本发明涉及利用化学合成的甘草酸和半乳糖醛酸甘草酸(英文：galacturoglycyrrhizicacid，日文：ガラクツログリチルリチン酸)的制造方法以及该制造方法中使用的中间体。
背景技术：
甘草为在中药、甜味剂等中大量使用的生药，作为其主要成分的甘草酸为具有肝损伤治疗作用等的化合物。甘草酸在日本药典中作为生药甘草、配合有甘草的中药中的定量成分，规定其含量。另外，作为标准物质，市售甘草酸(gly)，规定利用hplc的分析作为定量方法，通过分析技术的发展近年可知，在hplc色谱中，迄今视为单一峰的甘草酸的峰中含有不明的化合物(化合物x)。进而，对于该化合物x进行结构解析，鉴定为半乳糖醛酸甘草酸(gga)(非专利文献1)。由该原委，在第17次修改日本药典中，修改甘草中含有的甘草酸的定量方法，要求将甘草酸和半乳糖醛酸甘草酸分离后、将甘草酸含量定量。因此，进行分析时，需要高纯度的甘草酸和半乳糖醛酸甘草酸的标准物质。
但是，甘草酸和半乳糖醛酸甘草酸，结构极其类似，因此由甘草将各自高纯度地分离·纯化是非常困难的。因此，期待分别合成甘草酸和半乳糖醛酸甘草酸的方法。但是，迄今没有报告半乳糖醛酸甘草酸的合成方法。另外，提出了一些甘草酸、其类似物的合成方法，但是任意一种方法，工序都复杂或者收率低等而不实用(专利文献1、非专利文献2及3)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2009-114133号公报
非专利文献
非专利文献1：医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス(phamaceuticalandmedicaldeviceregulatryscience)、vol.47,no.8,600-608(2016)
非专利文献2：chem.pharm.bull.,39(9),2333-2339(1991)
非专利文献3：广冈素子等、药学杂志、109(.8)、544-559(1989)
技术实现要素：
发明要解决的问题
因此，期待提供能够简便且高收率地制造高纯度的甘草酸或半乳糖醛酸甘草酸的合成方法。
用于解决问题的方案
本发明人等为了解决上述问题而深入研究，结果发现，将甘草次酸作为起始原料，使用环氧化物的糖基给予体，将其3位羟基进行糖基化，接着在2’位进行选择性的半乳糖基化后，经过脱保护，在最终工序进行伯羟基的选择性氧化，由此可以合成半乳糖醛酸甘草酸。另外发现，通过替代半乳糖基化而进行糖基化，利用同样的制法，可以以与以往相比少的工序高收率地制造甘草酸，从而完成了本发明。
即，本发明为以下的式(3)所示的化合物，
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基)。
另外，本发明为以下的式(5)所示的化合物，
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基，r2表示乙酰基(acetyl)、丙酰基、新戊酰基或苯甲酰基，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)。
另外，本发明为以下的式(8)所示的化合物的制造方法，其包括下述工序：
使以下的式(1)所示的化合物与以下的式(2)所示的化合物反应而得到以下的式(3)所示的化合物的工序；
使式(3)所示的化合物与以下的式(4)所示的化合物反应而得到以下的式(5)所示的化合物的工序；
对式(5)所示的化合物的r2进行脱保护而得到以下的式(6)所示的化合物的工序；
对式(6)所示的化合物的r1进行脱保护而得到以下的式(7)所示的化合物的工序；和
将式(7)所示的化合物氧化的工序，
(式中，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基)
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基)
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基)
(式中，r2表示乙酰基、丙酰基、新戊酰基或苯甲酰基，sph表示硫基苯基，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基，r2表示乙酰基、丙酰基、新戊酰基或苯甲酰基，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)
(式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)
(式中，波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)。
发明的效果
本发明第一次提供半乳糖醛酸甘草酸的合成方法。另外，根据本发明，能够以简便的工序、高收率地制造高纯度的甘草酸或半乳糖醛酸甘草酸。
具体实施方式
本发明的制造方法的全部方案如以下所示。
式中，r1表示苄基、硝基苄基或甲氧基苄基。它们之中优选为苄基。r2表示乙酰基、丙酰基、新戊酰基或苯甲酰基，它们之中，优选为乙酰基。波形线表示能够形成r或s中的任意一种构型)。
