用作免疫调节剂的化合物的制作方法

本申请要求2014年4月14日提交的美国临时专利申请61/979,337的优先权，将其全部内容通过引用的方式并入本申请。

技术领域

本申请一般地涉及用作PD-1/PD-L1蛋白/蛋白和CD80/PD-L1蛋白/蛋白相互作用的抑制剂的化合物。本申请提供了化合物、包含所述化合物的组合物及其使用方法。本申请还涉及药物组合物，其包含本申请的用于治疗各种疾病包括癌症和感染性疾病的至少一种化合物。

背景技术：

程序性死亡-1(CD279)为T细胞上的受体，其已经显示当经其配体程序性死亡-配体1(PD-L1，CD274，B7-H1)或PD-L2(CD273，B7-DC)结合时，抑制来自T细胞受体的信号激活(Sharpe et al.，Nat.Imm.2007)。当表达PD-1的T细胞接触表达其配体的细胞时，对抗原刺激应答的机能活动，包括增殖、细胞因子分泌和细胞毒性得到减弱。PD-1/PD-配体相互作用在感染或肿瘤消退过程中或在发展自身耐受性过程中下调免疫应答(Keir Me，Butte MJ，Freeman GJ，et al.PD-1and its ligands in tolerance and immunity.Annu.Rev.Immunol.2008；26:Epub)。长期抗原刺激，诸如在肿瘤疾病或慢性感染过程中发生的那些，会导致T细胞表达升高水平的PD-1且在针对长期抗原的活性方面功能失调(reviewed in Kim and Ahmed，Curr Opin Imm，2010)。这称为“T细胞耗竭”。B细胞也显示了对PD-1/PD-配体的抑制和“耗竭”。

PD-L1已经显示与CD80相互作用(Butte MJ et al，Immunity；27:111–122(2007))。PD-L1/CD80对表达免疫细胞的相互作用已经表明其为抑制活性的。对这种相互作用的阻断也显示出阻止了这种抑制性相互作用(Paterson AM，et al.，J Immunol.，187:1097–1105(2011)；Yang J，et al.J Immunol.Aug 1；187(3):1113-9(2011))。

使用PD-L1的抗体对PD-1/PD-L1相互作用的阻断已经显示在许多系统中修复和促进T细胞激活。具有晚期癌症的患者受益于使用PD-L1的单克隆抗体的疗法(Brahmer et al.，New Engl J Med 2012)。肿瘤的临床前动物模型已经显示了单克隆抗体对PD-1/PD-L1途径的阻断可增强免疫应答且导致对众多组织学上不同的肿瘤的治疗免疫应答(Dong H，Chen L.B7-H1 pathway and its role in the Evasion of tumor immunity.J Mol Med.2003；81(5):281-287；Dong H，Strome SE，Salamoa DR，et al.Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis:a potential mechanism of immune evasion.Nat Med.2002；8(8):793-800)。

对PD-1/PD-L1的相互作用的干扰也显示了在慢性感染系统中的增强的T细胞活性。小鼠的慢性淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒感染也显示了经阻断PD-L1而导致的改善的病毒清除和恢复的免疫性(Barber DL，Wherry EJ，Masopust D，et al.Restoring function in exhausted CD8T cells during chronic viral infection.Nature.2006；439(7077):682-687)。感染有HIV-1的人源化小鼠显示了针对病毒血症的增强的保护以及对CD4+T细胞的降低病毒耗竭(Palmer et al.，J.Immunol 2013)。经PD-L1的单克隆抗体对PD-1/PD-L1的阻断可修复对来自以下患者的T细胞的体外抗原特异性功能：HIV患者(Day，Nature 2006；Petrovas，J.Exp.Med.2006；Trautman，Nature Med.2006；D’Souza，J.Immunol.2007；Zhang，Blood 2007；Kaufmann，Nature Imm.2007；Kasu，J.Immunol.2010；Porichis，Blood 2011)、HCV患者[Golden-Mason，J.Virol.2007；Jeung，J.Leuk.Biol.2007；Urbani，J.Hepatol.2008；Nakamoto，PLoS Path.2009；Nakamoto，Gastroenterology 2008]或HBV患者(Boni,J.Virol.2007；Fisicaro，Gastro.2010；Fisicaro et al.，Gastroenterology，2012；Boni et al.，Gastro.，2012；Penna et al.，J.Hep.，2012；Raziorrough，Hepatology 2009；Liang，World J Gastro.2010；Zhang，Gastro.2008)。

对PD-L1/CD80相互作用的阻断也显示了刺激免疫力(Yang J.，et al.，J Immunol.Aug 1；187(3):1113-9(2011))。这种来源于对PD-L1/CD80相互作用阻断的免疫刺激已经显示了通过与进一步PD-1/PD-L1或PD-1/PD-L2相互作用的阻断的联用得到了增强

将免疫细胞显型的改变已经被假设为败血症性休克的重要因素(Hotchkiss，et al.，Nat Rev Immunol(2013))。这些包括PD-1和PD-L1的增强水平，以及T细胞凋亡(Guignant，et al，Crit.Care(2011))。针对PD-L1的抗体能够将免疫细胞凋亡的水平降低(Zhang et al，Crit.Care(2011))。而且，相比于野生型小鼠，缺少PD-1表达的小鼠对败血症性休克症状更具有抗性(Yang J.，et al..J Immunol.Aug 1；187(3):1113-9(2011))。研究已经披露了使用抗体对PD-L1相互作用的阻断能够抑制不合适的免疫应答并且改善疾病症状。

除了增强对长期抗原的免疫应答之外，对PD-1/PD-L1途径的阻断还显示了增强对接种疫苗，包括在慢性感染情况下的治疗性接种疫苗的应答(S.J.Ha，S.N.Mueller，E.J.Wherry et al.，“Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection,”The Journal of Experimental Medicine，vol.205，no.3，pp.543-555，2008.；A.C.Finnefrock，A.Tang，F.Li et al.，“PD-1blockade in rhesus macaques:impact on chronic infection and prophylactic vaccination,”The Journal of Immunology，vol.182，no.2，pp.980-987，2009；M.-Y.Song，S.-H.Park，H.J.Nam，D.-H.Choi，and Y.-C.Sung，“Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+t-cell responses by soluble PD-1,”The Journal of Immunotherapy，vol.34，no.3，pp.297-306，2011)。

PD-1途径为在由慢性感染和肿瘤疾病过程中的长期抗原刺激引起的T细胞耗竭中的关键抑制分子。通过靶标PD-L1蛋白阻断PD-1/PD-L1的相互作用已经显示了修复体外和体内抗原特异性T细胞免疫功能，包括在肿瘤或慢性感染情况下增强对接种疫苗的应答。

因此，阻断PD-L1与PD-1或CD80的相互作用的药物是理想的。

申请人发现了具有作为PD-L1与PD-1以及与CD80的相互作用的抑制剂的活性的有效化合物，且因此可用于治疗性给药以增强癌症或感染的免疫性，包括治疗疫苗。提供这些化合物以用作药物，其具有对它们的药物性(drugability)而言重要的期望稳定性、生物利用度、治疗指数和毒性值。

技术实现要素：

本申请提供了药物组合物，其包含式(I)化合物和/或其药用盐，以及药用载体。

本申请还提供了治疗与PD-L1活性包括其与其他蛋白诸如PD-1和B7-1(CD80)的相互作用相关的疾病或病症的方法，所述方法包括向所需要的患者给予式(I)化合物和/或其药用盐。

本申请还提供了制备式(I)化合物和/或其盐的方法和中间体。

本申请还提供了式(I)化合物和/或其药用盐，其用于治疗。

本申请还提供了式(I)化合物和/或其药用盐在制备用于治疗或预防PD-L1相关病症诸如癌症和感染性疾病的药物中的用途。

式(I)化合物以及包含式(I)化合物的组合物可用于治疗、预防或治愈各种感染性疾病和癌症。包含这些化合物的药物组合物用于治疗、预防各种治疗领域的疾病或病症诸如癌症和感染性疾病或减缓其进展。

本申请的这些和其他特征将随着披露内容继续而以展开形式阐述。

具体实施方式

第一方面，本发明披露式(I)化合物：

或其药用盐，其中：

m为0、1或2；

R¹选自氢、-(CH₂)_nX和-(CH₂)_nAr；其中

n为1、2、3或4；

X选自-CH₃、-CF₃、CN、-CO₂R⁴、-C(O)NH₂、OR⁴和吡咯烷酮基；

R⁴为H或C₁-C₃烷基；

Ar选自苯并二噁烷基、吲唑基、异喹啉基、异噁唑基、萘基、噁二唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基和喹啉基；其中各环任选被独立选自以下的1、2、3或4个取代基取代：C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄烷氧基羰基、C₁-C₄烷氧基羰基氨基、C₁-C₄烷基、(C₁-C₄烷基)羰基、(C₁-C₄烷基)磺酰基、酰氨基、氨基羰基、氨基羰基(C₁-C₃烷基)、-(CH₂)_qCO₂C₁-C₄烷基、-(CH₂)_qOH、羧基、氰基、甲酰基、卤素、卤代C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷氧基、硝基、任选被一个氰基取代的苯基、任选被一个卤素取代的苯氧基、苯基羰基、吡咯和四氢吡喃；以及其中q为0、1、2、3或4；

R²选自

其中Y选自氰基、氯和甲基；

R^q选自氢、C₁-C₃烷基和苄基；

R³选自

其中R^z选自C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基磺酰基C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基亚磺酰基C₁-C₃烷基、酰氨基C₁-C₃烷基、氨基C₁-C₄烷基、羧基C₁-C₃烷基、氰基C₁-C₃烷基、二甲基氨甲酰基C₁-C₃烷基、二甲基氨基C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₃烷基、羟基C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基硫基C₁-C₃烷基、吡啶基C₁-C₃烷基、四唑基C₁-C₃烷基、咪唑基C₁-C₃烷基，其中所述咪唑基任选被甲基或苄基取代；苯基C₁-C₃烷基，其中所述苯基任选被氰基、甲基或羟基取代；噻唑基C₁-C₃烷基；

R⁶选自氢、苄基和甲基；

各R^6’独立选自氢和甲基；

R⁷选自氢、C₁-C₃烷基和苄基；

o为1或2；

X为CH或N；

P为0或1；

R^a为羟基；以及

R^b选自氢、苄基和甲基；

或

R³和R^q与它们所连接的氮原子一起形成环，所述环选自

s为0或1；

z为1、2或3；以及

R⁸选自羟基和-NHSO₂R¹¹；

R⁹选自氢和-CO₂H；

R¹⁰选自卤素和羟基；

R¹¹选自三氟甲基、环丙基、C₁-C₃烷基、二甲基氨基和被甲基取代的咪唑基；

Q选自CH₂、S、O和NCH₃；以及

R⁵选自C₂-C₄烯基、C₁-C₄烷基、氰基、甲氧基、卤素和三氟甲基。

在第一方面的第一实施方案，R²为

在第一方面的第二实施方案，R³为

在第一方面的第三实施方案，

R²为以及R³为

在另一方面，本发明提供式(I)化合物：

或其药用盐，其中：

m为0、1或2；

R¹选自氢、-(CH₂)_nX和-(CH₂)_nAr；其中

n为1、2、3或4；

X选自-CH₃、-CF₃、CN、-CO₂R⁴、-C(O)NH₂、OR⁴和吡咯烷酮基；

R⁴为H或C₁-C₃烷基；

Ar选自苯并二噁烷基、吲唑基、异喹啉基、异噁唑基、萘基、噁二唑基、苯基、吡啶基、嘧啶基和喹啉基；其中各环任选被独立选自以下的1、2、3或4个取代基取代：C₁-C₄烷氧基、C₁-C₄烷氧基羰基氨基、C₁-C₄烷基、(C₁-C₄烷基)羰基、(C₁-C₄烷基)磺酰基、酰氨基、氨基羰基、氨基羰基(C₁-C₃烷基)、-(CH₂)_qCO₂C₁-C₄烷基、-(CH₂)_qOH、羧基、氰基、甲酰基、卤素、卤代C₁-C₄烷基、卤代C₁-C₄烷氧基、硝基、任选被一个氰基取代的苯基、任选被一个卤素取代的苯氧基、苯基羰基、吡咯和四氢吡喃；以及其中q为0、1、2、3或4；

R²选自

其中Y选自氰基、氯和甲基；

R^q选自氢、C₁-C₃烷基和苄基；

R³选自

其中R^z选自C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基磺酰基C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基亚磺酰基C₁-C₃烷基、酰氨基C₁-C₃烷基、氨基C₁-C₃烷基、羧基C₁-C₃烷基、氰基C₁-C₃烷基、二甲基氨甲酰基C₁-C₃烷基、二甲基氨基C₁-C₃烷基、卤代C₁-C₃烷基、羟基C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基硫基C₁-C₃烷基、吡啶基C₁-C₃烷基四唑基C₁-C₃烷基、咪唑基C₁-C₃烷基，其中所述咪唑基任选被甲基或苄基取代；苯基C₁-C₃烷基，其中所述苯基任选被氰基、甲基或羟基取代；噻唑基C₁-C₃烷基；

R⁶选自氢、苄基和甲基；

各R^6’独立选自氢和甲基；

R⁷选自氢、C₁-C₃烷基和苄基；

o为1或2；

X为CH或N；

p为0或1；

R^a为羟基；以及

R^b选自氢、苄基和甲基；

或

R³和R^q与它们所连接的氮原子一起形成环，所述环选自

s为0或1；

z为1或2；以及

R⁸选自羟基和-NHSO₂R¹¹；

R⁹选自氢和-CO₂H；

R¹⁰选自卤素和羟基；

R¹¹选自三氟甲基、环丙基、C₁-C₃烷基、二甲基氨基和被甲基取代的咪唑基；

Q选自CH₂、S、O和NCH₃；以及

R⁵选自C₂-C₄烯基、C₁-C₄烷基、氰基、甲氧基和卤素。

在第二方面，本发明提供药物组合物，其包含式(I)化合物或其药用盐，以及药用载体。

在第三方面，本发明提供一种增强、刺激、调节和/或提高有需要的受试者中的免疫反应的方法，所述方法包括对受试者给药治疗有效量的权利要求1的化合物或其药用盐。在第三方面的第一实施方案，所述方法进一步包括在给药式(I)化合物或其药用盐之前、之后或同时，给药另一种药剂。在第三方面的第二实施方案，所述另一种药剂为抗微生物剂(antimicrobial agent)、抗病毒剂、基因表达调节剂、细胞毒性剂和/或免疫反应调节剂。

在第四方面，本发明提供一种在有此需要的受试者中抑制癌细胞生长、增殖或转移的方法，所述方法包括对所述受试者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。在第四方面的第一实施方案中，所述癌症选自黑色素瘤、肾细胞癌、鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)、非鳞状NSCLC、结肠直肠癌、去势抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer)、卵巢癌、胃癌、肝细胞癌、胰腺癌、头颈部鳞状细胞癌、食道癌、胃肠道癌、乳癌和血液学恶性疾病。

在第五方面，本发明提供一种治疗有此需要的受试者中感染疾病的方法，所述方法包括对所述受试者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。在第五方面的第一实施方案，所述感染性疾病是由病毒引起的。在第五方面的第二实施方案，所述病毒选自HIV、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、疱疹病毒、乳头瘤病毒(papillomaviruses)和流感。

在第六方面，本发明提供一种治疗有此需要的患者中败血性休克的方法，所述方法包括对所述受试者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。

在第六方面，本发明提供一种阻断受试者中PD-Ll与PD-I和/或CD80的相互作用的方法，所述方法包括对所述受试者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。

本发明的特征和优势可由本领域技术人员在阅读以下详细描述后更容易地了解。应了解，出于清楚原因上文和下文在各个实施方案的情况下描述的本发明的某些特征也可组合形成单一实施方案。反之，出于简洁原因在单一实施方案的情况下描述的本发明的各种特征也可组合形成其子组合。本申请确定为示例性或优选的实施方案意欲具说明性而非具限制性。

除非本申请另外特定说明，否则以单数形式提及也可包括复数。举例而言，“一个”和“一种”可指一个或一种，也可指一个或多个，或一种或多种。

本申请使用的短语“化合物或其药用盐”是指至少一种化合物、化合物的至少一种盐或其组合。例如，式(I)化合物或其药用盐包括式(I)化合物；两种式(I)化合物；式(I)化合物的盐；式(I)化合物以及式(I)化合物的一种或多种盐；和式(I)化合物的两种或多种盐。

除非另外指示，否则任何具有不饱和价数的杂原子被认为具有足以满足这种价数的氢原子。

在说明书全文中，基团和其取代基可由本领域技术人员选择以提供稳定的部分和化合物。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷氧基”是指C₁-C₄烷基经氧原子与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷氧基羰基”是指C₁-C₄烷氧基经羰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷氧基羰基氨基”是指C₁-C₄烷氧基羰基经-NH基团与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基”是指衍生自含有1-3个碳原子的直链或支链饱和烃的基团。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷基”是指衍生自含有1-4个碳原子的直链或支链饱和烃的基团。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷基羰基”是指C₁-C₄烷基经羰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基硫基”是指C₁-C₃烷基经硫原子与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基硫基C₁-C₃烷基”是指C₁-C₃烷基硫基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基磺酰基”是指C₁-C₄烷基经磺酰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₄烷基磺酰基”是指C₁-C₄烷基经磺酰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基磺酰基C₁-C₃烷基”是指C₁-C₃烷基磺酰基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基亚磺酰基”是指C₁-C₃烷基经亚磺酰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“C₁-C₃烷基亚磺酰基C₁-C₃烷基”是指C₁-C₃烷基亚磺酰基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“酰氨基”是指-C(O)NH₂。

如本申请所使用的，术语“酰氨基C₁-C₃烷基”是指酰氨基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“氨基C₁-C₃烷基”是指氨基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“氨基羰基”是指氨基经羰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“氨基羰基(C₁-C₃烷基)”是指氨基羰基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“羰基”是指-C(O)-。

如本申请所使用的，术语“羧基”是指-CO₂H。

如本申请所使用的，术语“羧基C₁-C₃烷基”是指羧基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“氰基”是指-CN。

如本申请所使用的，术语“氰基C₁-C₃烷基”是指氰基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“二甲基氨甲酰基”是指-C(O)N(CH₃)₂。

如本申请所使用的，术语“二甲基氨甲酰基C₁-C₃烷基”是指二甲基氨甲酰基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“二甲基氨基”是指-N(CH₃)₂。

如本申请所使用的，术语“二甲基氨基C₁-C₃烷基”是指二甲基氨基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“甲酰基”是指-C(O)H。

如本申请所使用的，术语“卤素”和“卤代”是指F、Cl、Br或I。

如本申请所使用的，术语“卤代C₁-C₃烷基”是指取代有1或2或3个卤素原子的C₁-C₃烷基。

如本申请所使用的，术语“卤代C₁-C₄烷基”是指取代有1或2或3个卤素原子的C₁-C₄烷基。

如本申请所使用的，术语“卤代C₁-C₄烷氧基”是指卤代C₁-C₄烷基经氧原子与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“羟基”是指-OH。

如本申请所使用的，术语“羟基C₁-C₃烷基”是指羟基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“咪唑基C₁-C₃烷基”是指咪唑基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“硝基”是指-NO₂。

如本申请所使用的，术语“苯基C₁-C₃烷基”是指苯基经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“苯基羰基”是指苯基经羰基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“苯氧基”是指苯基经氧原子与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“吡啶基C₁-C₃烷基”是指吡啶环经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“磺酰基”是指-SO₂-。

如本申请所使用的，术语“亚磺酰基”是指-SO-。

如本申请所使用的，术语“四唑基C₁-C₃烷基”是指四唑环经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

如本申请所使用的，术语“噻唑基C₁-C₃烷基”是指噻唑环经C₁-C₃烷基与母体分子部分连接。

用于描述本发明的各种术语的定义列于下文中。当术语在整篇说明书(除非其在特定情况下另外限制)中个别地或作为较大团体的一部分使用时，这些定义均适用于这种术语。本申请所阐述的定义优先于以引用方式并入本申请中的任何专利、专利申请和/或专利申请公开中所阐述的定义。

短语“药学上可接受”在本申请中用于指在正确医学判断范畴内适用于与人类和动物组织接触而无过度毒性、刺激性、过敏反应或其它问题或并发症且与合理效益/风险比率相称的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。

式(I)化合物可形成盐，其也落入到本申请的范围内。除非另作说明，应当理解的是提及本发明化合物包括提及其一种或多种盐。术语“盐”是指由无机酸和碱和/或有机酸和碱形成的酸性和/或碱性盐。此外，术语“盐可包括两性离子(内盐)，例如在式(I)化合物同时含有碱性部分(诸如胺或吡啶或咪唑环)和酸性部分(诸如羧酸)时。优选为药用盐(即无毒、生理学可接受的盐)，例如可接受的金属和胺盐，其中阳离子并不显著导致该盐的毒性或生物学活性。然而，可使用其他盐，例如在制备过程中可采用的分离或纯化步骤中，且因此认为其在本申请的范围内。式(I)化合物的盐可通过例如如下形成：使式(I)化合物与一定量(诸如当量)的酸或碱在诸如使盐沉淀的介质中或在水性介质中反应，随后冻干。

示例性酸加成盐包括乙酸盐(诸如由乙酸或三卤代乙酸例如三氟乙酸形成的盐)、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、葡糖二酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(由盐酸形成)、氢溴酸盐(由溴化氢形成)、氢碘酸盐、马来酸盐(由马来酸形成)、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐(由甲磺酸形成)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(诸如由硫酸形成的盐)、磺酸盐(诸如本申请提及的盐)、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐诸如甲苯磺酸盐(tosylate)、十一碳酸盐等。

示例性碱性盐包括铵盐；碱金属盐，诸如钠、锂和钾盐；碱土金属盐，诸如钙和镁盐；钡、锌和铝盐；与有机碱(例如有机胺)形成的盐，所述有机碱诸如三烷基胺诸如三乙胺、普鲁卡因、二苄基胺、N-苄基-β-苯乙胺、1-二苯羟甲胺、N,N′-二苄基亚乙基-二胺、去氢枞胺、N-乙基哌啶、苄基胺、二环己基胺或相似的药用胺；以及与氨基酸诸如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。碱性含氮基团可用诸如以下的试剂进行季铵化：低级烷基卤化物(例如甲基氯、甲基溴、甲基碘、乙基氯、乙基溴、乙基碘、丙基氯、丙基溴、丙基碘、丁基氯、丁基溴和丁基碘)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯)、长链卤化物(例如癸基氯、癸基溴、癸基碘、月桂基氯、月桂基溴、月桂基碘、肉豆蔻基氯、肉豆蔻基溴、肉豆蔻基碘、硬脂基氯、硬脂基溴和硬脂基碘)、芳烷基卤化物(例如苄基溴和苯乙基溴)等。优选的盐包括一盐酸盐、硫酸氢盐、甲磺酸盐、磷酸盐或硝酸盐。

各种前药形式在此项技术中为熟知的且描述于以下文献中：

a)The Practice of Medicinal Chemistry，Camille G.Wermuth et al.，Ch 31,(Academic Press，1996)；

b)Design of Prodrugs，edited by H.Bundgaard,(Elsevier，1985)；

c)A Textbook of Drug Design and Development，P.Krogsgaard-Larson and H.Bundgaard，eds.Ch 5，pgs 113-191(Harwood Academic Publishers，1991)；和

d)Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism，Bernard Testa and Joachim M.Mayer,(Wiley-VCH，2003)。

另外，式(I)化合物在制备之后可被分离和纯化，以获得含有等于或大于99重量％的量的式(I)化合物(“实质上纯”)的组合物，接着如本申请所述使用或配制。这种“实质上纯”的式(I)化合物在本申请中也涵盖作为本发明的一部分。

“稳定化合物”和“稳定结构”意欲指示足够稳固而能够自反应混合物中分离出达适用纯度且能够配制成有效治疗剂的化合物。本发明意欲包含稳定化合物。

“治疗有效量”意欲包括有效抑制PD-1/PD-L1蛋白/蛋白和/或CD80/PD-L1蛋白/蛋白相互作用或有效治疗或预防癌症或感染疾病诸如HIV或乙型肝炎、丙型肝炎或丁型肝炎的单独本发明化合物的量，或所主张的化合物组合的量，或与其它活性成分组合的本发明化合物的量。

本申请所用的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖治疗哺乳动物(尤其人类)的疾病状态，且包括：(a)预防哺乳动物出现疾病状态，尤其在所述哺乳动物易患所述疾病状态但尚未诊断为患有所述疾病状态时；(b)抑制疾病状态，也即阻止其发展；和/或(c)减轻疾病状态，也即使疾病状态消退。

本发明化合物意欲包括本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。作为一般实例且非限制性地，氢的同位素包括氘(D)和氚(T)。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。通常，同位素标记的本发明化合物可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本申请所述的方法的方法，使用适当的同位素标记试剂替代否则使用的未经标记的试剂来制备。例如，甲基(-CH₃)也包括氘化甲基诸如-CD₃。

式(I)化合物和/或其药用盐可通过任何适于待治疗病症的方式给药，其可取决于对位点特异性治疗或待递送的式(I)化合物的量的需求。本发明也涵盖一类药物组合物，其包含至少一种式(I)化合物；和一种或多种无毒的药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或辅料(本申请统称作“载体”物质)和必要时选用的其它活性成分。式(I)化合物可通过任何适合途径，优选以适于所述途径的药物组合物形式且以有效用于预期治疗的剂量给予。本发明的化合物和组合物可以含有常规药学上可接受的载体、辅料和媒介物的剂量单位制剂形式，例如口服、经粘膜、直肠或肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌内和胸骨内)给予。举例而言，药物载体可含有甘露糖醇或乳糖和微晶纤维素的混合物。混合物可含有其它组分，诸如润滑剂，例如硬脂酸镁；和崩解剂，诸如交聚维酮(crospovidone)。载体混合物可填充至明胶胶囊中或压制成片剂。药物组合物可以例如口服剂型或输注剂形式给予。

对于口服给药，药物组合物可呈例如片剂、胶囊剂、液体胶囊剂、混悬剂或液体形式。药物组合物优选以含有特定量的活性成分的剂量单位形式制成。举例而言，药物组合物可以包含约0.1mg至1000mg，优选约0.25mg至250mg，且更优选约0.5mg至100mg范围内的量的活性成分的片剂或胶囊剂形式提供。虽然适用于人类或其它哺乳动物的日剂量可视患者的病症和其它因素而广泛变化，但可使用常规方法确定。

本申请涵盖的任何药物组合物可例如经由任何可接受且适合的口服制剂来口服递送。示例性口服制剂包括(但不限于)例如片剂、糖衣锭(troches)、口含锭(lozenges)、水性和油性混悬剂、液体胶囊剂、可分散性散剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊剂和软胶囊剂、糖浆剂和酏剂。意欲口服给予的药物组合物可根据此项技术中已知用于制造意欲口服给予的药物组合物的任何方法来制备。为提供药学上可口的制剂，本发明药物组合物可含有至少一种选自甜味剂、矫味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂和防腐剂的试剂。

片剂可例如通过混合至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐与至少一种适用于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂来制备。示例性赋形剂包括(但不限于)例如惰性稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙和磷酸钠；粒化剂和崩解剂，诸如微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠、玉米淀粉和海藻酸；粘合剂，诸如淀粉、明胶、聚乙烯-吡咯烷酮和阿拉伯胶(acacia)；和润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石。另外，片剂可无包衣，或通过已知技术包覆包衣以掩蔽味道令人不悦的药物的不良味道，或延迟活性成分在胃肠道中的崩解和吸收，从而使活性成分的作用持续较长时段。示例性水溶性味觉掩蔽物质包括(但不限于)羟基丙基甲基纤维素和羟基丙基纤维素。示例性时间延迟物质包括(但不限于)乙基纤维素和乙酸丁酸纤维素。

硬明胶胶囊剂可例如通过混合至少一种式(I)化合物和/或其至少一种盐与至少一种惰性固体稀释剂(诸如碳酸钙；磷酸钙；和高岭土(kaolin))来制备。

软明胶胶囊剂可例如通过混合至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐与至少一种水溶性载体(诸如聚乙二醇)；和至少一种油介质(诸如花生油、液体石蜡和橄榄油)来制备。

水性混悬剂可例如通过混合至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐与至少一种适用于制造水性混悬剂的赋形剂来制备。适用于制造水性混悬剂的示例性赋形剂包括(但不限于)例如助悬剂，诸如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、海藻酸钠、海藻酸、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂，诸如天然存在的磷脂，例如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，诸如聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，诸如十七亚乙基-氧基十六醇；环氧乙烷与源自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，诸如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯；和环氧乙烷与源自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，诸如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性混悬剂也可含有至少一种防腐剂，诸如对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种矫味剂；和/或至少一种甜味剂，包括(但不限于)例如蔗糖、糖精和阿斯巴甜(aspartame)。

油性混悬剂可例如通过将至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐悬浮于植物油(诸如花生油；橄榄油；芝麻油；和椰子油)；或矿物油(诸如液体石蜡)中来制备。油性混悬剂也可含有至少一种增稠剂，诸如蜂蜡；硬石蜡；和十六醇。为提供可口的油性混悬剂，可将至少一种上文已描述的甜味剂和/或至少一种矫味剂添加至油性混悬剂中。油性混悬剂可进一步含有至少一种防腐剂，包括(但不限于)例如抗氧化剂，诸如丁基化羟基苯甲醚和α-生育酚。

可分散性散剂和颗粒剂可例如通过混合至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐与至少一种分散剂和/或湿润剂；至少一种助悬剂；和/或至少一种防腐剂来制备。适合的分散剂、湿润剂和助悬剂如上文已描述。示例性防腐剂包括(但不限于)例如抗氧化剂，例如抗坏血酸。另外，可分散性散剂和颗粒剂也可含有至少一种赋形剂，包括(但不限于)例如甜味剂；矫味剂；和着色剂。

至少一种式(I)化合物和/或其至少一种药用盐的乳剂可例如制备成水包油乳剂。包含式(I)化合物的乳剂的油相可由已知成分以已知方式构成。油相可由(但不限于)例如植物油(诸如橄榄油和花生油)；矿物油(诸如液体石蜡)；和其混合物提供。虽然所述相可仅包含乳化剂，但其可包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。适合的乳化剂包括(但不限于)例如天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；源自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，诸如脱水山梨糖醇单油酸酯；和偏酯与环氧乙烷的缩合产物，诸如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。优选地，亲水性乳化剂连同用作稳定剂的亲脂性乳化剂一起包括在内。也优选包括油和脂肪两者。具有或不具有稳定剂的乳化剂一起组成所谓乳化蜡，且所述蜡与油和脂肪一起组成所谓乳化软膏基质，所述乳化软膏基质形成乳膏剂制剂的油性分散相。乳剂也可含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。适用于本发明制剂中的乳化剂和乳剂稳定剂包括吐温(Tween)60、斯潘(Span)80、十六醇十八醇混合物(cetostearyl alcohol)、十四烷醇、单硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸钠、单独或与蜡一起的二硬脂酸甘油酯，或此项技术中熟知的其它物质。

式(I)化合物和/或其至少一种药用盐也可例如经由任何药学上可接受且适合的可注射形式静脉内、皮下和/或肌内递送。示例性可注射形式包括(但不限于)例如包含可接受的媒介物和溶剂(诸如水、林格溶液(Ringer's solution)和等张氯化钠溶液)的无菌水溶液；无菌水包油微乳剂；和水性或油性混悬剂。

用于肠胃外给予的制剂可为水性或非水性等张无菌注射溶液剂或混悬剂的形式。这种溶液剂和混悬剂可使用所提及的用于口服给予的制剂的一种或多种载体或稀释剂或通过使用其它适合的分散剂或湿润剂和助悬剂由无菌粉末或颗粒制备。这种化合物可溶解于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲液中。其它辅料和给药方式在医药技术中为广泛熟知的。活性成分也可以作为含适合载体(包括盐水、右旋糖或水)或含环糊精(也即Captisol)、共溶剂溶解(也即丙二醇)或胶束溶解(也即吐温80)的组合物形式通过注射给予。

无菌可注射制剂也可为于无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂或混悬剂，例如于1,3-丁二醇中的溶液剂。可使用的可接受的媒介物和溶剂为水、林格溶液和等张氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油惯常用作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可使用任何温和的不挥发性油，包括合成单酸甘油酯或二酸甘油酯。另外，在可注射剂制备中可使用脂肪酸，诸如油酸。

无菌可注射水包油微乳剂可例如通过以下来制备：1)将至少一种式(I)化合物溶解于油相(诸如大豆油与卵磷脂的混合物)中；2)组合含有式(I)的油相与水和甘油混合物；和3)加工所述组合，形成微乳剂。

无菌水性或油性混悬剂可根据此项技术早已已知的方法来制备。举例而言，无菌水溶液剂或混悬剂可用无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂来制备，诸如1,3-丁二醇；且无菌油性混悬剂可用无菌无毒可接受的溶剂或悬浮介质来制备，诸如无菌不挥发性油，例如合成单酸甘油酯或二酸甘油酯；和脂肪酸，诸如油酸。

可用于本发明药物组合物中的药学上可接受的载体、辅料和媒介物包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂；自乳化药物递送系统(SEDDS)，诸如d-α-生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯；用于药物剂型中的表面活性剂，诸如吐温、聚乙氧基蓖麻油，诸如CREMOPHOR表面活性剂(BASF)，或其它类似聚合递送基质；血清蛋白，诸如人血清白蛋白；缓冲物质，诸如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质，诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。环糊精(诸如α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精)或经化学修饰的衍生物(诸如羟基烷基环糊精，包括2-羟基丙基-环糊精和3-羟基丙基-环糊精)或其它溶解的衍生物也宜用于增强本申请所述式的化合物的递送。

本发明的药物活性化合物可根据常规药学方法加工以产生用于向患者(包括人类和其它哺乳动物)给予的医药药剂。药物组合物可经受常规医药操作(诸如杀菌)和/或可含有常规辅料，诸如防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、缓冲剂等。片剂和丸剂可另外用肠溶包衣制备。这些组合物也可包含辅料，诸如湿润剂、甜味剂、矫味剂和香化剂。

所给予的化合物的量和以本发明的化合物和/或组合物治疗疾病病症的给药方案视多种因素而定，包括个体的年龄、体重、性别、医学病症、疾病类型、疾病严重度、给药途径和频率和所采用的特定化合物。因此，给药方案可广泛不同，但可常规地使用标准方法来确定。每公斤体重约0.001mg至100mg，优选每公斤体重约0.0025mg至约50mg和最优选每公斤体重约0.005mg至10mg的日剂量可为适当的。日剂量可以每天一至四次给药给予。其他给药方案包括每周一次给予以及每两天周期一次给予。

为达治疗目的，通常将本发明的活性化合物与适用于所示给药途径的一种或多种辅料组合。若口服给予，则可将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，接着制成片剂或胶囊剂以方便给予。这些胶囊剂或片剂可含有控制释放制剂，如可以活性化合物于羟基丙基甲基纤维素中的分散液的形式提供。

