本发明涉及一种新的提取物，特别涉及一种从怀槐中提取的化合物及其提取方法和应用，属于医药技术领域。
背景技术：
怀槐(maackiaamurensisrupr.etmaxim.)，为豆科马鞍树属植物，又名山槐，高丽槐，朝鲜槐，其分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山东等地，俄罗斯远东地区和朝鲜也有分布。民间将其树皮作为祛风湿、镇痛、消炎和止血药，用来治疗胆囊炎、瘀血肿痛、风湿性关节炎、溃疡等症。国内有关怀槐的化学成分及药理活性研究较少。
现有技术中有用提取溶媒提取怀槐的心材、根皮、茎皮、枝皮、叶、叶梗、花、果实和种子；过滤该提取液并浓缩；浓缩液通过大孔吸附树脂，以不同浓度的甲醇或乙醇水溶液洗脱；收集洗脱液并浓缩至干，获得怀槐总黄酮提取物。专利cn101434592a公开了从怀槐中提取的7种新化合物，分别为怀槐黄酮a(maackiaflavanonea)、怀槐黄酮b(maackiaflavanoneb)、怀槐酮素(maackiapentone)、怀槐紫檀素a(maackiapterocarpana)、怀槐紫檀素b(maackiapterocarpanb)、怀槐异黄酮苷(maackiaisoflavonoside)和怀槐黄烷(8-3,3-dimethylallyl-5-hydroxy-7-methoxychromone)，是研究怀槐活性成分的很大进步，但这不一定就是全部，对于怀槐活性成分的进一步研究也很有必要。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种新的从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法。
本发明的另一目的是提供该种化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明采取的技术方案为：
一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物，其结构式为:
上述化合物的提取方法，包括步骤如下：
(1)将怀槐的干燥树皮用乙醇加热回流提取，并将提取液浓缩成无醇味的浸膏；
(2)将得到的浸膏用热水混悬，然后加入盐酸溶液调至ph＝2，用乙醚萃取，将乙醚萃取后的水层先用氨水碱化至ph＝10，再用二氯甲烷萃取，将二氯甲烷萃取后的水层先用碳酸钾饱和，再用二氯甲烷萃取至dragendorff′s(德雷根道尔夫试剂)反应呈阴性，将两次二氯甲烷萃取后的二氯甲烷萃取液层合并，减压干燥得二氯甲烷萃取物；
(3)将二氯甲烷萃取物用少量乙醇在加热下溶解，加入与乙醇等体积的硅胶混合均匀，干燥后研细得流动性很好的拌样硅胶粉；
(4)将拌样硅胶粉干法上样于硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇洗脱液洗脱，按洗出顺序每5个柱体积的洗脱液为1个流分，第2个流分静置后析出结晶，抽滤，将结晶用95％乙醇洗涤至呈白色粉末，得化合物，将滤液及洗涤液合并浓缩，经葡聚糖凝胶sephadexlh-20柱用甲醇-水层析纯化，也得化合物。
上述方法中，步骤(1)所述的乙醇为95％(v/v)乙醇，加热回流提取3次。
步骤(2)所述的盐酸溶液质量浓度为10％，氨水质量浓度为25％；所述的乙醚萃取、二氯甲烷萃取均为一次萃取3遍。
步骤(3)所述的硅胶为100-200目。
步骤(4)所述的硅胶柱硅胶粒度200-300目，体积量为拌样硅胶量的7～10倍，柱体径高比为1∶5～7；洗脱液二氯甲烷、甲醇体积比为17∶1；所述的甲醇-水，均为甲醇与水体积比1:1。