(i)化合物(1-i)的合成；
通过将甘草次酸(化合物(1’))进行苄基化，得到化合物(1-i)的甘草次酸苄酯。甘草次酸的苄基化，可以使用以苄基溴为代表的卤化苄基、2,2,2-三氯乙酰亚胺苄酯等公知的苄基化剂进行。具体而言，例如将甘草次酸和烃钠溶解于二甲基甲酰胺溶剂中，加入苄基溴，由此可以得到甘草次酸苄酯。优选在反应温度60℃～100℃、进而80℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(ii)化合物(2-i)的合成；
通过将三-o-苄基-d-葡萄烯糖(化合物(2’-i))进行环氧化，得到化合物(2-i)的环氧化物。环氧化可以使用公知的环氧化反应，例如可以使由过硫酸氢钾制剂(oxone)、丙酮、碳酸氢钠制造的二甲基双环氧乙烷作用于三-o-苄基-d-葡萄烯糖来进行。具体而言，在三-o-苄基-d-葡萄烯糖的二氯甲烷溶液中加入丙酮和饱和碳酸氢钠水溶液并进行冷却，将溶解于水的过硫酸氢钾制剂滴加到该液体进行反应。优选在反应温度-20℃～10℃、特别是0℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(iii)化合物(3-i)的合成；
作为糖基给予体，使用化合物(2-i)，将甘草次酸苄酯(化合物(1-i))进行糖基化，由此得到化合物(3-i)。糖基化可以通过公知的糖基化反应进行，例如通过使用氯化锌、溴化锌、三氟甲磺酸锌等活化剂，使甘草次酸苄酯与化合物(2-i)反应，生成化合物(3-i)。具体而言，将甘草次酸苄酯和化合物(2-i)溶解于四氢呋喃，冷却后滴加氯化锌的二乙基醚溶液进行反应。优选在反应温度-80℃～-40℃、特别是-60℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(iv)化合物(5-i)的合成；
通过使化合物(3-i)与化合物(4-i)反应，得到化合物(5-i)。化合物(3-i)与化合物(4-i)的反应，可以通过公知的糖基化或半乳糖基化反应进行，例如通过用n-碘代丁二酰亚胺(nis)和三氟甲磺酸(tfoh)使化合物(4-i)活化、与化合物(3-i)反应来生成化合物(5-i)。优选在反应温度-80℃～-40℃、特别是-60℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(v)化合物(6-i)的合成；
通过对化合物(5-i)进行脱乙酰基化，得到化合物(6-i)。脱乙酰基化可以使用公知的乙酰基的脱保护方法，例如可以通过使用甲醇中甲醇钠的方法进行。具体而言，将化合物(5-i)溶解于二氯甲烷和甲醇，向其中添加甲醇钠的甲醇溶液进行反应。优选在反应温度0℃～40℃、特别是20℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(vi)化合物(7)的合成；
通过对化合物(6-i)进行脱苄基化，得到化合物(7)。脱苄基化可以使用公知的苄基的脱保护方法，例如可以在氢气氛下使氢氧化钯碳作用于化合物(6-i)后，用氢氧化钠水溶液进行处理来进行。优选在反应温度0℃～40℃、特别是20℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
(vii)化合物(8)的合成；
通过将化合物(7)中的伯羟基选择性地氧化，得到化合物(8)的甘草酸或半乳糖醛酸甘草酸。选择性氧化例如可以通过使用2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧化物自由基(tempo)、2-氮杂金刚烷-n-氧化物(azado)、2-碘酰基苯甲酸(ibx)、二乙酸碘苯(pida)等的氧化反应进行。优选在反应温度0℃～30℃、特别是20℃下进行反应。反应结束后根据需要可以进行过滤、浓缩、利用色谱的纯化等操作。
如以上所述，可以将甘草次酸作为起始原料，合成化合物(8)的甘草酸或半乳糖醛酸甘草酸。作为该合成方法中的中间体的化合物(3)、(5)和(6)都为新型化合物。
半乳糖醛酸甘草酸(化合物(8a))的合成，
在上述的合成方法中，作为化合物(4-i)，使用化合物(4a-i)苯基2,3,4,6-四-o-乙酰基-1-硫代-β-d-吡喃半乳糖苷，将化合物(3-i)进行半乳糖基化而得到化合物(5a-i)，进行脱乙酰基化、脱苄基化后，进行选择性氧化反应，由此可以得到半乳糖醛酸甘草酸(化合物(8a))。其合成方案如以下所示。
甘草酸(化合物(8b))的合成，
上述的合成方法中，作为化合物(4-i)，使用化合物(4b-i)苯基2,3,4,6-四-o-乙酰基-1-硫代-β-d-吡喃葡萄糖苷，将化合物(3-i)进行糖基化而得到化合物(5b-i)，进行脱乙酰基化、脱苄基化后，进行选择性氧化反应，由此可以得到甘草酸(化合物(8b))。合成方案如以下所示。
[实施例]
接着通过实施例对于本发明进行更详细说明，但是本发明不被这些实施例任何限制。
实施例1
半乳糖醛酸甘草酸的制造：
(1-i)甘草次酸苄酯的合成