本发明的药物组合物包含式(I)化合物和/或其至少一种药用盐和任选地其它选自任何药学上可接受的载体、辅料和媒介物的试剂。本发明的替代组合物包含本申请所述的式(I)化合物或其前药和药学上可接受的载体、辅料或媒介物。

本发明的化合物抑制PD-1/PD-L1蛋白/蛋白，从而导致PD-L1阻断。PD-L1阻断可增强对哺乳动物包括人的癌性细胞和感染性疾病的免疫应答。在一方面，本发明涉及使用式(I)化合物或其盐体内治疗受试者以使得癌性肿瘤的生长得到抑制。式(I)化合物或其盐可单独使用以抑制癌性肿瘤的生长。可选择地，式(I)化合物或其盐可与如下所述的其他免疫源性药物或标准癌症治疗组合使用。

在一个实施方案中，本发明提供了抑制受试者的肿瘤细胞生长的方法，包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)化合物或其盐。

在一个实施方案中，提供了治疗癌症的方法，包括向有此需要的患者给予治疗有效量的式(I)化合物或其盐。癌症的实例包括这样的癌症，可使用本发明的化合物抑制其生长，包括通常对免疫疗法应答的癌症。用于治疗的优选的癌症的非限制性实例包括黑色素瘤(例如转移性恶性黑色素瘤)、肾癌(例如透明细胞癌)、前列腺癌(例如激素难治性前列腺腺癌)、乳腺癌、结肠癌和肺癌(例如非小细胞肺癌)。此外，本发明包括难治性或复发性恶性肿瘤，可使用本发明化合物抑制其生长。

可使用本发明方法治疗的其他癌症的实例包括骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛区癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、何杰金病、非何杰金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病包括急性髓细胞样白血病、慢性髓细胞样白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、儿童期实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或尿道癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性中枢神经的淋巴瘤、肿瘤血管发生、脊髓轴肿瘤、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌症、T细胞淋巴瘤、环境诱导的癌症包括由石棉诱导的癌症，以及上述癌症的组合。本发明还用于治疗转移性癌症，特别是表达PD-L1的转移性癌症(Iwai et al.(2005)Int.Immunol.17:133-144)。

任选地，式(I)化合物或其盐可与其他免疫源性剂组合，诸如癌性细胞、纯化的肿瘤抗原(包括重组蛋白、肽和碳水化合物分子)、细胞和转染有基因编码的免疫刺激细胞因子的细胞(He et al(2004)J.Immunol.173:4919-28)。可使用的肿瘤疫苗的非限制性实例包括黑色素瘤抗原的肽，诸如gp100、MAGE抗原、Trp-2、MART1和/或酪氨酸酶的肽，或转染以表达细胞因子GM-CSF的肿瘤细胞。在人中，某些肿瘤已经显示为免疫源性的，诸如黑色素瘤。可以预期的是，通过由PD-L1阻断提高T细胞激活的阈值，期望肿瘤应答在宿主中被激活。

PD-L1阻断可与接种疫苗方案组合。已经提议了针对抗肿瘤接种疫苗的许多实验策略(参见Rosenberg，S.，2000，Development of Cancer Vaccines，ASCO Educational Book Spring:60-62；Logothetis，C.，2000，ASCO Educational Book Spring:300-302；Khayat，D.2000，ASCO Educational Book Spring:414-428；Foon，K.2000，ASCO Educational Book Spring:730-738；也参见Restifo，N.and Sznol，M.，Cancer Vaccines，Ch.61，pp.3023-3043in DeVita，V.et al.(eds.)，1997，Cancer:Principles and Practice of Oncology.Fifth Edition)。在这些策略中的一者中，使用自体同源的或同种异体的肿瘤细胞制备疫苗。这些细胞疫苗已经显示在转导肿瘤细胞以表达GM-CSF时是最有效的。GM-CSF已经显示为针对肿瘤接种疫苗的抗原呈递的有效活化剂(Dranoff et al.(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:3539-43)。

在各种肿瘤中的基因表达和大规模基因表达模式的研究已经导致对所谓的肿瘤特异性抗原的限定(Rosenberg，S A(1999)Immunity 10:281-7)。在血多情况下，这些肿瘤特异性抗原为表达于肿瘤中和该肿瘤所来源的细胞中的分化抗原，例如黑色素细胞抗原gp100、MAGE抗原和Trp-2。更重要的是，这些抗原中的许多可显示为存在于宿主中的肿瘤特异性T细胞的靶标。PD-L1阻断可与表达于肿瘤中的重组蛋白和/或肽的整体组合使用以产生对这些蛋白的免疫应答。这些蛋白通常被免疫系统视为自体抗原且因此对其耐受。该肿瘤抗原也可包括蛋白端粒末端转移酶，其对于合成染色体的调聚物而言是必须的，并且在多于85％的人癌症中表达且仅在有限数目的体细胞组织中表达(Kim，N et al.(1994)Science 266:2011-2013)(这些体细胞组织可以各种方式而受到保护以防免疫攻击)。肿瘤抗原也可为表达于癌症细胞中的"新抗原"，这是由于体细胞突变改变了蛋白序列或在两种不相关序列间(即费城染色体中的bcr-abl)产生融合蛋白，或来自B细胞肿瘤的个体基因型。

其他肿瘤疫苗可包括来自人癌症中所涉及的病毒的蛋白，诸如人乳头状瘤病毒(HPV)、肝炎病毒(HBV、HDV和HCV)和卡波西疱疹肉瘤病毒(KHSV)。可与PD-L1阻断组合使用的其他形式的肿瘤特异性抗原为经纯化的热休克蛋白(HSP)，其由肿瘤组织自身分离。这些热休克蛋白含有来自肿瘤细胞的蛋白片段且这些HSP在递送至抗原呈递细胞时是高度有效的以用于产生肿瘤免疫性(Suot，R&Srivastava，P(1995)Science 269:1585-1588；Tamura，Y.et al.(1997)Science 278:117-120)。

树突细胞(DC)为有效的抗原呈递细胞，其可用于引起抗原特异性应答。DC可离体产生且载有各种蛋白和肽抗原以及肿瘤细胞提取物(Nestle，F.et al.(1998)Nature Medicine 4:328-332)。DC也可由遗传方式转导以同样表达这些肿瘤抗原。针对免疫接种的目的，DC也已经直接与肿瘤细胞融合(Kugler，A.et al.(2000)Nature Medicine 6:332-336)。作为疫苗接种的方法，DC免疫接种可有效地与PD-L1阻断组合以激活更有效的抗-肿瘤应答。

PD-L1阻断也可与标准癌症治疗组合。PD-L1阻断可有效地与化学治疗方案组合。在这些情况下，其可有效地降低所给予的化学治疗试剂的剂量(Mokyr，M.et al.(1998)Cancer Research 58:5301-5304)。所述组合的实例为本发明的化合物与用于治疗黑色素瘤的达卡巴嗪的组合。所述组合的另一个实例为本发明的化合物与用于治疗黑色素瘤的白细胞介素-2(IL-2)的组合。PD-L1阻断与化学疗法的组合使用的科学原理为细胞死亡，其为大多数化学治疗化合物的细胞毒素作用的结果，其应导致肿瘤抗原在抗原呈递途径中的水平增加。通过细胞死亡可导致与PD-L1阻断的协同作用的其他组合疗法为放射、手术和激素抑制疗法。这些方案中的每个在宿主中产生了肿瘤抗原的来源。血管发生抑制剂也可与PD-L1阻断组合。血管发生的抑制导致肿瘤细胞死亡，其可使得肿瘤抗原融入宿主抗原呈递途径。

本发明的化合物也可与双特异性化合物组合使用，后者使得Fcα或Fcγ受体表达效应器细胞靶标至肿瘤细胞(参见例如美国专利5,922,845和5,837,243)。双特异性化合物可用于靶标两种分离的抗原。例如抗-Fc受体/抗肿瘤抗原(例如Her-2/neu)双特异性化合物已经用于将巨噬细胞靶标至肿瘤位点。该靶标可更有效地激活肿瘤特异性应答。这些应答的T细胞分支可通过使用PD-L1阻断而得到增强。可选择地，通过使用结合至肿瘤抗原和树突细胞特异性细胞表面标记物的双特异性化合物，抗原可直接递送至DC。

肿瘤通过各种机制躲避宿主免疫监视。这些机制中的许多可通过使肿瘤表达的且免疫抑制的蛋白失活而得到克服。这些包括其他TGF-β(Kehrl，J.et al.(1986)J.Exp.Med.163:1037-1050)、IL-10(Howard，M.&O'Garra，A.(1992)Immunology Today 13:198-200)和Fas配体(Hahne，M.et al.(1996)Science 274:1363-1365)。结合和抑制以上各实体的抑制剂可与本发明的化合物组合使用以抵消免疫抑制剂的作用且有利于宿主的肿瘤免疫应答。

激活宿主免疫应答的化合物可与PD-L1阻断组合使用。这些包括树突细胞表面上的分子，其激活DC功能和抗原呈递。抗-CD40化合物能够有效替代T细胞辅助细胞活性(Ridge，J.et al.(1998)Nature 393:474-478)且可与PD-L1阻断组合使用(Ito，N.et al.(2000)Immunobiology 201(5)527-40)。激活化合物至T细胞辅刺激分子诸如CTLA-4(例如美国专利5,811,097)、OX-40(Weinberg，A.et al.(2000)Immunol 164:2160-2169)、4-1BB(Melero，I.et al.(1997)Nature Medicine 3:682-685(1997)和ICOS(Hutloff，A.et al.(1999)Nature 397:262-266)也可针对T细胞激活的水平增加来提供。

骨髓移植通常用于治疗各种造血来源的肿瘤。尽管移植物抗宿主病为该治疗的后果，治疗益处可由移植物抗肿瘤应答获得。PD-L1阻断可用于提高供体移入的肿瘤特异性T细胞的有效性。本发明的其他方法用于治疗已经暴露于特定毒素或病原体的患者。因此，本发明的另一方面提供了治疗受试者的感染性疾病的方法，包括向该受试者给予治疗有效量的式(I)化合物或其盐。与如上所讨论的其对肿瘤的应用类似，式(I)化合物或其盐可单独使用或作为辅剂与疫苗组合使用，以刺激对病原体、毒素或自体抗原的免疫应答。可特别使用该治疗方法所针对的病原体的实例包括这样的病原体，针对该病原体目前没有有效的疫苗，或针对该病原体常规疫苗并不完全有效。这些包括但不限于HIV、肝炎(甲型、乙型、丙型或丁型)、流感、疱疹、贾第虫(Giardia)、疟疾、利什曼原虫(Leishmania)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)。PD-L1阻断特别用于对抗按照因素确定的感染，所述因素诸如在感染过程中呈递改变的抗原的HIV。这些新的抗原表位在给药时被识别为异质的，因此引起强的T细胞应答，其不会被负信号经PD-1阻断而抑制。

可由本发明方法治疗的引起感染的病原性病毒的某些实例包括HIV、肝炎(甲型、乙型、丙型或丁型)、疱疹病毒(例如VZV、HSV-1、HAV-6、HHv-7、HHV-8、HSV-2、CMV和EB病毒)、腺病毒、流感病毒、虫媒病毒、埃可病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、豇豆花叶病毒(cornovirus)、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、细小病毒、痘苗病毒、HTLV病毒、登革热病毒、乳头瘤病毒、软疣病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、JC病毒和虫媒病毒性脑炎病毒。

可由本发明方法治疗的引起感染的病原性细菌的某些实例包括衣原体、立克次体细菌、分枝杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、脑膜炎球菌和淋球菌、克雷白杆菌、变形菌、灵杆菌、假单胞菌、军团杆菌、白喉、沙门菌、杆菌、霍乱、破伤风、肉毒杆菌、炭疽、鼠疫杆菌、钩端螺旋体和莱姆病菌。

可由本发明方法治疗的引起感染的病原性真菌的某些实例包括念珠菌(白色念珠菌、克鲁斯氏念珠菌、光滑念株菌、热带念珠菌等)、新型隐球菌、曲霉菌(烟曲霉、黑曲霉等)、属毛霉菌(毛霉、腐化米霉菌、根霉)、申克孢子丝菌、申克孢子丝菌、巴西副球孢子菌、粗球孢子菌和夹膜组织胞浆菌。

可由本发明方法治疗的引起感染的病原性寄生虫的某些实例包括痢疾内变形虫、结肠小袋虫、福勒耐格里原虫、棘阿米巴原虫、蓝氏贾第虫、隐孢子虫、卡氏肺囊虫、间日疟原虫、果氏巴贝虫、布氏锥虫、克氏锥虫、杜氏利什曼原虫、刚地弓形虫和巴西钩虫。

在所有以上方法中，PD-L1阻断可与其他形式的免疫疗法组合，诸如细胞因子治疗(例如干扰素、GM-CSF、G-CSF，IL-2)或双特异性抗体疗法，其提供肿瘤抗原(参见例如Holliger(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448；Poljak(1994)Structure 2:1121-1123)、疫苗或基因表达调节剂的增强呈递。

本发明的化合物可引起并增强自身免疫应答。事实上，使用肿瘤细胞和肽疫苗诱导抗肿瘤应答表明了许多抗-肿瘤应答涉及抗自体反应性(depigmentation observed in anti-CTLA-4+GM-CSF-modified B 16melanoma in van Elsas et al.supra；depigmentation in Trp-2vaccinated mice(Overwijk，W.et al.(1999)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96:2982-2987)；由TRAMP肿瘤细胞疫苗引起的自身免疫性前列腺炎(Hurwitz，A.(2000)supra)、黑色素瘤肽抗原疫苗接种和在人临床试验中观察的白癜风(Rosenberg，S A and White，D E(1996)J.Immunother Emphasis Tumor Immunol 19(1):81-4)。

因此，可以考虑使用抗-PD-L1阻断与各种自体蛋白的组合以设计疫苗接种方案，从而有效地产生针对疾病治疗的这些自体蛋白的免疫应答。例如，阿尔兹海默病包括A.β.肽在脑中淀粉样沉着物中的不适当累积；针对淀粉状蛋白的抗体反应能够清除这些淀粉样沉着物(Schenk et al.,(1999)Nature 400:173-177)。

其他自体蛋白也可用作靶标，诸如针对治疗变态反应和哮喘的IgE，以及针对治疗类风湿性关节炎的TNF.α.。最后，针对各种激素的抗体反应可通过使用式(I)化合物或其盐来诱导。使针对生殖激素的抗体反应失效可用于避孕。使针对激素和具体肿瘤生长所需的其他可溶性因子的抗体反应失效也可作为可能的疫苗接种靶标。

如上针对使用抗-PD-L1抗体所述的类似方法可用于诱导治疗性自身免疫应答以治疗具有其他自体抗原的不适当累积的患者，所述其他自体抗原诸如淀粉样沉着物，包括阿尔及海默病中的A.β.；细胞因子，诸如TNF.α.，和IgE。

通过共同给予式(I)化合物或其盐以及所研究的抗原(例如疫苗)，本发明的化合物可用于刺激抗原特异性免疫应答。因此，在本发明的另一方面，提供了在受试者中增强对抗原的免疫应答的方法，包括向所述受试者给予：(i)抗原；和(ii)式(I)化合物或其盐，以使得在受试者中对所述抗原的免疫应答得到增强。抗原可为例如肿瘤抗原、病毒抗原、细菌抗原或来自病原体的抗原。所述抗原的非限制性实例包括在如上段落所讨论的那些，诸如如上讨论的肿瘤抗原(或肿瘤疫苗)或如上讨论的来自病毒、细菌或其他病原体的抗原。

如前所述，本发明的化合物可与一种或多种其他治疗剂例如细胞毒素剂、放射毒性剂或免疫抑制剂共同给药。本发明的化合物可在其他治疗剂之前、之后或共同给药，或可与其他已知的疗法例如抗癌疗法例如放射疗法共同给予。所述治疗剂包括抗肿瘤药物诸如多柔比星(阿霉素)、顺铂、硫酸博来霉素、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、达卡巴嗪和环磷酰胺羟基脲，其本身仅在对患者有毒性或亚毒性的水平有效。顺铂以100mg/剂每四周一次经静脉内给予，且阿霉素以60-75mg/ml剂量每21天一次经静脉内给予。式(I)化合物或其盐与化学治疗剂的共同给药提供了两种抗癌药物，其经不同的机制起效，从而产生对人肿瘤细胞的细胞毒性作用。所述共同给药可解决由于发展对药物的抵抗或肿瘤细胞抗原性的变化(这会导致其不与所述抗体反应)所导致的问题。

本发明范围内还包括试剂盒，其包含式(I)化合物或其盐以及使用说明书。该试剂盒还可进一步包含至少一种额外的试剂。试剂盒通常包括指明试剂盒内容物的意在用途的标签。术语标签包括提供于该试剂盒上或其中的任何书写或记录的材料，或其以其他方式依附于所述试剂盒。

上述其它治疗剂在与本发明化合物组合使用时，可例如依医师参考手册(Physicians'Desk Reference，PDR)中所指示，或如由本领域技术人员以其它方式所确定的量使用。在本发明方法中，可在给予本发明化合物之前、同时或之后给予所述其它治疗剂。

在一个实施方案中，式(I)化合物抑制PD-1/PD-L1的相互作用，其所具有的IC₅₀值为20μM或更低，例如0.006至20μM，如经PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(Homogenous Time-Resolved Fluorescence，HTRF)结合测定所测量。优选地，式(I)化合物抑制PD-1/PD-L1的相互作用，其所具有的IC₅₀值为0.006至100nM。

实施例

下述实施例进一步限定了本发明。应当理解的是，这些实施例仅用于示例性性的。本领域技术人员应当能从以上披露的内容以及实施例中确定本发明的实质性特征，而没有偏离本发明的精神和范围，并且进行各种修改和变化以使本发明适应各种用途和条件。因此，本发明不限于下述示例的各种实施例，而其范围由所附的权利要求所限定。

如本申请说明书所使用的，以下术语具有所指定的含义：

TFA：三氟乙酸

ACN：乙腈

Min：分钟

RT：室温或保留时间(如上下文所指出的)

DMAP：4-N,N-二甲基氨基吡啶

EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

DMF：N,N-二甲基甲酰胺

H或hr：hrs

EtOAc：乙酸乙酯

THF：四氢呋喃

EtOH：乙醇

Me：甲基

DMSO：二甲基亚砜

AcOH：乙酸

HATU：(1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-¹H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧六氟磷酸盐)。

为确定中间体和实施例的最终纯度，分析性LCMS注射通常选自下述方法。

条件A：乙腈条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

条件M:甲醇条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

条件T:TFA方法:柱:Phenomenex LUNA C18，2.0X 50mm 3um，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4min，流速＝.8mL/min，波长＝220，溶剂对＝水-甲醇-0.1％TFA，溶剂A＝90％水-10％甲醇-0.1％TFA，溶剂B＝10％水-90％甲醇-0.1％TFA。

条件AA:乙酸铵方法柱:Phenomenex LUNA C18，2.0X 50mm，3u，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝4min，流速＝.8mL/min，波长＝220，溶剂对＝ACN:水:乙酸铵，溶剂A＝5％ACN:95％水:10mM乙酸铵

溶剂B＝95％ACN:5％水:10mM乙酸铵。

中间体：(3-溴-2-甲基苯基)甲醇

(也参见Gao，Shuanhu；Wang，Qiaoling；Chen，Chuo J.Am.Chem.Soc.2009，131(4)，1410-1412supplementary material page S15.)

将3-溴-2-甲基苯甲酸(8.4g，39.1mmol)溶解在四氢呋喃(100mL)中，在冰/水上冷却。历时15-20分钟，滴加硼烷四氢呋喃络合物(50.8mL，50.8mmol)。搅拌至室温，过周末。滴加50mL甲醇，猝灭过量的硼烷。旋转蒸发除去溶剂。从甲醇汇总旋转蒸发除去残余的硼烷，得到固体。分离出7.8g浅黄色固体，使用而没有进一步纯化。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.53(dd,J＝7.9，0.9Hz,1H),7.34(d,J＝7.3Hz,1H),7.08(t，J＝7.8Hz,1H),4.75(s,2H),2.45(s,3H)。

中间体：(2-甲基联苯-3-基)甲醇

将(3-溴-2-甲基苯基)甲醇(2.071g，10.3mmol)、苯基硼酸(2.51g，20.60mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(0.084g，0.103mmol)于甲苯(15.45mL)和乙醇(5.15mL)中的混合物置于氩气气氛下。向该溶液中加入碳酸氢钠2M(15.45mL，30.9mmol)，并且将该混合物在80℃搅拌30分钟。反应混合物用20mL乙酸乙酯和5mL水稀释。有机部分经旋转蒸发浓缩。粗产物经硅胶柱色谱纯化(0-40％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到2g灰白色固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.47-7.29(m,7H),7.23(s,1H),4.80(d,J＝5.6Hz，2H),2.27(s,3H),1.63-1.59(m,1H)。

中间体：(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇

四氢呋喃溶剂和0.5M磷酸三钾水溶液用氮气吹洗15分钟，然后分配使用。在1L圆底烧瓶中填充(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)硼酸(5.201g，28.9mmol)、(3-溴-2-甲基苯基)甲醇(5.00g，24.87mmol)和(2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)(2'-氨基-1,1'-联苯基-2-基)二氯化钯(II)(也称为第二代XPhos预催化剂，CAS number 1310584-14-5，See Kinzel，Tom；Zhang，Yong；Buchwald，Stephen L.J.Am.Chem.Soc.2010，132(40)，14073-14075.)(0.588g，0.747mmol)，加入预先脱氧的四氢呋喃(124mL)和0.5M磷酸三钾水溶液(124mL，62.2mmol)置于氮气气氛下，并且用氮气吹洗10分钟。反应混合物在氮气和室温搅拌10分钟。将乙酸乙酯(300mL)加至反应混合物中，然后加入200mL盐水，接着将反应混合物在分液漏斗中分配。有机萃取物用盐水再次洗涤(1x)，经硫酸镁干燥，过滤并且使用旋转蒸发仪真空除去溶剂。粗反应产物(7.84g暗色油状物)经硅胶色谱纯化(使用25％乙酸乙酯/己烷和30％乙酸乙酯/己烷的分步梯度洗脱)。得到纯产物(6.19g，95％产率)，为褐色油状物。¹H NMR(氯仿-d)δ:7.37(dd,J＝7.4，1.1Hz,1H),7.21-7.26(m,1H),7.17-7.21(m,1H),6.91(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.77(dd,J＝8.3，2.1Hz,1H),4.77(s,2H),4.31(s,4H),2.27(s,3H)。

中间体:(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯基)甲醇

类似于(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇，从(3-溴-2-氯苯基)甲醇制备标题化合物，70％产率。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.49(dd,J＝7.3，1.2Hz,1H),7.36-7.22(m,2H),7.00-6.86(m,3H),4.84(br.s.，2H),4.31(s,4H),2.74(t，J＝6.0Hz,1H)。

中间体：2-氨基-3-氯苯甲酸乙酯

将乙醇(180mL)和2-氨基-3-氯苯甲酸(12.0g，69.9mmol)在500mL的圆底烧瓶中搅拌，直到得到透明溶液。历时15分钟滴加硫酸(17.5mL，328mmol)。添加之后，将反应混合物加热回流48小时。反应用冰猝灭，用饱和碳酸氢钠水溶液中和，用乙酸乙酯(3x 500mL)萃取。合并的有机部分用盐水洗涤(1x 200mL)，经硫酸钠干燥，真空蒸发溶剂。得到褐色残余物。将残余物溶解在乙酸乙酯(200mL)中，用饱和碳酸氢钠溶液(2x 100mL)、水(1x 100mL)和盐水(1x 50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，真空除去溶剂。得到12.5g褐色固体，并且用于下一步骤中，而没有进一步纯化。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.83(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),7.40(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),6.6(t，J＝8.0Hz,1H),4.34(q，J＝7.2Hz，2H),1.39(t，J＝7.2Hz，3H)。

中间体：3-氯-2-氰基苯甲酸乙酯

将2-氨基-3-氯苯甲酸乙酯(1.0g，5.01mmol)和水(12mL)在100mL圆底烧瓶中合并，并且冷却至0℃。加入盐酸(3.0mL，99mmol)。历时5分钟，滴加亚硝酸钠(0.86g，12.46mmol)于水(12mL)中的溶液。在添加完成后，将反应混合物在0℃搅拌1小时。1小时后，将含有重氮物质的反应混合物用饱和的碳酸钠水溶液中和，并且保持0℃以供氰化。单独地，将水(12mL)和硫酸铜(II)(1.5g，6.01mmol)一起在250mL圆底烧瓶中搅拌，得到蓝色溶液。添加甲苯(12mL)，将混合物冷却至0℃。加入氰化钾(1.46g，22.42mmol)，颜色变为褐色。将褐色混合物加热至60℃。历时15分钟，经添加漏斗缓慢地加入上述制备的重氮盐。将重氮盐的温度维持在0℃。加入之后，将反应温度维持在70℃保持1小时。反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，经硅藻土床过滤，滤床用乙酸乙酯(2x 50mL)洗涤。水层用乙酸乙酯(1x 100mL)萃取。合并的有机部分用水(1x 25mL)、盐水溶液(1x 25mL)洗涤，经硫酸钠干燥。真空除去溶剂，得到褐色固体。粗物质经24g硅胶柱纯化(使用石油醚:乙酸乙酯作为洗脱液)。产物在10％乙酸乙酯洗脱。收集的级份经蒸发，得到标题化合物(0.7g，66％)，为浅橙色固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.03(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),7.71(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),7.71(t，J＝8.0Hz,1H),4.80(q，J＝7.2Hz，2H),1.47(t，J＝7.2Hz，3H)。

中间体:3-氯-2-氰基苯甲酸

将氢氧化锂水合物(0.925g，22.04mmol)加至3-氯-2-氰基苯甲酸乙酯(3.85g，18.37mmol)于1,4-二噁烷(40mL)和水(40mL)中的悬浮液中。获得透明溶液。搅拌5小时。用6:4石油醚:乙酸乙酯进行TLC分析，表明起始物质有残留。真空蒸发除去溶剂，将残余物溶于50mL水中。水层的pH值用1.5N盐酸调节至1。白色沉淀洗出。搅拌15分钟，过滤收集白色固体，用25m水洗涤。真空干燥过夜。将灰白色固体与20mL甲苯共沸两次，得到产物，为灰白色固体(3.3g，98％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.11(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),7.78(dd,J＝8.0，1.2Hz,1H),7.65(t，J＝8.0Hz,1H)。

中间体：2-氯-6-(羟基甲基)苯甲腈

在0℃，向3-氯-2-氰基苯甲酸(500mg，2.75mmol)于四氢呋喃(15mL)中的溶液中，加入硼烷四氢呋喃络合物(2.75mL，5.51mmol)。搅拌5小时。经HPLC监测反应，显示39％产物和58％起始物质。加入硼烷四氢呋喃络合物(2.75mL，5.51mmol)，将反应混合物搅拌3小时。HPLC监测显示71％产物和6％起始物质。搅拌过夜，反应混合物冷却至-5℃，缓慢地用5mL甲醇猝灭10分钟，在室温保持10分钟。蒸发溶剂。粗残余物经LCMS显示部分氰基还原。硅胶柱纯化(使用石油醚和丙酮作为洗脱液)。产物在8％丙酮/石油醚中洗脱。收集的级份经蒸发，得到灰白色固体(0.2g，42％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ:7.61(t，J＝9.8Hz,1H),7.50(dd,J＝9.8，1.0Hz,1H),7.40(dd,J＝9.8,1.0Hz,1H),4.89(s,2H),3.0(bs,1H)。

中间体：2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-(羟基甲基)苯甲腈

类似于(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇，从2-氯-6-(羟基甲基)苯甲腈制备标题化合物，60％产率。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.49(dd,J＝7.3，1.2Hz,1H),7.36-7.22(m,2H),7.00-6.86(m,3H),4.84(br.s.，2H),4.31(s,4H),2.74(t，J＝6.0Hz,1H)。

中间体：4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-羟基-6-甲基苯甲醛

将2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛(131mg，0.858mmol)、三苯基膦(225mg，0.858mmol)和(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(200mg，0.780mmol)在无水四氢呋喃(6mL)中合并，冷却至0℃。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.167mL，0.858mmol)于四氢呋喃(6mL)中的溶液。将所生成的黄色溶液缓慢温热至室温过夜。经旋转蒸发仪除去溶剂。粗产物经24g硅胶柱纯化(使用5:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份得到期望的产物(300mg，98％产率)，为白色固体。

中间体：3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-3-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈

在室温，将碳酸铯(167mg，0.512mmol)、4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-6-甲基苯甲醛(100mg，0.256mmol)和3-(溴甲基)苯甲腈(100mg，0.512mmol)在二甲基甲酰胺搅拌3小时。混合物用乙酸乙酯稀释，用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤。经硫酸钠干燥。过滤，经旋转蒸发除去溶剂。残余物经24g硅胶柱纯化(使用1:1至1:2己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到白色固体(90mg，69.5％产率)。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.60(s,1H),7.63-7.77(m,3H),7.49-7.58(m,1H),7.33-7.42(m,1H),7.23-7.32(m,2H),6.93(d,1H),6.85(d,1H),6.79(m,1H),6.53(s,1H),6.48(d,1H),5.15(d,4H),4.33(s,4H),2.61-2.67(m,3H),2.28(s,3H)。

实施例1000:N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺

向3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-3-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈(19mg，0.038mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液中，加入N-(2-氨基乙基)乙酰胺(11.52mg，0.113mmol)，将反应混合物在室温搅拌2小时。加入硼氰化钠(7.09mg，0.113mmol)和乙酸(2.151μl，0.038mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-85％B，历时15分钟，然后在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份，经离心蒸发干燥。产物的产率为13.6mg，纯度经LCMS分析估计为100％。LCMS条件A:2.07分钟，M+1＝592.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.90-7.98(m,1H),7.76-7.84(m,3H),7.60-7.65(m,1H),7.40(d,1H),7.23(m,1H),7.16(d,1H),6.93(d,1H),6.71-6.81(m,2H),6.61(s,1H),6.56(s,1H),5.18(s,2H),5.08(s,2H),4.29(s,4H),3.69(m,2H),3.12(m,2H),2.57(m,2H),2.32(s,3H),2.20(s,3H),1.76(s,3H)。

以与N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺相同的方式，从3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-3-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1001:(R)-2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.99分钟，M+1＝596.2，M-1＝594.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.93-7.97(m,2H),7.81(d,1H),7.60(m,1H),7.40(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.73-6.79(m,2H),6.69(s,1H),6.62(s,1H),5.23(s,2H),5.12(s,2H),4.29(s,4H),4.02(br.s.，2H),3.63(d,1H),3.56(d,1H),2.37(s,3H),2.19(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1002:(R)-2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基丙酸

LCMS条件A:1.90分钟，M+1＝595.3，M-1＝593.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.92(d,1H),7.80(d,1H),7.60(m,1H),7.39(d,1H),7.23(m,1H),7.16(d,1H),6.92(d,1H),6.72-6.79(m,2H),6.68(s,1H),6.63(s,1H),5.24(d,2H),5.10(s,2H),4.28(s,4H),4.15(br.s.，2H),3.83(d,1H),3.58-3.66(m,1H),3.21(d,1H),2.35(s,3H),2.18(s,3H)。

实施例1003:(S)-4-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.87分钟，M+1＝609.3，M-1＝607.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.80-7.87(m,2H),7.62(m,1H),7.53-7.54(m,1H),7.41(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.74-6.79(m,2H),6.64(s,1H),6.59(s,1H),5.19(s,2H),5.10(s,2H),4.29(s,4H),3.89-3.93(m,1H),2.90(s,2H),2.74(s,2H),2.68(br.s.，2H),2.37(br.s.,1H),2.34(s,3H),2.22-2.31(m,1H),2.20(s,3H)。

实施例1004:(S)-1-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.97分钟，M+1＝619.3，M-1＝617.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,3H),7.86(d,1H),7.81(d,1H),7.62(m,1H),7.40(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.74-6.80(m,2H),6.62(s,1H),6.58(s,1H),5.19(s,2H),5.09(s,2H),4.29(s,4H),3.89-3.94(m,1H),3.71(d,1H),3.13(br.s.,1H),2.93(br.s.,1H),2.90(s,2H),2.74(s,2H),2.37(s,3H),2.20(s,3H),1.76(br.s.，2H),1.45(br.s.，2H)。

中间体：5-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-3-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

将碳酸铯(125mg，0.384mmol)、4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-6-甲基苯甲醛(100mg，0.256mmol)和5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(78mg，0.512mmol)在二甲基甲酰胺(1mL)中在75℃搅拌3小时。反应混合物经过滤和浓缩。残余物经24g硅胶柱纯化(使用1:2至2:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到白色固体113mg(87％产率)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.45(s,1H),9.00(d,1H),9.03(d,1H),8.51(s,1H),7.44(d,1H),7.26(m,1H),7.19(d,1H),6.93(d,1H),6.85(s,1H),6.75-6.80(m,2H),6.68(s,1H),5.37(s,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),2.51(s,3H),2.22(s,3H)。

以与N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺相同的方式，从5-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-3-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1005:N-(2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:1.77分钟，M+1＝593.4，M-1＝591.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.98(s,1H),9.00(s,1H),8.42(s,1H),7.41(d,1H),7.24(s,1H),7.17(s,1H),6.93(d,1H),6.74-6.80(m,2H),6.65(s,1H),6.58(s,1H),5.23(s,2H),5.09(s,2H),4.29(s,4H),3.12(d,2H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.56(m,2H),2.33(s,3H),2.20(s,3H),1.76(s,3H)。

实施例1006:(S)-4-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.68分钟，M+1＝610.3，M-1＝608.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(br.s.，2H),8.45(s,1H),7.41(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.74-6.79(m,2H),6.68(s,1H),6.61(s,1H),5.24(s,2H),5.11(s,2H),4.29(s,4H),3.86-3.94(m,2H),3.79-3.86(m,2H),2.69(br.s.，2H),2.38(d,1H),2.35(s,3H),2.27(m,1H),2.20(s,3H)。

实施例1007:(R)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基丙酸

LCMS条件A:1.67分钟，M+1＝596.3，M-1＝594.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),9.01(d,1H),8.53(s,1H),7.41(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.72-6.80(m,3H),6.65(s,1H),5.20-5.35(m,2H),5.13(s,2H),4.29(s,4H),4.06-4.16(m,2H),3.78(m,1H),3.59(m,1H),3.16(m,1H),2.36(s,3H),2.20(s,3H)。

实施例1008:(R)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.73分钟，M+1＝610.3，M-1＝608.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.02(s,1H),8.98(s,1H),8.50(s,1H),7.39(d,1H),7.23(m,1H),7.16(d,1H),6.93(d,1H),6.70-6.78(m,3H),6.65(s,1H),5.24-5.30(m,2H),5.13(s,2H),4.27(s,4H),4.03-4.18(m,2H),3.69(d,1H),3.62(br.s.,1H),2.38(s,3H),2.19(s,3H),1.29(s,3H)。

