依碳氯替泼诺一水合物及其晶型与制备方法与流程

文档序号：12707173阅读：423来源：国知局

本发明涉及一种甾体化合物，特别涉及依碳氯替泼诺一水合物及其晶型与制备方法。

背景技术：

依碳氯替泼诺(CAS：82034-46-6，Loteprednol etabonate)，是一种新型糖皮质激素，由美国PharmoS公司研制生产，根据“软药”原理设计而成，1998年依碳氯替泼诺混悬滴眼液在美国批准上市，之后又陆续上市了眼用油膏和眼用凝胶，用于治疗眼部炎症，尤其适用于眼睑和球结膜、角膜和眼球前部的甾体敏感的炎症以及手术后眼部症状的药物。2005年，FDA批准Bausch&Lomb公司的复方依碳氯替泼诺/妥布霉素混悬滴眼液上市，用于治疗眼内皮质肾上腺素激素类药物敏感性炎症。

目前药物的晶型研究工作已经变得越来越重要，一个原料药的不同多晶型可以有不同的化学和物理特性，包括熔点、化学反应性、表观溶解度、溶解速率、光学和机械性质、蒸汽压和密度，这些特性可以直接影响原料药和制剂的处理和/或生产，并且会影响制剂的稳定性、溶解度和生物利用度。因此，多晶型可以影响药物制剂的质量、安全性和有效性。但是，目前没有关于依碳氯替泼诺多晶型的研究和报道。我们在开发依碳氯替泼诺原料药的时候，对其晶型情况进行了深入的研究，发现市售原料、滴眼液以及按照目前常规的合成方法如US4996335、Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology，1991，38(2)：149-154、中国药物化学杂志，2003，Vol.13，NO.5，P299、分析化学研究简报，2005年第33卷，P351-354、CN103249716、CN101942001、CN103183714等所公开的方法，得到的依碳氯替泼诺均为依碳氯替泼诺无水物，且仅有一种晶型，本发明称之为晶型II。我们过滤分离出市售依碳氯替泼诺/妥布霉素混悬滴眼液中的依碳氯替泼诺原料，进行X射线粉末衍射测定，发现其为晶型II，我们过滤分离出市售依碳氯替泼诺混悬滴眼液(0.5％依碳氯替泼诺眼用混悬剂)和(0.2％依碳氯替泼诺眼用混悬剂)中的依碳氯替泼诺原料，进行X射线粉末衍射测定，发现其也为晶型II。

经考察发现市售依碳氯替泼诺混悬滴眼液和市售依碳氯替泼诺/妥布霉素混悬滴眼液稳定性不好，杂质增长很快。例如： 12个月时依碳氯替泼诺的最大单杂(17β羧酸物，代号PJ-91)为0.44％，依碳氯替泼诺的总杂为0.88％，到24个月时其最大单杂(17β羧酸物，代号PJ-91)增长至1.78％，其总杂已达到2.21％。12个月时依碳氯替泼诺的最大单杂(17β羧酸物，代号PJ-91)为0.50％，依碳氯替泼诺的总杂为0.92％，到24个月时其最大单杂(17β羧酸物，代号PJ-91)增长至1.85％，其总杂已达到2.26％。因此，因此，制备一种稳定性更高的依碳氯替泼诺制剂产品变得非常重要。

技术实现要素：

出人意外地，在进行依碳氯替泼诺晶型研究过程中，发现了一种全新的依碳氯替泼诺一水合物，目前，经过稳定性试验考察，该全新的依碳氯替泼诺一水合物和已有的无水依碳氯替泼诺(晶型II)相比更易粉碎，更重要的是，采用本发明提供的依碳氯替泼诺一水合物微粉制成的水混悬液，与现有的依碳氯替泼诺晶型II的微粉制成的水混悬液相比，具有更好的稳定性，混悬效果更好。因此这种全新的依碳氯替泼诺一水合物可以成为依碳氯替泼诺制剂产品的新选择。

依碳氯替泼诺一水合物化学结构式如下式所示：

所述的依碳氯替泼诺一水合物，其特征是所述的化合物以晶体形式存在，其X射线粉末衍射在衍射角2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°处有特征峰。