将甘草次酸(化合物(1’))、4.74g、10.1毫摩尔)和碳酸氢钠(3.39g、40.4毫摩尔)溶解于二甲基甲酰胺(25ml)，加入苄基溴(3.60ml、30.3毫摩尔)，在80℃下搅拌2小时。冷却到室温后，加入水和乙酸乙酯。水层用己烷:乙酸乙酯＝4:1萃取，有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。将硫酸钠过滤去除，将所得到的滤液减压浓缩。所得到的残渣用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯＝5:1→3:1)纯化，以白色粉末形式得到目标的化合物(1-i)(mw560.81、5.59g、9.97毫摩尔)。化合物(1)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.69(1h,d,j＝11.5hz),0.73(3h,s),0.80(3h,s),0.94-1.02(2h,m),1.00(3h,s),1.11(3h,s),1.13(3h,s),1.16(3h,s),1.16-1.20(1h,m),1.35(3h,s),1.23-1.49(6h,m),1.55-1.70(5h,m),1.81(1h,dt,j＝4.5,13.7hz),1.93(1h,ddd,j＝2.8,4.3,13.7),1.97-2.07(3h,m),2.32(1h,s),2.79(1h,td,j＝3.6,13.6hz),3.22(1h,td,j＝5.3,11.0hz),5.09(1h,d,j＝12.2hz),5.20(1h,d,j＝12.2hz),5.55(1h,s),7.30-7.41(5h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:15.58(ch3),16.38(ch3),17.48(ch2),18.66(ch3),23.35(ch3),26.39(ch2),26.46(ch2),27.30(ch2),28.10(ch3),28.29(ch3),28.41(ch3),31.16(ch2),31.77(c),32.76(ch2),37.06(c),37.64(ch2),39.13(ch2),39.13(c),41.06(ch2),43.16(c),43.99(c),45.34(c),48.20(ch),54.93(ch),61.78(ch),66.22(ch2),78.76(ch),128.24(ch×2),128.30(ch),128.52(ch),128.61(ch×2),136.12(c),169.02(c),176.21(c),200.16(c).
hr-esi-ms:m/z561.3931[m+h]+(计算值(calcd.for)c37h53o4；561.3938).
ir(kbr)cm-1:3447,2948,1729,1658.
[α]d15+147.6(c0.3,chcl3).
(ii)三-o-苄基-d-葡萄烯糖的环氧化
在三-o-苄基-d-葡萄烯糖(化合物(2’-i)、3.63g、8.72毫摩尔)的二氯甲烷(70ml)溶液加入丙酮(7ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(120ml)，冰冷却至0℃。将过硫酸氢钾制剂(10.72g、17.44毫摩尔)溶解于水(80ml)，用15分钟滴加到反应液。在0℃下搅拌30分钟，升温至室温的同时搅拌1小时。将反应液用二氯甲烷萃取，用饱和食盐水洗涤后，用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除后，将滤液减压浓缩，以无色晶体形式得到目标的化合物(2-i)(mw432.53、3.75g、8.67毫摩尔)。化合物(2-i)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:3.06(1h,d,j＝2.4hz),3.63-3.69(2h,m),3.72-3.79(2h,m),3.97(1h,dd,j＝1.0,7.9hz),4.53(1h,d,j＝12.0hz),4.58(1h,d,j＝11.0hz),4.62(1h,d,j＝12.0hz),4.69(1h,d,j＝11.5hz),4.78-4.83(2h,m),4.99(1h,d,j＝1.7hz),7.15-7.19(2h,m),7.24-7.41(13h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:52.55(ch),68.18(ch2),69.40(ch),72.26(ch2),73.55(ch2),74.20(ch),74.56(ch2),77.52(ch),78.93(ch),127.67(ch),127.70(ch),127.81(ch×4),127.87(ch×2),127.99(ch),128.34(ch×2),128.38(ch×2),128.56(ch×2),137.49(c),137.91(c),138.15(c).
hr-esi-ms:m/z487.2087[m+meoh+na]+(计算值c28h32o6na；487.2091).
ir(kbr)cm-1:3027,2897,2361,1452.