实施例1009:(S)-1-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.79分钟，M+1＝620.2，M-1＝618.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.01(br.s.，2H),8.45(s,1H),7.96(s,1H),7.41(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.74-6.80(m,2H),6.67(s,1H),6.60(s,1H),5.21-5.26(m,2H),5.10(s,2H),4.29(s,4H),3.93(d,1H),3.74(d,1H),3.13-3.17(m,1H),2.90(s,2H),2.74(s,2H),2.37(s,3H),2.20(s,3H),1.76(br.s.，2H),1.46(br.s.，2H)。

实施例1010:(S)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.71分钟，M+1＝610.3，M-1＝608.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),8.99(s,1H),8.52(s,1H),7.40(d,1H),7.21-7.26(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.72-6.79(m,3H),6.65(s,1H),5.27(s,2H),5.14(s,2H),4.28(s,4H),4.10(d,2H),3.67(d,1H),3.59(d,1H),2.38(s,3H),2.19(s,3H),1.28(s,3H)。

中间体：2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛

在无水四氢呋喃(50mL)中合并2,4-二羟基苯甲醛(3.14g，22.75mmol)、三苯基膦(5.97g，22.75mmol)和(2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲醇(4.1g，20.68mmol)，并且在冰/水浴上冷却。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(4.33mL，22.25mmol)于四氢呋喃(50mL)中的溶液。将所生成的黄色溶液缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。经旋转蒸发仪除去过量溶剂。反应混合物经硅胶色谱纯化(使用0-20％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到期望产物(4.2g，64％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.53(s,1H),9.76(s,1H),7.51-7.29(m,11H),6.67(dd,J＝8.6，2.2Hz,1H),6.60(d,J＝2.0Hz,1H),5.17(s,2H),2.26(s,3H)。

实施例1011:(S)-4-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将3-(溴甲基)苯甲腈(21.68mg，0.111mmol)和三乙胺(15.41μl，0.111mmol)于0.5mL二甲基甲酰胺中的溶液加至2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(32mg，0.101mmol)中，并且在室温搅拌过夜。添加三乙酰氧基硼氢化钠(63.9mg，0.302mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(23.95mg，0.201mmol)，并且在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时30分钟，然后在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的产率为5.0mg，纯度经LCMS分析估计为99％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：注射1条件A：LCMS:2.0分钟，M+1＝537.4，M-1＝535.4，EM＝536.2.注射2条件M:LCMS:3.0分钟，M+1＝537.3，M-1＝535.4，EM＝536.2。¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.3Hz,1H),7.62(t，J＝7.7Hz,1H),7.48-7.42(m,3H),7.40-7.36(m,1H),7.34-7.24(m,4H),7.20(d,J＝7.7Hz,1H),6.79(s,1H),6.69(dd,J＝8.4，1.8Hz,1H),5.22(s,2H),5.13(s,2H),3.94(quin，J＝5.8Hz,1H),3.84(br.s.,1H),2.67(d,J＝3.3Hz，2H),2.38(d,J＝13.9Hz,1H),2.33-2.25(m,1H),2.19(s,3H),1.19-1.02(m,1H)。

中间体：3-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈

将碳酸铯(307mg，0.942mmol)、2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(200mg，0.628mmol)和3-(溴甲基)苯甲腈(185mg，0.942mmol)在二甲基甲酰胺(4mL)中在75℃加热3小时。用稀盐酸(0.1N)中和用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用3:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到170mg标题化合物，为白色膜。LCMS条件A:1.5分钟，M+1＝434.3，EM＝433.2。

以与N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-6-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺相同的方式，从3-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。LCMS表征数据示于下表中。

实施例1012:(2S,3S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.91(d,1H),7.82(d,1H),7.62(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.35(m,4H),7.21(d,1H),6.83(s,1H),6.72(d,1H),5.21-5.28(m,2H),5.15(s,2H),3.95-4.07(m,3H),3.10(d,1H),2.19(s,3H),1.06(d,3H)。

实施例1013:(2R,3R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.91(d,1H),7.82(d,1H),7.62(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.35(m,4H),7.21(d,1H),6.83(s,1H),6.69-6.75(m,1H),5.20-5.28(m,2H),5.15(s,2H),3.96-4.08(m,3H),3.11(d,1H),2.19(s,3H),1.06(d,3H)。

实施例1014:2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,1H),7.81(d,1H),7.58-7.64(m,1H),7.46(m,3H),7.36-7.42(m,2H),7.25-7.35(m,3H),7.20(d,1H),6.83(s,1H),6.73(d,1H),5.25(s,2H),5.16(s,2H),4.01(s,2H),3.64(d,1H),3.55(d,1H),2.19(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1015:(2R,3S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.90(d,1H),7.82(d,1H),7.62(m,1H),7.42-7.51(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.24-7.36(m,4H),7.21(d,1H),6.82(s,1H),6.72(d,1H),5.19-5.28(m,2H),5.15(s,2H),3.94-4.04(m,2H),3.87-3.94(m,1H),3.87(br.s.,1H),3.64(br.s.，2H),2.96(d,1H),2.19(s,3H),1.14(d,3H)。

实施例1016:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.92(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.46(q，J＝7.3Hz，3H),7.26-7.41(m,5H),7.20(d,J＝7.7Hz,1H),6.83(s,1H),6.72(d,J＝8.8Hz,1H),5.21-5.29(m,2H),5.15(s,2H),3.99-4.16(m,2H),3.91(s,1H),3.75(dd,J＝11.2，4.2Hz，2H),2.74(s,1H),2.19(s,3H)。

实施例1017:2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(br.s.,1H),7.87-7.98(m,2H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.62(t，J＝7.3Hz,1H),7.25-7.49(m,8H),7.20(d,J＝7.3Hz,1H),6.83(br.s.,1H),6.73(d,J＝8.1Hz,1H),5.20-5.32(m,2H),5.15(br.s.，2H),3.99-4.22(m,2H),3.91(s,1H),3.76(br.s.,1H),3.66(br.s.,1H),2.74(s,1H),2.19(s,3H)。

实施例1018:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.92(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.46(m,3H),7.25-7.42(m,5H),7.20(d,1H),6.83(s,1H),6.73(d,1H),5.20-5.30(m,2H),5.15(s,2H),4.11(d,1H),4.05(d,1H),3.76(m,1H),3.65(m,1H),3.18(m,1H),2.19(s,3H),1.91(s,1H)。

实施例1019:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.42-7.50(m,3H),7.35-7.42(m,2H),7.24-7.35(m,3H),7.20(d,1H),6.82(s,1H),6.73(d,1H),5.25(s,2H),5.16(s,2H),4.02(s,2H),3.65(d,1H),3.56(d,1H),2.19(s,3H),1.91(s,1H),1.26(s,3H)。

实施例1020:2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-2-(羟基甲基)-3-甲基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.93(d,1H),7.80(d,1H),7.60(m,1H),7.42-7.50(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.24-7.36(m,4H),7.20(d,1H),6.84(s,1H),6.72(d,1H),5.27(s,2H),5.16(s,2H),4.07(d,1H),3.98(d,1H),3.79(s,2H),2.19(s,3H),2.10-2.17(m,1H),0.96(d,3H),0.83(d,3H)。

实施例1021:(S)-3-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-4-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.89(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.46(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.25-7.34(m,4H),7.20(d,1H),6.80(s,1H),6.70(d,1H),5.23(s,2H),5.14(s,2H),3.98(d,1H),3.86(d,1H),3.53(m,2H),2.98(d,1H),2.10-2.27(m,5H),1.90(s,1H)。

实施例1022:(R)-3-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-4-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.89(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.46(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.25-7.35(m,4H),7.20(d,1H),6.81(s,1H),6.70(d,1H),5.23(s,2H),5.15(s,2H),3.98(d,1H),3.85(d,1H),3.53(m,1H),3.43(d,1H),2.98(br.s.,1H),2.11-2.27(m,5H)。

实施例1023:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.91-7.96(m,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.42-7.50(m,3H),7.39(m,2H),7.24-7.35(m,3H),7.20(d,1H),6.82(s,1H),6.73(d,1H),5.25(s,2H),5.16(s,2H),4.01(s,2H),3.64(d,1H),3.55(d,1H),2.19(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1335:N-(2-((2-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

将甲基碘(65mg)溶于3mL DMF中。将2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(0.016g，0.05mmol)和碳酸钾(0.021g，0.150mmol)合并于0.5mL甲基碘(6.25μl，0.100mmol)溶液中。将反应混合物在80℃加热3小时。冷却的溶液经500mg StratoSpheres^TM PL-Thiol MP SPE柱(含有1.5mmol的游离硫醇，以清除残余的甲基碘)过滤。该柱已经用甲醇预处理。使反应混合物在重力作用下经过该柱，然后该柱进一步用1mL甲醇洗涤。

将该洗脱液与N-(2-氨基乙基)乙酰胺(0.015g，0.150mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.032g，0.150mmol)合并，并且搅拌过夜。LCMS分析与起始物质和未还原的亚胺一致(M+1＝417)。添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.032g，0.150mmol)和N-(2-氨基乙基)乙酰胺(0.015g，0.150mmol)，并且搅拌过夜。

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时25分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为5.4mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。LCMS条件A:1.68分钟，M+1＝419.4；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.86-7.80(m,1H),7.46(t，J＝7.3Hz，3H),7.39(s,1H),7.32(d,J＝7.9Hz，2H),7.31-7.26(m,1H),7.20(d,J＝9.2Hz，2H),6.66(s,1H),6.64-6.59(m,1H),5.13(s,2H),3.78(s,3H),3.60(s,2H),3.13(d,J＝6.1Hz，2H),2.55-2.52(m,2H),2.21(s,3H)。

使用制备实施例1335:N-(2-((2-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺的两步操作，制备实施例1024至1120。使用合适的烷基溴代替甲基碘，以烷基化酚氧，并且N-(2-氨基乙基)乙酰胺用于还原性胺化，得到期望的实施例。表征数据示于实施例之后的表中。

实施例1024:N-(2-((2-(苄氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1025:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((3-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1026:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1027:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-丙氧基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1028:N-(2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1029:N-(2-((2-((4-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1030:N-(2-((2-(2-羟基乙氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1031:2-(2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)乙酰胺

实施例1032:5-(2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)戊酸甲酯

实施例1033:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-苯乙氧基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1034:3-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯

实施例1035:N-(2-((2-(3-羟基丙氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1036:4-(2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)丁酸甲酯

实施例1037:N-(2-((2-((3-(羟基甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1038:N-(2-((2-((2-(羟基甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1039:4-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲酰胺

实施例1040:N-(2-((2-((4-乙酰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1041:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((2-(甲基磺酰基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1042:N-(2-((2-(3-甲氧基丙氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1043:4-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲酸

实施例1044:N-(2-((2-乙氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1045:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1046:N-(2-((2-((4-(叔丁基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1047:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((4-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1048:N-(2-((2-((2-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1049:N-(2-((2-((2,6-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1050:N-(2-((2-((3-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1051:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((3-(三氟甲基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1052:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((4-(三氟甲基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1053:N-(2-((2-((2-氯苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1054:N-(2-((2-((3-氯苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1055:N-(2-((2-((2-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1056:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(萘-2-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1057:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((2-硝基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1058:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((4-硝基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1059:N-(2-((2-((3,4-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1060:N-(2-((2-((2,5-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1061:N-(2-((2-((3,5-双(三氟甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1062:N-(2-((2-((3,5-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1063:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(萘-1-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1064:N-(2-((2-((2,4-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1065:N-(2-((2-((3,5-二甲基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1066:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((2-(三氟甲基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1067:4-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲酸甲酯

实施例1068:N-(2-((2-((4-氯苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1069:N-(2-((2-((3,4-二氯苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1070:N-(2-((2-((2-氟-3-甲基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1071:N-(2-((2-((2,3-二氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1072:N-(2-((2-((3-氯-2-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1073:N-(2-((2-((3-苯甲酰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1074:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(喹啉-8-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1075:N-(2-((2-((4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1076:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((3-硝基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1077:N-(2-((2-((3-(2-氟苯氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1078:N-(2-((2-((3-(4-氟苯氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1079:N-(2-((2-((2-氟-3-(三氟甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1080:N-(2-((2-((2-氟-5-(三氟甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1081:N-(2-((2-((3-氟-5-(三氟甲基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1082:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((3-(三氟甲氧基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1083:N-(2-((2-((4-氯-2-(三氟甲基)喹啉-6-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1084:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((4-(甲基磺酰基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1085:N-(2-((2-((2-(二氟甲氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1086:N-(2-((2-((3-甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1087:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((2-(三氟甲氧基)苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1088:N-(2-((2-((4-(二氟甲氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1089:N-(2-((2-((2'-氰基-[1,1'-联苯基]-4-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1090:N-(2-((2-((4-甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1091:N-(2-((2-((3-氯-5-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1092:N-(2-((2-((2,6-二氟-3-甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1093:N-(2-((2-((4-氟-3-甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1094:N-(2-((2-((2-氟-5-甲基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1095:N-(2-((2-((5-氰基-2-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1096:N-(2-((2-((3-氟-5-甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1097:N-(2-((2-((4-溴-2-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1098:N-(2-((2-((1H-吲唑-5-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1099:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1100:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(嘧啶-4-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1101:2-(3-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯基)乙酸甲酯

实施例1102:N-(2-((2-((1H-吲唑-6-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1103:3-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)-4-氟苯甲酸甲酯

实施例1104:N-(2-((2-((5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1105:3-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲酸叔丁酯

实施例1106:N-(2-((2-((3-氟-5-(三氟甲氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1107:N-(2-((2-((3,5-二甲氧基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1108:N-(2-((2-((4-氟-3-甲基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1109:N-(2-((2-((5-氯-2-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1110:N-(2-((2-((3-氯-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1111:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(吡啶-4-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1112:N-(2-((2-((3-(1H-吡咯-1-基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1113:N-(2-((2-((3-氟-5-甲基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1114:N-(2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1115:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((5-甲基异噁唑-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1116:N-(2-((2-((3-(二氟甲氧基)苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1117:N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1118:N-(2-((2-(异喹啉-1-基甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

实施例1119:(3-((2-(((2-乙酰氨基乙基)氨基)甲基)-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯基)氨基甲酸叔丁酯

实施例1120:(S)-N-(2-((4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)-2-((5-氧代吡咯烷-2-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

表:实施例的LCMS表征

中间体：4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将2,4-二羟基苯甲醛(0.356g，2.58mmol)、三苯基膦(0.675g，2.58mmol)和(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(0.6g，2.341mmol)在无水四氢呋喃(10mL)中合并，然后在冰/水浴上冷却。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.501mL，2.58mmol)于四氢呋喃(10mL)中的溶液。将所生成的黄色溶液缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。旋转蒸发除去过量溶剂。含有产物的反应混合物经硅胶色谱纯化(使用乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)，得到标题化合物(0.5g，56％)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.52(s,1H),9.76(s,1H),7.49(d,J＝8.6Hz,1H),7.43-7.36(m,1H),7.31-7.25(m,2H，与残余的氯仿一致)，6.94(d,J＝8.3Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(s,1H),6.69-6.63(m,1H),6.59(d,J＝2.0Hz,1H),5.16(s,2H),4.33(s,4H),2.28(s,3H)。

实施例:1121(S)-4-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丁酸

将三乙胺(15.33μl，0.110mmol)于二甲基甲酰胺(1000μl)中的溶液加至3-(溴甲基)苯甲腈(21.56mg，0.110mmol)和4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(37.6mg，0.1mmol)中，并且在室温搅拌过夜。添加三乙酰氧基硼氢化钠(63.6mg，0.300mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(23.82mg，0.200mmol)，并且在室温搅拌72小时。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为3.1mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：LCMS条件A:1.7分钟，M+1＝595.3，M-1＝593.2，EM＝594.2。LCMS条件M:3.0分钟，M+1＝595.3，M-1＝593.3，EM＝594.2。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.85(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.65-7.60(m,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.29-7.21(m,2H),7.16(d,J＝7.3Hz,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.73(m,3H),6.68(d,J＝8.4Hz,1H),5.22(s,2H),5.11(s,2H),4.29(s,4H),3.91(t，J＝5.9Hz,1H),3.84-3.69(m,2H),2.62(d,J＝5.9Hz，2H),2.41-2.22(m,2H),2.20(s,3H)。

类似于(S)-4-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丁酸，从3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据参见下表。

实施例1122:(R)-2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.91(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.40(d,1H),7.34(d,1H),7.23(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.82(br.s.,1H),6.69-6.80(m,3H),5.20-5.29(m,2H),5.13(s,2H),4.29(s,4H),4.12(d,1H),4.05(d,1H),3.90(s,1H),3.71-3.80(m,1H),3.65(m,1H),3.18(br.s.,1H),2.19(s,3H)。

实施例1123:(2R,3S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

实施例1124:2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

实施例1125:(2R,3R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.90(d,1H),7.82(d,1H),7.62(m,1H),7.41(d,1H),7.33(d,1H),7.24(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.68-6.84(m,4H),5.20-5.28(m,2H),5.13(s,2H),4.29(s,4H),3.94-4.08(m,3H),3.10(d,1H),2.20(s,3H),1.06(d,3H)。

实施例1126:(S)-3-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-羟基丁酸

¹H NMR(甲醇-d₄)δ7.93(s,1H),7.88(d,1H),7.68-7.73(m,1H),7.56-7.62(m,1H),7.32-7.41(m,2H),7.14-7.24(m,2H),6.89(d,1H),6.77(d,1H),6.67-6.76(m,3H),5.30(s,2H),5.14(s,2H),4.34(d,1H),4.29(s,4H),4.21(d,1H),3.90(m,1H),3.64(m,1H),3.35-3.44(m,2H),2.39-2.57(m,2H),2.22(s,3H)。

实施例1127:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(甲醇-d₄)δ8.00(s,2H),7.87-7.96(m,2H),7.71(d,1H),7.60(m,1H),7.33-7.44(m,2H),7.14-7.23(m,2H),6.89(d,1H),6.80(d,1H),6.70-6.77(m,3H),5.29(s,2H),5.15(s,2H),4.29(s,4H),4.25(s,2H),3.95(d,1H),3.74(d,1H),2.22(s,3H),1.45(s,3H)。

实施例1128:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.37(d,1H),7.40(d,1H),7.23(m,1H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.81(s,1H),6.78(d,1H),6.68-6.77(m,2H),5.24(s,2H),5.14(s,2H),4.29(s,4H),3.63(d,1H),3.55(d,1H),3.18(s,1H),2.20(s,3H),1.91(s,1H),1.26(s,3H)。

实施例1129:(R)-3-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-羟基丁酸

¹H NMR(甲醇-d₄)δ7.94(s,1H),7.89(d,1H),7.71(d,1H),7.59(m,1H),7.32-7.40(m,2H),7.14-7.24(m,2H),6.89(d,1H),6.78(d,1H),6.69-6.77(m,3H),5.31(s,2H),5.14(s,2H),4.32-4.38(m,1H),4.29(s,4H),4.17-4.25(m,1H),3.90(m,1H),3.64(m,1H),3.36-3.43(m,2H),2.40-2.58(m,2H),2.22(s,3H)。

中间体：2-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-4-甲腈

将碳酸铯(173mg，0.531mmol)、4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-6-甲基苯甲醛(100mg，0.256mmol和3-(溴甲基)苯甲腈(81mg，0.531mmol)在二甲基甲酰胺中在75℃搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。过滤，通过旋转蒸发除去溶剂。残余物经24g硅胶柱纯化(使用2:3己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到白色固体(18mg，13.8％产率)。

使用类似于制备(S)-4-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丁酸的方法，通过还原性胺化从2-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-4-甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1130:N-(2-(2-((4-氰基吡啶-2-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:1.87分钟，M+1＝579.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.85(d,1H),7.91-8.04(m,1H),7.72-7.91(m,2H),7.40(d,1H),7.20-7.27(m,2H),7.16(d,1H),6.93(d,1H),6.71-6.82(m,3H),6.66(d,1H),5.30(s,2H),5.10(s,2H),4.29(s,4H),3.71(m,2H),3.11-3.19(m,2H),2.56(m,2H),2.19(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1131:(R)-2-(2-((4-氰基吡啶-2-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.81分钟，M+1＝596.2，M-1＝594.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.84(d,1H),8.10(s,1H),7.83(d,1H),7.36(d,1H),7.39(d,1H),7.20-7.24(m,1H),7.14-7.18(m,1H),6.93(d,1H),6.83(s,1H),6.70-6.79(m,3H),5.38(s,2H),5.13(s,2H),4.29(s,4H),4.06(s,2H),3.60(s,2H),2.18(s,3H),1.30(s,3H)。

实施例1132:(S)-1-(2-((4-氰基吡啶-2-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.81分钟，M+1＝606.3，M-1＝604.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.84(d,1H),8.09(s,1H),7.96(s,1H),7.83(d,1H),7.40(d,1H),7.33(d,1H),7.23(m,1H),7.16(d,1H),6.93(d,1H),6.68-6.82(m,4H),5.28-5.33(m,2H),5.11(s,2H),4.29(s,4H),4.02(d,1H),3.81(d,1H),3.17(d,1H),3.00(br.s.,1H),2.44(br.s.,1H),2.20(s,3H),1.83(br.s.,1H),1.76(br.s.,1H),1.53(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

中间体：3-((2-甲酰基-3-甲氧基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈

将碳酸铯(112mg，0.344mmol)、2-羟基-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(40mg，0.115mmol)和3-(溴甲基)苯甲腈(67.5mg，0.344mmol)在二甲基甲酰胺(1mL)中在75℃加热过夜。用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用2:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到28mg标题化合物，为无色膜。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.31(s,1H),8.03(s,1H),7.84(dd,J＝19.6，7.9Hz，2H),7.69-7.58(m,1H),7.54-7.44(m,3H),7.40(d,J＝7.3Hz,1H),7.36-7.28(m,3H),7.24(d,J＝7.3Hz,1H),6.55(s,1H),6.49(s,1H),3.88(s,3H),2.23(s,3H)。

实施例1133:(S)-4-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将3-((2-甲酰基-3-甲氧基-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈(26mg，0.056mmol)的溶液与(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(20.04mg，0.168mmol)合并，并且在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(10.6mg，0.168mmol)和3滴乙酸(3.21μl，0.056mmol)。在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，然后在100％B保持7分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为12.3mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.85(d,1H),7.81(d,1H),7.62(m,1H),7.47(m,3H),7.39(m,1H),7.27-7.34(m,3H),7.21(d,1H),6.49(s,1H),6.44(s,1H),5.22(s,2H),5.17(s,2H),3.76-3.99(m,4H),2.63(d,2H),2.55(s,2H),2.34(m,1H),2.26(m,1H),2.21(s,3H),1.91(s,1H)。

LCMS条件A:2.03分钟，M+1＝567.4，M-1＝565.4，EM＝566.2。

类似于(S)-4-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸的方法，从3-((2-甲酰基-3-甲氧基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1134:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.96(s,1H),7.78-7.93(m,3H),7.57-7.65(m,1H),7.47(m,3H),7.39(m,1H),7.26-7.35(m,3H),7.21(d,1H),6.48(s,1H),6.52(s,1H),5.22-5.27(m,2H),5.18(s,2H),4.04-4.16(m,2H),3.91(s,1H),3.83(s,3H),3.72(br.s.,1H),3.57-3.65(m,1H),3.09(br.s.,1H),2.21(s,3H)。

实施例1135:(2R,3S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(br.s.,1H),7.90(d,1H),7.82(d,1H),7.62(d,1H),7.47(br.s.，3H),7.40(d,1H),7.25-7.35(m,3H),7.21(d,1H),6.52(br.s.,1H),6.48(br.s.,1H),5.23(d,2H),5.18(br.s.，2H),4.07(br.s.，2H),3.89-3.99(m,1H),3.83(s,3H),3.75-3.96(m,5H),2.85-2.95(m,2H),2.74(s,1H),2.21(br.s.，3H),1.16(d,3H)。

实施例1136:(2S,3S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.89(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.43-7.51(m,3H),7.36-7.43(m,1H),7.26-7.33(m,3H),7.21(d,1H),6.48(s,1H),6.52(s,1H),5.24(d,2H),5.18(s,2H),4.07-4.18(m,2H),3.99-4.07(m,1H),3.84(s,3H),3.10(d,1H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.20(s,3H),1.04(d,3H)。

实施例1137:2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.96(s,1H),7.91(d,1H),7.80(d,1H),7.60(m,1H),7.44-7.49(m,2H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.34(m,2H),7.20-7.23(m,1H),6.51(s,1H),6.48(s,1H),5.15-5.28(m,3H),4.05(s,1H),3.83(s,2H),3.64(d,1H),3.53(d,1H),2.20(s,2H),1.24(s,2H)。

实施例1138:(2R,3R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-6-甲氧基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.90(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.43-7.51(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.26-7.35(m,3H),7.21(d,1H),6.50(s,1H),6.46(s,1H),5.16-5.25(m,4H),4.02(br.s.，2H),3.91(br.s.,1H),3.82(s,3H),2.88-2.98(m,1H),2.21(s,3H),1.05(d,3H)。

中间体：3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)甲基)苯甲腈

将碳酸铯(120mg，0.369mmol)、4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-6-甲氧基苯甲醛(100mg，0.246mmol)和3-(溴甲基)苯甲腈(72.4mg，0.369mmol)于二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在75℃搅拌过夜。反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用2:1己烷:乙酸乙酯洗脱)，得到标题化合物(80mg)，为白色膜。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.47(s,1H),7.85-7.80(m,1H),7.79-7.75(m,1H),7.67-7.63(m,1H),7.58-7.51(m,1H),7.41-7.34(m,1H),7.31-7.29(m,2H partially obscured by氯仿)，6.96-6.92(m,1H),6.86-6.83(m,1H),6.82-6.77(m,1H),6.31-6.25(m,1H),6.24-6.18(m,1H),5.19(s,2H),5.15(s,2H),4.34(s,4H),3.94(s,3H),2.30(s,3H)。

实施例1139:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲氧基苄基)氨基)-3-羟基丙酸

向3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)甲基)苯甲腈(20mg，0.038mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液中，加入(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(12.09mg，0.115mmol)。在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(7.23mg，0.115mmol)和3滴乙酸(2.195μl，0.038mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-85％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为6.5mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(br.s.,1H),7.90(d,1H),7.82(d,1H),7.61(m,1H),7.43(d,1H),7.25(m,1H),7.18(d,1H),6.93(d,1H),6.70-6.84(m,2H),6.48(s,1H),6.52(s,1H),5.20-5.30(m,2H),5.16(br.s.，2H),4.29(br.s.，4H),4.06-4.21(m,2H),3.74-3.82(m,1H),3.60-3.64(m,1H),3.13(br.s.，2H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.22(br.s.，3H)。LCMS条件A:1.85分钟，M+1＝611.4，M-1＝609.4，EM＝610.2。

类似于(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲氧基苄基)氨基)-3-羟基丙酸，从3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1140:(S)-4-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲氧基苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.85(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.42(d,1H),7.24(m,1H),7.18(d,1H),6.93(d,1H),6.71-6.82(m,2H),6.48(s,1H),6.43(s,1H),5.21(s,2H),5.14(s,2H),4.28-4.28(m,1H),4.29(s,4H),3.84-3.93(m,1H),3.82(br.s.，2H),3.80(s,3H),2.62(d,2H),2.33(m,1H),2.25(m,1H),2.22(s,3H)。

实施例1141:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲氧基苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(br.s.,1H),7.90(d,1H),7.82(d,1H),7.61(m,1H),7.43(d,1H),7.25(m,1H),7.18(d,1H),6.93(d,1H),6.72-6.82(m,2H),6.52(br.s.,1H),6.48(br.s.,1H),5.20-5.30(m,2H),5.16(br.s.，2H),4.29(s,4H),4.06-4.22(m,2H),3.84(s,3H),3.78(d,1H),3.58-3.67(m,1H),3.13(br.s.,1H),2.22(s,3H)。

实施例1142:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲氧基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.91(d,1H),7.81(d,1H),7.61(m,1H),7.42(d,1H),7.24(m,1H),7.18(d,1H),6.93(d,1H),6.71-6.81(m,2H),6.51(s,1H),6.48(s,1H),5.20-5.29(m,2H),5.17(s,2H),4.29(s,4H),4.08(s,2H),3.84(s,3H),3.66(d,1H),3.55(d,1H),2.21(s,3H),1.25(s,3H)

中间体：5-(2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)戊腈

含有碳酸铯(115mg，0.353mmol)、2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(75mg，0.236mmol)和5-氯戊腈(41.5mg，0.353mmol)的二甲基甲酰胺(4mL)溶液在75℃加热过夜。对混合物进行过滤，用稀盐酸(0.1N)中和。用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用3:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集含有标题化合物的级份，得到无色膜。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.24(s,1H),7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.53-7.44(m,3H),7.42-7.36(m,1H),7.35-7.28(m,3H),7.23(d,J＝7.7Hz,1H),6.86(s,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),5.28(s,2H),4.19(t，J＝6.1Hz，2H),2.61(t，J＝7.0Hz，2H),2.51(br.s.，3H),1.95-1.85(m,2H),1.83-1.72(m,2H)。

实施例1143:(R)-2-((2-(4-氰基丁氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将5-(2-甲酰基-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)戊腈(20mg，0.050mmol)和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(15.78mg，0.150mmol)的二甲基甲酰胺(1mL)溶液在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(9.44mg，0.150mmol)和3滴乙酸(2.87μl，0.050mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为14.6mg，其纯度经LCMS分析估计为98％。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.46(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.26-7.35(m,4H),7.21(d,1H),6.76(s,1H),6.68(d,1H),5.16(s,2H),3.98-4.12(m,4H),3.77(m,1H),3.65(m,2H),3.17(d,1H),2.58(m,2H),2.20(s,3H),1.84-1.93(m,2H),1.74-1.81(m,2H)。LCMS条件M:2.81分钟，M+1＝489.5，M-1＝487.6，EM＝488.2。

实施例1144:(S)-4-((2-(4-氰基丁氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将5-(2-甲酰基-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)戊腈(20mg，0.050mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(17.89mg，0.150mmol)于中的二甲基甲酰胺(1mL)溶液在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(9.44mg，0.150mmol)和3滴乙酸(2.87μl，0.050mmol)，然后将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-100％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为10.7mg，其纯度经LCMS分析估计为99％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.47(m,3H),7.36-7.42(m,1H),7.26-7.36(m,3H),7.20(d,1H),7.23(d,1H),6.70(s,1H),6.65(d,1H),5.14(s,2H),4.03(m,2H),3.88-3.94(m,2H),2.56-2.65(m,4H),2.40(m,1H),2.28(m,1H),2.21(s,3H),1.91(s,1H),1.81-1.88(m,2H),1.71-1.79(m,2H)。LCMS条件A:2.0分钟，M+1＝503.3，M-1＝501.3，EM＝502.3。

中间体：4-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将2,4-二羟基苯甲醛(212mg，1.538mmol),三苯基膦(404mg，1.538mmol)和(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯基)甲醇(387mg，1.399mmol)合并在无水四氢呋喃(4mL)中，并且在冰/水浴上冷却。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.299mL，1.538mmol)于四氢呋喃(4mL)中的溶液。使所生成的黄色溶液缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。在乙酸乙酯和水之间分配。有机部分通过旋转蒸发浓缩。经硅胶色谱纯化(使用0-50％乙酸乙酯/己烷洗脱)。合并含有经LCMS分析检测的期望物质的级份。NMR表明产物的混合物(两个醛峰)。没有纯化该物质(368mg)，就用于制备3-((5-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈。

中间体：3-((5-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

将4-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(368mg，0.927mmol)和碳酸铯(604mg，1.855mmol)溶于二甲基甲酰胺(5mL)中。添加3-(溴甲基)苯甲腈(273mg，1.391mmol)于二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液。在室温搅拌过周末。用100mL乙醚稀释，形成沉淀。通过旋转蒸发除去溶剂。再悬浮于乙酸乙酯中，吸收在硅胶中。经40g硅胶色谱纯化(使用0-100％乙酸乙酯/己烷洗脱)。产物所呈现的扁平峰与差溶解度(poor solubility)一致。除去溶剂后，分离标题化合物(180mg，38％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.28(s,1H),8.02(s,1H),7.90-7.80(m,3H),7.74(d,J＝8.8Hz,1H),7.64(s,2H),7.42(d,J＝16.1Hz，2H),6.99-6.77(m,5H),5.35(d,J＝14.2Hz，4H),4.30(s,4H)。

实施例1145:(S)-1-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

将氰基硼氢化钠(6.87mg，0.109mmol)、(S)-哌啶-2-羧酸(10.60mg，0.082mmol)和3-((5-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈(28mg，0.055mmol)合并在二甲基甲酰胺(1mL)和乙酸(0.050mL)中。在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:35-75％B，历时20分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为9.5mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：LCMS条件A:1.8分钟，M+1＝625.3，M-1＝623.3，EM＝624.2.条件M:LCMS:2.8分钟，M+1＝625.3，M-1＝623.3，EM＝624.2。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.96(s,2H),7.83(dd,J＝19.1，7.7Hz，2H),7.62(t，J＝7.9Hz,1H),7.58(d,J＝7.3Hz,1H),7.45-7.40(m,1H),7.35(dd,J＝13.9，8.1Hz，2H),6.98-6.93(m,1H),6.92(s,1H),6.88(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.69(d,J＝8.1Hz,1H),5.23(s,2H),5.20(s,2H),4.30(s,4H),3.98-3.71(m,3H),2.96(br.s.,1H),2.41(br.s.,1H),1.87-1.67(m,2H),1.58-1.31(m,4H)。

类似于(S)-1-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸，从3-((5-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。LCMS表征数据示于下表中。

实施例1146:(R)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丙酸

从(R)-2-氨基-3-羟基丙酸制备标题化合物。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.61(t，J＝7.8Hz,1H),7.57(d,J＝7.3Hz,1H),7.45-7.39(m,1H),7.36(d,J＝8.2Hz，2H),6.97-6.93(m,1H),6.92(d,J＝1.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.2Hz,1H),6.83(s,1H),6.70(d,J＝6.4Hz,1H),5.30-5.22(m,2H),5.21(s,2H),4.30(s,4H),4.13-4.01(m,2H),3.80-3.72(m,1H),3.65(dd,J＝11.3，6.7Hz,1H),3.18(t，J＝5.5Hz,1H)。

实施例1147:(S)-4-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丁酸

从(S)-4-氨基-3-羟基丁酸制备标题化合物。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.90-7.78(m,2H),7.67-7.60(m,1H),7.57(d,J＝7.3Hz,1H),7.46-7.39(m,1H),7.39-7.34(m,1H),7.30(d,J＝8.1Hz,1H),6.98-6.93(m,1H),6.91(s,1H),6.90-6.85(m,1H),6.79(s,1H),6.67(d,J＝7.3Hz,1H),5.23(s,2H),5.20(s,2H),4.30(s,4H),3.97-3.92(m,1H),3.88-3.78(m,2H),2.66(d,J＝5.1Hz，2H),2.44-2.36(m,1H),2.33-2.23(m,1H)。

