一种具有神经保护作用的化合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明提供一种具有神经保护作用的化合物，同时还提供了该化合物的制备方 法及其医用用途，属于医药合成技术领域。
【背景技术】
[0002] 帕金森病（PD)是一种慢性中枢神经系统退化性失调。它会损害患者的肢体功能， 语言能力等，临床表现为休息性震颤、僵直、运动迟缓和姿势不稳定性与认知和情感障碍。 它的病因目前仍不明确，但其主要病理特征为黑质致密部中多巴胺能神经元的损失和被称 为路易体的胞浆内包含体的存在。
[0003] 6-羟基多巴胺（6-0HDA)是一种广泛地用于在实验动物中诱导帕金森综合征的化 学物质（Lane&Dunnett，2008)。6-0HDA经由多巴胺和去甲肾上腺素重吸收转运蛋白进入神 经元。因此，6-0HDA通常与选择性去甲肾上腺素重吸收抑制剂（比如地昔帕明）一起使 用以选择性地仅杀死多巴胺能神经元。在体外，多巴胺的氧化可导致6-0HDA的产生，所 以6-0HDA被认为是内源性毒素（Jellingeretal.，1995)。确实的证据表明6-0HDA产生活 性氧簇，并降低谷胱甘肽和过氧化物歧化酶的活性（Betarbetetal.,2002)。在脑内注射 6-0HDA之后，纹状体神经元在24小时内开始变性，并且在2-3天后纹状体多巴胺耗尽。
[0004] 盐酸他克林（"Cognex(益智胶囊）")，第一种FDA批准的用于阿尔茨海默病的药 物，是一种乙酞胆碱酷酶抑制剂（卡特勒（Cutler)和斯让麦克（Sramek),新英格兰医学 杂志（N.Engl.J.Med.) 328:808810, 1993)。然而，这种药物已经示出在阿尔茨海默病患者 中产生认知改善，并且最初具有主要的副作用，如肝脏毒性。第二种FDA批准的药物，多 奈呱齐（"安理申"），也是一种乙酞胆碱酷酶抑制药，它比他克林更有效，在于在阿尔茨 海默病患者中显示轻微的认知改善（巴尔纳（Barner)和格雷（Gray),药物治疗纪事（Ann. Pharmacotherapy) 32:70-77, 1998;罗杰斯（Rogers)和氣瑞德哈夫（Friedhoff),欧洲神经 心理学（Eur.NeuroPsych. )8:67-75, 1998)，但不被认为是治愈。因此，清楚的是，对于用 于阿尔茨海默病患者的更有效的治疗存在需要。
【发明内容】
[0005] 本发明目的在于提供了一种具有神经保护作用的化合物，对神经毒素损伤的神经 细胞系具有明显的修复作用。
[0006] 本发明公开了一种具有神经保护作用的化合物的制备方法，可以用于工业化生 产。
[0007] 本发明进一步公开了所述化合物在神经保护作用方面的药物应用。
[0008] 本发明提供的一种具有神经保护作用的化合物(简称为NNK0019)，具有如下结构 式：
化学命名为4, 6-二羟基-5-苯乙氧羰基-1，3苯二磺酸，分子式为C15H1401()S2,相对分 子质量为 418. 473g/mol。
[0009] 本发明所述的具有神经保护作用的化合物的制备方法，如下所述：
1) 以2, 6-二甲基苯甲酸和苯乙醇为原料以1 :(1.0~1. 5)比例混合，以二氯甲烷、 氯仿、乙酸乙酯、二甲基甲酞胺中之任意一种为溶剂，在〇°C回流温度条件下，搅拌6-12 小时。反应完毕后，将全部反应液过滤；滤液浓缩后，通过硅胶柱层析、浓缩、结晶得到 2, 6-二甲基苯甲酸苯乙醇酯； 2) 将所得的2, 6-二甲基苯甲酸苯乙醇酯溶解于氯仿或二氯甲烷中，室温搅拌，分批 加入1. 2当量的A1C13,室温搅拌，TLC检测，反应完全后，将反应液缓慢倾入水中，萃取 分离得到有机层，将有机层浓缩至干，通过硅胶柱层析或直接浓缩、结晶得2-羟基-6-甲 氧基苯甲酸苯乙醇酯； 3) 将所得到的2-羟基-6-甲氧基苯甲酸苯乙醇酯溶解于二氯甲烷或氯仿中，室温 搅拌，分批加入2~3当量的AIC13,室温搅拌，TLC检测，反应完全后，将反应液缓慢倾 入水中，萃取分离得到有机层，将有机层浓缩至干，通过硅胶柱层析或直接浓缩、结晶得 2, 6-二羟基苯甲酸苯乙醇酯； 4) 过量浓硫酸加入所得2, 6-二羟基苯甲酸苯乙酸酯中，不断搅拌使其充分反应，反应 完全后将反应液倾入大量水中，萃取分离得到有机层，将有机层浓缩至干，通过硅胶柱层 析或直接浓缩、结晶得4, 6-二羟基-5-苯乙氧羰基-1，3苯二磺酸。
[0010] 本发明的积极效果在于：提供一种新的化合物，具有神经保护作用，对神经毒素损 伤的神经细胞系具有明显的修复作用，可用于制备治疗该类疾病的药物。本发明化合物由 取代的芳香酸和芳香醇混合制备，原料成本低，制备方法简单，神经保护作用明显，对预防 和治疗帕金森病及老年痴呆病的效果也十分显著。
【附图说明】
[0011] 图1为NNK0019对6-0HDA损伤的DPC12细胞的存活率的影响，细胞由NNK0019 (10yM，20yM)预处理3h，而后加入100yM6-0HDA处理24h。数据均以对照组的百分比呈 现，相比对照组###P〈〇.001，相比模型组（100yM6-0HDA) *#p〈0. 001。
[0012] 图2为NNK0019对6-0HDA损伤的DPC12细胞的修复作用，细胞由NNK0019( 20yM) 预处理3h，而后加入100yM6-0HDA处理24h，control为空白组，model为模型组。
【具体实施方式】
[0013] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可 以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附后权利要求书限定的范 围。
[0014] 本发明指出一种具有所述化学式的化合物，具有明显神经保护作用，可在治疗或 预防老年痴呆和帕金森药物或保健品中应用，所述化合物制备方法如下： 实施例1 称取100mg2,6-二甲氧基苯甲酸，将其置于干燥的圆底烧瓶中，加入10mL无水CH2C12 搅拌；冰水浴使装置中的混合液温度降至〇°C，加入150mg二环己基碳二酞亚胺，搅拌50 分钟后加入0.06mL苯乙醇、3mg4-N，N-二甲基-4-胺基吡啶，室温搅拌，TLC检测，反应完 全后，直接过滤，母液浓缩后经硅胶柱层析（石油醚：氯仿-2:3)分离得到2, 6-二甲基苯 甲酸苯乙醇酯，收率89.9%。加入1011^〇12(：12，搅拌，分批加入3.3当量的41(：1 3，室温搅 拌，TLC检测，反应完全后，将反应液缓缓倾入20mL水中，萃取