一种糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒的制作方法

文档序号:11145889阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种糖肽类抗生素耐药基因检测并联探针,其特征在于:包括探针1~23,其对应的序列如SEQ ID NO.1~23所示。

2.一种糖肽类抗生素耐药基因检测基因芯片,其特征在于:包括固体相载体和权利要求1所述的探针组。

3.如权利要求2所述的糖肽类抗生素耐药基因检测基因芯片,其特征在于:所述固相载体为氨基修饰的玻璃基片。

4.一种糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求2或3所述的基因芯片。

5.如权利要求4所述的糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒,其特征在于:还包括糖肽类抗生素耐药靶基因扩增引物对,引物序列如SEQ ID NO.24~39所示。

6.如权利要求5所述的糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒,其特征在于:所述引物对的下游引物的5’端含有CY3荧光染料标记。

7.如权利要求4-6所述的糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒,其特征在于:还包括PCR反应体系、杂交缓冲液、洗涤液。

8.如权利要求7所述的糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒,其特征在于:PCR反应体系包括:50~150 ng/μL的扩增模板2 μL,Premix Taq 10 μL,浓度为10 μM的上、下游引物各1μL,双蒸水6 μL。

9.一种糖肽类抗生素耐药基因的检测方法,其特征在于:使用权利要求4至8任一项所述的糖肽类抗生素耐药基因检测试剂盒进行检测;先要进行实验结果可信度评估,只有当阳性和阴性质控对照的检测结果同时分为别阳性(+)和阴性(-),才认为该组检测结果可信;当检测样本的任意一个耐药基因3个探针显示的检测结果一致时可以判断样品是否感染糖肽类抗生素耐药基因;当检测样本任意耐药基因3个探针显示的检测结果不一致时,不能判断该待测样品为阳性或阴性,建议使用该检测试剂盒重新检测或者使用现有其它检测方法进一步验证。

10.如权利要求9所述的糖肽类抗生素耐药基因的检测方法,其特征在于:PCR扩增反应程序为95℃ 5 min;95℃10 s、40℃ 30 s、72℃ 90 s、30个循环;72℃ 10 min。

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