实施例1148:(R)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

从(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸制备标题化合物。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.60(t，J＝7.9Hz,1H),7.56(d,J＝6.6Hz,1H),7.45-7.34(m,3H),6.95(d,J＝8.4Hz,1H),6.91(d,J＝1.8Hz,1H),6.89-6.85(m,1H),6.82(s,1H),6.73-6.66(m,1H),5.25(s,2H),5.22(s,2H),4.30(s,4H),4.01(s,2H),3.68-3.61(m,1H),3.56(d,J＝11.4Hz,1H),1.26(s,3H)。

实施例1149:(S)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

从(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸制备制备标题化合物。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.56(d,J＝7.3Hz,1H),7.44-7.34(m,3H),6.95(d,J＝8.1Hz,1H),6.91(s,1H),6.89-6.85(m,1H),6.82(s,1H),6.70(d,J＝8.4Hz,1H),5.25(s,2H),5.22(s,2H),4.30(s,4H),4.01(s,2H),3.66-3.61(m,1H),3.56(d,J＝11.4Hz,1H),1.26(s,3H)。

实施例1150:N-(2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基氨基)乙基)乙酰胺

从N-(2-氨基乙基)乙酰胺制备标题化合物。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.83(d,J＝4.4Hz，2H),7.66-7.60(m,1H),7.57(d,J＝6.2Hz,1H),7.45-7.39(m,1H),7.38-7.33(m,1H),7.25(d,J＝8.4Hz,1H),6.98-6.93(m,1H),6.92(d,J＝1.8Hz,1H),6.90-6.86(m,1H),6.76(d,J＝1.8Hz,1H),6.63(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.30(s,4H),3.13(q，J＝6.2Hz，2H),2.55(t，J＝6.4Hz，2H),1.77(s,3H)。

中间体：5-((5-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

将碳酸铯(178mg，0.548mmol)、4-((2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(150mg，0.365mmol)和5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(111mg，0.730mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中在75℃搅拌3小时。对反应混合物进行过滤并且浓缩。残余物经24g硅胶色谱柱进行纯化(使用1:2至2:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到期望的产物(110mg，57％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.34(s,1H),8.92-8.88(m,2H),8.08(s,1H),7.73(s,1H),7.57-7.49(m,1H),7.40-7.34(m,2H),7.02-6.88(m,3H),6.51(s,1H),5.34(s,2H),5.22(s,2H),4.35(s,4H),2.32(s,3H)。

以与(S)-1-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-(3-氰基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同的方式，从5-((5-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1151:5-((5-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((2-羟基乙基氨基)甲基)-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

LCMS条件A:1.83分钟，M+1＝572.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.97(s,1H),9.00(s,1H),8.42(s,1H),7.59(d,1H),7.42(m,1H),7.36(d,1H),7.11(s,1H),6.85-6.97(m,4H),5.28(s,2H),5.22(s,2H),4.30(s,4H),3.47(m,2H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.58(m,2H),2.14(s,3H)。

实施例1152:(S)-1-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.80分钟，M+1＝640.2，M-1＝638.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(s,2H),8.48(s,1H),7.60(d,1H),7.41-7.45(m,1H),7.36-7.38(m,1H),7.19(s,1H),6.92-6.97(m,2H),6.88-6.91(m,2H),5.30(d,2H),5.24(s,2H),4.30(s,4H),3.94(s,1H),3.71-3.77(m,1H),3.14(m,1H),2.94(br.s.,1H),2.39(d,1H),2.14(s,3H),1.83(br.s.,1H),1.75(d,1H),1.51(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

实施例1153:(R)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丙酸

LCMS条件A:1.70分钟，M+1＝616.2，M-1＝614.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),9.01(s,1H),8.53(s,1H),7.60(d,1H),7.43(m,1H),7.37(d,1H),7.22(s,1H),6.92-6.97(m,3H),6.88-6.91(m,1H),5.28-5.35(m,2H),5.25(s,2H),4.30(s,4H),4.08(d,1H),4.00(d,1H),3.74(m,1H),3.63(m,1H),3.11-3.19(m,1H),2.14(s,3H)。

实施例1154:(S)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.74分钟，M+1＝630.3，M-1＝628.2 ¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),8.99(s,1H),8.52(s,1H),7.58(d,1H),7.40-7.44(m,1H),7.35-7.38(m,1H),7.25(s,1H),6.87-6.97(m,4H),5.32(s,2H),5.26(s,2H),4.30(s,4H),3.99(s,2H),3.64(d,1H),3.55(d,1H),2.15(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1155:(R)-1-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.80分钟，M+1＝640.2，M-1＝638.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.94-9.05(m,2H),8.48(s,1H),7.60(d,1H),7.43(m,1H),7.37(d,1H),7.19(s,1H),6.92-6.97(m,2H),6.88-6.91(m,2H),5.26-5.32(m,2H),5.24(s,2H),4.30(s,4H),3.89-3.97(m,1H),3.72-3.78(m,1H),3.14(m,1H),2.94(br.s.,1H),2.39(d,1H),2.14(s,3H),1.83(br.s.,1H),1.75(d,1H),1.52(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

实施例1156:(R)-2-(4-(2-氯-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.76分钟，M+1＝630.3，M-1＝628.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),8.99(s,1H),8.52(s,1H),7.58(d,1H),7.42(m,1H),7.37(d,1H),7.25(s,1H),6.87-6.97(m,4H),5.32(s,2H),5.26(s,2H),4.30(s,4H),3.99(s,2H),3.64(d,1H),3.55(d,1H),2.15(s,3H),1.26(s,3H)。

中间体：5-氯-2,4-二羟基苯甲醛

5-氯-2,4-二羟基苯甲醛如下述文献所述制备：Vogel，H；Goeldner,M.et.al.Angew.Chem.Int.Ed.2007，46，3505-3508，Supplemental information，page 6。化合物进一步经硅胶色谱柱纯化(使用乙酸乙酯:己烷(1:5)作为洗脱液)。¹H NMR(氯仿-d)δ:11.26(s,1H),9.70(d,J＝0.5Hz,1H),7.53(s,1H),6.62(s,1H),6.21(br.s.,1H)。

中间体：5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.532mL，2.68mmol)于四氢呋喃(3mL)中的溶液滴加至5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(421mg，2.440mmol)、三苯基膦(711mg，2.71mmol)和(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(686mg，2.68mmol)于无水四氢呋喃(7mL)中的冷却(0℃)溶液中。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。使用布式漏斗从反应混合物中过滤出产物，并且用四氢呋喃(约5mL)淋洗，然后在室温真空干燥，得到393mg几近无色的固体。¹H NMR(氯仿-d)δ:11.44(s,1H),9.71(s,1H),7.56(s,1H),7.45(dd,J＝6.5，2.4Hz,1H),7.23-7.27(m,2H),6.92(d,J＝8.2Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(dd,J＝8.2，2.0Hz,1H),6.64(s,1H),5.21(s,2H),4.32(s,4H),2.28(s,3H)。

中间体：3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(180mg，0.438mmol)部分悬浮于二甲基甲酰胺(4.3mL)中，添加碳酸铯(180mg，0.552mmol)，将反应混合物搅拌约5分钟，此时呈现为改进的溶解度。将3-氰基苄基溴(94mg，0.479mmol)加至反应混合物中。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌过夜。从反应混合物中除去挥发性物质，将固体残余物分配在二氯甲烷和水之间。水相用二氯甲烷萃取一次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂，得到标题化合物(241mg)，为无色固体。在质子NMR中观察到*0.45二氯甲烷的溶剂化物。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.33(s,1H),7.92(s,1H),7.73(s,1H),7.69(d,J＝1.3Hz,1H),7.68(s,1H),7.53-7.58(m,1H),7.37-7.41(m,1H),7.25-7.27(m,2H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.0Hz,1H),6.61(s,1H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.32(s,4H),2.29(s,3H)。

实施例1157:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈、*0.45二氯甲烷(32mg，0.057mmol)加至二甲基甲酰胺(568uL)中，加入D-丝氨酸(9.9mg，0.094mmol)、甲醇(142μl)和乙酸(14.2μl)。将氰基硼氢化钠(8.8mg，0.140mmol)加至所形成的不透明反应溶液中。将反应混合物加盖，然后在室温搅拌2天。反应混合物用约2mL四氢呋喃稀释，加入2滴水以帮助增溶盐。反应混合物过滤经过0.45μm注射器漏斗，产物经反相HPLC纯化，使用下述条件：

柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:50-100％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为17.1mg，其纯度经LCMS分析估计为94％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ:8.01(s,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.9Hz,1H),7.50(s,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.20-7.27(m,1H),7.15-7.19(m,1H),7.11(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.68-6.83(m,2H),5.27-5.37(m,2H),5.24(s,2H),4.28(s,4H),3.93-4.04(m,2H),3.60-3.75(m,3H),3.47(br.s.，4H),3.18(t，J＝5.3Hz,1H),2.23(s,3H)。LCMS条件A:1.79分钟，M-1:613，精确质量:614。

以制备R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸的相同方式，从3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述标题化合物，在还原性胺化反应中得到标题实施例。这些实施例的LCMS表征数据示于下表中。

实施例1158:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)琥珀酸

实施例1159:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(3-羟基苯基)丙酸

实施例1160:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(甲硫基)丙酸

实施例1161:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-(4-羟基苯基)乙酸

实施例1162:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3,3,3-三氟丙酸

实施例1163:(2R,3R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

实施例1164:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1H-咪唑-4-基)丙酸

实施例1165:1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)吡咯烷-2-羧酸

实施例1166:(2R,4R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1167:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(5-羟基-1H-吲哚-3-基)丙酸

实施例1168:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)丙酸

实施例1169:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丙酸

实施例1170:3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((2-羟基乙基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲腈

实施例1171:(S)-2-(苄基(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

实施例1172:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(二甲基氨基)丙酸

实施例1173:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-6-(二甲基氨基)己酸

实施例1174:(2S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-(甲基亚磺酰基)丁酸

实施例1175:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)琥珀酸

实施例1176:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸

实施例1177:1-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)环丙烷羧酸

实施例1178:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(噻唑-2-基)丙酸

实施例1179:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-甲氧基-3-甲基丁酸

实施例1180:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-氰基丙酸

实施例1181:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(2-羟基苯基)丙酸

实施例1182:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-(甲基磺酰基)丁酸

实施例1183:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)(甲基)氨基)-3-羟基丙酸

实施例1184:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-甲氧基丙酸

实施例1185:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)丙酸

实施例1186:(S)-3-(1-苄基-1H-咪唑-4-基)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丙酸

实施例1187:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(4-羟基苯基)丙酸

实施例1188:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)(甲基)氨基)丙酸

实施例1189:(2S,3S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

实施例1190:(2S,3R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2,3-二羧酸

实施例1191:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1H-咪唑-4-基)-2-甲基丙酸

实施例1192:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸

实施例1193:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸

实施例1194:(R)-3-(苄氧基)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丙酸

实施例1195:(2R,3S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

实施例1196:(2S,4S)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1197:(2S,4R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1198:(R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

实施例1199:(2R,4S)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1200:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-(甲基磺酰基)丁酸

实施例1201:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸

实施例1202:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-(甲硫基)丁酸

实施例1203:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)(甲基)氨基)琥珀酸

实施例1204:(2S,3R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-3-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1205:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-羟基丁酸

实施例1206:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(噻唑-4-基)丙酸

实施例1207:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)丙酸

实施例1208:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(噻唑-4-基)丙酸

实施例1209:1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氮杂环丁烷-2-羧酸

实施例1210:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-3-甲基丁酸

实施例1211:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙酸

实施例1212:3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((2-羟基-3-吗啉代丙基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲腈

实施例1213:4-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)吗啉-3-羧酸

实施例1214:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-2-(羟基甲基)-3-甲基丁酸

实施例1215:(2S,4R)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-氟吡咯烷-2-羧酸

实施例1216:2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4,4,4-三氟丁酸

实施例1217:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(3-氰基苯基)丙酸

实施例1218:2-苄基-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

实施例1219:(2S,3S)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-3-羟基吡咯烷-2-羧酸

实施例1220:4-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-1-甲基哌啶-4-羧酸

实施例1221:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(吡啶-2-基)丙酸

实施例1222:(S)-4-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)硫吗啉-3-羧酸

实施例1223:3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((2-甲基-1-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-2-基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲腈

实施例1224:1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-甲基哌嗪-2-羧酸

实施例1225:3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-(((2-羟基-3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基)氨基)甲基)苯氧基)甲基)苯甲腈

实施例1226:5-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4,5,6,7-四氢-3H-吡唑并[4,5-c]吡啶-4-羧酸

实施例1227:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(2H-四唑-2-基)丙酸

实施例1228:(R)-3-(1-苄基-1H-咪唑-4-基)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丙酸

实施例1229:3-((2-((((1H-四唑-5-基)甲基)氨基)甲基)-4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈

实施例1230:(S)-1-(5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ:7.96(s,1H),7.82(t，J＝8.1Hz，2H),7.57-7.66(m,1H),7.40-7.47(m,2H),7.21-7.28(m,1H),7.14-7.20(m,1H),7.07(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.71-6.80(m,2H),5.28(s,2H),5.22(s,2H),4.28(s,4H),3.63-3.84(m,2H),3.16(dd,J＝7.5，4.2Hz,1H),2.90(d,J＝10.3Hz,1H),2.27-2.38(m,1H),2.23(s,3H),1.65-1.86(m,2H),1.49(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

中间体：5-氯-2,4-二羟基苯甲醛

5-氯-2,4-二羟基苯甲醛使用下述文献操作进行制备：Vogel，H；Goeldner，M.et.al.Angew.Chem.Int.Ed.2007，46，3505-3508，Supplemental information，page 6。化合物进一步经硅胶色谱纯化(使用乙酸乙酯:己烷(1:5)作为洗脱剂)。¹H NMR(氯仿-d)δ11.26(s,1H),9.70(d,J＝0.5Hz,1H),7.53(s,1H),6.62(s,1H),6.21(br.s.,1H)。

中间体：5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.532mL，2.68mmol)于四氢呋喃(3mL)中的溶液滴加至5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(421mg，2.440mmol)、三苯基膦(711mg，2.71mmol)和(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(686mg，2.68mmol)于无水四氢呋喃(7mL)中的冷却(0℃)溶液中。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。使用布氏漏斗从反应混合物中过滤出产物，用四氢呋喃(约5mL)淋洗，然后在室温真空干燥，得到393mg几近无色的固体。¹H NMR(氯仿-d)δ:11.44(s,1H),9.71(s,1H),7.56(s,1H),7.45(dd,J＝6.5，2.4Hz,1H),7.23-7.27(m,2H),6.92(d,J＝8.2Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(dd,J＝8.2，2.0Hz,1H),6.64(s,1H),5.21(s,2H),4.32(s,4H),2.28(s,3H)。

中间体：3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(180mg，0.438mmol)部分悬浮于二甲基甲酰胺(4.3mL)中，加入碳酸铯(180mg，0.552mmol)，然后搅拌约5分钟，此时几乎呈现出该改进的溶解度。将3-氰基苄基溴(94mg，0.479mmol)加至反应混合物中。将反应混合物加盖，在室温搅拌过夜。从反应混合物中除去挥发性物质，然后将固体残余物分配在二氯甲烷和水之间。水相用二氯甲烷一次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂，得到标题化合物(241mg)，为无色固体。在质子NMR中观察到*0.45二氯甲烷的溶剂化物。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.33(s,1H),7.92(s,1H),7.73(s,1H),7.69(d,J＝1.3Hz,1H),7.68(s,1H),7.53-7.58(m,1H),7.37-7.41(m,1H),7.25-7.27(m,2H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.0Hz,1H),6.61(s,1H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.32(s,4H),2.29(s,3H)。

实施例1157:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈、*0.45二氯甲烷(32mg，0.057mmol)溶于二甲基甲酰胺(568uL)中，加入D-丝氨酸(9.9mg，0.094mmol)、甲醇(142μl)和乙酸(14.2μl)。将氰基硼氢化钠(8.8mg，0.140mmol)加至不透明的反应溶液中。将反应混合物加盖，在室温搅拌2天。反应混合物用约2mL四氢呋喃稀释，加入2滴水以帮助增溶盐。反应混合物经0.45μm注射器过滤器过滤，产物经反相HPLC纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:50-100％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为17.1mg，其纯度经LCMS分析估计为94％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ:8.01(s,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.9Hz,1H),7.50(s,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.20-7.27(m,1H),7.15-7.19(m,1H),7.11(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.68-6.83(m,2H),5.27-5.37(m,2H),5.24(s,2H),4.28(s,4H),3.93-4.04(m,2H),3.60-3.75(m,3H),3.47(br.s.，4H),3.18(t，J＝5.3Hz,1H),2.23(s,3H)。LCMS条件A:1.79分钟，M-1:613，精确质量:614。

以制备(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸的相同方式，从3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺在还原性胺化反应中制备下述实施例。

实施例1243:3-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)氧杂环丁烷-3-羧酸

LCMS条件M:2.85分钟，M-1＝625.5。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.97(br.s.,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.37-7.47(m,2H),7.19-7.26(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.07(br.s.,1H),6.88-6.95(m,1H),6.68-6.80(m,2H),5.29(s,2H),5.23(s,2H),4.68(d,J＝6.2Hz，2H),4.40-4.48(m,2H),4.28(s,4H),3.65-3.72(m,1H),2.23(s,3H)。

实施例1244:(R)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.79分钟，M-1＝627.5。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.55(s,1H),7.42(d,J＝7.0Hz,1H),7.19-7.26(m,1H),7.14-7.19(m,1H),7.10(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.69-6.79(m,2H),5.27-5.35(m,2H),5.25(s,2H),4.28(s,4H),3.97(s,2H),3.50-3.68(m,3H),2.23(s,3H),1.25(s,3H)。

实施例1245:(S)-2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件M:2.85分钟，M+1＝629.4，M-1＝627.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ:8.01(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.55(s,1H),7.42(d,J＝7.0Hz,1H),7.19-7.26(m,1H),7.14-7.19(m,1H),7.10(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.69-6.79(m,2H),5.27-5.35(m,2H),5.25(s,2H),4.28(s,4H),3.97(s,2H),3.50-3.68(m,3H),2.23(s,3H),1.25(s,3H)。

实施例1246:(S)-4-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件M:2.85分钟，M+1＝629.5，M-1＝627.5。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),7.81(d,J＝8.1Hz,1H),7.58-7.66(m,1H),7.39-7.48(m,2H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.13-7.19(m,1H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.70-6.80(m,2H),5.29(s,2H),5.23(s,2H),4.27(s,4H),3.91-4.00(m,1H),3.81(br.s.，2H),2.65(br.s.，2H),2.40(dd,J＝15.4，4.8Hz,1H),2.27(dd,J＝15.4，6.6Hz,1H),2.23(s,3H)。

实施例1247:N-(2-((5-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件M:2.96分钟，M+1＝612.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.91(t，J＝5.1Hz,1H),7.83(t，J＝7.3Hz，2H),7.63(t，J＝7.9Hz,1H),7.40-7.46(m,2H),7.21-7.27(m,1H),7.15-7.19(m,1H),7.08(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.77(d,J＝1.8Hz,1H),6.74(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.29(s,2H),5.23(s,2H),4.28(s,4H),3.75(s,2H),3.13-3.20(m,2H),2.61(t，J＝6.4Hz，2H),2.23(s,3H),1.78(s,3H)。

中间体：3-氯-2，4-二羟基苯甲醛

3-氯-2,4-二羟基苯甲醛使用文献操作制备：Ciufolini，M.A.；Tan，J.S.Org.Lett.2006，8(21)，4771-4774，supplemental material page 4。该化合物经硅胶色谱柱纯化(使用30％乙酸乙酯/己烷(v/v)作为洗脱液)。¹H NMR(氯仿-d)δ:12.01(s,1H),9.74(s,1H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),6.73(d,J＝8.7Hz,1H),6.33(br.s.,1H)。

中间体：3-氯-2-羟基-4-((2-甲基-[1，1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.758mL，3.82mmol)于四氢呋喃(8.5mL)中的溶液滴加至3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(600mg，3.48mmol)、三苯基膦(1016mg，3.87mmol)和2-甲基-3-联苯基甲醇(758mg，3.82mmol)于无水四氢呋喃(8.5mL)中的冷却(0℃)溶液中。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。粗物质经硅胶色谱纯化(使用60％己烷/二氯甲烷(v/v)作为洗脱液)，得到491mg标题化合物，为无色固体。¹H NMR(氯仿-d)δ:11.80(s,1H),9.77(s,1H),7.47-7.50(m,2H),7.42-7.46(m,2H),7.35-7.40(m,1H),7.31-7.34(m,2H),7.28-7.31(m,2H),6.78(d,J＝8.7Hz,1H),5.30(s,2H),2.28(s,3H)。

中间体：3-((2-氯-6-甲酰基-3-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈

将3-氯-2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(80mg，0.227mmol)溶于二甲基甲酰胺(2.2mL)中，然后加入碳酸铯(88mg，0.270mmol)和3-氰基苄基溴(50mg，0.255mmol)。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌过夜。使用旋转蒸发仪真空除去挥发性物质，然后将无色反应残余物分配在二氯甲烷和水之间。有机萃取物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。过滤出干燥剂，真空除去溶剂，得到105mg标题化合物，为无色固体。产物使用而没有进一步纯化。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.11(s,1H),7.82(d,J＝8.8Hz，2H),7.77(d,J＝8.2Hz,1H),7.67-7.71(m,1H),7.53-7.58(m,1H),7.50(dd,J＝7.0，2.0Hz,1H),7.42-7.47(m,2H),7.35-7.40(m,1H),7.28-7.35(m,4H),7.04(d,J＝8.7Hz,1H),5.30(s,2H),5.18(s,2H),2.29(s,3H)。

实施例1231:(R)-2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将二甲基甲酰胺(336μL)和甲醇(319μL)加至3-((2-氯-6-甲酰基-3-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈(30mg，0.064mmol)和D-丝氨酸(10.8mg，0.103mmol)中。将二甲基甲酰胺(336μL)加至反应悬浮液中，然后加入乙酸(16.8μL)。将反应混合物小心地加热，涡旋，然后冷却至室温。反应混合物变成半透明的混合物。将氰基硼氢化钠(10.6mg，0.169mmol)加至反应混合物中，将反应混合物加盖，并且在室温搅拌2天。使用旋转蒸发仪从反应混合物中真空除去挥发性物质。将二甲基甲酰胺(1mL)加至反应混合物中，并且用一些乙腈和四氢呋喃试图曾溶。然后将反应混合物加热过滤经过0.45μm注射器过滤器。在冷却时，有沉淀析出。真空出去溶剂，将反应残余物再次溶解在四氢呋喃(1mL)和二甲基甲酰胺(1mL)中。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:50-90％B，历时15分钟，then a 8-minute hold at 100％B；流速:20mL/分钟.合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为13.7mg，其纯度经LCMS分析估计为98％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ:7.99(s,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),7.64(t，J＝7.7Hz,1H),7.51(d,J＝7.3Hz,1H),7.41-7.49(m,3H),7.35-7.41(m,1H),7.27-7.34(m,3H),7.21(d,J＝7.3Hz，2H),5.27(s,2H),5.04-5.12(m,2H),3.94-4.01(m,1H),3.85-3.93(m,1H),3.58-3.69(m,3H),3.18(t，J＝4.6Hz,1H),2.22(s,3H),1.23(br.s.,1H)。LCMS条件A:1.89分钟，M-1:555，M+H:557；精确质量:556。

实施例1232:(S)-4-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将二甲基甲酰胺(336μL)和甲醇(319μL)加至3-((2-氯-6-甲酰基-3-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈(30mg，0.064mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(8.1mg，0.068mmol)中。将二甲基甲酰胺(336μL)加至反应悬浮液中，然后加入乙酸(16.8μL)。将反应混合物小心地加热，涡旋，然后冷却至室温。反应混合物变成半透明混合物。将氰基硼氢化钠(10.3mg，0.164mmol)加至反应混合物中，然后将反应混合物加盖，在室温搅拌5天。将四氢呋喃(0.9mL)加至反应混合物中，反应混合物经0.45μm注射器过滤器过滤。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-100％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为1.7mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ:7.95(s,1H),7.86(dd,J＝16.5，8.1Hz，2H),7.65(t，J＝7.9Hz,1H),7.52(d,J＝8.1Hz,1H),7.43-7.48(m,2H),7.35-7.41(m,2H),7.27-7.34(m,3H),7.14-7.25(m,2H),5.25(s,2H),5.07(s,2H),3.86-3.92(m,1H),3.33-3.76(m,3H),2.51(br.s.,1H),2.33-2.40(m,1H),2.17-2.25(m,4H),1.90(s,1H),1.03(d,J＝5.9Hz,1H)。LCMS条件A:1.96分钟，M-1:569.3，M+H:571.3；精确质量:570。

以与(S)-4-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸相同的方式，从3-((2-氯-6-甲酰基-3-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1233:(S)-1-(3-氯-2-(3-氰基苄氧基)-4-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:2.12分钟，M+1＝581.3，M-1＝579.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.88(d,J＝7.7Hz,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,1H),7.60-7.68(m,1H),7.52(d,J＝7.3Hz,1H),7.43-7.49(m,2H),7.27-7.41(m,5H),7.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.18(d,J＝8.8Hz,1H),5.25(s,2H),4.99-5.15(m,2H),3.80(d,J＝13.2Hz,1H),3.56(d,J＝13.2Hz,1H),3.11(t，J＝5.3Hz,1H),2.86(d,J＝7.3Hz,1H),2.23(s,4H),1.64-1.74(m,2H),1.33-1.48(m,J＝11.7Hz，4H)。

实施例1234:N-(2-(3-氯-2-(3-氰基苄氧基)-4-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:2.27分钟，M+1＝554.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ:7.95(s,1H),7.86(t，J＝8.9Hz，2H),7.77(t，J＝5.3Hz,1H),7.60-7.69(m,1H),7.52(d,J＝7.3Hz,1H),7.42-7.49(m,2H),7.27-7.41(m,5H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝8.8Hz,1H),5.25(s,2H),5.07(s,2H),3.66(s,2H),3.10(q，J＝6.4Hz，2H),2.51-2.54(m,2H),2.23(s,3H),1.76(s,3H)。

中间体：3-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.253mL，1.275mmol)于四氢呋喃(2.5mL)中的溶液滴加至3-氯-2,4-二羟基苯甲醛(200mg，1.159mmol)、三苯基膦(342mg，1.304mmol)和(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(340mg，1.327mmol)于无水四氢呋喃(2.9mL)中的冷却(0℃)溶液。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。粗反应物质经硅胶柱(55g)色谱纯化，使用30％己烷/二氯甲烷作为洗脱液，得到174mg标题化合物，为无色固体。¹H NMR(氯仿-d)δ11.80(s,1H),9.77(s,1H),7.42-7.51(m,2H),7.23-7.27(m,2H),6.92(d,J＝8.2Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.75-6.81(m,2H),5.28(s,2H),4.32(s,4H),2.29(s,3H)。

中间体：3-((2-氯-3-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

将3-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(151mg，0.368mmol)溶于二甲基甲酰胺(3.5mL)中。有必要小心地将反应混合物加热，以将底物溶解在二甲基甲酰胺中。加入试剂碳酸铯(150mg，0.460mmol)和3-氰基苄基溴(79mg，0.404mmol)，然后将反应混合物加盖，并且在室温搅拌过夜。使用旋转蒸发仪真空蒸发挥发性物质，将无色反应残余物分配在二氯甲烷和水之间。水相用二氯甲烷萃取。合并有机萃取物，用盐水洗涤，然后将硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂，得到105mg标题化合物，为无色固体。使用产物而没有进一步纯化。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.11(d,J＝0.5Hz,1H),7.79-7.85(m,2H),7.77(d,J＝7.7Hz,1H),7.69(dt，J＝7.8，1.3Hz,1H),7.52-7.58(m,1H),7.46(dd,J＝6.5，2.5Hz,1H),7.27-7.30(m,J＝3.9Hz，2H),7.03(d,J＝8.5Hz,1H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.3，2.1Hz,1H),5.28(s,2H),5.17(s,2H),4.32(s,4H),2.31(s,3H)。

实施例1235:(R)-2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将二甲基甲酰胺(284μL)和甲醇(270μl)加至3-((2-氯-3-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈(30mg，0.057mmol)和D-丝氨酸(10.7mg，0.102mmol)中。将二甲基甲酰胺(284μL)加至反应悬浮液中，然后加入乙酸(14.2μL)。将氰基硼氢化钠(7.2mg，0.115mmol)加至反应混合物中，然后将反应混合物涡旋且加盖，在室温搅拌2天。将水(2滴)和四氢呋喃(0.9mL)加至混合物中。对反应混合物进行涡旋混合，然后过滤经过0.45μm注射器过滤器。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为10.9mg，其纯度经LCMS分析估计为96％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,1H),7.85(d,J＝7.3Hz,1H),7.64(t，J＝7.9Hz,1H),7.47(d,J＝7.7Hz,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(t，J＝7.5Hz,1H),7.14-7.22(m,2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.72-6.80(m,2H),5.24(s,2H),5.02-5.15(m,2H),4.28(s,4H),3.92-3.99(m,1H),3.87(t，J＝13.6Hz,1H),3.55-3.69(m,3H),3.39(br.s.，2H),2.23(s,3H)。LCMS条件A:1.77分钟，M-1:613.5，M+H:615.5；精确质量:614。

以与(R)-2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸相同的方式，从3-((2-氯-3-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-6-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1236:(S)-1-(3-氯-2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:2.07分钟，M+1＝639.4，M-1＝637.4。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.88(d,J＝7.7Hz,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,1H),7.64(t，J＝7.9Hz,1H),7.47(d,J＝7.7Hz,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(t，J＝7.5Hz,1H),7.13-7.21(m,2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.71-6.81(m,2H),5.23(s,2H),4.98-5.15(m,2H),4.28(s,4H),3.76-3.83(m,1H),3.33-3.63(m,7H),3.12(t，J＝5.0Hz,1H),2.80-2.88(m,J＝8.8Hz,1H),2.23(s,4H),1.70(br.s.，2H),1.42(br.s.，4H)。

实施例1237:N-(2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:2.15分钟，M+1＝612.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.97(s,1H),7.88(dd,J＝13.6，7.7Hz，3H),7.61-7.71(m,1H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(t，J＝7.7Hz,1H),7.11-7.22(m,2H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.71-6.82(m,2H),5.24(s,2H),5.08(s,2H),4.29(s,4H),3.14(d,J＝5.9Hz，2H),2.57(br.s.，2H),2.24(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1238:(S)-2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:2.03分钟，M+1＝629.4，M-1＝627.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.85(d,J＝8.1Hz,1H),7.64(t，J＝7.7Hz,1H),7.48(d,J＝8.1Hz，2H),7.23-7.29(m,1H),7.19(dd,J＝17.2，8.1Hz，2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.71-6.81(m,2H),5.26(s,2H),5.04-5.16(m,2H),4.28(s,4H),3.83-3.95(m,2H),3.48-3.61(m,3H),2.23(s,3H),1.21(s,3H)。

实施例1239:(R)-2-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:2.03分钟，M+1＝629.4，M-1＝627.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.85(d,J＝8.1Hz,1H),7.64(t，J＝7.7Hz,1H),7.48(d,J＝8.1Hz，2H),7.23-7.29(m,1H),7.19(dd,J＝17.2，8.1Hz，2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.71-6.81(m,2H),5.26(s,2H),5.04-5.16(m,2H),4.28(s,4H),3.83-3.95(m,2H),3.48-3.61(m,3H),2.23(s,3H),1.21(s,3H)。

实施例1240:(S)-4-((3-氯-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.83分钟，M+1＝629.3，M-1＝627.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.86(dd,J＝15.4，8.4Hz，2H),7.65(t，J＝7.7Hz,1H),7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(t，J＝7.5Hz,1H),7.12-7.21(m,2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.72-6.80(m,2H),5.23(s,2H),4.98-5.09(m,2H),4.29-4.51(m,1H),4.28(s,4H),3.86-3.94(m,1H),3.23-3.74(m,2H),2.52(br.s.,1H),2.33-2.42(m,1H),2.17-2.25(m,4H)。

中间体：2-((2-氯-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.160mL，0.810mmol)于四氢呋喃(2mL)中的溶液滴加至5-氯-2,4-二羟基苯甲醛(127mg，0.736mmol)、三苯基膦(212mg，0.810mmol)和2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-(羟基甲基)苯甲腈(211.6mg，0.792mmol)于无水四氢呋喃(5mL)中的冷却(0℃)溶液。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。从反应混合物中除去溶剂，将混合物溶于二氯甲烷中，加入己烷。将粗物质装载至24g Isco沉降分离硅胶柱上，经Biotage Isolera One系统进行色谱纯化，使用下述条件:

CV＝柱体积＝33.6mL；％A＝己烷；％B＝二氯甲烷；收集波长＝254nm，流速＝35mL/分钟；梯度:70％B至100％B，具有下述梯度:

1A/B 70％2.0CV

2A/B 70％-90％4.0CV

3A/B 90％3.0CV

4A/B 90％-100％2.0CV

5A/B 100％5.4CV

使用TLC进一步分析级份，合并纯产物级份，使用旋转蒸发仪真空除去溶剂，得到83.8mg标题化合物，为白色固体。¹H NMR(氯仿-d)δ11.41(s,1H),9.73(d,J＝0.5Hz,1H),7.70-7.74(m,1H),7.65-7.70(m,1H),7.59(s,1H),7.48(dd,J＝7.6，1.3Hz,1H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),7.05-7.08(m,1H),6.98-7.01(m,1H),6.65(s,1H),5.43(s,2H),4.30-4.35(m,4H)。

中间体：2-((2-氯-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈

将2-((2-氯-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈(78.7mg，0.187mmol)溶于二甲基甲酰胺(2mL)中。加入试剂碳酸铯(74.4mg，0.228mmol)和3-氰基苄基溴(40.7mg，0.208mmol)，并且将反应混合物加盖，并且在室温搅拌过夜。使用旋转蒸发仪真空蒸发挥发性物质，将浅黄色反应残余物分配二氯甲烷和水之间。水相用二氯甲烷萃取。合并有机萃取物用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂，得到106mg标题化合物，为浅黄色固体。使用产物而没有进一步纯化。¹H NMR(氯仿-d)δ10.35(s,1H),7.94(s,1H),7.64-7.79(m,5H),7.52-7.58(m,1H),7.49(d,J＝8.5Hz,1H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),7.03-7.07(m,1H),6.98-7.03(m,1H),6.71(s,1H),5.46(s,2H),5.24(s,2H),4.34(s,4H)。