(iii)甘草次酸苄酯的糖基化
将化合物(1-i)(3.62g、6.45毫摩尔)和化合物(2-i)(3.63g、8.39毫摩尔)溶解于四氢呋喃(13ml)，冷却至-78℃。向反应液用15分钟滴加氯化锌的二乙基醚溶液(1.0摩尔/l、16.8ml)。将反应液用4小时缓慢升温至室温的同时进行搅拌。向反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除后，进行减压浓缩。所得到的残渣用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯＝4:1)纯化，以白色粉末形式得到目标的化合物(3-i)(mw993.31、4.99g、5.02毫摩尔)。化合物(3-i)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.71(1h,d,j＝11.2hz),0.73(3h,s),0.86(3h,s),0.93-1.04(2h,m),1.02(3h,s),1.11(3h,s),1.15(3h,s),1.16(3h,s),1.13-1.19(1h,m),1.24-1.48(6h,m),1.33(3h,s),1.54-1.67(3h,m),1.76-1.88(2h,m),1.90-2.06(5h,m),2.28-2.31(2h,m),2.81(1h,td,j＝3.4,13.6hz),3.19(1h,dd,j＝4.5,11.7hz),3.45-3.50(1h,m),3.52-3.65(4h,m),3.71(1h,dd,j＝1.9,10.7hz),4.32(1h,dd,j＝7.4hz),4.54(1h,d,j＝6.2hz),4.56(1h,d,j＝4.6hz),4.60(1h,d,j＝12.4hz),4.82(1h,d,j＝3.4hz),4.84(1h,d,j＝3.1hz),4.94(1h,d,j＝11.3hz),5.10(1h,d,j＝12.2hz),5.20(1h,d,j＝12.2hz),5.56(1h,s),7.19-7.22(2h,m),7.27-7.41(18h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:16.78(ch3),16.70(ch3),17.35(ch2),18.67(ch3),23.32(ch3),25.99(ch2),26.38(ch2),26.45(ch2),28.22(ch3),28.30(ch3),28.40(ch3),31.16(ch2),31.77(c),32.74(ch2),36.79(c),37.64(ch2),39.16(ch2),39.40(c),41.06(ch2),43.12(c),43.99(c),45.35(c),48.19(ch),55.21(ch),61.77(ch),66.22(ch2),69.05(ch2),73.44(ch2),75.02(ch2),75.10(ch),75.18(ch2),75.49(ch),77.73(ch),84.72(ch),89.19(ch),104.84(ch),127.59(ch),127.66(ch×3),127.78(ch),127.87(ch×2)128.03(ch×2),128.25(ch×2),128.30(ch),128.40(ch×6),128.52(ch),128.61(ch×2),136.12(c),138.08(c),138.19(c),138.72(c),168.94(c),176.21(c),200.04(c).
hr-esi-ms:m/z1015.5687[m+na]+(计算值c64h80o9na；1015.5695).
ir(kbr)cm-1:2947,2361,1728,1659.
[α]d20+80.1(c0.1,chcl3).
(iv)化合物(3-i)的半乳糖基化
将化合物(3-i)(1.39g、1.40毫摩尔)和化合物(4a-i)(苯基2,3,4,6-四-o-乙酰基-1-硫代-β-d-吡喃半乳糖苷、1.83g、4.15毫摩尔)溶解于二氯甲烷(50ml)，加入n-碘代丁二酰亚胺(0.95g、4.22毫摩尔)，冷却至-60℃。将三氟甲磺酸(12.4μl、0.14毫摩尔)的二氯甲烷(1ml)溶液用10分钟滴加到反应液。将反应液用3小时缓慢升温的同时搅拌。向反应液加入三乙胺停止反应后，加入间氯过苯甲酸。用乙酸乙酯萃取，有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液、硫代硫酸钠水溶液、水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除后，进行减压浓缩。所得到的残渣用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯＝3:1)纯化，以无色晶体形式得到目标的化合物(5a-i)(mw1323.60、1.56g、1.18毫摩尔)。化合物(5a-i)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.70(1h,d,j＝11.5hz),0.74(3h,s),0.89(3h,s),0.90-1.03(2h,m),1.11(3h,s),1.13(3h,s),1.15(3h,s),1.16(3h,s),1.12-1.19(1h,m),1.33(3h,s),1.24-1.47(6h,m),1.54-1.66(2h,m),1.77-2.07(7h,m),1.98(3h,s),2.03(3h,s),2.05(3h,s),2.14(3h,s),2.29(1h,s),2.79(1h,td,j＝3.8,13.6hz),3.10(1h,dd,j＝4.8,11.5hz),3.41-3.46(1h,m),3.54(1h,t,j＝9.4hz),3.57-3.64(2h,m),3.69(1h,dd,j＝1.9,10.6hz),3.80(1h,t,j＝7.2hz),3.83(1h,dd,j＝7.7,9.1hz),4.07(1h,dd,j＝6.2,11.3hz),4.09-4.15(1h,m),4.34(1h,d,j＝7.7hz),4.54(1h,d,j＝12.4hz),4.58(1h,d,j＝5.5hz),4.60(1h,d,j＝6.9hz),4.75(1h,d,j＝10.3hz),4.77(1h,d,j＝11.2hz),4.85(1h,d,j＝10.1hz),4.95(1h,dd,j＝3.5,10.5hz),5.03(1h,d,j＝7.9hz),5.10(1h,d,j＝12.2hz),5.18-5.22(2h,m),5.34(1h,dd,j＝0.7,3.4hz),5.56(1h,s),7.17-7.21(2h,m),7.26-7.41(18h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:16.33(ch3),16.39(ch3),17.38(ch2),18.69(ch3),20.64(ch3),20.71(ch3),20.74(ch3),20.98(ch3),23.32(ch3),26.06(ch2),26.40(ch2),26.44(ch2),27.66(ch3),28.31(ch3),28.42(ch3),31.18(ch2),31.78(c),32.78(ch2),36.81(c),37.66(ch2),39.21(ch2),39.58(c),41.07(ch2),43.12(c),44.00(c),45.39(c),48.21(ch),55.36(ch),61.05(ch2),61.81(ch),66.23(ch2),67.20(ch),68.92(ch2),69.83(ch),70.41(ch),71.23(ch),73.52(ch2),74.73(ch2),74.89(ch2),75.85(ch2),77.23(ch),78.52(ch),85.92(ch),90.22(ch),99.97(ch),103.95(ch),127.65(ch),127.73(ch×2),127.85(ch×3),128.07(ch×2),128.12(ch),128.27(ch×2),128.31(ch),128.42(ch×2),128.47(ch×2),128.54(ch),128.62(ch×2),128.73(ch×2),136.14(c),137.85(c),137.88(c),138.06(c),168.70(c),168.95(c),169.22(c),170.19(c),170.39(c),176.24(c),200.22(c).
