本发明属于一种植物多糖的提取方法，尤其涉及一种从中药材枸杞中提取多糖的方法。
背景技术：
枸杞子(lycium chinense mill)为茄科植物，是我国传统的药食兼用的名贵中药材，能滋补肝肾、益精明目。枸杞提取物主要活性成分为一种水溶性多糖，即枸杞多糖(LBP，Lycium barbarum polysaccharides)，该多糖是一种蛋白多糖，分子量为22～25kD，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖成分组成，具有增强免疫力、抗肿瘤、防衰老、降血压、降血糖和抗疲劳方面的药理作用，具有广阔的开发前景。枸杞多糖既可以作为药物使用，也可以作为食品加工。
现有提取纯化枸杞多糖的方法有水提法，酶解法，微波法等，水提法提取过程需要多次浸提，操作时间长，提取率低，并且费时费料。酶解法提取成本较高，不利于工业化大规模生产。微波技术在提取时间方面不宜过长，功率不宜太高，会降低反应的活化能，使分子之间形成新的作用力，导致多糖分子溶出受阻。枸杞多糖进一步纯化大多应用Sevage法除蛋白，柱层析等，但其工艺繁琐，有机溶剂用量多，能耗大。
目前使用的枸杞多糖有效成分含量低，含色素、蛋白质和小分子杂质等，枸杞多糖含量不稳定，因此急需找到一种有效成分含量高，工艺简单，枸杞多糖含量稳定的枸杞多糖提取物的制备方法。
技术实现要素：
本发明所要解决的问题是提供一种枸杞多糖提取物的制备方法，该方法克服目前制得的枸杞多糖含量低，枸杞多糖纯化工艺长、能耗高、污染大的缺点，制备得到的枸杞多糖提取物有效成分含量高，枸杞多糖含量稳定、疗效高。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：一种枸杞多糖提取物的制备方法，所述方法包括以下步骤：
(1)碱提：取干燥枸杞，加入6～8倍干燥枸杞质量的pH为10～12的碱水，75～85℃浸提2～3次，每次1～2小时，合并得到提取液，调pH至中性，将提取液浓缩成比重为1.08～1.10的浸膏；
(2)醇沉1：将步骤(1)所得浸膏加入质量分数为90～95％乙醇进行醇沉，上清浓缩回收乙醇；
(3)醇沉2：将步骤(2)所得沉淀加水复溶，再加入质量分数为90～95％乙醇进行醇沉，上清浓缩回收乙醇，沉淀待挥去乙醇，加水溶解，冷冻干燥，即得所述枸杞多糖提取物。
上述技术方案中，所述步骤(1)中，所述碱水为氢氧化钠水溶液。
上述技术方案中，所述步骤(3)制得的枸杞多糖提取物枸杞多糖含量大于等于30％。
作为优选，步骤(1)中，浸提温度为75℃。
作为优选，步骤(2)中，加入的乙醇的质量分数为95％。
与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优点：利用碱水浸提断裂糖肽键的原理分离得到枸杞多糖，再通过两次醇沉获得高含量枸杞多糖，含量稳定、疗效高，制备工艺简单。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
一种枸杞多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)碱提1：取干燥枸杞200g，加入1600g的pH为12的NaOH水溶液，在75℃浸提2小时，过滤，得第一滤液和枸杞残渣；
(2)碱提2：在步骤(1)所得枸杞残渣中加入1200g的pH为12的NaOH水溶液，在75℃浸提1小时，过滤，得第二滤液；
(3)滤液浓缩：将步骤(1)所得第一滤液与步骤(2)所得第二滤液合并，得提取液，调pH至中性，浓缩成比重为1.08的浸膏；
(4)醇沉1：在步骤(3)所得浸膏中加入质量分数为95％乙醇进行醇沉，上清浓缩回收乙醇。
(5)醇沉2：将步骤(4)所得沉淀加水复溶，加质量分数为95％乙醇再次醇沉，上清浓缩回收乙醇，沉淀待挥去乙醇，加水溶解，冷冻干燥，制得的提取物枸杞多糖含量为31.1％。
本案例中枸杞多糖含量由下述公式计算得出：枸杞多糖含量(％)＝(提取物中枸杞多糖质量)/(枸杞多糖提取物质量)×100％。
本案例中枸杞多糖含量按照苯酚-硫酸法测定得出，具体如下：
(1)标准曲线的绘制：准确吸取D-葡萄糖标准使用液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml，置于25ml比色管中，补水至2.0ml，加入质量分数为5％苯酚硫酸溶液1.0ml，在漩涡混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10ml，在漩涡混匀器上小心混匀，置沸水浴中加热2分钟，取出，冷却至室温，用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光值。以D-葡萄糖质量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
(2)样品含量的测定：
a.样品提取：称取混合均匀的固体样品1.0～2.0g，置于100ml容量瓶，加水80ml左右，于沸水浴中加热1小时，冷却至室温后补水加水至刻度，混匀后过滤，弃去初滤液，收集余下滤液供沉淀粗多糖。
b.沉淀粗多糖：准确吸取上述滤液5.0ml，置于50ml离心管中，加入无水乙醇20ml，混匀，于4℃冰箱静止4小时以上，以4000r/min离心5min，弃去上清液，残渣用数毫升质量分数为80％乙醇溶液洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次。残渣用水溶解并定容至10～25ml。
c.样品测定：准确吸取上液适量置于25ml比色管中，补水加至2.0ml，于485nm波长下测定吸光度值，从标准曲线上求出枸杞多糖含量。
实施例2
一种枸杞多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)碱提1：取干燥枸杞200g，加入1600g的pH为10的NaOH水溶液，在75℃浸提2小时，过滤，得第一滤液和枸杞残渣；
(2)碱提2：在步骤(1)所得枸杞残渣中加入1200g的pH为10的NaOH水溶液，在75℃浸提1小时，过滤，得第二滤液；
(3)滤液浓缩：将步骤(1)所得第一滤液与步骤(2)所得第二滤液合并，得提取液，调pH至中性，浓缩成比重为1.20的浸膏；
(4)醇沉1：在步骤(3)所得浸膏中加入质量分数为95％乙醇进行醇沉，上清浓缩回收乙醇。
(5)醇沉2：将步骤(4)所得沉淀加水复溶，加质量分数为95％乙醇再次醇沉，上清浓缩回收乙醇，沉淀待挥去乙醇，加水溶解，冷冻干燥，制得的提取物枸杞多糖含量为30.2％。
提取物中枸杞多糖含量计算方法同上一案例。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。