1.一种从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤如下:
1)取新鲜马血,加入混合缓冲提取液,在4℃冰浴、100-200rpm的转速下搅拌混合15-20min,获得第一混合液;
2)将第一混合液在0-4℃下静置12-24小时,获得第二混合液;
3)将第二混合液在4℃冰浴、300-400rpm的转速下匀浆8-12min,获得第三混合液;
4)将第三混合液在4℃、7500-8000rpm的条件下冷冻离心23-28min,取上清液,获得第四混合液;
5)采用Procainamide亲和层析法对第四混合液进行纯化处理,获得初次纯化物;
6)采用SephadexG-200凝胶柱对初次纯化物进行纯化处理,获得最终纯化物;
7)将最终纯化物浓缩,干燥,即得产品。
2.根据权利要求1所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤1)中,所述混合缓冲提取液的加入量为所用的新鲜马血体积的3-5倍。
3.根据权利要求2所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤1)中,所述混合缓冲提取液中含有质量百分比为0.5-0.8%的聚乙二醇辛基苯基醚,余量为磷酸盐缓冲液。
4.根据权利要求3所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤1)中,所述混合缓冲提取液的pH为7.2-7.6。
5.根据权利要求1-4任一所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤5)中,体系pH为7.3。
6.根据权利要求1-4任一所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤6)中,体系pH为7.5。
7.根据权利要求1-4任一所述的从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法,其特征在于,步骤7)中,采用透析法于4℃下浓缩最终纯化物,然后进行真空冷冻干燥。