hr-esi-ms:m/z1345.6632[m+na]+(计算值c78h98o18na；1345.6645).
ir(kbr)cm-1:2947,2360,1754,1659.
[α]d15+52.8(c0.1,chcl3).
(va)化合物(5a-i)的脱乙酰基化
将化合物(5a-i)(495mg、0.374毫摩尔)溶解于二氯甲烷(9ml)和甲醇(15ml)的混合溶剂，加入甲醇钠的28％甲醇溶液(1.2ml)，室温下搅拌30分钟。加入1摩尔/l的稀盐酸，使ph为1后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除，进行减压浓缩。将所得到的残渣溶解于少量的二氯甲烷，用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯:甲醇＝10:20:1)纯化，以无色晶体形式得到目标化合物(6a-i)419.9mg(mw974.97、419.9mg、0.363毫摩尔)。化合物(6a-i)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.70(1h,d,j＝11.3hz),0.73(3h,s),0.83(3h,s),0.93-1.02(2h,m),1.08(3h,s),1.10(3h,s),1.13-1.19(1h,m),1.14(3h,s),1.16(3h,s),1.24-1.46(6h,m),1.32(3h,s),1.54-1.65(3h,m),1.76-1.86(2h,m),1.89-1.96(2h,m),1.97-2.07(3h,m),2.29(1h,s),2.80(1h,td,j＝3.6,10.1hz),3.17(1h,dd,j＝4.6,11.7hz),3.42(1h,ddd,j＝2.2,4.5,9.6hz),3.46(1h,dd,j＝7.4,9.6hz),3.49-3.53(2h,m),3.60-3.69(3h,m),3.71(1h,t,j＝9.4hz),3.82(1h,dd,j＝7.7,9.8hz),3.84(1h,t,j＝4.8hz),3.91(1h,dd,j＝5.7,11.9hz),3.96(1h,dd,j＝0.9,3.3hz),4.44(1h,d,j＝7.7hz),4.54-4.66(3h,m),4.80(1h,d,j＝5.7hz),4.81(1h,d,j＝5.3hz),4.98(1h,d,j＝10.5hz),5.10(1h,d,j＝12.2hz),5.20(1h,d,j＝12.2hz),5.56(1h,s),7.19-7.22(2h,m),7.26-7.40(18h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:16.35(ch3),16.41(ch3),17.35(ch2),18.67(ch3),23.32(ch3),26.21(ch2),26.37(ch2),26.44(ch2),27.82(ch3),28.29(ch3),28.40(ch3),31.15(ch2),31.76(c),32.71(ch2),36.75(c),37.64(ch2),39.26(ch2),39.48(c),41.06(ch2),43.12(c),43.99(c),45.36(c),48.19(ch),55.25(ch),61.79(ch),62.54(ch2),66.22(ch2),68.50(ch2),68.93(ch),72.52(ch),73.52(ch2),73.60(ch),74.61(ch),74.69(ch),74.95(ch2),76.73(ch2),78.71(ch),79.55(ch),84.76(ch),89.33(ch),103.65(ch),104.58(ch),127.68(ch×2),127.70(ch),127.95(ch×2),128.00(ch),128.24(ch×2),128.31(ch×4),128.45(ch×3),128.54(ch×2),128.61(ch×2),128.63(ch×2),136.12(c),137.12(c),137.60(c),137.97(c),169.09(c),176.23(c),200.15(c).
hr-esi-ms:m/z1177.6228[m+na]+(计算值c70h90o14na；1177.6223).
ir(kbr)cm-1:3437,2948,1728,1659.
[α]d15+77.3(c0.3,cdcl3).
