一种新型细胞培养液制备方法与流程

文档序号:12411281阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种新型细胞培养液制备方法,其特征在于,包含以下步骤:

1)首先,进行100mg/mL Amp的配制:称量50gAmp置于500mL容量瓶中,其后加入80mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至500mL;用0.1μm厚度的滤膜过滤其中的除菌,用10个50ml的小瓶分装后于在-20℃的恒温下培养1至2个小时;

2)氨苄青霉素阳性液体培养基的配制;取胰蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl10g溶解于1000mL水中,进行分装成20个50ml的小瓶,然后在121℃的高温下灭菌20分钟;待温度降至40℃以下时,按照6μL/mL,加入氨卞青霉素贮存液,使其终浓度达到60μg/mL,即制备完成所述氨苄青霉素阳性液体培养基;

3)氨苄青霉素阳性固体培养基的配制:先按照上一步的步骤配制所述氨苄青霉素阳性液体培养基,然后在其中加入浓度为2.5g/100mL的琼脂粉,进行高压灭菌30分钟,然后待温度降至40℃以下时,按照6μL/mL加入氨苄青霉素贮存液,使终浓度达到60μg/mL,即制备完成所述氨苄青霉素阳性固体培养基;

4)将所述氨苄青霉素阳性液体培养基与所述氨苄青霉素阳性固体培养基进行混合,将第1)步制备所得100mg/mL Amp的加入,再溶解于180mL去离子水中,定容于500mL,用0.1μm厚度的滤膜过滤除菌,保存于-20℃待用。

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