实施例1241:(R)-2-((5-氯-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

将2-((2-氯-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈，0.2乙腈(20mg，0.037mmol)溶于二甲基甲酰胺(436μl)中。有必要小心地加热以使其溶解。将甲基D-丝氨酸(13.8mg，0.116mmol)加至反应混合物中，然后加入乙酸(21.8μl)。将氰基硼氢化钠(6.9mg，0.110mmol)加至黄色不均匀反应混合物中，然后将混合物涡旋并且加盖，接着在室温搅拌2.5天。反应混合物用四氢呋喃稀释，使用加热枪加热，经0.45um注射器过滤器过滤，经HPLC纯化。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为11.7mg，其纯度经LCMS分析估计为96％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(br.s.,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.3Hz,1H),7.71-7.78(m,1H),7.68(d,J＝7.3Hz,1H),7.52-7.63(m,3H),7.10(d,J＝12.8Hz，2H),6.95-7.07(m,2H),5.42(br.s.，2H),5.26-5.35(m,2H),4.31(br.s.，4H),3.92-4.03(m,2H),3.49-3.70(m,1H),1.26(s,3H)。

条件M:LCMS:2.70分钟，M-1:638.5；精确质量:639。

以制备(R)-2-((5-氯-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸的相同方法，通过还原性胺化从2-((2-氯-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1242:(R)-2-((5-氯-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

以制备(R)-2-((5-氯-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸的相同方法，从2-((2-氯-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸通过还原性胺化制备下述实施例。LCMS条件M:2.6分钟，M-1＝624.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.89(d,J＝7.9Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.74-7.79(m,1H),7.68(d,J＝6.8Hz,1H),7.56-7.63(m,2H),7.52(s,1H),7.12(s,1H),7.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.04-7.08(m,1H),7.00-7.04(m,1H),5.41(s,2H),5.26-5.35(m,2H),5.06(br.s.,1H),4.28-4.35(m,4H),3.97(s,2H),3.67-3.74(m,1H),3.59-3.66(m,1H),3.20(br.s.,1H)。

中间体：5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

将碳酸铯(159mg，0.487mmol)、5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(100mg，0.243mmol)在二甲基甲酰胺(1mL)中合并。添加5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(74.3mg，0.487mmol)，并且在75℃搅拌。反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤。有机相经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用1:1至1:2己烷:乙酸乙酯)，得到标题化合物92mg，72％)。LCMS:1.5分钟，M+1＝527.3，EM＝526.1(起始％B＝0，最终％B＝98，梯度时间＝1.5min，流速＝0.8mL/min，波长＝220，溶剂对＝ACN:水:0.05％TFA，溶剂A＝100％水:0.05％TFA，溶剂B＝100％ACN:0.05％TFA，柱＝Waters Aquity UPLC BEH C18 2.1X 50mm 1.7U，炉温＝40℃)。

实施例1244:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(19mg，0.036mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液加至(S)-哌啶-2-羧酸(4.66mg，0.036mmol)，并且在室温搅拌2小时。加入氰基硼氢化钠(6.80mg，0.108mmol)和乙酸(2.064μl，0.036mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LCMS纯化，使用如下条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-85％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/分钟合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为5.1mg(22％)纯度经LCMS分析估计为99％。使用以下的两种分析性LCMS注射确定最终纯度：LCMS条件A:1.9分钟，M+1＝640.4，M-1＝638.3，EM＝639.2.条件M:LCMS:2.8分钟，M+1＝640.4，M-1＝638.4，EM＝639.2。¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.01(d,J＝5.1Hz，2H),8.46(s,1H),7.51-7.39(m,2H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.11(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.38-5.30(m,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.80(d,J＝9.9Hz,1H),3.72-3.59(m,1H),3.14(br.s.,1H),2.31(br.s.,1H),2.25(s,3H),1.80(br.s.,1H),1.72(d,J＝8.4Hz,1H),1.49(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸的相同方法，从5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1248:(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),9.01(s,1H),8.51(s,1H),7.55(s,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.27-7.21(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.12(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.40-5.32(m,2H),5.28(s,2H),4.29(s,4H),3.96(br.s.，2H),3.66-3.58(m,1H),3.57-3.49(m,1H),2.24(s,3H),1.24(s,3H)。

实施例1249:(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.02(d,J＝9.9Hz，2H),8.52(br.s.,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝7.0Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.14(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.82-6.72(m,2H),5.41-5.31(m,2H),5.27(s,2H),4.29(s,4H),4.08-3.93(m,2H),3.71(d,J＝6.2Hz,1H),3.63(d,J＝6.2Hz,1H),3.17(d,J＝5.5Hz,1H),2.24(s,3H)。

实施例1250:(S)-4-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.05-8.96(m,2H),8.44(br.s.,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.42-7.37(m,1H),7.27-7.22(m,1H),7.19-7.15(m,1H),7.13-7.05(m,1H),6.96-6.87(m,1H),6.81-6.69(m,2H),5.39-5.29(m,2H),5.27-5.19(m,2H),4.33-4.21(m,4H),3.78-3.67(m,1H),3.66-3.43(m,2H),2.59-2.53(m,2H),2.42-2.33(m,1H),2.28-2.18(m,5H)。

实施例1251:N-(2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ9.00(d,J＝18.0Hz，2H),8.43(br.s.,1H),7.79(d,J＝5.1Hz,1H),7.45(d,J＝7.3Hz,1H),7.38(s,1H),7.28-7.21(m,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.72(m,2H),5.32(s,2H),5.24(s,2H),4.29(s,4H),3.12(q，J＝6.0Hz，2H),2.55-2.51(m,2H),2.25(s,3H),1.93-1.85(m,5H)。

实施例1252:(S)-2-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.01(s,1H),9.04(s,1H),8.52(s,1H),7.54(s,1H),7.44(s,1H),7.24(s,1H),7.19(s,1H),7.13(s,1H),6.93(d,1H),6.74-6.80(m,2H),5.36(s,2H),5.27(s,2H),4.29(s,4H),3.60(d,1H),3.52(d,1H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.24(s,3H),1.23(s,3H)。

中间体：2-((5-溴吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苯甲醛

将碳酸铯(159mg，0.487mmol)、5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(100mg，0.243mmol)和5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(74.3mg，0.487mmol)在75℃在二甲基甲酰胺(1mL)中搅拌3小时。

反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(使用1:1至1:2己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到期望的产物，为黄色固体。LCMS条件T:1.46分钟，M+1＝527.3。

以与(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同的方式，从2-((5-溴吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苯甲醛和合适的胺通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1254:(R)-2-(2-((5-溴吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.85分钟，M+1＝685.1，M-1＝683.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.74(s,1H),8.70(s,1H),8.28(s,1H),7.52(s,1H),7.45(d,1H),7.25(s,1H),7.17-7.20(m,1H),7.13(s,1H),6.93(d,1H),6.74-6.80(m,2H),5.28(d,4H),4.29(s,4H),3.57(d,1H),3.51(d,1H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.25(s,3H),1.22(s,3H)。

实施例1255:N-(2-(2-((5-溴吡啶-3-基)甲氧基)-5-氯-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:1.93分钟，M+1＝668.3，M-1＝664.5。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.69-8.72(m,2H),8.20(s,1H),7.80(br.s.,1H),7.46(d,1H),7.38(s,1H),7.25(m,1H),7.18(d,1H),7.10(s,1H),6.93(d,1H),6.75-6.80(m,2H),5.28(s,2H),5.24(s,2H),4.29(s,4H),3.12(m,2H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.53-2.55(m,2H),2.25(s,3H),1.78(s,3H)。

中间体：5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(1.06g，2.58mmol)部分悬浮于DMF(25mL)中，加入碳酸铯(1.186g，3.64mmol)，将反应混合物搅拌约8分钟，此时似乎呈现出改进的溶解度。将5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(433mg，2.84mmol)加至反应混合物中。将反应混合物置于氮气气氛中，在75℃加热三次。使用旋转蒸发仪真空除去溶剂，将固体残余物分配在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液中。有机萃取物用水洗涤，经硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂，得到粗产物，为褐色/米色固体。粗产物用乙酸乙酯研磨，使用布氏漏斗对产物进行过滤，真空干燥后得到851mg产物，为米色固体。使用产物而没有进一步纯化。¹H NMR(氯仿-d)δ10.29(s,1H),8.92(d,J＝1.9Hz,1H),8.91(d,J＝2.0Hz,1H),8.09(t，J＝2.0Hz,1H),7.93(s,1H),7.38-7.42(m,1H),7.28(s,2H),7.26(br.s.,1H),6.93(d,J＝8.2Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.0Hz,1H),6.64(s,1H),5.25(s,2H),5.22(s,2H),4.32(s,4H),2.30(s,3H)。

实施例1253:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸，TFA salt。

伴随着加热，将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(300mg，0.569mmol)溶于DMF(6.3mL)中，然后短暂冷却，接着加入L-2-哌啶酸(226mg，1.748mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(374mg，1.765mmol)。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌3天。向反应混合物中，加入5滴水和约3-5mL乙腈。对反应混合物进行涡旋搅拌，然后使用布氏漏斗经Whatman\#1纸过滤。用少量乙腈淋洗析出物。滤液粗产物混合物在5*2注射液中经反相HPLC纯化，在下述条件下使用Shimadzu制备性HPLC系统，使用Discover软件:

柱:Waters Sunfire C18，19mm x 150mm

流速:25mL/min

％A:10％乙腈-90％水-0.1％TFA

％B:90％乙腈-10％水-0.1％TFA

检测:220nm的UV

梯度0％B至100％B，历时20分钟，在100％B保持10分钟。

产品的保留时间＝11.9分钟。

合并产物级份，使用旋转蒸发仪真空除去溶剂。使用DCM转移至小瓶中，然后除去溶剂，干燥，得到204mg产物，为无色无定性固体。

LCMS-Shimadzu HPLC系统:使用Discover软件,

梯度:

起始％B＝0

最终％B＝100

梯度时间＝4min，然后在100％B保持1分钟。

流速＝.8mL/min

波长＝220nm

溶剂对＝ACN:水:乙酸铵

溶剂A＝5％ACN:95％水:10mM乙酸铵

溶剂B＝95％ACN:5％水:10mM乙酸铵

柱2＝Phenomenex LUNA C18，50x2，3u

保留＝2.8min，M-1:638.4，M+1:640.2

¹H NMR(氯仿-d)δ8.91(br.s.,1H),8.84(s,1H),8.02-8.39(m,1H),7.41-7.54(m,1H),7.37(dd,J＝6.4，2.4Hz,1H),7.20-7.26(m,2H),6.92(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.77(dd,J＝8.3，2.1Hz,1H),6.65(s,1H),5.17-5.25(m,2H),5.15(s,2H),4.43(br.s.，2H),4.31(s,4H),2.72-2.86(m,1H),2.28(s,3H),2.15-2.25(m,1H),2.02(s,1H),1.84(br.s.，3H),1.36-1.71(m,2H).NMR披露了*0.3DCM溶剂化物。

实施例1256:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(甲基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

在含有(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸和TFA(8.0mg，10.61μmol)的小瓶中，加入二氯甲烷(150μl)、DMAP(8.4mg，0.069mmol)、甲磺酰胺(3.9mg，0.041mmol)，最后加入EDC(7.1mg，0.037mmol)。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌22小时。使用旋转蒸发仪真空除去反应溶剂，将反应残余物溶于0.5mL DMF中，进一步用0.4mL乙腈稀释。

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为6.9mg，其纯度经LCMS分析估计为97％。使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ:9.01(s,2H),8.51(s,1H),7.58(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.28(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.13(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.36(s,2H),5.26(s,2H),4.28(s,4H),4.01(d,J＝13.9Hz,1H),3.80(br.s.,1H),2.99(d,J＝12.1Hz,1H),2.84(s,3H),2.42(br.s.,1H),2.24(s,3H),1.83-1.88(m,1H),1.63(t，J＝10.3Hz，2H),1.53(br.s.，2H),1.33(br.s.,1H)LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)1.85min.，M-1:715.2，M+H:717.3；精确质量:716。

如对(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的操作所概述的，合成一些列芳基磺酰胺和酰基磺酰胺。

实施例1257:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

将(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸和TFA*0.3二氯甲烷(15mg，0.019mmol)溶于二氯甲烷(200μl)和DMAP(15.2mg，0.124mmol)中。将二甲基磺酰胺(9.8mg，0.079mmol)加至反应混合物中，然后加入EDC(13.3mg，0.069mmol)。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌17.5小时。使用旋转蒸发仪真空除去反应溶剂，将反应残余物溶于0.5mL DMF中，然后用0.5mL乙腈稀释。

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-85％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为9.9mg，其纯度经LCMS分析估计为94％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.01(d,J＝4.8Hz，2H),8.47(s,1H),7.53(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.28(m,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.14(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.78(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.32-5.40(m,2H),5.26(s,2H),4.28(s,5H),3.86(d,J＝13.9Hz,1H),3.72-3.79(m,1H),3.34(br.s.,1H),3.27(br.s.,1H),2.98(d,J＝11.7Hz,1H),2.68(s,6H),2.41(br.s.,1H),1.88(br.s.,1H),1.57-1.72(m,2H),1.54(br.s.，2H),1.36(br.s.,1H)LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)2.02min.，M-1:744.3，M+H:746.3；精确质量:745。

实施例1258:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-((三氟甲基)磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

类似于上述(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的方式制备标题化合物。

纯化和分析:粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:50-90％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为10.3mg，其纯度经LCMS分析估计为99％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.32(br.s.,1H),9.03(d,J＝3.3Hz，2H),8.43-8.55(m,1H),7.55(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.30(m,1H),7.17-7.22(m,2H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.4，1.8Hz,1H),5.39(s,2H),5.30(s,2H),4.23-4.31(m,5H),4.13(d,J＝12.5Hz,1H),3.72-3.81(m,1H),3.18(d,J＝11.7Hz,1H),2.82(br.s.,1H),2.25(s,3H),2.09(d,J＝16.1Hz,1H),1.56-1.72(m,4H),1.42(br.s.,1H).LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)2.12min.，M-1:769.3，M+H:771.3；精确质量:770。

实施例1259:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(环丙基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

类似于上述(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的方式制备标题化合物。

纯化和分析:粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:waters xbridge c-18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为10.3mg，其纯度经LCMS分析估计为100％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,2H),8.50(s,1H),7.63(s,1H),7.47(d,J＝7.7Hz,1H),7.23-7.30(m,1H),7.14-7.21(m,2H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.1，1.8Hz,1H),5.38(s,2H),5.29(s,2H),4.28(s,4H),4.10-4.17(m,1H),4.02-4.09(m,1H),3.08(d,J＝11.7Hz,1H),2.82-2.88(m,1H),2.60-2.70(m,1H),2.25(s,3H),1.99(d,J＝12.8Hz,1H),1.53-1.72(m,4H),1.31-1.46(m,J＝11.0Hz,1H),0.83-0.92(m,2H),0.78(d,J＝7.7Hz，2H).LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)1.77min.，M-1:741.5，M+H:743.3；精确质量:742。

实施例1260:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(异丙基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

类似于上述(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的方式制备标题化合物。

纯化和分析:粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为10.7mg，其纯度经LCMS分析估计为100％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.02(s,2H),8.49(s,1H),7.61(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.23-7.29(m,1H),7.14-7.21(m,2H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.38(s,2H),5.28(s,2H),4.28(s,4H),4.04-4.13(m,1H),3.97-4.04(m,1H),3.51-3.60(m,J＝13.6，6.8，6.8Hz,1H),3.06(d,J＝11.7Hz,1H),2.57-2.67(m,1H),2.24(s,3H),1.99(d,J＝12.5Hz,1H),1.51-1.74(m,4H),1.33-1.45(m,J＝15.4Hz,1H),1.17(dd,J＝6.8，1.7Hz，6H).LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)1.81min.，M-1:743.4，M+H:745.3；精确质量:744。

实施例1261:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-((1-甲基-1H-咪唑-4-基)磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

类似于上述(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的方式制备标题化合物。

纯化和分析:粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为12.7mg，其纯度经LCMS分析估计为97％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV).LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)1.86min.，M-1:781.3；M+H:783.3；精确质量:782。

实施例1262:(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)哌啶-2-羧酰胺

类似于上述(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-N-(N,N-二甲基氨基磺酰基)哌啶-2-羧酰胺的方式制备标题化合物。

纯化和分析:粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；梯度:25-70％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。该物质进一步经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:50-90％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为5.6mg，其纯度经LCMS分析估计为95％.使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99(d,J＝5.1Hz，2H),8.46(s,1H),7.52(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.28(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.78(s,1H),6.76(dd,J＝8.4，1.8Hz,1H),5.33(s,2H),5.23(s,2H),4.28(s,5H),3.79(d,J＝13.9Hz，2H),3.48(d,J＝13.2Hz，2H),2.98(br.s.，3H),2.85(br.s.,1H),2.26(br.s.，2H),2.21-2.25(m,3H),2.12(s,3H),1.75(s,2H),1.55-1.68(m,2H),1.45(br.s.，2H),1.20-1.30(m,1H).LC/MS(乙腈:水:乙酸铵)1.98min.，M-1:799.3；M+H:801.5；精确质量:800。

实施例1263:(R)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸，TFA

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(150mg，0.285mmol)溶于DMF(2.7mL)中并且加热，加入乙酸(0.135mL)，短暂冷却，然后加入2-甲基-D-丝氨酸(86mg，0.722mmol)。将氰基硼氢化钠(39mg，0.621mmol)加至反应混合物中。将反应混合物加盖，并且在室温搅拌24小时。通过LCMS对产物进行分析，表明大量的副产物(标题化合物)。然后将反应混合物置于冷藏箱中过夜。反应混合物用四氢呋喃稀释，经布氏漏斗过滤，用四氢呋喃淋洗过滤垫。使用四氢呋喃，将滤液稀释至最终6mL体积，混合物经反相HPLC在3次2mL注射中纯化，在运行Discovery软件的Shimadzu Prep HPLC上进行:

柱:Waters Sunfire C18，19mm x 150mm

流速:25mL/min

％A:10％乙腈-90％水-0.1％TFA

％B:90％乙腈-10％水-0.1％TFA

检测:220nm的UV

梯度0％B至100％B，历时20分钟，在100％B保持10分钟。

标题化合物的保留时间＝10.9-11.0分钟。

含有期望产物的级份经离心蒸发干燥，然后溶于二氯甲烷中，合并至样品瓶中，然后浓缩，用氮气吹熄，接着使用旋转蒸发仪除去最终的残余溶剂。在室温真空干燥产物，得到36.0mg标题化合物，为无色膜。¹H NMR(氯仿-d)δ7.39(t，J＝4.3Hz,1H),7.17(d,J＝4.4Hz，3H),6.88(d,J＝8.4Hz,1H),6.78(d,J＝1.9Hz,1H),6.72(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.65(br.s.,1H),4.97(br.s.，2H),4.28(s,4H),3.88(d,J＝19.2Hz，3H),3.65(br.s.，3H),2.15-2.22(m,3H),1.35(br.s.，3H)。

LCMS-Shimadzu HPLC系统:运行Discover软件,

梯度:

起始％B＝0

最终％B＝100

梯度时间＝4min，然后在100％B保持1分钟。

流速＝.8mL/min

波长＝220nm

溶剂对＝ACN:水:乙酸铵

溶剂A＝5％ACN:95％水:10mM乙酸铵

溶剂B＝95％ACN:5％水:10mM乙酸铵

柱2＝Phenomenex LUNA C18，50x2，3u

保留＝2.55min，M-1:512.1

中间体：4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛

将三苯基膦(207mg，0.789mmol)加至(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(168mg，0.657mmol)和2,4-二羟基-5-甲基苯甲醛(100mg，0.657mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌15分钟。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.153mL，0.789mmol)。然后使反应混合物温热至室温，并且搅拌过夜。然后浓缩，残余物经硅胶柱纯化(使用己烷至20％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)，得到白色固体，为最终产物4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(85mg，0.218mmol，33.1％产率)。LCMS条件T:4.46min，391.0(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ11.46(s,1H),9.71(s,1H),7.42(dd,J＝6.2，2.6Hz,1H),7.23-7.31(m,3H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.75-6.82(m,1H),6.55(s,1H),5.14(s,2H),4.32(s,4H),2.26(s,3H),2.22(s,3H)。

中间体：3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(85mg，0.218mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中，加入3-(溴甲基)苯甲腈(46.9mg，0.239mmol)和碳酸铯(106mg，0.327mmol)。将反应混合物在室温搅拌3天。加入水，收集白色固体，为最终产物3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈(100mg，0.198mmol，91％产率)。LCMS条件T:4.535min，506(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.36(s,1H),7.74(s,1H),7.63-7.73(m,3H),7.50-7.58(m,1H),7.34-7.41(m,1H),7.23-7.28(m,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.83(d,J＝2.2Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.52(s,1H),5.20(s,2H),5.13(s,2H),4.32(s,4H),2.27(s,3H),2.22(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸的相同方式，从3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1264:N-(2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.74-7.85(m,3H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝7.3Hz,1H),7.08(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.85(s,1H),6.68-6.81(m,2H),5.22(s,2H),5.10(s,2H),4.28(s,4H),3.44-3.79(br，s，2H),3.11(q，J＝6.4Hz，2H),2.52(t，J＝6.2Hz，2H),2.22(s,3H),2.10(s,3H),1.76(s,3H)。

实施例1265:(S)-4-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基丁酸

实施例1266:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.03(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.60(t，J＝7.9Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.20-7.27(m,1H),7.12-7.20(m,2H),6.88-6.95(m,2H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.1Hz,1H),5.23-5.32(m,2H),5.14(s,2H),4.28(s,4H),3.98-4.12(m,2H),3.76(dd,J＝11.6，4.6Hz,1H),3.64(dd,J＝11.2，7.2Hz,1H),3.17(s,1H),2.21(s,3H),2.10(s,3H)。

实施例1267:(S)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.02(s,1H),7.93(d,J＝8.1Hz,1H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(t，J＝7.9Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.19-7.26(m,2H),7.16(d,J＝7.3Hz,1H),6.88-6.96(m,2H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.27(s,2H),5.15(s,2H),4.28(s,4H),3.98(s,2H),3.50-3.70(m,2H),2.22(s,3H),2.11(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1268:(S)-1-(2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.97(s,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.56-7.65(m,1H),7.42(d,J＝7.3Hz,1H),7.24(t，J＝7.7Hz,1H),7.12-7.20(m,2H),6.85-6.94(m,2H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.18-5.33(m,2H),5.13(s,2H),4.28(s,4H),3.94(d,J＝13.2Hz,1H),3.78(d,J＝12.8Hz,1H),3.08-3.21(m,1H),2.93-3.00(m,1H),2.38-2.47(m,1H),2.22(s,3H),2.10(s,3H),1.80-1.88(m,1H),1.64-1.76(m,1H),1.45-1.55(br.m，3H),1.31-1.41(m,1H)。

实施例1269:(R)-2-((2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MMz，DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.3Hz,1H),7.59(t，J＝7.7Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.19-7.26(m,2H),7.16(d,J＝7.3Hz,1H),6.89-6.94(m,2H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.1Hz,1H),5.27(s,2H),5.15(s,2H),4.28(s,4H),3.11-3.70(m,4H),2.22(s,3H),2.10(s,3H),1.26(s,3H)

中间体：5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(85mg，0.218mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中，加入5-(溴甲基)-2-氟苯甲腈(51.3mg，0.239mmol)和碳酸铯(106mg，0.327mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。加入水，收集粗产物，为淡黄色固体。用乙酸乙酯研磨，得到白色固体，为最终产物5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(86mg，0.164mmol，75％产率)。LCMS条件T:4.511min，524(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.33(s,1H),7.65-7.74(m,3H),7.35-7.41(m,1H),7.24-7.31(m,3H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.74-6.81(m,1H),6.52(s,1H),5.15(d,J＝1.7Hz，4H),4.32(s,4H),2.28(s,3H),2.23(s,3H)。

以制备5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈相同方式，从4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1270:(S)-4-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.08(d,J＝5.1Hz,1H),7.92-7.97(m,1H),7.55(t，J＝9.0Hz,1H),7.41(d,J＝7.0Hz,1H),7.23(t，J＝7.3Hz,1H),7.19(s,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),6.88-6.94(m,2H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.23(s,2H),5.15(s,2H),4.28(s,4H),3.98-4.07(m,1H),3.87-3.94(m,2H),2.67-2.83(m,2H),2.38-2.45(m,1H),2.27-2.36(m,1H),2.22(s,3H),2.10(s,3H)。

实施例1271:N-(2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.03(d,J＝6.2Hz,1H),7.80-7.92(m,2H),7.55(t，J＝9.2Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝7.0Hz,1H),7.08(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.85(s,1H),6.77(d,J＝1.8Hz,1H),6.75(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.19(s,2H),5.11(s,2H),4.27(s,4H),3.40(d,J＝6.2Hz，2H),3.12(q，J＝6.4Hz，2H),2.54(t，J＝6.4Hz，2H),2.21(s,3H),2.09(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1272:(S)-1-(2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.08(d,J＝5.1Hz,1H),7.85-8.01(m,1H),7.55(t，J＝9.0Hz,1H),7.42(d,J＝7.3Hz,1H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.13-7.21(m,2H),6.88-6.95(m,2H),6.78(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.18-5.27(m,2H),5.14(s,2H),4.28(s,4H),3.93-4.03(m,1H),3.75-3.87(m,1H),3.12-3.18(m,1H),2.94-3.01(m,1H),2.41-2.48(m,1H),2.22(s,3H),2.10(s,3H),1.82-1.89(m,1H),1.66-1.76(m,1H),1.47-1.56(m,3H),1.30-1.40(m,1H)。

实施例1273:(R)-2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.09(d,J＝5.5Hz,1H),7.96-8.04(m,1H),7.52(t，J＝9.0Hz,1H),7.41(d,J＝7.7Hz,1H),7.23(t，J＝7.7Hz,1H),7.10-7.20(m,2H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.88(s,1H),6.78(s,1H),6.75(dd,J＝8.4，1.5Hz,1H),5.22(s,2H),5.14(s,2H),4.28(s,4H),3.85(br.s.，2H),3.32-3.57(m,2H),2.21(s,3H),2.09(s,3H),1.19(s,3H)。

实施例1274:(S)-2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.13(br.s.,1H),7.92-8.04(m,1H),7.54(t，J＝9.0Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.19(s,1H),7.16(d,J＝7.3Hz,1H),6.90-6.94(m,2H),6.78(s,1H),6.75(dd,J＝8.1，1.5Hz,1H),5.21-5.29(m,2H),5.15(s,2H),4.28(s,4H),3.99-4.13(m,2H),3.75-3.80(m,1H),3.64(dd,J＝11.2，7.2Hz,1H),3.16-3.21(m,1H),2.22(s,3H),2.10(s,3H)。

实施例1275:(S)-2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.09(d,J＝5.5 Hz,1H),7.99(d,J＝5.5 Hz,1H),7.52(t，J＝9.0 Hz,1H),7.41(d,J＝7.3 Hz,1H),7.18-7.25(m,1H),7.10-7.17(m,2H),6.92(d,J＝8.1 Hz,1H),6.88(s,1H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.22(s,2H),5.13(s,2H),4.28(s,4H),3.81(br.s.，2H),3.11-3.55(m,2H),2.21(s,3H),2.09(s,3H),1.18(s,3H)。

中间体:4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苯甲醛

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(85mg，0.218mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中，加入3-(溴甲基)吡啶、氢溴酸(60.6mg，0.239mmol)和碳酸铯(177mg，0.544mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。加入水，收集褐色固体，为最终产物4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苯甲醛(90mg，0.187mmol，86％产率)。LCMS条件T:3.916min，482(MH+).¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.35(s,1H),8.70(d,J＝1.7Hz,1H),8.63(dd,J＝4.8，1.6Hz,1H),7.80(d,J＝7.8Hz,1H),7.69(s,1H),7.32-7.44(m,3H),7.23-7.30(m,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.84(d,J＝2.2Hz,1H),6.79(dd,J＝8.3，2.2Hz,1H),6.58(s,1H),5.20(s,2H),5.14(s,2H),4.32(s,4H),2.28(s,3H),2.22(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苯甲醛和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1276:N-(2-((4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.67(s,1H),8.53(d,J＝4.0Hz,1H),7.87(d,J＝7.7Hz,1H),7.80-7.84(m,1H),7.37-7.48(m,2H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.15(d,J＝7.7Hz,1H),7.06(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.89(s,1H),6.73-6.79(m,2H),5.20(s,2H),5.11(s,2H),4.27(s,4H),3.59(s,2H),3.09(q，J＝6.2Hz，2H),2.50(m,2H),2.22(s,3H),2.09(s,3H),1.76(s,3H)。

实施例1277:(S)-2-((4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.75(s,1H),8.55(d,J＝4.0Hz,1H),8.01(d,J＝7.7Hz,1H),7.34-7.55(m,2H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.19(s,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),6.99(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(dd,J＝8.3，1.7Hz,1H),5.21-5.32(m,2H),5.16(s,2H),4.28(s,4H),3.95-4.11(m,2H),3.73-3.80(m,1H),3.65(dd,J＝11.4，7.0Hz,1H),3.15-3.20(m,1H),2.22(s,3H),2.10(s,3H)。

实施例1278:(S)-4-((4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.69(br.s.,1H),8.53(d,J＝3.3Hz,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,1H),7.35-7.50(m,2H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.16(d,J＝7.3Hz,1H),7.08(s,1H),6.88-6.94(m,2H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.21(s,2H),5.13(s,2H),4.28(s,4H),3.76-3.84(m,1H),3.61-3.73(m,2H),2.51-2.57(m,2H),2.22(s,br，4H),2.09(s,br，4H)。

实施例1279:(S)-1-(4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.71(br.s.,1H),8.54(d,J＝4.0Hz,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,1H),7.40-7.47(m,2H),7.25(t，J＝7.3Hz,1H),7.12-7.22(m,2H),6.96(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.19-5.27(m,2H),5.15(s,2H),4.28(s,4H),3.86-3.96(m,1H),3.75(d,J＝12.5Hz,1H),2.86-2.99(m,2H),2.35-2.44(m,1H),2.23(s,3H),2.10(s,3H),1.79-1.87(m,1H),1.65-1.75(m,1H),1.50(br.s.，3H),1.30-1.40(m,1H)。

实施例1280:(S)-2-((4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.53(d,J＝4.4Hz,1H),8.01(d,J＝7.7Hz,1H),7.35-7.46(m,2H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.21(s,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),6.97(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.26(s,2H),5.17(s,2H),4.28(s,4H),3.95(br.s.，2H),3.41-3.74(m,2H),2.22(s,3H),2.10(s,3H),1.23(s,3H)。

实施例1281:(R)-2-((4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-甲基-2-(吡啶-3-基甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.73(s,1H),8.53(d,J＝4.8Hz,1H),8.01(d,J＝7.7Hz,1H),7.36-7.46(m,2H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.21(s,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),6.97(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.26(s,2H),5.17(s,2H),4.28(s,4H),3.95(br.s.，2H),3.47-3.70(m,2H),2.22(s,3H),2.11(s,3H),1.23(s,3H)。

中间体:5-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(102mg，0.261mmol)于DMF(3mL)中的溶液中，加入5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(43.8mg，0.287mmol)和碳酸铯(170mg，0.523mmol)。将反应混合物在75℃搅拌3小时。LC/MS显示反应完成。然后加入水，收集米色固体，为最终产物5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(129mg，0.255mmol，97％产率)。

LCMS条件T:4.38min，507(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.33(s,1H),8.89-8.94(m,2H),8.12(s,1H),7.72(s,1H),7.35-7.44(m,1H),7.24-7.32(m,2H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.56(s,1H),5.25(s,2H),5.18(s,2H),4.34(s,4H),2.30(s,3H),2.25(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从5-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1282:N-(2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.01(d,J＝1.5Hz,1H),8.98(s,1H),8.42(s,1H),7.76-7.82(m,1H),7.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.89(s,1H),6.80(d,J＝1.8Hz,1H),6.75-6.78(m,1H),5.28(s,2H),5.13(s,2H),4.29(s,4H),3.50-3.75(m,2H),3.09-3.15(m,2H),2.53(t，J＝6.6Hz，2H),2.23(s,3H),2.11(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1283:(S)-4-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(s,2H),8.45(s,1H),7.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.24(t，J＝7.5Hz,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.13(s,1H),6.91-6.95(m,2H),6.80(s,1H),6.77(d,J＝8.4Hz,1H),5.30(s,2H),5.15(s,2H),4.29(s,4H),3.70-3.93(m,3H),2.63(d,J＝5.9Hz，2H),2.34-2.41(m,1H),2.20-2.30(m,4H),2.12(s,3H)。

实施例1284:(S)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.05(s,1H),9.01(s,1H),8.55(s,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.20(s,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),6.97(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.80(s,1H),6.74-6.79(m,1H),5.28-5.40(m,2H),5.17(s,2H),4.29(s,4H),4.06-4.13(m,1H),3.98-4.05(m,1H),3.75(dd,J＝11.4，4.4Hz,1H),3.64(dd,J＝11.0，7.0Hz,1H),3.13-3.20(m,2H),2.23(s,3H),2.12(s,3H)。

实施例1285:(S)-1-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99-9.03(m,2H),8.50(s,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.16-7.20(m,2H),6.91-6.96(m,2H),6.80(s,1H),6.77(d,J＝8.1Hz,1H),5.27-5.36(m,2H),5.16(s,2H),4.29(s,4H),3.96(d,J＝13.2Hz,1H),3.77(d,J＝12.8Hz,1H),3.12-3.17(m,1H),2.92-3.00(m,1H),2.38-2.46(m,1H),2.24(s,3H),2.11(s,3H),1.81-1.89(m,1H),1.68-1.77(m,1H),1.47-1.56(br.s.，3H),1.32-1.41(m,1H)。

实施例1286:(S)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),9.00(s,1H),8.53(s,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.21-7.28(m,2H),7.13-7.20(m,1H),6.95(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.80(s,1H),6.74-6.78(m,1H),5.33(s,2H),5.18(s,2H),4.29(s,4H),3.22-3.65(m,4H),2.23(s,3H),2.12(s,3H),1.25(s,3H)。

实施例1287:(R)-2-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),9.00(d,J＝1.5Hz,1H),8.53(s,1H),7.43(d,J＝7.0Hz,1H),7.21-7.28(m,2H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),6.95(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.80(d,J＝1.8Hz,1H),6.74-6.78(m,1H),5.33(s,2H),5.18(s,2H),4.29(s,4H),3.24-3.67(m,4H),2.23(s,3H),2.12(s,3H),1.25(s,3H)。

实施例1288:(R)-1-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99-9.03(m,2H),8.49(s,1H),7.45(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.29(m,1H),7.14-7.21(m,2H),6.89-6.97(m,2H),6.81(d,J＝1.8Hz,1H),6.75-6.79(m,1H),5.27-5.35(m,2H),5.16(s,2H),4.29(s,4H),3.95(d,J＝13.2Hz,1H),3.76(d,J＝12.8Hz,1H),3.14(dd,J＝8.3，3.9Hz,1H),2.92-3.00(m,1H),2.36-2.44(m,1H),2.24(s,3H),2.11(s,3H),1.81-1.88(m,1H),1.65-1.78(m,1H),1.52(br.s.，3H),1.32-1.41(m,1H).