(via)化合物(6a-i)的脱苄基化
将化合物(6a-i)(384mg、0.332毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(21ml)和乙醇(21ml)的混合溶剂，加入20％氢氧化钯碳(干燥(dry)、79mg)。在氢气氛下、室温下搅拌16小时。将反应液过滤后，将滤液减压浓缩。向所得到的残渣加入氢氧化钠水溶液(1摩尔/l、50ml)，室温下搅拌3小时。对于反应液用1摩尔/l稀盐酸使ph为1。将该溶液附加于用水调整的diaionhp-20，用水洗涤后用乙腈洗脱。将乙腈层减压浓缩，以白色粉末形式得到目标的化合物(7a)(mw794.97、256.5mg、0.323毫摩尔)。化合物(7a)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(dmso-d6,600mhz)δ:0.72(1h,d,j＝11.7hz),0.757(3h,s),0.762(3h,s),0.92-1.02(2h,m),0.99(3h,s),1.04(6h,s),1.10(3h,s),1.13-1.18(1h,m),1.21-1.30(1h,m),1.31-1.42(7h,m),1.48-1.86(9h,m),2.02-2.12(2h,m),2.33(1h,s),2.54-2.62(1h,m),3.05(1h,dd,j＝3.9,11.5hz),3.08(2h,brs),3.23(1h,t,j＝8.1hz),3.26-3.46(4h,m),3.51-3.58(1h,m),3.64(1h,dd,j＝4.6,11.3hz),3.68(1h,brs),4.26(1h,d,j＝7.6hz),4.29(1h,brs),4.31(1h,d,j＝7.6hz),4.40(1h,t,j＝5.5hz),4.45(1h,brs),4.72(1h,brs),5.02(1h,brs),5.40(1h,s),5.50(1h,brs),5.82(1h,brs).[20150417-1]
13c-nmr(dmso-d6,150mhz)δ:15.92(ch3),16.11(ch3),16.80(ch2),18.23(ch3),22.85(ch3),25.53(ch2),25.67(ch2),25.94(ch2),27.28(ch3),27.70(ch3),28.26(ch3),30.23(ch2),31.41(c),31.98(ch2),36.20(c),37.39(ch2),38.50(ch2),39.94(c),40.51(ch2),42.77(c),42.96(c),44.74(c),47.95(ch),54.16(ch),58.99(ch2),60.89(ch2),60.99(ch),67.12(ch),69.75(ch),72.56(ch),72.84(ch),74.89(ch),76.24(ch),76.43(ch),82.93(ch),87.77(ch),103.46(ch),105.33(ch),127.14(ch),169.58(c),177.55(c),198.90(c).
hr-esi-ms:m/z817.4333[m+na]+(计算值c42h66o14na；817.4345).
ir(kbr)cm-1:3415,2947,1705,1655.
[α]d15+98.2(c0.1,ch3oh).
(viia)化合物(7a)的选择性氧化
将化合物(7a)(91.3mg、0.115毫摩尔)和2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧化物(3.2mg、0.0204毫摩尔)、溴化钾(44.4mg、0.373毫摩尔)溶解于饱和碳酸氢钠水溶液(2.4ml)。将0.4％次氯酸钠水溶液(0.89ml)滴加到反应液，室温下搅拌10分钟。将4％次氯酸钠水溶液(0.085ml)滴加到反应液，室温下搅拌10分钟。将4％次氯酸钠水溶液(0.085ml)滴加到反应液，室温下搅拌10分钟。向反应液加入硫代硫酸钠停止反应，加入乙酸使ph为3。加入水，用乙酸乙酯去除未反应的2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧化物。将水层附加于用水调整的diaionhp-20。依次用水、1摩尔/l稀盐酸、水洗涤，用乙腈洗脱。将乙腈层减压浓缩，以白色粉末形式得到目标的化合物(8a)(mw822.93、80.5mg、0.0978毫摩尔)。化合物(8a)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(dmso-d6,600mhz)δ:0.68-0.74(1h,m),0.72(3h,s),0.75(3h,s),0.92-1.01(2h,m),0.98(3h,s),1.02(6h,s),1.10(3h,s),1.12-1.18(1h,m),1.22-1.29(2h,m),1.30-1.40(7h,m),1.45-1.83(8h,m),2.03-2.13(2h,m),2.33(1h,s),2.52-2.58(1h,m),3.10(1h,dd,j＝4.6,11.3hz),3.66(1h,d,j＝9.6hz),3.87(1h,dd,j＝1.2,3.1hz),4.02(1h,d,j＝1.4hz),4.36(1h,d,j＝7.6hz),4.45(1h,d,j＝7.6hz),5.39(1h,s).
13c-nmr(dmso-d6,150mhz)δ:15.71(ch3),16.09(ch3),16.77(ch2),18.22(ch3),22.83(ch3),25.49(ch2),25.67(ch2),25.94(ch2),27.10(ch3),27.69(ch3),28.25(ch3),30.22(ch2),31.41(c),31.97(ch2),36.20(c),37.39(ch2),38.36(ch2),38.80(c),40.50(ch2),42.78(c),42.95(c),44.74(c),47.93(c),54.14(ch),60.93(ch),69.67(ch),71.22(ch),72.01(ch),72.03(ch),74.15(ch),74.96(ch),75.32(ch),82.30(ch),87.65(ch),103.41(ch),104.45(ch),127.13(ch),169.18(c),169.56(c),170.09(c),177.54(c),198.87(c).[20150424-1]
hr-esi-ms:m/z845.3933[m+na]+(计算值c42h62o16na；845.3930).
ir(kbr)cm-1:3414,2949,1733,1648.
