一种表达vgb基因的重组谷氨酸棒杆菌及其应用的制作方法

文档序号:17637989发布日期:2019-05-11 00:29阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一株重组谷氨酸棒杆菌,其特征在于,共表达来自于苏云金芽孢杆菌的异亮氨酸双加氧酶基因和透明颤菌血红蛋白基因,以L-异亮氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌乳糖发酵亚种SN01为宿主,以pJYW-4为表达载体,采用tacM启动子。

2.构建权利要求1所述重组谷氨酸棒杆菌的方法,其特征在于,将来自于苏云金芽孢杆菌的异亮氨酸双加氧酶基因ido和来自于透明颤菌的血红蛋白基因vgb共表达,构建谷氨酸棒杆菌表达载体pJYW-4-ido-vgb,将该表达载体pJYW-4-ido-vgb电转入谷氨酸棒杆菌SN01中,获得重组谷氨酸棒杆菌SN01/pJYW-4-ido-vgb。

3.利用权利要求1所述的重组谷氨酸棒杆菌发酵生产4-羟基异亮氨酸的方法,其特征在于,以葡萄糖或其他谷氨酸棒杆菌能够利用的底物,作为生产4-羟基异亮氨酸的底物。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,发酵培养基组成为:葡萄糖140g/L,(NH4)2SO4 20g/L,玉米浆10g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L,FeSO4 0.5g/L,CaCO3 20g/L,pH 7.2。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,发酵条件为28~32℃、180~200rpm。

6.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,种子培养基组成为:葡萄糖25g/L,(NH4)2SO4 0.5g/L,尿素1.25g/L,玉米浆40g/L,KH2PO4 1g/L,MgSO4 0.5g/L,pH 7.0;种子培养温度为30℃,使用回旋式摇床150rpm培养15-24h。

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