1.一种鉴定落叶型棉花黄萎病菌的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)待测棉花黄萎病菌的分离、单孢纯化;
(2)将步骤(1)纯化后的黄萎病菌接种现有感病、耐病寄主品种,对待测菌株进行生物测定;
(3)利用特异引物对待测菌株进行分子检测,采用落叶型菌株特异引物D-1/D-2:CATGTTGCTCTGTTGACTGG/GACACGGTATCTTTGCTGAA,非落叶型菌株特异引物ND-1/ND-2:CAGGGGATACTGGTACGAGACG/(ATGAGTATTGCCGATAAGAACA对待测菌株进行PCR扩增;
(4)落叶型黄萎病菌的评价
(4-1)待测菌株人工接种耐病品种后20天内,棉苗出现典型的黄萎病症状并导致真叶脱落;
(4-2)待测菌株在感病对照上病情指数达到50时,在耐病品种上的发病率能达到50.0%以上,病情指数能达到耐病品种审定时的病情指数及以上;
(4-3)落叶型菌株特异引物D-1/D-2扩展出特异条带,非落叶型菌株特异引物ND-1/ND-2未扩展出特异条带,
满足以上三个条件的菌株为棉花黄萎病菌为落叶型菌株。
2.根据权利要求1所述的鉴定落叶型棉花黄萎病菌的方法,其特征在于,在步骤(2)中,寄主品种的黄萎病调查分级标准:0级,棉株健康,无病叶,生长正常;1级,棉株三分之一以下叶片表现病状;2级,棉株三分之一以上,三分之二以下叶片表现病状;3级,棉株三分之二以上叶片表现病状,未枯死;4级,棉株枯死,
病株率和病情指数按下面的公式进行计算:病株率=发病株数/总株数×100%,病情指数=∑(相应病级×相应病级病株数)/(总株数×4)×100。