[α]d15+69.9(c0.1,ch3oh).
如以上所述，可以将甘草次酸作为起始原料，以7个工序、收率52％合成半乳糖醛酸甘草酸。
实施例2
甘草酸的合成；
(ivb)化合物(3-i)的糖基化
向实施例1中制造的化合物(3-i)(1.30g、1.31毫摩尔)、和化合物(4b-i)(苯基2,3,4,6-四-o-乙酰基-1-硫代-β-d-吡喃葡萄糖苷、1.15g、2.61毫摩尔)的二氯甲烷(50ml)溶液加入n-碘代丁二酰亚胺(0.59g、2.62毫摩尔)，冷却至-60℃。用10分钟将三氟甲磺酸(11.6μl、0.131毫摩尔)的二氯甲烷(1ml)溶液滴加到反应液。用3.5小时缓慢升温至室温的同时进行搅拌。加入三乙胺停止反应，用乙酸乙酯萃取。有机层依次用饱和碳酸氢钠水溶液、硫代硫酸钠水溶液、水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除后，进行减压浓缩。所得到残渣用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯＝3:1)纯化，以无色晶体形式得到目标的化合物(5b-i)(mw1323.60、1.38g、1.04毫摩尔)。化合物(5b-i)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.69(1h,d,j＝11.7hz),0.74(3h,s),0.85(3h,s),0.90-1.02(2h,m),1.09(3h,s),1.11(3h,s),1.14(3h,s),1.16(3h,s),1.13-1.20(1h,m),1.24-1.46(6h,m),1.33(3h,s),1.52-1.67(2h,m),1.77-1.97(4h,m),1.97-2.07(3h,m),2.006(3h,s),2.014(3h,s),2.047(3h,s),2.050(3h,s),2.29(1h,m),2.79(1h,td,j＝3.4,13.6hz),3.09(1h,dd,j＝4.6,11.5hz),3.40-3.45(1h,m),3.52-3.63(4h,m),3.68(1h,dd,j＝1.9,10.7hz),3.79(1h,dd,j＝7.7,9.1hz),4.03(1h,dd,j＝2.2,12.4hz),4.23(1h,dd,j＝4.3,12.2hz),4.33(1h,d,j＝7.7hz),4.54(1h,d,j＝12.4hz),4.59(2h,d,j＝12.2hz),4.75(1h,d,j＝10.0hz),4.78(1h,d,j＝11.0hz),4.86(1h,d,j＝10.1hz),5.00(1h,dd,j＝8.3,9.5hz),5.06-5.16(4h,m),5.20(1h,d,j＝12.2hz),5.56(3h,s),7.18-7.21(2h,m),7.25-7.41(18h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:16.32(ch3),16.38(ch3),17.34(ch2),18.69(ch3),20.64(ch3×2),20.77(ch3),20.89(ch3),23.33(ch3),26.02(ch2),26.40(ch2),26.43(ch2),27.69(ch3),28.31(ch3),28.42(ch3),31.18(ch2),31.78(c),32.77(ch2),36.79(c),37.66(ch2),39.22(ch2),39.57(c),41.07(ch2),43.13(c),44.00(c),45.39(c),48.22(ch),55.35(ch),61.82(ch),61.90(ch2),66.22(ch2),68.25(ch),68.85(ch2),71.69(ch),72.04(ch),73.20(ch),73.53(ch2),74.72(ch),74.88(ch2),75.89(ch2),77.81(ch),78.60(ch),85.86(ch),90.26(ch),99.78(ch),103.84(ch),127.65(ch),127.71(ch×2),127.83(ch×2),127.88(ch),128.16(ch),128.26(ch×2),128.30(ch×3),128.42(ch×2),128.48(ch×2),128.53(ch),128.62(ch×2),128.77(ch×2),136.15(c),137.83(c×2),138.06(c),168.96(c),169.13(c),169.46(c),170.25(c),170.73(c),176.24(c),200.21(c).
hr-esi-ms:m/z1345.6620[m+na]+(计算值c78h98o18na；1345.6645).
ir(kbr)cm-1:2945,2870,1759,1660.
[α]d15+50.8(c0.4,chcl3).