本发明提取的化合物为美迪紫檀素-3-o-β-d-葡萄糖苷(medicarpin-3-o-β-d-glucoside，mdcg)，是一种紫檀烷苷；提取方法简便易行，所得化合物纯度高(高效液相色谱面积归一化法测得纯度为99.0％)。本发明化合物具有显著的抗肿瘤作用，特别是对肝癌hepg2细胞的抑瘤效果显著，可应用在制备抗肿瘤药物中。
附图说明
图1为本发明提取化合物的13cnmr谱图；
图2为本发明提取化合物的1hnmr谱图；
图3为本发明提取化合物的hplc色谱图；色谱条件：
固定相：十八烷基硅烷键和硅胶；
流动相：甲醇-0.1％磷酸水溶液，0～30min，50％甲醇；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：310nm；进样量：l0μl。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案做进一步具体的说明。
实施例1
提取方法：
(1)将怀槐的干燥树皮用95％(v/v)乙醇加热回流提取3次，将提取液浓缩成无醇味的浸膏；
(2)将浸膏用热水混悬，加10％(质量浓度)的盐酸至ph＝2，用乙醚萃取3次，得到的水层用25％(质量浓度)的氨水碱化至ph＝10，再用二氯甲烷萃取3次，萃取后水层以碳酸钾饱和，再用二氯甲烷萃取至dragendorff′s反应阴性，将两次二氯甲烷萃取的二氯甲烷萃取液合并，减压干燥得二氯甲烷萃取物；
(3)将二氯甲烷萃取物用少量乙醇在加热下溶解，加入与乙醇等体积硅胶(100-200目)混合均匀，干燥后研细得流动性很好的拌样硅胶粉；
(4)将拌样硅胶粉干法上样于硅胶柱(硅胶粒度200-300目，体积量为拌样硅胶量的7～10倍，柱体径高比约为1∶5～7)，以二氯甲烷-甲醇(体积比17∶1)洗脱，按洗出顺序每5个柱体积的洗脱液为1个流分，第2个流分静置后析出结晶，抽滤，将结晶以适量95％乙醇洗涤至呈白色粉末，得化合物，将滤液及洗液合并浓缩，经sephadexlh-20柱甲醇-水(体积比1∶1)纯化，也得化合物。
该化合物成分的核磁共振氢谱、碳谱数据及图谱如图1、图2及表1所示，其结构式为：
表1mdcg的nmr(600mhz)数据(溶剂dmso-d6，δppm，j＝hz)
提取的化合物mdcg对肝癌hepg2肿瘤细胞抑制作用的研究
取对数生长期的hepg2肝癌肿瘤细胞，倾去上清液，以pbs洗2次，加入适量胰酶－edta消化液，消化至细胞边缘收缩，倒掉消化液并以pbs洗去残余的消化液，加入6mlpbs以吸管轻轻吹打使细胞脱落并均匀打散，1000rpm离心5min，弃去上清液，以6ml含10％(m/m)小牛血清的rpmi-1640培养液混悬沉淀的细胞，细胞计数后根据细胞种类不同调至含细胞20000-100000个/ml备用。
每孔加入100μl上述细胞悬液，置37℃5％(v/v)co2培养箱中培养。细胞贴壁后，弃去上清液，每孔加入不同浓度梯度的mdcg样品各50μl，然后每孔加入50μlrpmi-1640培养液，以50μlpbs和50μl培养液作为对照组，培养48h。弃去上清液，每孔加入50μlpbs和10μl5mg/ml的mtt，置37℃5％(v/v)co2培养箱中培养4h后，弃去上清液，每孔加入150μldmso，振荡10min后在酶标仪上以检测波长570nm检测。按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率％＝(1-实验组平均od值/对照组平均od值)×100％。
实验结果见表2。
表2mdcg成分对hepg2肿瘤细胞体外抑制作用(n＝4)
从怀槐mdcg成分对肝癌hepg2细胞的抑瘤效果上分析，样品最高抑瘤率达到87.46％，对肝癌hepg2细胞的抑瘤效果较佳，适合进一步开发成抗肝癌的产品。
以上是结合具体实施例对本发明的详细介绍，本发明的保护范围不限于此。