所述的依碳氯替泼诺一水合物的制备方法，其特征是采用超临界流体技术制备，步骤如下：

⑴配置依碳氯替泼诺溶液：将5g依碳氯替泼诺在50℃下完全溶于300ml丙酮和30ml水的混合溶液中；

⑵将步骤⑴中配置的依碳氯替泼诺溶液与溶液泵相连，工作压力控制为 15MPa；

⑶二氧化碳进料：将钢瓶内的CO₂通过增压泵输入超临界流体抗溶剂设备体系，进入结晶釜，流量控制在10ml/min，控制启动温度50℃，压力为15MPa；

⑷将上述步骤⑴中配置的依碳氯替泼诺溶液通过溶液泵经超临界流体抗溶剂设备体系中喷嘴急速喷入结晶釜内，流量控制为2ml/min，喷嘴温度为50℃，其喷射距离为5cm；同时将夹带剂乙醇通过夹带溶液泵喷入结晶釜内，流量控制为1.5ml/min；操作时间为150min；持续通入CO₂将结晶釜内剩余的溶剂洗净；

⑸依碳氯替泼诺一水合物结晶析出；在结晶釜底收集从溶液中析出的依碳氯替泼诺一水合物。

所述的一种依碳氯替泼诺一水合物的制备方法，其特征是在依碳氯替泼诺的饱和溶液M中，加入晶种，冷却析晶，所述溶液M由1体积份的乙醇，0.2～0.3体积份的水，0.2～0.3体积份的乙腈组成,所述晶种的X射线粉末衍射在衍射角2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°处有特征峰。

所述的依碳氯替泼诺一水合物在制备治疗人或哺乳动物疾病的药物中的应用。

所述的依碳氯替泼诺一水合物的应用，所述的药物的剂型选自水剂、油膏剂、混悬剂、吸入剂、凝胶剂、乳剂中的一种。

所述的依碳氯替泼诺一水合物的应用，所述的药物的剂型为混悬剂。

本发明依碳氯替泼诺一水合物经热重差热分析研究，确定含有一个结晶水。DTA谱图在室温～200℃范围内，在143℃有一个吸热峰，对应的TG谱为阶状失重线，失重为3.7％，计算一个结晶水的量为3.71％，证明存在一个结晶水。

在研究中发现，依碳氯替泼诺晶型Ⅱ比较容易得到，除了背景技术中提到的文献报道的方法外，将依碳氯替泼诺溶解在丙酮、乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氧六环、氯仿、二氯甲烷、乙腈或者异丙醇中的一种或几种溶剂中，无论是利用蒸发结晶、冷却结晶都可得到依碳氯替泼诺晶型Ⅱ。在以丙酮、乙醇、四氢呋喃或者异丙醇为良性溶剂，以水，正己烷，乙醚，石油醚，异丙醚等作为不良溶剂，利用溶析法结晶时也可得到依碳氯替泼诺晶型Ⅱ。

通过超临界流体技术意外得到了依碳氯替泼诺一水合物结晶(详见发明实施例1)，其X射线粉末衍射在衍射角2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°处有特征峰，其相对衍射强度实质上分别为其详细谱图如图2所示。所述术语“实质上”，应当理解为特征峰的衍射强度随着晶体制备技术、样品安装方法和测量仪器的不同可以有所微量变化，也应该在本发明的范围内。此外，仪器的差异和其他因素可能影响衍射角2θ值，所以上述有特征峰的衍射角2θ值可以在现有值±0.2°内变化。

该依碳氯替泼诺一水合物的制备方法，还可以通过在依碳氯替泼诺的饱和溶液M中，加入晶种，冷却析晶，所述溶液M由1体积份的乙醇，0.2～0.3体积份的水，0.2～0.3体积份的乙腈组成,所述晶种的X射线粉末衍射在衍射角2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°处有特征峰。可以将通过超临界流体技术意外得到的依碳氯替泼诺一水合物结晶作为晶种。

相对于依碳氯替泼诺无水物的制备，依碳氯替泼诺一水合物的制备对溶剂有一定的选择性，通过研究，惊奇发现，在上述依碳氯替泼诺一水合物的制备方法中，重结晶所需混合溶剂M中乙醇/水/乙腈的体积比很重要，例如：当乙醇/水/乙腈的体积比不在上述范围时，即使加入依碳氯替泼诺一水合物的晶种，得到的产物也为依碳氯替泼诺晶型II，例如对照实施例1。另一方面，依碳氯替泼诺一水合物的晶种的加入也很重要，在不加入晶种，但其他制备条件相同的情况下，得到的也为依碳氯替泼诺晶型II，例如对照实施例2。