中间体4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-乙基-2-羟基苯甲醛

向3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-乙烯基苯氧基)甲基)苯甲腈(60mg，0.116mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中，加入10％Pd/C(5mg)。将反应混合物在氢气气囊中搅拌4小时。然后经硅藻土过滤，用甲醇洗。滤液然后经浓缩，得到粗产物，为灰白色固体。粗产物接着经biotage柱纯化(使用己烷至25％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)。产物在～20％乙酸乙酯/己烷中析出。收集级份，并且浓缩，得到白色固体，即最终产物4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-乙基-2-羟基苯甲醛(27mg，0.067mmol，57.6％产率).LC/MS方法T:4.610min，405(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ11.48(s,1H),9.75(s,1H),7.43(dd,J＝6.5，2.6Hz,1H),7.31(s,1H),7.26-7.29(m,2H),6.94(d,J＝8.3Hz,1H),6.86(d,J＝2.0Hz,1H),6.79-6.83(m,1H),6.57(s,1H),5.16(s,2H),4.33(s,4H),2.66(q，J＝7.3Hz，2H),2.28(s,3H),1.23(t，J＝7.3Hz，3H)。

中间体3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-乙基-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-乙基-2-羟基苯甲醛(26mg，0.064mmol)于DMF(1mL)中的溶液中，加入3-(溴甲基)苯甲腈(13.86mg，0.071mmol)和碳酸铯(41.9mg，0.129mmol)。将反应混合物在室温3小时。LC/MS显示反应完成。然后加入水，收集米色固体，为最终产物3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-乙基-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈(29mg，0.056mmol，87％产率).LC/MS方法T:4.59min，520(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.39(s,1H),7.64-7.78(m,4H),7.52-7.59(m,1H),7.35-7.41(m,1H),7.25-7.30(m,2H),6.95(d,J＝8.3Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.3，2.2Hz,1H),6.55(s,1H),5.21(s,2H),5.14(s,2H),4.34(s,4H),2.66(q，J＝7.4Hz，2H),2.28(s,3H),1.22(t，J＝7.6Hz，3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-乙基-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1289:N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-乙基苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件M:3.0min，606.4(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.95(s,1H),7.78-7.86(m,3H),7.59-7.67(m,1H),7.42(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.87(s,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.24(s,2H),5.11(s,2H),4.29(s,4H),3.48-3.77(m,2H),3.09-3.16(m,2H),2.50-2.57(m,4H),2.23(s,3H),1.77(s,3H),1.10(t，J＝7.5Hz，3H)。

实施例1290:(S)-2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-乙基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.95min，623.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.03(s,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.60(t，J＝7.7Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.20-7.29(m,2H),7.17(d,J＝7.0Hz,1H),6.90-6.98(m,2H),6.78(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.28(s,2H),5.16(s,2H),4.29(s,4H),4.02(s,2H),3.66(d,J＝11.4Hz,1H),3.57(d,J＝11.4Hz,1H),2.50-2.57(m,2H),2.22(s,3H),1.27(s,3H),1.11(t，J＝7.5Hz，3H)。

实施例1291:(R)-2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-乙基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.94min，623.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.03(s,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.60(t，J＝7.7Hz,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.20-7.28(m,2H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),6.90-6.98(m,2H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.28(s,2H),5.16(s,2H),4.29(s,4H),4.01(s,2H),3.66(d,J＝11.0Hz,1H),3.56(d,J＝11.4Hz,1H),2.50-2.57(m,2H),2.23(s,3H),1.27(s,3H),1.11(t，J＝7.5Hz，3H)。

中间体:3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-乙烯基苯氧基)甲基)苯甲腈

在微波小瓶中，加入3-((4-溴-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈(200mg，0.351mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(24.61mg，0.035mmol)和氯化锂(74.3mg，1.753mmol)。然后密封，真空并且用氮气吹洗。加入DMF(12mL)和三丁基(乙烯基)锡(0.123mL，0.421mmol)。将反应混合物在80℃加热过夜。LC/MS显示反应完成。加入KF溶液，然后在室温搅拌2天。过滤出浅灰色固体，反应混合物用乙酸乙酯(25mL)萃取。分离有机层，干燥(MgSO₄)，并且浓缩得到浅灰色固体粗产物。粗产物然后经biotage柱纯化(使用己烷至20％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)。产物在～15％乙酸乙酯/己烷中析出。收集级份并且浓缩，得到浅黄色固体最终产物3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-乙烯基苯氧基)甲基)苯甲腈(115mg，0.222mmol，63.4％产率).LC/MS:方法T:4.55min，518(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.40(s,1H),8.07(s,1H),7.76(s,1H),7.66-7.74(m,2H),7.52-7.60(m,1H),7.34-7.39(m,1H),7.25-7.31(m,2H),6.91-7.03(m,2H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.56(s,1H),5.79(dd,J＝17.6，1.2Hz,1H),5.24-5.30(m,1H),5.23(s,2H),5.17(s,2H),4.34(s,4H),2.28(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-乙烯基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1292:N-(2-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-乙烯基苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:2.08min，604.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.76-7.91(m,3H),7.56-7.70(m,1H),7.50(s,1H),7.41(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.14-7.21(m,1H),6.85-6.96(m,3H),6.73-6.82(m,2H),5.66(d,J＝16.9Hz,1H),5.29(s,2H),5.16(s,2H),5.12(d,J＝12.1Hz,1H),4.29(s,4H),3.69(s,2H),3.09-3.19(m,2H),2.56(t，J＝6.6Hz，2H),2.22(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1293:(S)-1-(2-(3-氰基苄氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-乙烯基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件M:2.93min，631.3(M+H),629.3(M-H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.00(s,1H),7.87(d,J＝7.7Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.63(t，J＝7.7Hz,1H),7.57(s,1H),7.42(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),6.84-6.98(m,3H),6.80(d,J＝1.8Hz,1H),6.77(d,J＝8.4Hz,1H),5.63(d,J＝17.6Hz,1H),5.31(s,2H),5.18(s,2H),5.15(d,J＝11.7Hz,1H),4.29(s,4H),3.97(d,J＝13.6Hz,1H),3.81(d,J＝13.6Hz,1H),3.13-3.22(m,1H),2.95-3.03(m,1H),2.40-2.48(m,1H),2.22(s,3H),1.81-1.89(m,1H),1.70-1.79(m,1H),1.46-1.57(m,3H),1.33-1.43(m,1H)。

中间体:5-(5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)戊腈

向4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基-5-甲基苯甲醛(100mg，0.256mmol)于DMF(5mL)中的溶液中，加入5-氯戊腈(33.1mg，0.282mmol)和碳酸铯(125mg，0.384mmol)。将反应混合物在室温4小时。LC/MS显示反应完成。加入水，收集黑色固体最终产物5-(5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)戊腈(92mg，0.195mmol，76％产率).LC/MS方法T:4.33min，472(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.32(s,1H),7.67(s,1H),7.40-7.46(m,1H),7.25-7.31(m,2H),6.94(d,J＝8.3Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.52(s,1H),5.18(s,2H),4.34(s,4H),4.15(t，J＝6.0Hz，2H),2.50(t，J＝6.8Hz，2H),2.30(s,3H),2.22(s,3H),2.02-2.10(m,2H),1.91-1.99(m,2H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从5-(5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)戊腈和合适的胺，通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1294:N-(2-(2-(4-氰基丁氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:1.9min，558.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.79-7.85(m,1H),7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.26(t，J＝7.7Hz,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.05(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.73-6.81(m,3H),5.14(s,2H),4.29(s,4H),4.05(t，J＝5.9Hz，2H),3.35-3.65(m,2H),3.09-3.16(m,2H),2.60(t，J＝7.0Hz，2H),2.54(t，J＝6.2Hz，2H),2.24(s,3H),2.10(s,3H),1.69-1.88(m,7H)。

实施例1295:(S)-4-(2-(4-氰基丁氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.74min，575.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.26(t，J＝7.7Hz,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.78-6.83(m,2H),6.76(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.16(s,2H),4.29(s,4H),4.07(t，J＝6.1Hz，2H),3.87-3.94(m,1H),3.54-3.84(m,2H),2.56-2.66(m,4H),2.34-2.44(m,1H),2.28(dd,J＝15.4，5.9Hz,1H),2.24(s,3H),2.10(s,3H),1.80-1.89(m,2H),1.72-1.80(m,2H)。

实施例1296:(S)-1-(2-(4-氰基丁氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.85min，585.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.23-7.30(m,1H),7.14-7.21(m,2H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.79-6.84(m,2H),6.77(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.17(s,2H),4.29(s,4H),4.07(t，J＝5.9Hz，2H),3.97(d,J＝13.2Hz,1H),3.82(d,J＝12.8Hz,1H),3.15(dd,J＝8.4，4.0Hz,1H),2.97-3.04(m,1H),2.60(t，J＝7.0Hz，2H),2.46-2.52(m,1H),2.24(s,3H),2.08-2.14(m,3H),1.80-1.90(m,3H),1.68-1.80(m,3H),1.48-1.59(m,3H),1.33-1.43(m,1H)。

实施例1297:(S)-2-(2-(4-氰基丁氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.78min，575.3(M+H)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ7.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(t，J＝7.7Hz,1H),7.11-7.18(m,2H),6.92(d,J＝8.8Hz,1H),6.82(s,1H),6.70-6.77(m,2H),5.16(s,2H),4.25(s,4H),3.95-4.13(m,4H),3.73(d,J＝11.7Hz,1H),3.58(d,J＝11.4Hz,1H),2.50-2.55(m,2H),2.20(s,3H),2.07(s,3H),1.81-1.89(m,2H),1.70-1.81(m,2H),1.31(s,3H)。

中间体：5-溴-2,4-二羟基苯甲醛

向5-溴-2,4-二甲氧基苯甲醛(1g，4.08mmol)于二氯甲烷(100mL)中的溶液中，在-78℃滴加三溴化硼(1.929mL，20.40mmol)。将反应混合物温热至室温，并且搅拌3天。然后反应混合物用冰猝灭，加入1N氢氧化钠水溶液，调节pH至约10。分离水相，用1N盐酸溶液酸化至pH 3。用乙酸乙酯(2X50mL)萃取，合并有机层，经硫酸镁干燥，浓缩得到浅褐色固体，为粗产物。然后粗产物经硅胶柱纯化(使用己烷至30％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)，得到灰白色固体，为最终产物5-溴-2,4-二羟基苯甲醛(585mg，2.70mmol，66.1％产率)。LCMS条件AA:1.69min，215，217(M-H)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ11.25(s,1H),9.70(s,1H),7.66(s,1H),6.63(s,1H),6.13(br.s,1H)。

中间体：5-溴-2-羟基-4-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯甲醛

向(2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲醇(100mg，0.507mmol)和5-溴-2,4-二羟基苯甲醛(100mg，0.461mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中，加入三苯基膦(145mg，0.553mmol)。将反应混合物在0℃搅拌15分钟.将偶氮二羧酸二异丙酯(0.108mL，0.553mmol)滴加至四氢呋喃(5mL)中。然后将反应混合物温热至室温，并且搅拌过夜。将反应混合物浓缩，向残余物中加入乙腈。浅黄色固体析出，收集最终产物5-溴-2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(62mg，0.156mmol，33.9％产率)。

中间体：5-((4-溴-2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

向5-溴-2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(62mg，0.156mmol)于二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中，加入5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(26.2mg，0.172mmol)和碳酸铯(102mg，0.312mmol)。将反应混合物在75℃搅拌3小时。LC/MS显示反应完成。加入水，收集浅褐色固体，为标题化合物(60mg，0.117mmol，74.9％产率)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.28(s,1H),8.93(s,2H),8.16-8.07(m,2H),7.50-7.43(m,3H),7.42-7.36(m,1H),7.36-7.30(m,4H),6.65(s,1H),5.28(s,2H),5.25(s,2H),2.31(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从5-((4-溴-2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺，通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1298:(S)-1-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.91min，626.2(MH+)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99-9.04(m,2H),8.47(s,1H),7.57(s,1H),7.53(d,J＝7.3Hz,1H),7.44-7.50(m,2H),7.37-7.42(m,1H),7.31-7.36(m,2H),7.28-7.31(m,1H),7.22(d,J＝7.3Hz,1H),7.11(s,1H),5.31-5.40(m,2H),5.27(s,2H),3.30-3.83(m,3H),2.86-2.94(m,1H),2.27-2.35(m,1H),2.25(s,3H),1.67-1.86(m,2H),1.50(br.s.，3H),1.33-1.42(m,1H)。

中间体：5-溴-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛

将三苯基膦(363mg，1.382mmol)加至(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(325mg，1.267mmol)和5-溴-2,4-二羟基苯甲醛(250mg，1.152mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中。将反应混合物在0℃搅拌15分钟。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.269mL，1.382mmol)。使反应混合物温热至室温并且搅拌3天。然后浓缩反应混合物，向残余物中加入乙酸乙酯。收集白色析出物，为最终产物5-溴-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(298mg，0.655mmol，56.8％产率)。LCMS条件AA:3.865min，453，455(M-H-)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:11.45(s,1H),9.71(s,1H),7.72(s,1H),7.48(dd,J＝6.7，2.3Hz,1H),7.22-7.31(m,2H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.84(d,J＝2.2Hz,1H),6.79(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.62(s,1H),5.21(s,2H),4.32(s,4H),2.28(s,3H)。

中间体：3-((4-溴-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈

向5-溴-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(295mg，0.648mmol)于二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中，加入3-(溴甲基)苯甲腈(140mg，0.713mmol)和碳酸铯(317mg，0.972mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。加入水，收集白色固体，即最终产物3-((4-溴-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈(370mg，0.649mmol，100％产率)。

LCMS条件T:4.56min，570，572(MH+).¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.31(s,1H),8.09(s,1H),7.73(s,1H),7.65-7.72(m,2H),7.52-7.59(m,1H),7.38-7.43(m,1H),7.24-7.28(m,2H),6.93(d,J＝8.3Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.58(s,1H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.32(s,4H),2.29(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从3-((4-溴-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺，制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1299:N-(2-((5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.94(s,1H),7.73-7.85(m,3H),7.59-7.66(m,1H),7.50(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.24(t，J＝7.3Hz,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.03(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.77(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.27(s,2H),5.20(s,2H),4.28(s,4H),3.43(br.s.，2H),3.11(q，J＝5.7Hz，2H),2.51(t，J＝6.6Hz，2H),2.24(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1300:(S)-4-((5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.80-7.87(m,2H),7.58-7.67(m,1H),7.52(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.20-7.28(m,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.05(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.77(s,1H),6.75(d,J＝8.1Hz,1H),5.28(s,2H),5.21(s,2H),4.28(s,4H),3.85-3.91(m,1H),3.65-3.75(m,2H),2.51-2.57(m,2H),2.33-2.40(m,1H),2.14-2.29(m,4H)。

实施例1301:(S)-2-((5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.02(br.s.,1H),7.90(d,J＝7.0Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.57-7.69(m,2H),7.45(d,J＝7.0Hz,1H),7.24(t，J＝7.3Hz,1H),7.13-7.21(m,1H),7.08(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.68-6.83(m,2H),5.27-5.38(m,2H),5.23(s,2H),4.28(s,4H),3.13-3.78(m,5H),2.24(s,3H)。

实施例1302:(S)-1-(5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.82(t，J＝8.3Hz，2H),7.62(t，J＝7.7Hz,1H),7.56(s,1H),7.46(d,J＝7.7Hz,1H),7.20-7.28(m,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.05(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.78(s,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),5.29(s,2H),5.22(s,2H),4.28(s,4H),3.77(d,J＝13.6Hz,1H),3.63(d,J＝13.2Hz,1H),2.89(br.s.,1H),2.29(br.s.,1H),2.24(s,3H),1.65-1.85(m,2H),1.48(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)

实施例1303:(R)-2-((5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.67(s,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.20-7.27(m,1H),7.12-7.20(m,1H),7.07(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.77(s,1H),6.74(d,J＝8.1Hz,1H),5.31(s,2H),5.25(s,2H),4.28(s,4H),3.12-3.65(m,4H),2.24(s,3H),1.24(s,3H)。

实施例1304:(S)-2-((5-溴-2-((3-氰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.01(s,1H),7.91(d,J＝7.7 Hz,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,1H),7.67(s,1H),7.61(t，J＝7.5Hz,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.20-7.27(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.07(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.77(s,1H),6.74(d,J＝8.8Hz,1H),5.31(s,2H),5.25(s,2H),4.28(s,4H),3.10-3.65(m,4H),2.24(s,3H),1.24(s,3H)。

中间体：2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-((4-甲酰基-5-羟基-2-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈

将偶氮二羧酸二异丙酯(0.160mL，0.823mmol)于四氢呋喃(3mL)中的溶液，滴加至2,4-二羟基-5-甲基苯甲醛(125mg，0.823mmol)、三苯基膦(216mg,0.823mmol)和2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-(羟基甲基)苯甲腈(200mg，0.748mmol)于无水四氢呋喃(3mL)中的冷却(0℃)溶液中。将所生成的反应混合物缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。使用布氏漏斗从反应混合物中分离出产物，用四氢呋喃(约5mL)淋洗，然后在室温真空干燥，得到75mg白色固体。

LCMS条件T:1.38分钟，M+1＝402.0。

中间体：5-((5-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

将碳酸铯(146mg，0.448mmol)，2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-((4-甲酰基-5-羟基-2-甲基苯氧基)甲基)苯甲腈(120mg，0.299mmol)和5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(91mg，0.598mmol)在75℃在二甲基甲酰胺(2mL)搅拌2小时。对反应混合物进行过滤，并且浓缩。残余物经24g硅胶柱纯化(1:2至2:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到白色固体，为期望的产物(110mg，71％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.27(s,1H),9.02(s,2H),8.52(s,1H),7.82-7.68(m,2H),7.64-7.53(m,2H),7.17-6.96(m,4H),5.46(d,J＝5.9Hz，4H),4.32(s,4H),3.42(s,7H),2.14(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从5-((5-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-甲酰基-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺，通过还原性胺化制备下述实施例。

实施例1305:N-(2-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)乙基)乙酰胺

LCMS条件A:1.70分钟，M+1＝604.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(s,1H),8.97(s,1H),8.41(s,1H),7.75(d,1H),7.66-7.70(m,1H),7.56(d,1H),7.10-7.13(m,2H),7.01-7.08(m,2H),6.90(s,1H),5.30(d,4H),4.32(s,4H),3.65(s,2H),3.13(d,2H),2.90(s,1H),2.74(s,1H),2.54(m,2H),2.12(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1306:5-((5-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((2-羟基乙基氨基)甲基)-4-甲基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

LCMS条件M:2.55分钟，M+1＝563.2，M-1＝561.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.98(s,1H),9.01(s,1H),8.42(s,1H),7.76(m,1H),7.69(d,1H),7.57(d,1H),7.12(d,2H),7.01-7.08(m,2H),6.92(s,1H),5.31(d,4H),4.32(s,4H),3.91(s,1H),3.72(s,1H),2.62(m,2H),2.08-2.14(m,3H),1.91(s,2H)。

实施例1307:(S)-4-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.53分钟，M+1＝621.2，M-1＝619.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(d,2H),8.44(s,1H),7.76(m,1H),7.68(d,1H),7.57(d,1H),7.15(s,1H),7.11(s,1H),7.01-7.08(m,2H),6.93(s,1H),5.31(d,4H),4.32(s,4H),3.88-3.93(m,2H),3.74-3.81(m,2H),2.63(d,2H),2.39(m,1H),2.27(m,1H),2.13(s,3H)。

实施例1308:(S)-2-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.61分钟，M+1＝621.2，M-1＝619.2。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),8.99-9.01(m,1H),8.51(s,1H),7.74(d,1H),7.69(s,1H),7.57(d,1H),7.26(s,1H),7.10(d,1H),7.01-7.07(m,2H),6.96(s,1H),5.34(d,4H),4.32(s,4H),4.00(s,2H),3.63(s,1H),3.57(s,1H),2.13(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例1309:(S)-1-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.69分钟，M+1＝631.3，M-1＝629.4。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(s,2H),8.48(s,1H),7.76(m,1H),7.70(d,1H),7.57(d,1H),7.20(s,1H),7.11(d,1H),7.01-7.08(m,2H),6.94(s,1H),5.28-5.35(m,4H),4.32(s,4H),3.96(d,1H),3.77(d,1H),3.15(m,1H),2.95(br.s.,1H),2.12(s,3H),1.84(br.s.,1H),1.68-1.77(m,1H),1.52(br.s.，3H),1.36(br.s.,1H)。

实施例1310:(R)-2-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基丙酸

LCMS条件A:1.57分钟，M+1＝607.2，M-1＝605.3。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.02(m,1H),8.53(s,1H),7.76(m,1H),7.69(d,1H),7.57(d,1H),7.22(s,1H),7.11(d,1H),7.01-7.08(m,1H),6.98(s,1H),5.29-5.38(m,3H),4.32(s,3H),4.10(d,1H),4.03(d,1H),3.76(m,1H),3.64(m,1H),2.13(s,2H)。

实施例1311:(R)-2-(4-(2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄氧基)-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-5-甲基苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

LCMS条件A:1.61分钟，M+1＝621.3，M-1＝619.4。¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.00(d,1H),9.03(d,1H),8.52(s,1H),7.75(m,1H),7.68(d,1H),7.57(d,1H),7.25(s,1H),7.11(d,1H),7.01-7.08(m,2H),6.96(s,1H),5.34(d,4H),4.32(s,4H),3.99(s,2H),3.64(d,1H),3.55(d,1H),2.14(s,3H),1.25(s,3H)。

中间体：2-((2-溴-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈

将三苯基膦(145mg，0.553mmol)加至2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-6-(羟基甲基)苯甲腈(135mg，0.507mmol)和5-溴-2,4-二羟基苯甲醛(100mg，0.461mmol)于四氢呋喃(5mL)中溶液中。将反应混合物在0℃搅拌15分钟。滴加偶氮二羧酸二异丙酯(0.108mL，0.553mmol)。使反应混合物温热至室温，并且搅拌3天。对反应混合物进行浓缩，残余物用乙腈研磨。收集灰白色固体，为粗产物。粗产物然后经硅胶柱纯化(使用己烷至25％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液)，得到白色固体，为最终产物2-((2-溴-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈(60mg，0.129mmol，27.9％产率)。

LCMS条件T:4.131min，466，468(MH+).¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ11.41(s,1H),9.73(s,1H),7.73-7.78(m,2H),7.65-7.72(m,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.07-7.11(m,1H),7.06(d,J＝2.2Hz,1H),6.98-7.02(m,1H),6.63(s,1H),5.44(s,2H),4.33(s,4H)。

中间体：2-((2-溴-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈

向2-((2-溴-4-甲酰基-5-羟基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈(60mg，0.129mmol)于二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液中，加入3-(溴甲基)苯甲腈(27.7mg，0.142mmol)和碳酸铯(62.9mg，0.193mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。加入水，收集白色固体，为最终产物2-((2-溴-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈(71mg，0.122mmol，95％产率)。

LCMS条件AA:3.751min，581，583(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.33(s,1H),8.11(s,1H),7.81(d,J＝7.3Hz,1H),7.63-7.77(m,4H),7.52-7.59(m,1H),7.48(d,J＝7.1Hz,1H),7.09(d,J＝2.2Hz,1H),7.03-7.07(m,1H),6.98-7.02(m,1H),6.69(s,1H),5.46(s,2H),5.25(s,2H),4.34(s,4H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从2-((2-溴-5-((3-氰基苄基)氧基)-4-甲酰基苯氧基)甲基)-6-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1312:(S)-2-((5-溴-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

LCMS条件A:1.67分钟，M-1＝668.1。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.99(s,1H),7.90(d,J＝7.7Hz,1H),7.73-7.83(m,2H),7.64-7.72(m,2H),7.60(t，J＝7.9Hz,1H),7.57(d,J＝8.1Hz,1H),6.97-7.12(m,4H),5.40(s,2H),5.26-5.35(m,2H),4.31(s,4H),4.01(s,2H),3.71-3.77(m,1H),3.59-3.67(m,1H),3.17-3.22(m,1H)。

实施例1313:(S)-1-(5-溴-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

LCMS条件A:1.75分钟，M+1＝694.3，M-1＝692.3。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.90(s,1H),7.73-7.84(m,3H),7.69(d,J＝7.7Hz,1H),7.58-7.64(m,2H),7.56(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(s,1H),6.98-7.07(m,3H),5.37(s,2H),5.26(s,2H),4.31(s,4H),3.72-3.79(m,1H),2.82-2.90(m,2H),2.03-2.13(br.s.,1H),1.82(s,3H),1.61-1.76(m,2H),1.48-1.55(m,1H),1.37-1.47(m,2H),1.19-1.33(m,1H)。

实施例1314:(S)-4-((5-溴-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

LCMS条件A:1.65分钟，M-1＝682.2。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.72-7.86(m,3H),7.69(d,J＝7.3Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.51-7.58(m,2H),7.08-7.12(m,1H),6.97-7.07(m,3H),5.38(s,2H),5.28(s,2H),4.31(s,4H),3.81-3.93(m,1H),3.64-3.77(m,2H),2.50-2.57(m,2H),2.29-2.38(m,1H),2.16-2.24(m,1H)。

实施例1315:N-(2-((5-溴-4-((2-氰基-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)苄基)氧基)-2-((3-氰基苄基)氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.91(s,1H),7.78-7.84(m,3H),7.73-7.78(m,1H),7.69(d,J＝7.3Hz,1H),7.61(t，J＝7.7Hz,1H),7.57(d,J＝7.3Hz,1H),7.52(s,1H),7.08-7.11(m,1H),6.99-7.08(m,3H),5.37(s,2H),5.27(s,2H),4.31(s,4H),3.65(s,2H),3.07-3.13(m,2H),2.52(t，J＝6.2Hz，2H),1.77(s,3H)。

中间体：5-((4-溴-5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

向5-溴-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(106mg，0.233mmol)于DMF(3mL)中的溶液中，加入5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(39.1mg，0.256mmol)和碳酸铯(152mg，0.466mmol)。将反应混在合物75℃搅拌3小时。LC/MS显示反应完成。加入水，收集米色固体，最终产物5-((4-溴-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(110mg，0.193mmol，83％产率)。LC/MS方法T:4.36min，571，573(MH+)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.27(s,1H),8.92(s,2H),8.10(s,2H),7.44(t，J＝4.5Hz,1H),7.22-7.34(m,2H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.63(s,1H),5.26(s,2H),5.24(s,2H),4.33(s,4H),2.32(s,3H)。

以制备(S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸相同方式，从5-((4-溴-5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1316:(S)-4-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.98-9.05(m,2H),8.45(s,1H),7.55(s,1H),7.48(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.0Hz,1H),7.09(s,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.75-6.78(m,1H),5.34(s,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.82-3.94(m,1H),3.66-3.76(m,2H),2.55(d,J＝5.5Hz，2H),2.33-2.41(m,1H),2.18-2.28(m,4H)。

实施例1317:N-(2-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.02(s,1H),8.99(s,1H),8.44(s,1H),7.76-7.83(m,1H),7.52(s,1H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.07(s,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.33(s,2H),5.24(s,2H),4.29(s,4H),3.50-3.75(m,2H),3.08-3.15(m,2H),2.50-2.55(m,2H),2.26(s,3H),1.78(s,3H)。

实施例1318:(S)-2-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),9.02(s,1H),8.53(s,1H),7.61(s,1H),7.48(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.30-5.41(m,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.30-3.65(m,4H),3.01(t，J＝6.1Hz,1H),2.25(s,3H)。

实施例1319:(S)-1-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99-9.03(m,2H),8.47(s,1H),7.58(s,1H),7.49(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.29(m,1H),7.16-7.21(m,1H),7.08(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.77(d,J＝8.1Hz,1H),5.34(s,2H),5.24(s,2H),4.29(s,5H),3.50-3.85(m,3H),2.86-2.91(m,1H),2.18-2.28(m,4H),1.65-1.83(m,2H),1.43-1.55(m,3H),1.30-1.39(m,1H)。

实施例1320:(R)-2-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),9.01(s,1H),8.52(s,1H),7.67(s,1H),7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.21-7.28(m,1H),7.15-7.20(m,1H),7.09(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.78(s,1H),6.72-6.78(m,1H),5.36(s,2H),5.27(s,2H),4.29(s,4H),3.30-3.64(m,4H),2.25(s,3H),1.21(s,3H)。

实施例1321:(S)-2-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(s,1H),9.01(d,J＝1.5Hz,1H),8.52(s,1H),7.67(s,1H),7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.27(m,1H),7.16-7.20(m,1H),7.10(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.1，1.8Hz,1H),5.36(s,2H),5.27(s,2H),4.29(s,5H),3.24-3.61(m,4H),2.25(s,3H),1.21(s,3H)。

实施例1322:5-((4-溴-5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-((2-羟基乙基氨基)甲基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.03(d,J＝1.8Hz,1H),9.00(s,1H),8.44(s,1H),7.54(s,1H),7.48(d,J＝7.0Hz,1H),7.22-7.28(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(s,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),5.34(s,2H),5.24(s,2H),4.29(s,4H),3.72(s,2H),3.48(t，J＝5.5Hz，2H),2.59(t，J＝5.5Hz，2H),2.26(s,3H)。

实施例1323:(R)-1-(5-溴-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.99-9.03(m,2H),8.47(s,1H),7.58(s,1H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),7.22-7.29(m,1H),7.19(d,J＝7.3Hz,1H),7.10(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),6.76(dd,J＝8.1，1.8Hz,1H),5.31-5.40(m,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.83(d,J＝13.9Hz,1H),3.66(d,J＝13.9Hz,1H),3.13-3.17(m,1H),2.90-2.95(m,1H),2.29-2.36(m,1H),2.26(s,3H),1.67-1.87(m,2H),1.50(br.s.，3H),1.32-1.42(m,1H).

