一种枸杞多糖提取物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及植物提取物领域，具体为一种具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤、抗衰 老等多种生理功能的构杞多糖的提取方法。
【背景技术】
[0002] 构杞子（化uctoLxcii)始载于《神农本草经》，为构杞的干燥成熟果实，主要分布 于宁夏、甘肃、山西、新疆、青海、陕西、内蒙等地，构杞子是我国的传统名贵中药材，它在我 国的传统医学中具有重要的地位，其药用价值备受历代医家的推崇。明朝李时珍在《本草纲 目》中记载"构杞主五内邪气、热中消渴、久服坚筋骨，轻身不老；补内伤，大劳虚。强阴、利 大小肠；补精气不足、易颜色、变白、明目安神、令人长寿"。构杞具有如此多的生理和药理功 能，与其所含的丰富的化学成分有着密切的联系。构祀中的化学成分比较复杂，主要包括蛋 白质、氨基酸、微量元素、糖类、脂肪、脂肪酸、祗类、酱醇类、维生素、色素类、生物碱类。 阳003] 多糖（polysaccharide)又称多聚糖，是由20个W上的单糖W糖昔键相连组成的 聚合物。它是组成高分子化合物家族中最丰富多彩的成员。多糖是来自于高等植物、动物细 胞膜、微生物的细胞壁中的天然大分子物质，是所有生命有机体的重要组成成分与维持生 命所必需的结构材料。人们对糖的认识首先是把它看作食物中的能量来源。对多糖的研究， 最早是在20世纪40年代，但其作为广谱免疫促进剂而引起人们的极大重视是在60年代， 经过40余年的不断发展，人们对多糖运一类重要生命物质产生了新的认识，使运一学科成 为目前生命科学中研究最活跃的领域之一。人们发现糖类在生物体中不仅是作为能量物质 或结构材料，更重要的是它参与了生命科学中细胞的各种活动，具有多种多样的生物功能。 因此糖的研究逐步活跃起来，其中，一些分子量在几千W上，具有很强生物活性的活性多糖 的研究受到日益重视。运些活性多糖的生理活性、化学结构W及构效关系成为多糖研究的 前沿阵地，并取得了很大的进展。科学工作者逐渐发现多糖类化合物具有抗肿瘤、抗衰老、 抗感染、降血糖血脂、治疗艾滋病等方面的生物活性。近年来，又发现多糖的糖链在控制细 胞的分裂和分化，调节细胞的生长和衰老方面起着决定性作用，多糖已逐渐显示出越来越 广泛的应用前景。
[0004] 构杞多糖是构杞的主要有效成分，构杞多糖成为一个研究的热点，国内对构杞多 糖的提取分离、化学分析、药理作用及临床应用等进行了大量的研究，药理与临床研究十分 引人瞩目。构杞多糖（LBP，LyciumBar~barumPolysaccharides)具有广泛的药理学作 用，可促进造血、降血脂、保肝及抗癌等作用。临床研究表明，构祀多糖对高血脂兔的血脂有 明显影响，能显著降低血清胆固醇（TC)及S献甘油（TG)的含量，降脂有效率达100.0%，具 有良好的降血脂作用研究表明，构祀多糖对正常及糖尿病模型动物均有降血糖作用；实验 结果表明，构祀多糖对四氯化碳引起的肝损伤有修复作用，其机制可能是通过阻止内质网 的损伤，促进蛋白质合成及解毒作用，恢复肝细胞的功能，并促进肝细胞再生；体外试验提 示构杞多糖能显著的抑制人宫颈瘤化al细胞和人胃腺癌MGC- 8仍细胞的生长和繁殖，抑 制癌细胞克隆的形成；构杞多糖在体内能提高D~半乳糖致衰老小鼠体内GsH~Px和超氧 化物歧化酶（SOD)活性，从而可W清除过量的自由基，降低MDA和脂褐素含量，起到延缓衰 老的作用。 阳〇化]目前现有技术制备多糖常用的提取方法有：热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法和酶 法。运些方法都存在着许多的问题，比如破坏了多糖结构，多糖提取效率低下，提取时间过 长，提取的过程复杂等。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种有效成分损失少、品质高、提取成本低的构杞多糖的提 取方法。该方法提取出来的构杞多糖具有降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤、抗衰老等多种生理 功能。
[0007] 一种构杞多糖的提取制备方法，其特种在于，构杞经破碎后，用乙醇回流提取。
[0008] 一种构杞多糖提取物的制备方法，其特征在于，包括W下步骤：