从发明实施例7可以看出，参考市售品(0.5％依碳酸氯替泼诺眼用混悬剂)的处方，采用本发明提供的依碳氯替泼诺一水合物的微粉制成的水混悬液，与现有的依碳氯替泼诺晶型II的微粉制成的水混悬液相比，在相同的处方和制备条件下制得的混悬滴眼剂在稳定性放置过程中具有更高稳定性，杂质增长缓慢，同时主药粒径更小，药物团聚程度更低，具有更高的沉降比。

另外在进行影响因素、加速试验及24个月室温留样长期稳定性试验考察结果表明，此依碳氯替泼诺一水合物各检测项目(性状、含量、有关物质)没有出现显著变化，具有良好的稳定性，此外还进行了X射线粉末衍射测试，结果表明晶型没有发生改变，该晶型能保持很好的稳定性。

同时从实施例8可以看出，在相同条件下本发明提供的依碳氯替泼诺一水合物比现有技术中的无水依碳氯替泼诺晶型Ⅱ更容易被粉碎，因此在用于制备各种需要微粉化的药物制剂时，具有潜在的优势。研究中发现市售依碳氯替泼诺原料(晶型II)在机械粉碎过程中，由于静电，粒子间团聚严重。

本发明中所用粉末衍射仪器是Rigaku D/max-2500粉末衍射仪为日本理学公司产品。本发明中所用热重-差热分析仪为日本理学标准型TG-DTA分析仪。激光散射粒径分析仪型号：Mastersizer 2000。

附图说明：

图1是对照实施例1制得的无水依碳氯替泼诺晶型Ⅱ的X射线粉末衍射谱图

图2是发明实施例1制得的依碳氯替泼诺一水合物的X射线粉末衍射谱图

图3是发明实施例1中超临界流体抗溶剂设备连接及流程示意图

其中，1为依碳氯替泼诺溶液，2为溶液泵，3为喷嘴，4为结晶釜，5为气液分离釜，6为气体排放口，7为残液收集器，8为增压泵，9为CO₂，10为夹带剂溶液泵，P1为设备体系压力，P2为结晶釜工作压力

具体实施方式：

下面将通过实施例对本发明作进一步的描述，这些描述并不是对本发明内容作进一步的限定。本领域的技术人员应理解，对本发明的技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。

市售依碳氯替泼诺原料药(无水物，晶型II)，购自天津天药股份有限公司。

以下发明实施例1和对照实施例1-13中采用同一批号的依碳氯替泼诺原料。

含量分析方法：

依碳氯替泼诺含量测定用HPLC分析：

HPLC的色谱条件为：色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶

流动相乙腈-0.1M冰醋酸(50：50)

检测波长 254nm

发明实施例1超临界法制备依碳氯替泼诺一水合物

⑴配置依碳氯替泼诺溶液1：将5g依碳氯替泼诺在50℃下完全溶于300ml丙酮和30ml水的混合溶液中；

⑵将步骤⑴中配置的依碳氯替泼诺溶液1与溶液泵2相连，工作压力控制为15MPa；

⑶二氧化碳进料：将钢瓶内的CO₂通过增压泵8输入超临界流体抗溶剂设备体系，进入结晶釜4，流量控制在10ml/min,控制启动温度50℃，压力为15MPa；

⑷将上述步骤⑴中配置的依碳氯替泼诺溶液1通过溶液泵2经超临界流体抗溶剂设备体系中喷嘴3急速喷入结晶釜4内，流量控制为2ml/min，喷嘴温度为50℃，其喷射距离为5cm；同时将夹带剂乙醇通过夹带溶液泵10喷入结晶釜4内，流量控制为1.5ml/min；操作时间为150min；持续通入CO₂将结晶釜4内剩余的溶剂洗净；

⑸依碳氯替泼诺一水合物结晶析出；在结晶釜底4收集从溶液中析出的依碳氯替泼诺一水合物。

⑹残留物经气液分离釜5处理，气体经由气体排放口6排出，残液流入残液收集器7。

将干燥后的晶体利用TG-DTA分析，失重约3.7％，确认为依碳氯替泼诺一水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°，如图2所示。