中间体：5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)-4-甲基吡啶-3-甲腈

向碳酸铯(101mg，0.311mmol)于二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物中，加入2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(66mg，0.207mmol)，然后加入5-(氯甲基)-4-甲基吡啶-3-甲腈(51.8mg，0.311mmol)。在室温加热3小时。混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物用12g硅胶柱纯化(使用3:1己烷:乙酸乙酯洗脱)。收集级份，得到标题化合物，为白色泡沫，73mg(80％产率)。¹H NMR(氯仿-d)δ:10.29(s,1H),8.83(s,1H),8.86(s,1H),7.93(d,1H),7.42-7.50(m,3H),7.37-7.42(m,1H),7.30-7.36(m,4H),7.29(s,5H),6.80(m,1H),6.69(d,1H),5.21(d,4H),2.65(s,3H),2.29(s,3H),1.61(br.s.，9H)。LCMS:1.49分钟，M+1＝149.2，EM＝148.1(起始％B＝0，最终％B＝98，梯度时间＝1.5min，流速＝0.8mL/min，波长＝220)。

中间体：5-(氯甲基)-4-甲基吡啶-3-甲腈

将(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)甲醇(100mg，0.495mmol)和氰化亚铜(I)(111mg，1.237mmol)于吡啶(2mL)中的混合物在160℃的密封管中加热20小时。在冷却至室温后，将反应混合物吸收在1mL浓氨水溶液和3mL饱和氯化铵溶液中。搅拌2小时。然后用二氯甲烷:异丙基醇(85:15)溶液萃取反应混合物，经硫酸钠干燥，然后减压浓缩，用于下一步骤中。

向5-(羟基甲基)-4-甲基吡啶-3-甲腈(100mg，0.675mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中，加入亚硫酰氯(0.099mL，1.350mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。TLC显示反应完成。除去溶剂，粗物质用乙酸乙酯稀释，用碳酸氢钠和盐水洗涤。浓缩，得到浅褐色油状物(80mg，70％产率)。

实施例1324:(R)-2-(2-((5-氰基-4-甲基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苄基氨基)-3-羟基丙酸

将5-((2-甲酰基-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)-4-甲基吡啶-3-甲腈(20mg，0.045mmol)和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(14.06mg，0.134mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(8.41mg，0.134mmol)和3滴乙酸(2.55μl，0.045mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:35-75％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为12.8mg，其纯度经LCMS分析估计为96％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.92(d,2H),7.47(m,3H),7.27-7.41(m,5H),7.21(d,1H),6.98(s,1H),6.75(d,1H),5.26-5.34(m,2H),5.18(s,2H),3.96-4.07(m,2H),3.68(d,1H),3.60(m,1H),3.15(m,1H),2.58(s,3H),2.17-2.22(m,3H)。LCMS条件A:1.91分钟，M+1＝538.3，M-1＝536.3，EM＝537.2。

中间体：3-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲酰胺

将碳酸铯(260mg，0.797mmol)、4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(200mg，0.531mmol)和3-(氯甲基)苯甲酰胺(111mg，0.638mmol)于二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物在75℃加热4小时。LC/MS显示～60％转换。反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物用12g硅胶柱纯化(3:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到浅黄色固体，120mg(42％产率，95％纯度)。LCMS条件A:1.33分钟，M+1＝510.3，EM＝509.2。

实施例1325:(R)-2-((2-((3-氨甲酰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲酰胺(20mg，0.039mmol)和D-丝氨酸(12.37mg，0.118mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(7.40mg，0.118mmol)和3滴乙酸(2.247μl，0.039mmol)。将反应混合物在室温搅拌48小时。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为7.2mg，其纯度经LCMS分析估计为99％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.90(br.s.,1H),8.24(s,1H),7.86(d,1H),7.64(d,1H),7.47(m,1H),7.39(d,1H),7.42(d,1H),7.22-7.28(m,2H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.87(s,1H),6.79(s,1H),6.76(d,1H),6.72(d,1H),5.21(s,2H),5.14(s,2H),4.29(s,4H),4.22(d,1H),4.03(d,1H),3.76(m,1H),3.65(m,1H),2.21(s,3H),1.91(s,1H)。LCMS条件A:1.65分钟，M+1＝599.3，M-1＝597.4，EM＝598.2。

实施例1326:(R)-2-((2-((3-氨甲酰基苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

将3-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)苯甲酰胺(20mg，0.039mmol)和(R)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(14.03mg，0.118mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(7.40mg，0.118mmol)和3滴乙酸(2.247μl，0.039mmol)，将反应混合物在室温搅拌一周。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为4.4mg，其纯度经LCMS分析估计为98％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.84(br.s.,1H),8.23(s,1H),7.96(s,1H),7.85(d,1H),7.65(d,1H),7.46(m,1H),7.41(d,1H),7.37(d,1H),7.19-7.27(m,2H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.88(s,1H),6.73-6.81(m,2H),6.71(d,1H),5.23(s,2H),5.15(s,2H),4.29(s,4H),3.99-4.11(m,2H),3.64-3.69(m,1H),3.56(d,1H),3.18(s,1H),2.20(s,3H),1.26(s,3H)。LCMS条件A:1.67分钟，M+1＝613.3，M-1＝611.2，EM＝612.2。

中间体：5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈

向碳酸铯(230mg，0.707mmol)于二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物中，加入2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(150mg，0.471mmol)和5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(86mg，0.565mmol)。将反应混合物在75℃加热过夜。混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经24g硅胶柱纯化(1:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到浅黄色固体，100mg(49％产率)。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ10.28(s,1H),8.97-9.07(m,2H),8.54(s,1H),7.75(d,1H),7.47(m,3H),7.37-7.42(m,1H),7.28-7.35(m,3H),7.23(d,1H),7.00(s,1H),6.87(d,1H),5.42(s,2H),5.30(s,2H),2.21(s,3H)。LCMS条件A:2.24分钟，M+1＝435.5，EM＝434.4。

实施例1327:(R)-2-((2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

将5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(15mg，0.035mmol)和(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(10.88mg，0.104mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(6.51mg，0.104mmol)和3滴乙酸(1.976μl，0.035mmol)，将反应混合物在室温搅拌48小时。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为5.1mg，其纯度经LCMS分析估计为99％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ:9.01(s,1H),9.04(s,1H),8.53(s,1H),7.96(s,1H),7.43-7.49(m,3H),7.26-7.41(m,5H),7.21(d,1H),6.87(s,1H),6.74(d,1H),5.23-5.35(m,2H),5.16(s,2H),4.09(d,1H),4.01(d,1H),3.70(d,1H),3.62(m,1H),3.13(m,1H),2.20(s,3H),1.91(s,1H)。LCMS条件A:1.79分钟，M+1＝524.3，M-1＝522.3，EM＝523.2。

以制备(R)-2-((2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸相同方式，从5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和合适的胺制备下述实施例。

实施例1328:(S)-4-((2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.98-9.02(m,2H),8.45(s,1H),7.44-7.50(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.35(m,4H),7.21(d,1H),6.81-6.84(m,1H),6.71(d,1H),5.27(s,2H),5.15(s,2H),3.85-3.94(m,2H),3.71-3.85(m,1H),2.60(d,2H),2.36(m,1H),2.17-2.27(m,4H),1.90(s,2H)。LCMS条件A:1.73分钟，M+1＝538.3，M-1＝536.3，EM＝537.2。

实施例1329:(S)-1-(2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ9.01(br.s.，2H),8.48(s,1H),7.44-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.35(m,4H),7.21(d,1H),6.84(s,1H),6.73(d,1H),5.25-5.32(m,2H),5.15(s,2H),3.93(d,1H),3.74(d,1H),2.95(br.s.,1H),2.38(br.s.,1H),2.20(s,3H),1.81(br.s.,1H),1.76(d,1H),1.51(br.s.，3H),1.36(br.s.,1H)。LCMS条件A:1.74分钟，M+1＝548.5，M-1＝546.5，EM＝547.3。

中间体：5-((5-(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈

向碳酸钾(26.4mg，0.191mmol)于二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物中，加入4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(24mg，0.064mmol)和5-(溴甲基)-2-氟苯甲腈(20.47mg，0.096mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经12g硅胶柱纯化(2:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到标题化合物，为白色泡沫，15mg(46％产率)。LCMS条件A:1.52分钟，M+1＝510.3，EM＝509.2。

实施例1330:(S)-4-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)-2-氟苯甲腈(15mg，0.029mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(10.52mg，0.088mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(5.55mg，0.088mmol)和3滴乙酸(1.685μl，0.029mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。该物质经制备性LC/MS进一步纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-85％B，历时20分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

产物的收率为1.7mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.05(d,1H),7.92(d,1H),7.57(m,1H),7.41(d,1H),7.21-7.29(m,2H),7.17(d,1H),6.93(d,1H),6.73-6.80(m,3H),6.68(d,1H),5.18(s,2H),5.12(s,2H),4.29(s,4H),3.86-3.93(m,1H),3.70-3.82(m,3H),2.59(d,2H),2.35(m,1H),2.22-2.28(m,1H),2.20(s,3H),1.90(s,1H)。LCMS条件M:2.8分钟，M+1＝613.3，M-1＝611.3，EM＝612.2。

中间体：2-氟-5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈

向碳酸钾(130mg，0.942mmol)和2-羟基-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯甲醛(100mg，0.314mmol)于二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物中，加入5-(溴甲基)-2-氟苯甲腈(101mg，0.471mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用稀盐酸(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥。残余物经24g硅胶柱纯化(2:1己烷:乙酸乙酯)。收集级份，得到标题化合物，为白色泡沫，150mg(100％产率)。LCMS条件A:1.57分钟，M+1＝452.3，EM＝451.2。

实施例1331:(S)-4-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸

将2-氟-5-((2-甲酰基-5-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈(15mg，0.033mmol)和(S)-4-氨基-3-羟基丁酸(11.87mg，0.100mmol)于二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在室温搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(6.26mg，0.100mmol)和3滴乙酸(1.902μl，0.033mmol)，将反应混合物在室温搅拌过夜。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:45-95％B，历时25分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为6.9mg，其纯度经LCMS分析估计为99％。¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.06(d,1H),7.91-7.96(m,1H),7.57(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.26-7.34(m,4H),7.20(d,1H),6.79(s,1H),6.70(d,1H),5.19(s,2H),5.15(s,2H),3.94(m,1H),3.91(s,1H),3.78-3.86(m,2H),2.66(d,2H),2.39(m,1H),2.28(m,1H),2.19(s,3H),1.91(s,1H)。LCMS条件A:1.85分钟，M+1＝555.3，M-1＝553.3，EM＝554.2。

以制备(S)-4-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丁酸相同方式，从2-氟-5-((2-甲酰基-5-((2-甲基联苯-3-基)甲氧基)苯氧基)甲基)苯甲腈和合适的胺制备下述实施例。这些实施例的LCMS数据示于下表中。

实施例1114:N-(2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)乙基)乙酰胺

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.03(d,1H),7.90(m,1H),7.79(br.s.,1H),7.58(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,1H),7.32(d,2H),7.18-7.30(m,3H),6.76(s,1H),6.67(d,1H),5.17(s,2H),5.13(s,2H),3.66(s,2H),3.13(m,2H),2.53-2.57(m,2H),2.20(s,3H),1.77(s,3H)。

实施例1332:(R)-2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.14(d,1H),8.01(m,1H),7.56(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.34-7.41(m,2H),7.26-7.34(m,3H),7.20(d,1H),6.84(s,1H),6.71-6.75(m,1H),5.18-5.26(m,2H),5.16(s,2H),4.12(d,1H),4.05(d,1H),3.77(m,1H),3.65(m,1H),3.18(d,1H),2.19(s,3H)。

实施例1333:(R)-2-((2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.12(d,1H),8.02(m,1H),7.55(m,1H),7.43-7.49(m,3H),7.37-7.41(m,2H),7.26-7.33(m,3H),7.20(d,1H),6.82-6.85(m,1H),6.73(m,1H),5.21(s,2H),5.17(s,2H),4.02(s,2H),3.65(d,1H),3.56(d,1H),2.19(s,3H),1.23-1.28(m,3H)。

实施例1334:(S)-1-(2-((3-氰基-4-氟苄基)氧基)-4-((2-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.03-8.13(m,1H),7.91-7.95(m,1H),7.57(m,1H),7.47(m,3H),7.39(m,1H),7.26-7.36(m,4H),7.21(d,1H),6.81(d,1H),6.72(m,1H),5.17-5.23(m,2H),5.15(s,2H),3.95(d,1H),3.79(d,1H),3.16(m,1H),2.98(d,1H),2.39-2.46(m,1H),2.20(s,3H),1.83(br.s.,1H),1.69-1.79(m,1H),1.52(br.s.，3H),1.38(br.s.,1H)。

中间体：5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟酸乙酯

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(200mg，0.487mmol)、5-(溴甲基)烟酸乙酯(154mg，0.633mmol)、碳酸铯(238mg，0.730mmol)在DMF(4mL)中的混合物在室温搅拌18hrs。

反应混合物用稀释的HCl(0.1N)中和，用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。残余物经Biotage(2:1己烷/EtOAc；24g硅胶柱)纯化。收集期望的级份，得到223mg(80％)目标化合物，为淡黄色固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.33(s,1H),9.27(d,J＝2.0Hz,1H),8.88(d,J＝2.3Hz,1H),8.42(t，J＝2.1Hz,1H),7.94(s,1H),7.47-7.40(m,1H),7.33-7.26(m,2H),6.94(d,J＝8.3Hz,1H),6.85(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.70(s,1H),5.26(s,2H),5.25(s,2H),4.47(q，J＝7.0Hz，2H),4.33(s,4H),2.32(s,3H),1.45(t，J＝7.2Hz，3H)。

实施例2000:(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((5-(乙氧基羰基)吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)烟酸乙酯(30mg，0.052mmol)、(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(18.68mg，0.157mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(34.3mg，0.162mmol)于DMF(1mL)中的混合物在室温搅拌20hrs。对反应混合物进行过滤，除去溶剂。60％生成的残余物直接用于下一步反应，而没有进一步纯化。40％生成的残余物经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时20分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min.合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为8.4mg(59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.06(s,1H),9.00(s,1H),8.46(s,1H),7.55(s,1H),7.45(d,J＝7.3Hz,1H),7.28-7.21(m,1H),7.20-7.13(m,2H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.80-6.72(m,2H),5.39(s,2H),5.27(s,2H),4.36(q，J＝7.2Hz，2H),4.28(s,4H),3.95(s,2H),3.61(d,J＝11.4Hz,1H),3.4-3.52(m,1H),2.23(s,3H),1.33(t，J＝7.2Hz，3H),1.23(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.78min，ESI m/z 677(M+1)，675(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.89min，ESI m/z 677(M+1)，675(M-1)。

实施例2001:(S)-5-((2-(((2-羧基-1-羟基丙-2-基)氨基)甲基)-4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟酸

将氢氧化锂(10.46mg，0.437mmol)加至(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((5-(乙氧基羰基)吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸(实施例2000)(21.13mg，0.0312mmol)于THF(1mL)和EtOH(1mL)中的溶液中，将混合物加热至100℃保持15分钟。除去溶剂，粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min.合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。得到目标化合物4.5mg(22％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.95(s,1H),8.72(s,1H),8.49(s,1H),7.54(s,1H),7.49(d,J＝7.3Hz,1H),7.30-7.23(m,1H),7.22-7.16(m,2H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.72(m,2H),5.31(d,J＝12.5Hz，4H),4.28(s,4H),3.99(s,2H),3.65(d,J＝11.0Hz,1H),3.56(d,J＝11.0,1H)2.26(s,3H),1.27(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.390min，ESI m/z 649(M+1)，647(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.520min，ESI m/z 649(M+1)，647(M-1)。

中间体：(S)-5-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸甲酯

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(37.9mg，0.072mmol)(粗制的)，H-Orn(boc)-OMe HCl(20.36mg，0.072mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(47.3mg，0.223mmol)于DMF(1mL)中的混合物在室温搅拌7hrs。加入额外的H-Orn(Boc)-OMe HCl(20.36mg，0.072mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(47.3mg，0.223mmol)。将混合物在室温搅拌2天。除去溶剂，将所生成的残余物分配在二氯甲烷和水之间。水相用二氯甲烷萃取一次。合并有机萃取物，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥。过滤除去干燥剂，真空除去溶剂。残余物直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。

实施例2002:(S)-5-((2-(((4-氨基-1-羧基丁基)氨基)甲基)-4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯氧基)甲基)烟酸

将氢氧化锂(24.14mg，1.008mmol)加至(S)-5-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸甲酯(54.5mg，0.072mmol)(粗制的)于THF(2mL)和EtOH(2mL)中的混合物中。将混合物在100℃的微波炉中加热30分钟。加入额外的氢氧化锂(24.14mg，1.008mmol)，然后将反应混合物在100℃的微波炉中加热2小时。除去溶剂。将残余物溶于CH₂Cl₂(5mL)中，用三氟乙酸(1mL)在0℃处理。将混合物在室温搅拌20小时。除去溶剂。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时25分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为1.3mg(2.6％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.92(s,1H),8.64(s,1H),8.42(s,1H),7.49(d,J＝6.2Hz,1H),7.40(s,1H),7.27(t，J＝7.3Hz,1H),7.22-7.15(m,2H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.82-6.74(m,2H),5.35-5.23(m,4H),4.29(s,4H),3.91(s,1H),3.81(d,J＝11.7Hz,1H),3.75-3.69(m,1H),2.75(br.s.，2H),2.26(s,3H),1.68(br.s.，4H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1.0mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.464min，ESI m/z 662(M+1)，660(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.976min，ESI m/z 662(M+1)，660(M-1)。

实施例2003:(S)-5-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸

将氢氧化锂(24.14mg，1.008mmol)加至(S)-5-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸甲酯(54.5mg，0.072mmol)(粗制的)于THF(1mL)和EtOH(1mL)中的溶液中。将混合物在100℃微波炉中加热30min。除去溶剂。将所生成的残余物溶于CH₂Cl₂(5mL)，混合物用三氟乙酸(1mL)处理，在室温搅拌4小时。除去溶剂。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时40分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。该物质经制备性LC/MS进一步纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；

流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为3.6mg(7.5％)¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.00(d,J＝5.9Hz，2H),8.47(s,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.38(s,1H),7.27-7.22(m,1H),7.19-7.15(m,1H),7.08(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.73(m,2H),5.32(s,2H),5.23(s,2H),4.28(s,4H),3.66(d,J＝13.6Hz,1H),3.61(br.s.,1H),2.83(br.s.,1H),2.71(br.s.,1H),2.69-2.62(m,1H),2.24(s,3H),1.69(br.s.,1H),1.57(br.s.，3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.61min，ESI m/z 641(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.67min，ESI m/z 643(M+1)。

中间体：(S)-6-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)己酸叔丁酯

(S)-6-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)己酸叔丁酯(58mg，0.072mmol，粗制的)获自5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(7)和H-Lys(Boc)-OTBu HCl，使用对(S)-5-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸甲酯所描述的操作。

实施例2004:(S)-6-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)己酸

(S)-6-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)己酸(1.5mg，3％)获自(S)-6-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)己酸叔丁酯，使用上述对(S)-5-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸(实施例2003)所描述的操作。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:15-55％B，历时40分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.00(d,J＝6.6Hz，2H),8.48(br.s.,1H),7.47-7.37(m,2H),7.27-7.20(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.08(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.81-6.72(m,2H),5.32(br.s.，2H),5.23(br.s.，2H),4.28(s,4H),3.72(d,J＝13.6Hz,1H),3.63(d,J＝13.6Hz,1H),2.90-2.83(m,1H),2.70(br.s.，2H),2.24(s,3H),1.51(d,J＝5.1Hz，4H),1.43-1.25(m,2H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.57min，ESI m/z 657(M+1)，655(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.65min，ESI m/z 657(M+1)。

中间体:(S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸甲酯

(S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸甲酯(53.5mg，0.072mmol，粗制的)获自5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈and H-Dab(Boc)-OMe HCl，使用上述对(S)-5-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸甲酯所描述的操作。

实施例2005:(S)-4-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸

(S)-4-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸(1.5mg，3.2％)获自(S)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)丁酸甲酯，使用上述对(S)-5-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊酸(实施例2003)所描述的操作。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。该物质经制备性LC/MS进一步纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:40-80％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min.合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.04(d,J＝2.2Hz,1H),8.85(d,J＝2.2Hz,1H),8.51(t，J＝2.1Hz,1H),7.43(dd,J＝7.2，1.3Hz,1H),7.39(s,1H),7.25-7.16(m,2H),7.01(s,1H),6.89(d,J＝8.1Hz,1H),6.78-6.72(m,2H),5.33(s,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.98-3.91(m,1H),3.89-3.82(m,1H),3.45(dd,J＝9.5，8.3Hz,1H),3.39-3.35(m,1H),3.31-3.25(m,1H),2.47-2.37(m,1H),2.29(s,3H),1.95-1.85(m,1H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1.0mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.925min，ESI m/z 629(M+1)，627(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝3.110min，ESI m/z 628(M+1)。

实施例2006:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-6-(二甲基氨基)己酸

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(37.9mg，0.072mmol)(粗制的),(S)-2-氨基-6-(二甲基氨基)己酸、TFA(87mg，0.216mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(47.3mg，0.223mmol)于DMF(1mL)中的混合物在室温搅拌过夜。加入额外量的三乙酰氧基硼氢化钠(47.3mg，0.223mmol)，将混合物在室温搅拌2天。混合物经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为18.1mg(35％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.02(s,2H),8.51(s,1H),7.50-7.40(m,2H),7.28-7.21(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.12(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.72(m,2H),5.41-5.30(m,2H),5.26(s,2H),4.28(s,4H),3.92-3.77(m,2H),3.05(t，J＝6.1Hz,1H),2.24(s,3H),2.17(d,J＝5.9Hz，2H),2.12(s,6H),1.58(br.s.，2H),1.32(br.s.，4H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.68min，ESI m/z 685(M+1)，683(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.95min，ESI m/z 685(M+1)，683(M-1)。

实施例2007:(2S,5S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-5-羟基哌啶-2-羧酸

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(37.9mg，0.072mmol)和(2S,5S)-5-羟基哌啶-2-羧酸TFA(18.66mg，0.072mmol)于DMF(1mL)中的混合物在室温搅拌1hr。然后加入氰基硼氢化钠(13.57mg，0.216mmol)和乙酸(4.12μl，0.072mmol)，将反应混合物在室温搅拌2.5天。混合物经制备性LC/MS纯化，使用下述条件：柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:35-75％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。该物质经制备性LC/MS进一步纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为0.8mg(2％)。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.98(d,J＝2.2Hz,1H),8.91(d,J＝2.0Hz,1H),8.48(t，J＝2.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.42(dd,J＝7.2，1.8Hz,1H),7.26-7.17(m,2H),7.06(s,1H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),6.78-6.73(m,2H),5.40(s,2H),5.30(s,2H),4.67(d,J＝13.2Hz,1H),4.30(s,4H),4.18(d,J＝13.0Hz,1H),4.04(br.s.,1H),3.52(dd,J＝10.8，3.9Hz,1H),3.19-3.10(m,1H),3.07-3.00(m,1H),2.29(s,3H),2.27-2.17(m,1H),2.13-2.04(m,1H),1.85-1.72(m,2H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.62min，ESI m/z 656(M+1)，654(M-1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.77min，ESI m/z 656(M+1)，654(M-1)。

实施例2008:(2S,4R)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基哌啶-2-羧酸

(2S,4R)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-4-羟基哌啶-2-羧酸6.5g,(14％)获自5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈和(2S,4R)-4-羟基哌啶-2-羧酸TFA，使用上述对(2S,5S)-1-(5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)-5-羟基哌啶-2-羧酸(实施例2007)所述的操作。粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时20分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03-8.98(m,2H),8.47(s,1H),7.49-7.44(m,2H),7.29-7.23(m,1H),7.21-7.17(m,1H),7.11(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.74(m,2H),5.33(s,2H),5.25(s,2H),4.29(s,4H),3.73(d,J＝13.6Hz,1H),3.54-3.50(m,1H),3.48(br.s.,1H),3.03(dd,J＝11.0，2.9Hz,1H),2.81(d,J＝11.7Hz,1H),2.25(s,3H),2.15(t，J＝12.3Hz,1H),2.00(d,J＝13.6Hz,1H),1.68(d,J＝12.1Hz,1H),1.51(q，J＝11.2Hz,1H),1.40-1.31(m,1H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终的浓度。

注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

LCMS(注射1条件)Rt＝1.56min，ESI m/z 656(M+1)。

LCMS(注射2条件)Rt＝2.72min，ESI m/z 656(M+1)，654(M-1)。

使5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(25，或30，或60mg)和相应的氨基酸(3当量)，在室温使用三乙酰氧基硼氢化钠(3.1当量)于DMF(1mL，或2mL)中的混合物，制备下述实施例2009至2013。

实施例2009:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(吡啶-2-基)丙酸

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时35分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为9.4mg，其纯度经LCMS分析估计为98％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)8.96(s,1H),8.93(s,1H),8.40(s,1H),8.23(d,J＝4.4Hz,1H),7.67(t，J＝7.5Hz,1H),7.43(s,1H),7.40(d,J＝7.7Hz,1H),7.24(m,2H),7.17(m,2H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.75(s,1H),6.73(d,与s重叠,1H),5.36(d,J＝4.0Hz，2H),5.25(s,2H),4.26(s,4H),4.09(d,J＝6.6Hz，2H),3.63(dd,J＝8.4，3.7Hz,1H),3.24(m,1H),3.07(m,1H),2.22(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝1.80min，ESI m/z 677.3(M+H),675.2(M-H).Rt＝保留。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝2.80min，ESI m/z 677.3(M+H),675.2(M-H)。

实施例2010:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(吡啶-3-基)丙酸

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:35-75％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为17.8mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.00(s,1H),8.96(s,1H),8.41(br s，2H),8.38(d,J＝4.8Hz,1H),7.62(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝7.7Hz,1H),7.25(m,3H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.07(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.78(s,1H),6.76(d,J＝9.5Hz,1H),5.29(s,2H),5.23(s,2H),4.29(s,4H),3.73(m,2H),3.35(t，J＝6.6Hz,1H),2.96(m,1H),2.86(m,1H),2.24(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1.0mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝1.77min，ESI m/z 677.0(M+H),675.0(M-H)。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝3.39min，ESI m/z 677.0(M+H),675.1(M-H)。

实施例2011:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酸

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:35-75％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为12.5mg，其纯度经LCMS分析估计为96％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.00(s,1H),8.96(s,1H),8.39(m,3H),7.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.28(s,1H),7.25-7.21(m,3H),7.17(m,1H),7.06(s,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.78(s,1H),6.76(d,J＝8.1Hz,1H),5.29(s,2H),5.23(s,2H),4.28(s,4H),3.76(m,2H),3.42(t，J＝6.4Hz,1H),2.98(m,1H),2.87(m,1H),2.23(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1.0mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝1.74min，ESI m/z 677.0(M+H),675.3(M-H)。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝2.56min，ESI m/z 677.1(M+H),675.1(M-H)。

实施例2012:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)戊二酸

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为4.1mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝1.47min，ESI m/z 658.6(M+H),656.6(M-H)。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝2.58min，ESI m/z 658.7(M+H),656.6(M-H)。

实施例2013:2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)乙酸

粗物质经制备性LC/MS纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:30-70％B，历时15分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。产物的收率为5.7mg，其纯度经LCMS分析估计为100％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.03(d,J＝4.8Hz，2H),8.51(s,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(m,1H),7.19(d,J＝7.7Hz,1H),7.14(s,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.79(s,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,1H),5.37(s,2H),5.28(s,2H),4.29(s,4H),3.98(s,2H),3.12(s,2H),2.24(s,3H)。

使用两种分析性LC/MS注射确定最终浓度。注射1条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝1.72min，ESI m/z 586.2(M+H),584.1(M-H)。

注射2条件:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV.Rt＝2.86min，ESI m/z 586.2(M+H),584.1(M-H)。

LC-MS方法

条件N-1:

柱＝Phenomenex，2.0X 50mm，3μm

起始％B＝0；最终％B＝100

梯度时间＝4min；停止时间＝5min

流速＝0.8mL/min；波长＝220nm

溶剂A＝0.1％TFA in 10％甲醇/90％water

溶剂B＝0.1％TFA in 90％甲醇/10％water

炉温＝40℃

SCP-1

Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；

流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；

流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；

温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；

流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

实施例3000

实施例3000步骤a

向氟化试剂(10.46g，29.5mmol)于乙腈(40mL)中的溶液中，加入2,4-二羟基苯甲醛(3.0g，21.72mmol)。将反应混合物在室温4天。反应混合物用水和EtOAc稀释，然后分离有机相，用饱和氯化钠洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩，得到粗产物，经硅胶纯化(0-35％EtOAc/己烷)，得到5-氟-2,4-二羟基苯甲醛(0.9g)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 11.26(s,1H),9.69(s,1H),7.26(d,J＝9.8Hz,1H),6.59(d,J＝7.3Hz,1H)。

实施例3000步骤b

在0℃向(3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基)甲醇(1.642g，6.41mmol)、5-氟-2,4-二羟基苯甲醛(1g，6.41mmol)和三苯基膦(2.016g，7.69mmol)于THF(40mL)中的溶液中，滴加偶氮二羧酸二异丙酯(1.513ml，7.69mmol)于THF(5mL)中的溶液。将所生成的混合物在室温搅拌3天。除去溶剂，然后经硅胶色谱纯化(0-35％EtOAc/己烷)，得到4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氟-2-羟基苯甲醛(1.0g，2.54mmol，39.6％产率)。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 11.40(s,1H),9.69(s,1H),7.43-7.35(m,1H),7.28-7.23(m,3H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.86-6.76(m,2H),6.65(d,J＝6.8Hz,1H),5.20(s,2H),4.32(s,4H),2.32-2.23(m,3H).LC/MS(Cond.N-1):[M+Na]⁺417.20，RT＝4.469min。

实施例3000步骤c

将4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-5-氟-2-羟基苯甲醛(0.23g，0.583mmol)、5-(氯甲基)吡啶-3-甲腈(0.089g，0.583mmol)和Cs₂CO₃(0.228g，0.700mmol)的搅拌混合物和NaI(8.7mg，0.058mmol)于DMF(4mL)中的溶液在75℃搅拌3小时。

使反应混合物温热至室温，用水和乙酸乙酯稀释，有机相用饱和氯化钠水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(0-100％EtOAC in己烷)，得到5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氟-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(0.22g，0.431mmol，73.9％产率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 10.31(d,J＝3.0Hz,1H),8.91(dd,J＝4.4，2.1Hz，2H),8.09(t，J＝2.0Hz,1H),7.63(d,J＝11.0Hz,1H),7.39-7.35(m,1H),7.26(d,J＝3.3Hz，2H),6.93(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.80-6.75(m,1H),6.68(d,J＝6.3Hz,1H),5.26(s,2H),5.20(s,2H),4.32(s,4H),2.30(s,3H).LC/MS(Cond.N-1):[M+Na]⁺533.20，RT＝4.334min。

实施例3000

向螺纹加盖的小瓶中，加入5-((5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-4-氟-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(0.045g，0.088mmol)、(R)-2-氨基-3-羟基丙酸(0.030g，0.282mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(0.056g，0.264mmol)和DMF(1mL)。将小瓶加盖，然后将反应混合物在室温搅拌16小时。反应混合物用EtOAc和饱和NaCl稀释，白色固体析出。过滤出白色固体，用EtOAc和水洗涤，然后干燥，得到实施例3000(0.035g，0.055mmol，62.9％产率).LC/MS(Cond.N-1):[M+H]⁺600.25，RT＝3.594min。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 9.08-8.99(m,2H),8.53(t，J＝2.0Hz,1H),7.42(d,J＝6.5Hz,1H),7.36(d,J＝11.8Hz,1H),7.25(t，J＝7.5Hz,1H),7.21-7.15(m,2H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),6.81-6.73(m,2H),5.38-5.21(m,4H),4.29(s,4H),4.03-3.93(m,2H),3.70(dd,J＝11.3，4.5Hz,1H),3.61(dd,J＝11.0，6.3Hz,1H),3.15(dd,J＝6.3，4.8Hz,1H),2.23(s,3H)。

实施例3001

根据上述对实施例3000所述的操作制备实施例3001。LC/MS(Cond.N-1):[M+H]⁺614.25，RT＝3.626min。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δppm 8.96(d,J＝2.0Hz,1H),8.89(d,J＝2.0Hz,1H),8.42(s,1H),7.39-7.29(m,2H),7.21-7.13(m,2H),7.05(d,J＝7.0Hz,1H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),6.78-6.70(m,2H),5.33(s,2H),5.29(s,2H),4.29(s,4H),4.22(s,2H),3.93(d,J＝12.0Hz,1H),3.72(d,J＝12.0Hz,1H),2.27(s,3H),1.51-1.39(m,3H)。

实施例3002

根据上述对实施例3000所述的操作制备实施例3002。最终产物经制备性HPLC纯化(柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:25-65％B，历时15分钟；流速:20mL/min.).LC/MS(Cond.N-1):[M+H]⁺624.25，RT＝3.669min。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)ppm 9.00(d,J＝9.5Hz，2H),8.45(s,1H),7.42(d,J＝7.3Hz,1H),7.29-7.22(m,2H),7.21-7.16(m,1H),7.14(d,J＝7.3Hz,1H),6.93(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.73(m,2H),5.33-5.26(m,2H),5.23(s,2H),4.29(s,4H),3.80(d,J＝13.9Hz,1H),3.65(d,J＝13.9Hz,1H),3.19-3.13(m,1H),2.90(m,1H),2.31(d,J＝6.2Hz,1H),2.23(s,3H),1.80(br.s.,1H),1.74(br.s.,1H),1.50(br.s.，3H),1.38(br.s.,1H)。

中间体-1于各种胺和氨基酸的还原性胺化的一般操作如下:

将中间体-1(1当量)、合适的胺或氨基酸(3当量)和AcOH(5当量)于DMF中的混合物在室温搅拌4-16小时。然后加入氰基硼氢化钠(3当量)，将混合物在室温搅拌直至还原性胺化完成(一般过夜)。产物经制备性HPLC纯化，使用下述条件:柱:XBridge C18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:20-60％B，历时30分钟，在100％B保持5分钟；流速:20mL/min.合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

使用下述LC-MS方法之一测定最终纯度。

LC-MS条件1:

柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm的UV。

LC-MS条件2:

柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm的UV。

对于实施例3008至3030，使用下述纯化方法和LC-MC条件。

LCMS条件:

条件ACN-TFA:柱:Waters Aquity UPLC BEHC18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:99.95％水和0.05％三氟乙酸；流动相B:99.95％乙腈和0.05％三氟乙酸；梯度:2％B，2-98％B，历时1分钟，然后在98％B保持0.5分钟；流速:0.8mL/min；检测:220nm或254nm的UV。

条件ACN-AA:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:1mL/min；检测:220nm或254nm的UV。

条件MeOH-AA:柱:Waters BEH C18，2.0x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相A:5:95甲醇:含有10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5甲醇:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度:0％B，0-100％B历时3分钟，然后在100％B保持0.5分钟；流速:0.5mL/min；检测:220nm或254nm的UV。

纯化条件:

最终产物的一般纯化条件:柱:XBridge C18，19x mm，5-μm颗粒。流动相A:5:95乙腈:含有10-mM乙酸铵的水.流动相B:95:5乙腈:含有10-mM乙酸铵的水；梯度:0-100％B，历时10-20分钟，然后在100％B保持0-10分钟；流速:20mL/min；梯度和保持时间随不同的化合物而变化。合并含有期望产物的级份并且经离心蒸发干燥。

实施例3008:(5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(0.071g，0.173mmol)、(5-(氯甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯盐酸盐(0.056g，0.225mmol)、碳酸铯(0.169g，0.519mmol)和碘化钠(3mg，0.02mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌混合物在75℃搅拌(油浴)90分钟。冷却反应混合物，用二氯甲烷稀释，用水洗涤(2x 10mL)。有机层经硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，用乙醚研磨后得到产物，为黄色粉末固体。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝589.2，1.08分钟，精确质量计算值＝588.17。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.39(s,1H),8.28(d,J＝5.3Hz,1H),8.10(s,1H),7.92(s,1H),7.64(br.s.,1H),7.41-7.36(m,1H),7.26-7.23(m,2H),7.08(d,J＝5.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.60(s,1H),5.22(s,2H),5.18(s,2H),4.32(s,4H),4.25(q，J＝7.1Hz，2H),2.27(s,3H),1.33(t，J＝7.2Hz，3H)。

实施例3009:(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((5-((乙氧基羰基)氨基)吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

将(5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(0.042g，0.071mmol)和(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(0.027g，0.227mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(0.75mL)中的混合物用冰醋酸(10μl，0.175mmol)处理，并且搅拌30分钟。向混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.045g，0.214mmol)，将反应混合物搅拌3小时。周期性地加入额外部分的氨基酸和三乙酰氧基硼氢化钠，直至LCMS监测表明没有进一步的反应进展。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，经减压浓缩。粗物质经制备性LCMS纯化的一般方法纯化。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝692.5，1.76分钟，精确质量计算值＝691.23。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.24(d,J＝5.1Hz,1H),7.97(s,1H),7.54(s,1H),7.41(d,J＝7.0Hz,1H),7.28-7.12(m,3H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.67(m,2H),5.30(br.s.，2H),5.23(br.s.，2H),4.27(s,4H),4.11(q，J＝7.1Hz，2H),3.99(br.s.，2H),3.89(s,1H),3.69-3.53(m,4H),2.21(s,3H),1.27(s,3H),1.21(t，J＝7.2Hz，3H)。

实施例3010:N-(4-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-2-基)乙酰胺

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+):M+H＝559.3，1.02分钟，精确质量计算值＝558.16。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.39(s,1H),8.34-8.25(m,2H),7.95(br.s.,1H),7.92(s,1H),7.43-7.35(m,1H),7.26-7.23(m,2H),7.15(d,J＝6.3Hz,1H),6.93(d,J＝8.3Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.81-6.76(m,1H),6.60(s,1H),5.22(s,2H),5.18(s,2H),4.32(s,4H),2.27(s,3H),2.22(s,3H)。

实施例3011:(S)-2-((2-((2-乙酰氨基吡啶-4-基)甲氧基)-5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

基本上与制备实施例3009的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝662.5，1.60分钟，精确质量计算值＝661.22。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ:8.28(d,J＝5.1Hz,1H),8.21(s,1H),7.69-7.55(m,1H),7.54(s,1H),7.37-7.23(m,2H),7.16-7.10(m,2H),6.90(s,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),6.73-6.68(m,2H),5.33(s,2H),5.21(s,2H),4.27(s,4H),4.27(s,1H),4.03-3.72(m,2H),2.22(s,3H),2.15(s,3H),1.48(s,3H)。

实施例3012:(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

基本上与制备实施例3009的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝683.2，1.63分钟，精确质量计算值＝682.18。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:9.07(s,1H),9.04(s,1H),8.55(s,1H),7.55(s,1H),7.46(d,J＝7.3Hz,1H),7.29-7.22(m,1H),7.21-7.14(m,2H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79-6.69(m,2H),5.41(s,2H),5.28(s,2H),4.27(s,4H),4.00(br.s.，2H),3.63(d,J＝11.7Hz,1H),3.37(s,3H),2.23(s,3H),1.23(s,3H)；LCMS(ES+)M+H＝683.1.Note:甲基signal partially obscured。

实施例3013:(5-氯-4-{[3-(2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基]甲氧基}-2-[(5-甲磺酰基吡啶-3-基)甲氧基]苯基)甲醇