[0009]1、清理：将构杞筛除泥沙，用清水洗净；
[0010] 2、干燥：将清洗干净的构杞在5~25°C下低溫干燥10~20h; W11] 3、破碎：将步骤2得到的构杞进行超微粉碎，得到颗粒粒径范围为10~70ym粉 末；
[0012] 4、除杂：将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中400~650W功率下，用乙酸 回流提取10~30min，得到药渣I;药渣I用乙酸回流提取10~30min;得到药渣II;将药 渣II用乙醇回流提取得药渣III;药渣III挥干溶剂；
[0013] 5、提取：将得到的药渣III加入10~15倍的水，置于超声回流提取系统中，超声 回流提取0. 5~化，超声功率0. 5~2KW，提取溫度30~50°C，得到滤液I;
[0014] 6、脱色：在滤液I中加入0. 1 %活性炭，脱色，得到滤液II;
[0015] 7、除蛋白：将滤液II用S氯醋酸法得到滤液III;
[0016] 8、浓缩：将滤液III放至微波真空干燥器中，微波功率密度和真空度的取值范围 为（2~8w/g)和化02~0.OSMpa)，得到构杞多糖浓缩提取液；
[0017] 9、纯化：将经过预处理的Dioi大孔树脂湿法装柱，取上述粗提液于0. 2~1.0ml/ min的不同流速上样，用80%浓度的乙醇W 0. 5~1. 5ml/min的不同流速洗脱，将洗脱液合 并，浓缩，干燥即得纯度较高的多糖提取物。
[0018] 第一步中，若不仔细清选，渗杂的泥沙枯叶等会影响提取效率。
[0019] 第二步中，低溫下进行干燥，可W保证多糖有效成分的保存。
[0020] 第=步中，超微粉碎技术可W使粉末粒径小（一般在15ymW下）且分布均匀，球 性度及均质度明显改善，松密度及比表面显著提高，植物细胞破壁率高，构杞中的有效成分 (特别是难溶性成分）的溶解和释放加快，有效成分的溶出速率加快。
[0021] 第五步中，结合了超声与回流提取的优势，提取效率较高。
[0022] 此外，出于控制成本的考虑，本发明各步骤中的低溫干燥、回流、超声、等均是成熟 的技术，操作简单，易上手。但与现有技术相比，简化了提取过程却得到了较高的收率和品 质很好的产品。
[0023] 优选的，一种构杞多糖提取物的制备方法，其特征在于包括W下步骤：
[0024]1、清理：将构杞筛除泥沙，用清水洗净； 阳O巧]2、干燥：将清洗干净的构杞在5°C下低溫干燥20h;
[0026] 3、破碎：将步骤2得到的构杞进行超微粉碎，得到颗粒粒径范围为10~70ym粉 末；
[0027] 4、除杂：将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中400W功率下，用乙酸回流提 取30min，得到药渣I;药渣I用乙酸回流提取30min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流 提取得药渣III;药渣III挥干溶剂；
[0028] 5、提取：将得到的药渣HI加入10倍的水，置于超声回流提取系统中，超声回流提 取化，超声功率0. 5KW，提取溫度50°C，得到滤液I;
[0029] 6、脱色：在滤液I中加入0.1 %活性炭，脱色，得到滤液II;
[0030] 7、除蛋白：将滤液II用S氯醋酸法得到滤液III;
[0031] 8、浓缩：将滤液III放至微波真空干燥器中，微波功率密度和真空度的取值范围 为8w/g和0. 08Mpa，得到构杞多糖浓缩提取液；
[0032] 9、纯化：将经过预处理的DlOl大孔树脂湿法装柱，取上述粗提液于0. 2ml/min的 不同流速上样，用80%浓度的乙醇W0. 5ml/min的不同流速洗脱，将洗脱液合并，浓缩，干 燥即得纯度较高的多糖提取物。
[0033] 优选的，一种构杞多糖提取物的制备方法，其特征在于包括W下步骤：
[0034]1、清理：将构杞筛除泥沙，用清水洗净；
[00对 2、干燥：将清洗干净的构杞在10°C下低溫干燥15h;
[0036] 3、破碎：将步骤2得到的构杞进行超微粉碎，得到颗粒粒径范围为10~70ym粉 末；
[0037] 4、除杂：将步骤3得到的粉末置于连续微波反应器中500W功率下，用乙酸回流提 取20min，得到药渣I;药渣I用乙酸回流提取20min;得到药渣II;将药渣II用乙醇回流 提取得药渣III;药渣III挥干溶剂；
[00測 5、提取：将得到的药渣m加入