将发明实施例1制备的依碳氯替泼诺一水合物结晶做发明实施例2-5的晶种。

发明实施例2依碳氯替泼诺一水合物的制备

取5g依碳氯替泼诺加入100ml的乙醇，20ml的水，20ml的乙腈的混合溶液中加热至50℃，热过滤滤去不溶物，降温至30℃(若有晶体析出，取上层清液)，然后加入发明实施例1制备的晶种，保温搅拌30分钟，析出大量晶体，冷却至0～5℃，过滤，干燥，将干燥后的晶体利用TG-DTA分析，失重约3.7％，确认为依碳氯替泼诺一水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°。

发明实施例3依碳氯替泼诺一水合物的制备

取5g依碳氯替泼诺加入100ml的乙醇，20ml的水，30ml的乙腈的混合溶液中加热至50℃，热过滤滤去不溶物，降温至30℃(若有晶体析出，取上层清液)，然后加入发明实施例1制备的晶种，保温搅拌30分钟，析出大量晶体，冷却至0～5℃，过滤，干燥，将干燥后的晶体利用TG-DTA分析，失重约3.7％，确认为依碳氯替泼诺一水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°。

发明实施例4依碳氯替泼诺一水合物的制备

取5g依碳氯替泼诺加入100ml的乙醇，30ml的水，20ml的乙腈的混合溶液中加热至50℃，热过滤滤去不溶物，降温至30℃(若有晶体析出，取上层清液)，然后加入发明实施例1制备的晶种，保温搅拌30分钟，析出大量晶体，冷却至0～5℃，过滤，干燥，将干燥后的晶体利用TG-DTA分析，失重约3.7％，确认为依碳氯替泼诺一水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°。

发明实施例5依碳氯替泼诺一水合物的制备

取5g依碳氯替泼诺加入100ml的乙醇，30ml的水，30ml的乙腈的混合溶液中加热至50℃，热过滤滤去不溶物，降温至30℃(若有晶体析出，取上层清液)，然后加入发明实施例1制备的晶种，保温搅拌30分钟，析出大量晶体，冷却至0～5℃，过滤，干燥，将干燥后的晶体利用TG-DTA分析，失重约3.7％，确认为依碳氯替泼诺一水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝9.8°，15.0°，15.6°，16.6°，17.2°，18.1°，19.8°，23.0°，24.8°，26.3°。

发明实施例6依碳氯替泼诺一水合物乳剂的制备

依碳氯替泼诺一水合物 0.052g

蓖麻油 5.0g

吐温-80 4.0g

甘油 2.2g

醋酸钠 0.05g

EDTA-2Na 0.02g

硼酸 0.1g

山梨酸 0.1g

氢氧化钠调节pH至5.5 氯化钠调节渗透压为320mOsm/kg

纯化水至100ml

将纯化水加热至约70℃，加入甘油、醋酸钠、EDTA-2Na、硼酸、山梨酸并溶解，用氢氧化钠调节pH至5.5。另外将蓖麻油和吐温-80混合加热至70℃，加入依碳氯替泼诺一水合物溶解得到油相。在用剪切器剪切水相的同时加入油相得到初乳。最后将初乳在高压均质机处理，过滤除菌得到乳剂。

发明实施例7眼用混悬剂稳定性试验数据对比实施例

专利CN200580016030公开了市售品(0.5％依碳酸氯替泼诺眼用混悬剂)的处方：

表1市售品处方

*25.0mg/mL甘油，96％相当于24mg/mL(2.4W/W)甘油，100％。

参考上述处方，制备了0.5％的依碳氯替泼诺一水合物眼用混悬剂(a组，以无水依碳氯替泼诺计，含量0.5％)和0.5％的依碳氯替泼诺眼用混悬剂(b组)，并针对稳定性与市售品(0.5％依碳酸氯替泼诺眼用混悬剂，组)进行了比较。a组采用了微粉化依碳氯替泼诺一水合物，粒度分布为d(0.1)＝2.515μm，d(0.5)＝5.238μm，d(0.9)＝10.145μm。b组采用了微粉化依碳氯替泼诺晶型II，粒度分布为d(0.1)＝2.476μm，d(0.5)＝5.123μm，d(0.9)＝10.213μm。两组混悬液的制备方法为：