该产物是制备实施例3012分理出的副产物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝582.0，2.87分钟，精确质量计算值＝581.13。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:9.06(s,1H),9.00(s,1H),8.43(s,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.36(s,1H),7.28-7.20(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.12(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.70(m,2H),5.39(s,2H),5.23(s,2H),4.47(d,J＝5.1Hz，2H),4.27(s,4H),3.35(s,3H),2.24(s,3H)。

实施例3014:(S)-2-((5-氯-2-((2-氯-6-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

基本上与制备实施例3009的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝669.6，1.88分钟，精确质量计算值＝668.17。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:7.53(s,1H),7.37(d,J＝7.7Hz,1H),7.24(s,1H),7.22-7.11(m,2H),7.00(s,1H),6.95(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.76(s,1H),6.73(d,J＝8.1Hz,1H),5.27(s,2H),5.23(s,2H),4.27(s,4H),3.95(br.s.，2H),3.84(s,3H),3.65-3.60(m,1H),3.54(d,J＝11.4Hz,1H),2.22(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例3015:(2S)-2-{[(5-氯-4-{[3-(2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基]甲氧基}-2-[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基]苯基)甲基]氨基}-3-羟基-2-甲基丙酸

基本上与制备实施例3009的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件MeOH-AA，ES-)M-H＝633.2，2.88分钟，精确质量计算值＝634.21。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.15(d,J＝5.5Hz,1H),7.54(s,1H),7.38(d,J＝7.3Hz,1H),7.24-7.18(m,1H),7.18-7.10(m,2H),7.04(s,1H),6.95-6.87(m,2H),6.80-6.68(m,2H),5.26(s,2H),5.23(s,2H),4.27(s,4H),3.97(s,2H),3.84(s,3H),3.64(d,J＝11.0Hz,1H),3.55(d,J＝11.4Hz,1H),2.22(s,3H),1.26(s,3H)。

实施例3016:(5-氯-4-{[3-(2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基]甲氧基}-2-[(2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基]苯基)甲醇

该产物是制备实施例3015分理出的副产物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝534.4，3.18分钟，精确质量计算值＝533.16。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.38(d,J＝7.3Hz,1H),7.34(s,1H),7.23-7.17(m,1H),7.17-7.11(m,1H),7.03(d,J＝5.1Hz,1H),6.99(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.85(s,1H),6.78-6.68(m,2H),5.22(s,2H),5.19(s,2H),4.49(d,J＝5.5Hz，2H),4.27(s,4H),3.84(s,3H),2.21(s,3H)。

实施例3017:(S)-1-(5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)苯甲醛(0.037g，0.070mmol)and(S)-哌啶-2-羧酸(0.013g，0.104mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(0.9ml)和冰醋酸(0.100ml)中的悬浮液搅拌20分钟，用硼烷-2-皮考啉络合物(0.015g，0.139mmol)处理，然后搅拌16小时。反应混合物用水和乙酸乙酯稀释，然后通过添加碳酸氢钠溶液猝灭。对有机层进行浓缩，残余物用制备性LCMS纯化的一般方法纯化。LCMS(条件ACN-AA，ESI+)M+H＝645.05，1.88分钟，精确质量计算值＝644.23。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.16(d,J＝5.5Hz,1H),7.45(s,1H),7.41(d,J＝7.7Hz,1H),7.26-7.19(m,1H),7.19-7.13(m,1H),7.05(d,J＝5.1Hz,1H),7.03(s,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.88(s,1H),6.77(s,1H),6.76-6.71(m,1H),5.23(s,2H),5.20(s,2H),4.27(s,4H),3.89(s,1H),3.84-3.77(m,1H),3.68(d,J＝13.9Hz,1H),3.17(dd,J＝7.7，4.0Hz,1H),2.96-2.89(m,1H),2.37-2.26(m,1H),2.22(s,3H),1.80(br.s.,1H),1.72(d,J＝9.2Hz,1H),1.49(br.s.，3H),1.37(br.s.,1H)。

实施例3018:(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-(二甲基氨甲酰基)吡啶-4-基)甲氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

将4-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-酰胺(0.035g，0.061mmol)和(S)-2-氨基-3-羟基-2-甲基丙酸(0.022g，0.183mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)中的溶液搅拌2小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(0.039g，0.183mmol)处理，搅拌40小时。反应混合物用氰基硼氢化钠(0.023g，0.366mmol)处理，将反应混合物搅拌18小时。将反应混合物分配在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液之间，有机层减压浓缩。将残余物悬浮在N,N-二甲基甲酰胺中，经棉花塞过滤，粗物质经一般制备性LCMS纯化条件纯化。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝676.2，1.62分钟，精确质量计算值＝675.23。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.57(d,J＝5.1Hz,1H),7.69-7.62(m,2H),7.56(s,1H),7.42(d,J＝7.7Hz,1H),7.39-7.26(m,1H),7.25-7.20(m,1H),7.19-7.13(m,1H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79-6.70(m,2H),5.35(s,2H),5.24(s,2H),4.27(s,4H),4.04(s,2H),3.67(d,J＝11.4Hz,1H),3.57(d,J＝11.4Hz,1H),3.00(s,3H),2.91(s,3H),2.22(s,3H),1.27(s,3H)。

实施例3019:4-(4-氯-5-{[3-(2,3-二氢-1,4-苯并二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苯基]甲氧基}-2-(羟基甲基)苯氧基甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-羧酰胺

该产物是制备实施例3018分理出的副产物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝575.1，2.00分钟，精确质量计算值＝574.19。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.58(d,J＝5.1Hz,1H),7.61(s,1H),7.52(d,J＝4.4Hz,1H),7.41(d,J＝7.7Hz,1H),7.36(s,1H),7.26-7.18(m,1H),7.18-7.12(m,1H),7.03(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79-6.70(m,2H),5.32(s,2H),5.20(s,2H),4.51(s,2H),4.27(s,4H),3.00(s,3H),2.92(s,3H),2.22(s,3H)。

实施例3020:5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((3-(甲基磺酰基)苄基)氧基)苯甲醛

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+Na＝601.2，1.14分钟，精确质量计算值＝578.12。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.30(s,1H),8.05(s,1H),7.99-7.93(m,1H),7.90(s,1H),7.75(d,J＝7.8Hz,1H),7.67-7.62(m,1H),7.44-7.38(m,1H),7.27-7.23(m,2H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.77(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.68(s,1H),5.24(s,2H),5.22(s,2H),4.31(s,4H),3.09(s,3H),2.29(s,3H)。

实施例3021:(S)-2-((5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((3-(甲基磺酰基)苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基-2-甲基丙酸

基本上与制备实施例3009的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝682.7，2.70分钟，精确质量计算值＝681.18。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.12(s,1H),7.92(dd,J＝15.8，7.7Hz，2H),7.68(t，J＝7.7Hz,1H),7.54(s,1H),7.45(d,J＝7.3Hz,1H),7.30-7.21(m,1H),7.21-7.09(m,2H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.83-6.68(m,2H),5.37(s,2H),5.26(s,2H),4.27(s,4H),3.97(s,2H),3.65-3.58(m,1H),3.52(d,J＝11.4Hz,1H),3.24(s,3H),2.24(s,3H),1.23(s,3H)。

实施例3022:(S)-4-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-氧代丁酸

将5-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)吡啶-3-甲腈(0.025g，0.047mmol)和L-天冬酰胺酸(0.021g，0.159mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(0.70mL)中的溶液用乙酸(0.014mL，0.237mmol)处理，将混合物搅拌30分钟。向混合物中加入氰基硼氢化钠(8.94mg，0.142mmol)，将反应混合物搅拌16小时。对反应混合物进行过滤(0.45μm注射器尖端过滤器)，滤液经备性LCMS纯化的一般方法纯化。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝643.2，2.67分钟，精确质量计算值＝642.19.¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.01(d,J＝7.0Hz，2H),8.49(s,1H),7.65(br.s.,1H),7.47(s,1H),7.43(d,J＝7.7Hz,1H),7.27-7.20(m,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.13(s,1H),7.00(br.s.,1H),6.92(d,J＝7.7Hz,1H),6.80-6.72(m,2H),5.36(s,2H),5.26(s,2H),4.28(s,4H),4.04-3.92(m,2H),3.38(d,J＝4.4Hz,1H),2.64-2.56(m,1H),2.40(dd,J＝16.3，8.3Hz,1H),2.23(s,3H)。

实施例3023:(S)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)琥珀酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝644.1，2.58分钟，精确质量计算值＝643.17。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.01(s,1H),8.99(s,1H),8.48(s,1H),7.47-7.38(m,2H),7.23(t，J＝7.7Hz,1H),7.16(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.81-6.70(m,2H),5.34(s,2H),5.24(s,2H),4.27(s,4H),3.94-3.80(m,2H),3.23(br.,1H),2.46(m,1H),2.39-2.29(m,1H),2.22(s,3H)。

实施例3024:(R)-4-氨基-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-4-氧代丁酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝643.2，1.68分钟，精确质量计算值＝642.19。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:9.01(d,J＝8.1Hz，2H),8.49(s,1H),7.70(br.s.,1H),7.47-7.39(m,2H),7.27-7.21(m,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(s,1H),6.96(br.s.,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.71(m,2H),5.35(s,2H),5.25(s,2H),4.28(s,4H),4.02-3.86(m,3H),3.33(br.s.,1H),2.61-2.55(m,1H),2.37(dd,J＝16.0，8.3Hz,1H),2.23(s,3H),1.90(s,1H)。

实施例3025:(R)-2-((5-氯-2-((5-氰基吡啶-3-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)琥珀酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝644.2，1.48分钟，精确质量计算值＝643.17。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:9.00(d,J＝8.1Hz，2H),8.48(s,1H),7.49(s,1H),7.42(d,J＝7.3Hz,1H),7.23(t，J＝7.5Hz,1H),7.17(d,J＝7.3Hz,1H),7.12(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.71(m,2H),5.35(s,2H),5.26(s,2H),4.27(s,4H),4.07-4.01(m,1H),4.00-3.94(m,1H),2.66(dd,J＝16.1，8.4Hz,1H),2.23(s,3H)；一些峰被溶剂掩盖。

实施例3026:(S)-1-(5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝702.9，3.11分钟，精确质量计算值＝701.24。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.06(s,1H),7.96(d,J＝8.9Hz,1H),7.48(s,1H),7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.27-7.20(m,1H),7.16(dd,J＝7.6，5.5Hz，2H),7.08(s,1H),6.90(d,J＝8.2Hz,1H),6.80-6.65(m,2H),5.22(s,2H),5.19(s,2H),4.26(s,4H),3.89(s,3H),3.17(s,2H),2.94(d,J＝10.7Hz,1H),2.36(br.s.,1H),2.22(s,3H),1.84(br.s.,1H),1.67(d,J＝9.8Hz,1H),1.49(br.s.，3H),1.32(br.s.,1H)；一些信号被溶剂掩盖。

实施例3027:(S)-1-(2-((5-羧基-2-甲氧基苄基)氧基)-5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

将(S)-1-(5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基-5-(甲氧基羰基)苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸(0.01442g，0.021mmol)在无水甲醇(0.5mL)中的溶液用氢氧化锂一水合物(8.62mg，0.205mmol)处理，搅拌加热(65℃油浴)45min。冷却反应混合物，然后(0.45μm注射器尖端过滤器)，滤液经备性LCMS纯化的一般方法纯化。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝688.3，1.54分钟，精确质量计算值＝687.22。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.07(s,1H),7.93(d,J＝8.1Hz,1H),7.50-7.39(m,2H),7.30-7.22(m,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.14(d,J＝8.8Hz,1H),7.10(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.79-6.72(m,2H),5.24(s,2H),5.19(s,2H),4.27(s,4H),3.89(s,3H),3.83(d,J＝13.9Hz,1H),3.68(d,J＝13.6Hz,1H),3.11(d,J＝4.4Hz,1H),2.92(br.s.,1H),2.35(br.s.,1H),2.24(s,3H),1.81(br.s.,1H),1.66(d,J＝10.6Hz,1H),1.49(br.s.，3H),1.33(d,J＝5.9Hz,1H)。

实施例3028:(S)-1-(2-(苄氧基)-5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝614.3，1.96分钟，精确质量计算值＝613.22。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:7.49-7.37(m,6H),7.36-7.31(m,1H),7.28-7.21(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(s,1H),6.92(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.72(m,2H),5.22(s,2H),5.21(s,2H),4.28(s,4H),3.77(d,J＝13.9Hz,1H),3.65(d,J＝14.3Hz,1H),3.16(d,J＝8.1Hz,1H),2.89(br.s.,1H),2.31(br.s.,1H),2.24(s,3H),1.80(br.s.,1H),1.70(d,J＝9.2Hz,1H),1.48(br.s.，3H),1.36(br.s.,1H)。

实施例3029:(S)-1-(5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基苄基)氧基)苄基)哌啶-2-羧酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝644.2，3.02分钟，精确质量计算值＝643.23。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:7.48(s,1H),7.44(dd,J＝10.6，8.1Hz，2H),7.35(t，J＝7.7Hz,1H),7.28-7.22(m,1H),7.18(d,J＝7.3Hz,1H),7.13(s,1H),7.06(d,J＝8.4Hz,1H),6.96(t，J＝7.3Hz,1H),6.91(d,J＝8.1Hz,1H),6.80-6.70(m,2H),5.25(br.s.，2H),5.19(s,2H),4.26(s,4H),4.12-4.06(m,1H),4.03-3.96(m,1H),3.81(s,3H),3.62(br.s.,1H),3.12(d,J＝10.6Hz,1H),2.66(br.s.,1H),2.23(s,3H),2.00(d,J＝12.8Hz,1H),1.70(d,J＝10.3Hz,1H),1.58(br.s.，3H),1.41(br.s.,1H)。

实施例3030:(S)-2-((2-(2-氨基-2-氧代乙氧基)-5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苄基)氨基)-3-羟基丙酸

基本上与制备实施例3022的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-AA，ES+)M+H＝557.3，1.49分钟，精确质量计算值＝556.16。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:9.18(s,1H),8.72(s,1H),7.43(t，J＝4.5Hz,1H),7.34(s,1H),7.25(d,J＝4.5Hz，2H),6.91(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.80-6.73(m,2H),5.36-5.25(m,1H),5.23-5.11(m,3H),4.30(s,4H),3.77(s,3H),3.68-3.56(m,1H),3.36(s,3H),2.30(s,3H),1.61(br.s.，2H)。

制备中间体:

(5-(((叔丁基二甲基甲硅基)氧基)甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯

5-(((叔丁基二甲基甲硅基)氧基)甲基)吡啶-3-胺(0.100g，0.419mmol)于无水二氯甲烷(2.0mL)中的冷(0℃冰浴)溶液先后用许尼希碱(0.110mL，0.629mmol)、氯甲酸乙酯(0.048mL，0.503mmol)处理。将反应混合物搅拌10分钟，温热至室温，搅拌1小时。反应混合物用氢氧化钠0.2N的甲醇溶液(3.15mL，0.629mmol)处理，然后搅拌3小时。再加入1.0N氢氧化钠水溶液(1.0mL)，将反应混合物搅拌16小时。将反应混合物温热(45℃水浴)，搅拌2小时，然后减压浓缩，用二氯甲烷和水稀释。有机层用盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩，得到灰白色固体，将其用于随后反应。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝311.2，0.94分钟，精确质量计算值＝310.17。

(5-(羟基甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯

将(5-(((叔丁基二甲基甲硅基)氧基)甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(0.130g，0.419mmol)于无水THF(5mL)中的溶液用固体氟化四丁基铵(0.329g，1.257mmol)和冰醋酸(0.072mL，1.257mmol)处理。将反应混合物搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(15mL)稀释，用水(2x 10mL)洗涤。有机层然后经硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到产物(0.050g，0.255mmol，60.8％产率)，为灰白色固体。该物质经柱色谱纯化(40g柱，乙酸乙酯/己烷10-80％)，得到产物(0.050g，0.255mmol，60.8％产率)，为白色粉末固体。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝197.1，1.39分钟，精确质量计算值＝196.08。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.24(d,J＝4.9Hz,1H),7.97(s,1H),7.54(s,1H),7.05(d,J＝5.1Hz,1H),4.77(d,J＝6.1Hz，2H),4.27(q，J＝7.2Hz，2H),1.35(t，J＝7.1Hz，3H)。

(5-(氯甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯盐酸盐

将(5-(羟基甲基)吡啶-3-基)氨基甲酸乙酯(0.050g，0.255mmol)于无水二氯甲烷(3mL)中的溶液用亚硫酰氯(0.112mL，1.529mmol)处理，搅拌3小时，然后减压浓缩，得到产物，为白色固体，将其立即用于下一实验中。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:11.26(br.s.,1H),8.63(br.s.,1H),8.24(br.s.,1H),7.41(br.s.,1H),4.69(s,2H),4.34(q，J＝6.9Hz，2H),1.37(t，J＝6.8Hz，3H)。

N-(4-(羟基甲基)吡啶-2-基)乙酰胺

在氮气气氛下，向2-乙酰氨基异烟酸(1.56g，8.66mmol)于无水THF(60mL)中的冷却(0℃冰浴)的溶液中，先后加入N-甲基吗啉(0.952mL，8.66mmol)和氯甲酸乙酯(0.828mL，8.66mmol)。再搅拌20分钟后，分批加入硼氢化钠(0.983g，26.0mmol)。将混合物冷却(-78℃干冰丙酮浴)，历时90分钟加入甲醇(50mL)。然后将温度上升至室温，继续搅拌16小时。将反应混合物倾倒至硅胶垫上，用二氯甲烷洗脱，直至浑流停止，然后加入10％甲醇的二氯甲烷溶液。对甲醇/二氯甲烷级份进行减压浓缩。橙色油状物干载至硅藻土垫上，然后经40g柱通过25柱体积纯化(从0-10％甲醇/二氯甲烷)，得到期望的产物(0.52g，3.13mmol，36.1％产率)，为白色蜡状固体。LCMS(条件MeOH-AA，ESI+)M+H＝167.20，1.34分钟，精确质量计算值＝166.07 ¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.24(d,J＝5.1Hz,1H),8.20-8.05(m,2H),7.11(dt，J＝5.2，0.7Hz,1H),4.76(s,2H),2.22(s,3H)。

N-(4-(氯甲基)吡啶-2-基)乙酰胺盐酸盐

将N-(4-(羟基甲基)吡啶-2-基)乙酰胺(0.050g，0.301mmol)于二氯甲烷(3mL)的溶液用亚硫酰氯(0.132mL，1.805mmol)处理，将反应混合物搅拌3小时。然后浓缩，真空泵干燥30分钟，得到产物，为白色玻璃状固体，将其立即用于随后的反应。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:12.61(br.s.,1H),8.76(s,1H),8.16(d,J＝6.4Hz,1H),7.47(dd,J＝6.4，1.4Hz,1H),4.69(s,2H),2.43(s,3H)。

(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)甲醇

将(5-溴吡啶-3-基)甲醇(0.386g，2.053mmol)、甲亚磺酰钠(0.251g，2.464mmol)、碘化亚铜(I)(0.039g，0.205mmol)、L-脯氨酸(0.047g，0.411mmol)和氢氧化钠(0.411mL，0.411mmol)于二甲基亚砜(3mL)中的混合物在100℃在微波照射中加热6小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥，接着减压浓缩。水层用盐水稀释，然后再用乙酸乙酯萃取两次，用二氯甲烷萃取一次。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩。残余物经(RediSep 12g SiO₂，0％(3CV)，0-50％(15CV)，50-100％(10CV)，乙酸乙酯/己烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩，得到产物(0.084g，0.449mmol，21.86％产率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.05(d,J＝2.3Hz,1H),8.86(d,J＝2.0Hz,1H),8.27(t，J＝2.1Hz,1H),4.86(s,2H),3.12(s,3H)。

3-(氯甲基)-5-(甲基磺酰基)吡啶盐酸盐

(5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)甲醇(0.084g，0.449mmol)于无水氯仿(3.0mL)中的悬浮液用亚硫酰氯(0.033mL，0.449mmol)处理，搅拌3小时。反应混合物然后减压浓缩，得到产物，为浅黄色粉末，将其立即用于随后的反应。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:9.13(d,J＝2.0Hz,1H),8.91(d,J＝2.0Hz,1H),8.30(t，J＝2.1Hz,1H),4.69(s,2H),3.16(s,3H)

5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((5-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)甲氧基)苯甲醛

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝580.1，1.20分钟，精确质量计算值＝579.11。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.27(s,1H),9.19(s,1H),8.99(s,1H),8.38(s,1H),7.93(s,1H),7.43(t，J＝4.5Hz,1H),7.28(br.s.，2H),6.93(d,J＝8.3Hz,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.81-6.75(m,1H),6.69(s,1H),5.28(s,2H),5.26(s,2H),4.32(s,4H),3.17(s,3H),2.31(s,3H)。

2-氯-4-(氯甲基)-6-甲氧基吡啶盐酸盐

(2-氯-6-甲氧基吡啶-4-基)甲醇(0.050g，0.288mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液用亚硫酰氯(0.126mL，1.728mmol)处理，搅拌3小时。对反应混合物进行浓缩，真空泵干燥30分钟，得到产物，为透明粘稠油状物，将其立即用于随后的反应。

5-氯-2-((2-氯-6-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛

将5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(0.091g，0.222mmol)、2-氯-4-(氯甲基)-6-甲氧基吡啶盐酸盐(0.066g，0.288mmol)、碳酸铯(0.217g，0.665mmol)和碘化钠(3mg，0.022mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌混合物加热(75℃油浴)1.5小时。冷却反应混合物，用二氯甲烷稀释，用水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩，经静置凝固，得到橙色油状物。橙色油状物用乙醚研磨，滗析出乙醚，然后通过真空泵干燥。残余物经biotage(Redi-sep 12g SiO2，0％(3CV)，0-100％(15CV)，100％(2CV)，乙酸乙酯/己烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩，用乙醚研磨后得到产物(0.036g，0.064mmol，28.7％产率)，为白色固体。该物质在随后的实验中按原样使用。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝566.2，1.26分钟，精确质量计算值＝565.11。

(2-甲氧基吡啶-4-基)甲醇

在氮气气氛下，向2-甲氧基异烟酸(0.285g，1.861mmol)于无水四氢呋喃(10mL)中的冷却(0℃冰浴)中，加入N-甲基吗啉(0.215mL，1.954mmol)，然后加入氯甲酸乙酯(0.187mL，1.954mmol)。在搅拌20分钟后，分批加入硼氢化钠(0.211g，5.58mmol)。将混合物冷却(-78℃干冰丙酮浴)，历时5分钟加入甲醇(10mL)。然后使温度升高至室温，继续搅拌16小时。将反应混合物倾倒至硅胶垫上，用二氯甲烷洗脱，直至浑流停止，然后10％甲醇/二氯甲烷洗脱。然后对后一滤液进行减压浓缩，经硅胶柱色谱(24g SiO₂，0-10％(20CV)甲醇/二氯甲烷)纯化，得到产物(0.24g，1.725mmol，93％产率)，为琥珀色油状物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝140.1，宽洗脱，精确质量计算值＝139.06。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.13(d,J＝5.4Hz,1H),6.91-6.83(m,1H),6.76(s,1H),4.70(d,J＝5.6Hz，2H),3.94(s,3H),1.91(br.s.,1H)。

4-(氯甲基)-2-甲氧基吡啶盐酸盐

(2-甲氧基吡啶-4-基)甲醇(0.100g，0.719mmol)于无水二氯甲烷(3mL)中的溶液二用亚硫酰氯(0.315mL，4.31mmol)处理，在氮气气氛下载室温搅拌2小时。然后对反应混合物进行减压浓缩，得到白色固体，将其立即用于随后的反应。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.38(d,J＝5.8Hz,1H),7.38(d,J＝5.5Hz,1H),7.30(s,1H),4.71(s,2H),4.39(s,3H)。

5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基吡啶-4-基)甲氧基)苯甲醛

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝532.2，1.27分钟，精确质量计算值＝531.14。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.38(s,1H),8.20(d,J＝5.3Hz,1H),7.91(s,1H),7.35(dd,J＝6.3，2.8Hz,1H),7.26-7.20(m,2H),6.95-6.88(m,2H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.80-6.75(m,2H),6.55(s,1H),5.16(s,2H),5.15(s,2H),4.32(s,4H),3.96(s,3H),2.26(s,3H)。

4-(羟基甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-酰胺

4-(羟基甲基)吡啶-2-甲酸(0.100g，0.653mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)中的溶液先后用许尼希碱(0.228mL，1.306mmol)和二甲胺(2.0M，THF(0.392mL，0.784mmol))和HATU(0.323g，0.849mmol)处理。将反应混合物搅拌30分钟。产物经硅胶柱色谱(24g SiO₂，0-10％(20CV)，10-20％(2CV)，20％(15CV)甲醇/二氯甲烷)纯化，得到产物(0.101g，0.560mmol，86％产率)，为粘稠油状物。LCMS(条件MeOH-AA，ES+)M+H＝181.1，0.88分钟，精确质量计算值＝180.09。

4-(氯甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-酰胺盐酸盐

4-(羟基甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-酰胺(0.100g，0.555mmol)于无水二氯甲烷(3.0mL)中的溶液用亚硫酰氯(0.243mL，3.33mmol)处理。在加入亚硫酰氯后，溶液立即形成白色沉淀。将混合物搅拌2小时，然后减压浓缩，残余物立即用于随后的反应。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.82(br.s.,1H),8.09-7.95(m,2H),4.81(s,2H),3.20(br.s.，3H),3.13(br.s.，3H)。

4-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)-N,N-二甲基吡啶-2-酰胺

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物，不同的是将后处理的残余物经biotage(RediSep 24g SiO₂，0％(3CV)，0-20％(15CV)，20％(3CV)，甲醇/二氯甲烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝573.2，1.10分钟，精确质量计算值＝572.17。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ:10.37(s,1H),8.64(d,J＝5.0Hz,1H),7.92(s,1H),7.73(s,1H),7.43(dd,J＝5.0，1.5Hz,1H),7.41-7.37(m,1H),7.27-7.24(m,2H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.3，2.3Hz,1H),6.62(s,1H),5.22(d,J＝3.0Hz，3H),4.32(s,4H),3.16(s,3H),3.13(s,3H),2.29(s,3H)。

1-(氯甲基)-3-(甲基磺酰基)苯

(3-(甲基磺酰基)苯基)甲醇(0.106g，0.569mmol)于无水二氯甲烷(3.0mL)中的悬浮液用亚硫酰氯(0.249mL，3.42mmol)处理，然后将混合物搅拌2小时，在此期间全部固体溶解。然后将反应混合物减压浓缩，残余物从二氯甲烷干燥两次。残余物立即用于随后的实验中。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.07-7.88(m,2H),7.77-7.54(m,2H),5.22-4.99(m,1H),4.66(s,1H),3.10-3.06(m,3H)。

3-(氯甲基)-4-甲氧基苯甲酸甲酯

3-(氯甲基)-4-甲氧基苯甲酸(0.465g，2.318mmol)于无水二氯甲烷(1.5mL)和甲醇(1.5mL)中的冷(0℃冰浴)溶液用TMS-重氮甲烷(5.79mL，11.59mmol)处理。将混合物搅拌10分钟，然后温热至室温，并且搅拌20分钟。然后对反应混合物进行减压浓缩，从二氯甲烷干燥两次，然后真空干燥20分钟，得到产物(0.490g，2.283mmol，98％产率)，为白色粉末。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝215.1，0.92分钟，精确质量计算值＝214.04。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.07(d,J＝2.3Hz,1H),8.03(dd,J＝8.5，2.3Hz,1H),6.93(d,J＝8.5Hz,1H),4.66(s,2H),3.95(s,3H),3.90(s,3H)。

3-((4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)甲基)-4-甲氧基苯甲酸甲酯

5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-羟基苯甲醛(0.100g，0.243mmol)和3-(氯甲基)-4-甲氧基苯甲酸甲酯(0.107g，0.498mmol)于无水N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)中的溶液用碳酸铯(0.238g，0.730mmol)和碘化钠(4mg，0.03mmol)处理，将混合物加热(75℃油浴)3.5小时(计时器)，然后缓慢地冷却，并且在室温搅拌16小时。反应混合物用乙酸乙酯(25mL)稀释，用水(2x 25mL)洗涤，然后用盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩。残余物经biotage(RediSep 12g SiO2，0％(3CV)，0-100％(15CV)，100％(2CV)，乙酸乙酯/己烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩，得到产物，为部分纯化的产物，将其用于下一步骤而没有进一步纯化。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+Na＝613.5，1.22分钟，精确质量计算值＝588.16。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.34(s,1H),8.13(d,J＝2.0Hz,1H),8.08(dd,J＝8.8，2.3Hz,1H),7.89(s,1H),7.43-7.38(m,1H),7.26-7.22(m,2H),6.97(d,J＝8.5Hz,1H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.2，2.1Hz,1H),6.72(s,1H),5.22(s,2H),5.20(s,2H),4.31(s,4H),3.93(s,3H),3.90(s,3H),2.29(s,3H)。

2-(苄氧基)-5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)苯甲醛

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物，不同的是后处理的残余物经biotage(RediSep 12g SiO₂，0％(3CV)，0-100％(15CV)，100％(2CV)，乙酸乙酯/己烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝501.0，1.23分钟，精确质量计算值＝500.14。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.36(s,1H),7.89(s,1H),7.43-7.37(m,6H),7.26-7.23(m,2H),6.92(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.65(s,1H),5.19(s,2H),5.15(s,2H),4.32(s,4H),2.27(s,3H)。

5-氯-4-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-((2-甲氧基苄基)氧基)苯甲醛

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物，不同的是后处理的残余物经(RediSep 12g SiO₂，0％(3CV)，0-100％(15CV)，100％(2CV)，乙酸乙酯/己烷)纯化。收集产物级份，然后减压浓缩。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝531.1，1.25分钟，精确质量计算值＝530.15。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.36(s,1H),7.88(s,1H),7.44-7.39(m,2H),7.35(td，J＝7.8，1.6Hz,1H),7.26-7.23(m,2H),7.00(td，J＝7.5，0.9Hz,1H),6.93(s,1H),6.91(s,1H),6.84(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(dd,J＝8.3，2.0Hz,1H),6.74(s,1H),5.25(s,2H),5.18(s,2H),4.32(s,4H),3.88(s,3H),2.29(s,3H)。

2-(4-氯-5-((3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧杂环己烯-6-基)-2-甲基苄基)氧基)-2-甲酰基苯氧基)乙酰胺

基本上与制备实施例3008的方法相同的方法制备标题化合物。LCMS(条件ACN-TFA，ES+)M+H＝467.9，1.09分钟，精确质量计算值＝467.11。

生物学测定

使用PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定研究式(I)化合物结合PD-L1的能力。

均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定

PD-1和PD-L1的相互作用可使用两种蛋白的细胞外结构域的可溶的、纯化的制备物进行检测。PD-1和PD-L1蛋白细胞外结构域被表达成具有检测标签(例如PD-1)的融合蛋白，该标签为免疫球蛋白(PD-1-Ig)的Fc部分，对PD-L1而言，其为6组氨酸基序(PD-L1-His)。所有结合研究在HTRF测定缓冲液中进行，该缓冲液由补充有0.1％(with)牛血清白蛋白的dPBS和0.05％(v/v)Tween-20组成。对于h/PD-L1-His结合测定，将抑制剂与PD-L1-His(10nM最终)在4μl测定缓冲液中预先培养15m，随后加入在1μl测定缓冲液中的PD-1-Ig(20nM最终)并进一步培养15m。使用铕穴状化合物-标记的抗-Ig(1nM最终)和别藻蓝素(APC)标记的抗-His(20nM最终)完成HTRF检测。将抗体稀释于HTRF检测缓冲液并将5μl分配于结合反应混合物的上方。将反应混合物平衡30分钟并使用EnVision荧光计得到所生成的信号(665nm/620nm比)。在人蛋白PD-1-Ig/PD-L2-His(分别为20&5nM)和CD80-His/PD-L1-Ig(分别为100&10nM)之间进行其它结合测定。

重组蛋白:具有免疫球蛋白G(Ig)表位标签的C-末端人Fc结构域的人PD-1(25-167)[hPD-1(25-167)-3S-IG]，以及具有C-末端His表位标签的人PD-L1(18-239)[hPD-L1(18-239)-TVMV-His]在HEK293T细胞中表达，依次通过ProteinA亲合色谱和位阻排斥色谱进行纯化。人PD-L2-His和CD80-His获自商业来源。

重组人PD-1-Ig的序列

hPD1(25-167)-3S-IG

(SEQ ID NO:1)

重组人PD-L1-His的序列

hPDL1(18-239)-TVMV-His

(SEQ ID NO:2)

下表列出了如在PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合测定中测量的本发明代表性实施例的IC₅₀。范围如下：A＝0.60nM-10nM；B＝10.01nM-100nM；C＝100.01nM-20μM。

式(I)化合物具有作为PD-1/PD-L1相互作用的抑制剂的活性，且因此可用于治疗与PD-1/PD-L1相互作用相关的疾病或缺陷。通过抑制PD-1/PD-L1的相互作用，本发明化合物可用于治疗感染性疾病，诸如HIV、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎或丁型肝炎和癌症。

序列表

<110> 百时美施贵宝公司

<120> 用作免疫调节剂的化合物

<130> 12256-WO-PCT

<150> US 61/979,337

<151> 2014-04-14

<160> 2

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 384

<212> PRT

<213> 人

<400> 1

Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr Phe Ser Pro Ala

1 5 10 15

Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe Thr Cys Ser Phe

20 25 30

Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr Arg Met Ser Pro

35 40 45

Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu Asp Arg Ser Gln

50 55 60

Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu Pro Asn Gly Arg

65 70 75 80

Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn Asp Ser Gly Thr

85 90 95

Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala Gln Ile Lys Glu

100 105 110

Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg Ala Glu Val Pro

115 120 125

Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly Gln Phe Gln Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gly Gly Gly Gly Arg Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr

145 150 155 160

His Thr Ser Pro Pro Ser Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser

165 170 175

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

180 185 190

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

195 200 205

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

210 215 220

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

225 230 235 240

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

245 250 255

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

260 265 270

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

275 280 285

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

290 295 300

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

305 310 315 320

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

325 330 335

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

340 345 350

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

355 360 365

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

370 375 380

<210> 2

<211> 238

<212> PRT

<213> 人

<400> 2

Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr Gly

1 5 10 15

Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu Asp

20 25 30

Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile Ile

35 40 45

Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser Tyr

50 55 60

Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn Ala

65 70 75 80

Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr Arg

85 90 95

Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val Lys

100 105 110

Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val Asp

115 120 125

Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr Pro

130 135 140

Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser Gly

145 150 155 160

Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn Val

165 170 175

Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr Cys

180 185 190

Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu Val

195 200 205

Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr Gly Ser

210 215 220

Ser Glu Thr Val Arg Phe Gln Gly His His His His His His

225 230 235