本发明涉及多肽提取技术领域，具体涉及一种灵芝多肽的提取方法。
背景技术：
灵芝属于自然界分布的一类真菌生物，是传统名贵中药材之一，药食兼用。古今药理与临床研究均证明，灵芝确有防病治病、延年益寿之功效。现代药理学研究发现，灵芝中含有灵芝多糖、灵芝酸、核苷酸、超氧化物歧化酶、生物类黄酮(又称维他命P)、维他命B5、维他命C、维他命E、蛋白质、氨基酸、微量元素(钙、钾、锌、铁、铬、硒等)、胡萝卜素等，中医理论中，灵芝入五脏，补全身之气，所以心、肺、肝、脾、肾脏虚弱，均可服之；临床医学表明，灵芝具有广泛的药理作用，如抗肿瘤作用、免疫调节作用、抗放射与抗化疗作用，镇静作用、强心及抗心肌缺血作用、调节血脂作用、降血糖作用、平喘作用、保肝作用、抗缺氧作用和抗衰老等作用。
目前市面上的灵芝制品可根据不同用途制成各种产品，供药用的可制成糖浆、片剂、针剂、冲剂、酒剂等，供保健食品用的可制成各种饮料、口服液、袋泡茶等。灵芝的有效成分大多能溶于热水，其中灵芝酸、皂甙、麦角甾醇等成分在热水中溶解度较低，而在乙醇中的溶解度却很高，而乙醇提取的费用高，也并不能保证灵芝有效成分的全部保留；灵芝多肽受热易分解为多糖和氨基酸，导致对药效有所影响。
因此进行灵芝的综合利用和深度开发，实现灵芝中多种活性成分的综合开发，对灵芝产业发展有积极地意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种灵芝多肽的提取方法，用以解决灵芝多肽提取率低、难以大规模生产，以及灵芝多肽产品中灵芝多肽含量较低的问题。
为实现上述目的，本发明提供了一种灵芝多肽的提取方法。具体地，所述提取方法包括以下步骤：
一、将灵芝清洗2～3次后切成长宽高均为0.8～1.2cm的碎块，转移至破壁机进行破壁，制得灵芝粉；
二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮2～3次，每次2h，合并煎煮液，静置10～12h；
三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入碱溶液调节pH值至7，加入酶解剂酶解，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液；
五、将灵芝多肽灭活酶解液静置2～3h后，利用过滤器过滤2～3次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为11～13°Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩，收集干粉制得灵芝多肽。
优选地，所述步骤一中破壁条件为45000～85000r/min，4～8min。
优选地，所述步骤四中碱溶液为NaOH溶液。
优选地，所述步骤四中酶解剂为入木瓜蛋白酶。
优选地，所述步骤四中抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.004-0.009。
优选地，所述步骤四中酶解时间为4～6h。
优选地，所述步骤五中过滤器为桶式过滤器或两级板框过滤器。
优选地，所述步骤七中所得灵芝多肽的干粉含水量为8～10％。
本发明灵芝多肽的提取方法与现有技术相比具有如下优点：
1、本发明的提取方法，将优质灵芝经酶降解萃取后制成，其产品无需搅拌即可迅速溶于水，溶解后为褐色透明液体，无任何杂质和沉淀物，制得的灵芝多肽分子量均在1000道尔顿以下，具有极高的消化吸收性和利用率，可以有效的保证人体对灵芝中营养素的补充。
2、本发明的提取方法，灵芝多肽提取率高，操作简单，反应条件温和，适用于灵芝多肽大规模生产应用。
3、本发明的提取方法提取出的灵芝多肽，不含任何化学成分与激素，对人体没有任何毒副作用，含水量为8～10％，纯净度高。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
本实施例的灵芝多肽的提取方法，按以下步骤制备：
步骤一、将灵芝清洗2次后切成长宽高均为1.1cm的碎块，转移至破壁机85000r/min破壁5min，制得灵芝粉；
步骤二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮3次，每次2h，合并煎煮液，静置12h；
步骤三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
步骤四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入NaOH溶液调节pH值至7，加入木瓜蛋白酶酶解6h，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液，其中，抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.006；
步骤五、将灵芝多肽灭活酶解液静置3h后，利用桶式过滤器或两级板框过滤器过滤2次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
步骤六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为13°Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
步骤七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩至灵芝多肽干粉含水量为9％，收集干粉，即制得灵芝多肽。经测定，所得灵芝多肽的纯度为87.3％。
实施例2
本实施例的灵芝多肽的提取方法，按以下步骤制备：
步骤一、将灵芝清洗2次后切成长宽高均为1cm的碎块，转移至破壁机45000r/min破壁7min，制得灵芝粉；
步骤二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮3次，每次2h，合并煎煮液，静置11h；
步骤三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
步骤四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入NaOH溶液调节pH值至7，加入木瓜蛋白酶酶解5h，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液，其中，抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.004；