1.取处方量60％的注射用水加热至80℃，加入辅料，搅拌至完全溶解；

2.在百级环境中用0.22μm微孔滤膜过滤两次；

3.加入菌检合格的主药，用均质机搅拌30分钟；

4.用0.1M盐酸和或0.1M氢氧化钠调节pH值至5.3-5.6左右；

5.加水至全量，搅匀，过200目筛，在百级环境中不断搅拌灌装至低密度聚乙烯瓶中。

7.1稳定性

将实施例7中的依碳氯替泼诺一水合物组(a组)和依碳氯替泼诺晶型II组(b组)在25℃±2℃/40％RH±5％RH下储藏24个月，重点考察了依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物的有关物质、沉降比、粒度变化情况，具体如下：

7.1.1依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物有关物质考察结果

分别测储存0时、12个月和24个月后的有关物质，测得结果见下表，由结果可知，25℃±2℃/40％RH±5％RH下储藏24个月后，分别采用依碳氯替泼诺晶型II和依碳氯替泼诺一水合物制备的样品，依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物的有关物质均有增长，但是采用依碳氯替泼诺一水合物制备的样品，最大单杂(17β羧酸物，代号PJ-91)和总杂增长均较小，较依碳氯替泼诺晶型II组和市售品更稳定。下表中的最大单杂为PJ-91。

表2依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物有关物质考察结果

7.1.2依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物的沉降比

以50ml具塞量筒取50ml药液，密塞，用力震摇1分钟，记下混悬物初始高度H0，静置3小时，记下混悬物最终高度H，沉降比＝H/H0，分别于0时和24个月测定，结果见下表，由结果可知，25℃±2℃/40％RH±5％RH下储藏24个月后，与采用依碳氯替泼诺晶型II制备的样品和24个月到效期的市售样品的沉降比相比，采用依碳氯替泼诺一水合物制备的样品的沉降比更高，放置的过程中更稳定。

表3沉降比考察结果

7.1.3依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物的粒径

我们采用激光粒度仪在0时和24个月分别检测样品粒径，结果见下表，由结果可知，0时，分别采用依碳氯替泼诺一水合物和依碳氯替泼诺晶型II制备的样品粒径基本一致。经25℃±2℃/40％RH±5％RH下储藏24个月后，两组样品及市售品中的依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物均有聚集，但是依碳氯替泼诺一水合物制备样品的依碳氯替泼诺一水合物的粒径更小，稳定性更好。

表4激光粒度仪测定依碳氯替泼诺/依碳氯替泼诺一水合物粒径结果(μm)

发明实施例8粉碎实验

实验设备：WLFM-P-85型气流粉碎机北京微菱互信机械设备有限公司生产

粒径测量仪器：Easysizer20激光粒度仪，珠海欧美克科技有限公司

样品分组：

8.1组为发明实施例2方法所制的依碳氯替泼诺一水合物结晶500g，平均分为十次粉碎，进料粒度80-100目，五次粉碎的粒径d(0.9)进行再平均；

8.2组为对照实施例方法1所制依碳氯替泼诺晶型II 500g，平均分为十次粉碎，进料粒度80-100目，五次粉碎的粒径d(0.9)进行再平均。

粉碎条件：粉碎气流1.0Mpa；进料速度0.5kg/h

将上述8.1组和8.2组样品分别按照上述粉碎条件进行气流粉碎，将得到的产品粒度为：8.1组样品的平均d(0.9)＝9.1μm，8.2组样品平均d(0.9)＝19.5μm。当8.2组样品继续粉碎时，由于粉碎产生的静电，粒子团聚严重。

发明实施例9依碳氯替泼诺一水合物粉雾剂的制备

将微粉化，平均粒径达到5μm的依碳氯替泼诺一水合物1g和微粉化平均粒径达到100μm的乳糖100g，混匀，过200目筛3次，装入4号胶囊中。

对照实施例1无水依碳氯替泼诺晶型Ⅱ的制备

取5g依碳氯替泼诺加入100ml的乙醇，20ml的水，40ml的乙腈的混合溶液中加热至50℃，热过滤滤去不溶物，降温至30℃(若有晶体析出，取上层清液)，然后加入发明实施例1制备的晶种，保温搅拌30分钟，析出大量晶体，冷却至0～5℃，过滤，真空室温干燥，将干燥后的晶体利用卡尔费休法测含水量，确认为依碳氯替泼诺无水合物。将得到的晶体进行X射线粉末衍射测定，测得特征峰位置为2θ＝7.1°，9.2°，11.5°，13.7°，14.1°，15.5°，16.3°，18.6°，19.7°，如图1所示。

分子式：C₂₄H₃₁ClO₇