步骤五、将灵芝多肽灭活酶解液静置3h后，利用桶式过滤器或两级板框过滤器过滤2次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
步骤六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为12°Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
步骤七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩至灵芝多肽干粉含水量为8％，收集干粉，即制得灵芝多肽。经测定，所得灵芝多肽的纯度为89.7％。
实施例3
本实施例的灵芝多肽的提取方法，按以下步骤制备：
步骤一、将灵芝清洗3次后切成长宽高均为1.2cm的碎块，转移至破壁机6000r/min破壁5min，制得灵芝粉；
步骤二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮2次，每次2h，合并煎煮液，静置10.5h；
步骤三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
步骤四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入NaOH溶液调节pH值至7，加入木瓜蛋白酶酶解4.5h，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液，其中，抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.008；
步骤五、将灵芝多肽灭活酶解液静置2h后，利用桶式过滤器或两级板框过滤器过滤3次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
步骤六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为13°Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
步骤七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩至灵芝多肽干粉含水量为9.5％，收集干粉，即制得灵芝多肽。经测定，所得灵芝多肽的纯度为88.3％。
实施例4
本实施例的灵芝多肽的提取方法，按以下步骤制备：
步骤一、将灵芝清洗2次后切成长宽高均为0.9cm的碎块，转移至破壁机75000r/min破壁8min，制得灵芝粉；
步骤二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮3次，每次2h，合并煎煮液，静置12h；
步骤三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
步骤四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入NaOH溶液调节pH值至7，加入木瓜蛋白酶酶解4h，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液，其中，抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.009；
步骤五、将灵芝多肽灭活酶解液静置2后，利用桶式过滤器或两级板框过滤器过滤3次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
步骤六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为11° Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
步骤七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩至灵芝多肽干粉含水量为8.5％，收集干粉，即制得灵芝多肽。经测定，所得灵芝多肽的纯度为91.9％。
实施例5
本实施例的灵芝多肽的提取方法，按以下步骤制备：
步骤一、将灵芝清洗2次后切成长宽高均为0.8cm的碎块，转移至破壁机80000r/min破壁4min，制得灵芝粉；
步骤二、将灵芝粉置于夹层反应罐中，升温至上部100℃下部120℃，搅拌条件下煎煮3次，每次2h，合并煎煮液，静置10h；
步骤三、将煎煮液置于真空抽提罐中，45℃条件下真空抽滤，制得抽提液；
步骤四、将抽提液转移至水解罐中，100℃灭菌10min，迅速降温至60℃，加入NaOH溶液调节pH值至7，加入木瓜蛋白酶酶解5.5h，酶解结束后升温至90℃恒温15min灭酶，制得灵芝多肽灭活酶解液，其中，抽提液与木瓜蛋白酶的体积质量比为1：0.0065；
步骤五、将灵芝多肽灭活酶解液静置3h后，利用桶式过滤器或两级板框过滤器过滤3次，弃滤渣，然后继续循环过滤1h；
步骤六、将过滤后的灵芝多肽灭活酶解液真空浓缩至浓度为11° Bé，制得灵芝多肽浓缩液；
步骤七、将灵芝多肽浓缩液转移至喷雾干燥机，进风温度100℃，出风温度85℃进行浓缩至灵芝多肽干粉含水量为10％，收集干粉，即制得灵芝多肽。经测定，所得灵芝多肽的纯度为87.2％。
通过以上实施例可知，本发明的方法操作简便，适于大规模生产，且采用本发明的方法提取得到的灵芝多肽纯度高。
灵芝多肽不同于一般药物对某种疾病而起治疗作用，亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化，而是在整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活力，调节人体新陈代谢机能，提高自身免疫能力，促使全部的内脏或器官机能正常化。对胃癌、食道癌、肺癌、结肠癌、膀胱癌、肾癌、前列腺癌、卵巢癌、子宫癌等有一定的辅助治疗效果，其特点如下：提高肿瘤患者对放、化疗的耐受性；减轻放、化疗引起的白细胞减少、食欲减退等副作用；改善肿瘤患者的恶病质，使体质增强；提高肿瘤患者的免疫功能，增强机体的抗肿瘤免疫力。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。