(vb)化合物(5b-i)的脱乙酰基化
将化合物(5b-i)(0.89g、0.672毫摩尔)溶解于二氯甲烷(15ml)和甲醇(25ml)，加入甲醇钠的28％甲醇溶液(2ml)，室温下搅拌30分钟。加入1摩尔/l的稀盐酸，使ph为1后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和食盐水洗涤、用硫酸钠干燥。利用过滤将硫酸钠去除，进行减压浓缩。所得到的残渣溶解于少量的二氯甲烷，用快速硅胶色谱(己烷:乙酸乙酯＝1:2)纯化，以白色粉末形式得到目标化合物(6b-i)(mw794.97、0.71g、0.614毫摩尔)。化合物(6b-i)的物理化学的性质如以下所示
1h-nmr(cdcl3,600mhz)δ:0.70(1h,d,j＝11.3hz),0.73(3h,s),0.83(3h,s),0.93-1.02(2h,m),1.06(3h,s),1.10(3h,s),1.15(3h,s),1.16(3h,s),1.13-1.19(1h,m),1.32(3h,s),1.24-1.46(6h,m),1.52-1.66(2h,m),1.76-1.87(2h,m),1.89-1.96(2h,m),1.97-2.07(4h,m),2.29(1h,s),2.81(1h,td,j＝3.6,13.6hz),3.08-3.14(1h,m),3.17(1h,dd,j＝4.6,11.9hz),3.35-3.48(3h,m),3.53-3.59(1h,m),3.62-3.72(4h,m),3.75-3.82(2h,m),3.84-3.90(1h,m),4.05(1h,d,j＝2.7hz),4.43(1h,d,j＝7.6hz),4.54-4.67(4h,m),4.77(1h,d,j＝10.5hz),4.80(1h,d,j＝10.7hz),5.00(1h,d,j＝10.5hz),5.10(1h,d,j＝12.4hz),5.20(1h,d,j＝12.2hz),5.56(1h,s),7.20-7.23(2h,m),7.25-7.40(18h,m).
13c-nmr(cdcl3,150mhz)δ:16.34(ch3),16.42(ch3),17.36(ch2),18.67(ch3),23.32(ch3),26.21(ch2),26.37(ch2),26.45(ch2),27.82(ch3),28.30(ch3),28.40(ch3),31.16(ch2),31.77(c),32.71(ch2),36.75(c),37.64(ch2),39.26(ch2),39.48(c),41.07(ch2),43.12(c),43.99(c),45.35(c),48.19(ch),55.27(ch),61.80(ch),62.42(ch2),66.23(ch2),68.47(ch2),70.29(ch),73.54(ch2),74.62(ch),74.96(ch2),75.45(ch),75.76(ch),75.81(ch),76.71(ch2),78.74(ch),79.60(ch),84.55(ch),89.39(ch),103.36(ch),104.51(ch),127.68(ch×2),127.71(ch),127.96(ch×2),128.02(ch),128.25(ch×2),128.28(ch×2),128.30(ch),128.39(ch),128.46(ch×2),128.49(ch),128.56(ch×2),128.61(ch×2),128.69(ch×2),136.12(c),136.99(c),137.56(c),137.95(c),169.05(c),176.23(c),200.12(c).
hr-esi-ms:m/z1177.6220[m+na]+(计算值c70h90o14na；1177.6223).
ir(kbr)cm-1:3435,2947,1730,1659.
[α]d15+59.2(c0.1,chcl3).
(vib)化合物(6b-i)的脱苄基化
将化合物(6b-i)(1.85g、1.60毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(100ml)和乙醇(100ml)的混合溶剂，加入20％氢氧化钯碳(dry、374mg)。在氢气氛下、室温下搅拌16小时。将反应液过滤后，将滤液减压浓缩。向所得到的残渣加入氢氧化钠水溶液(1摩尔/l、50ml)，室温下搅拌3小时。对于反应液用1摩尔/l稀盐酸使ph为1。将该溶液附加于用水调整的diaionhp-20，用水洗涤后用乙腈洗脱。将乙腈层减压浓缩，以白色粉末形式得到目标的化合物(7b)(mw794.97、124g、1.56毫摩尔)。化合物(7b)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(dmso-d6,600mhz)δ:0.73(1h,d,j＝11.7hz),0.76(6h,s),0.91-0.99(2h,m),1.01(3h,s),1.04(6h,s),1.10(3h,s),1.12-1.18(1h,m),1.21-1.29(1h,m),1.31-1.41(7h,m),1.48-1.87(8h,m),2.02-2.12(2h,m),2.33(1h,s),2.54-2.63(1h,m),2.99(1h,t,j＝8.1hz),3.01-3.18(6h,m),3.30-3.38(2h,m),3.39-3.45(1h,m),3.48(1h,dd,j＝4.5,11.3hz),3.61(1h,dd,j＝2.2,11.5hz),3.64(1h,d,j＝10.8hz),4.27(1h,d,j＝7.4hz),4.43(1h,d,j＝7.7hz),5.40(1h,s).
13c-nmr(dmso-d6,150mhz)δ:15.93(ch3),16.10(ch3),16.79(ch2),18.22(ch3),22.85(ch3),25.46(ch2),25.66(ch2),25.94(ch2),27.33(ch3),27.69(ch3),28.25(ch3),30.21(ch2),31.41(c),31.97(ch2),36.20(c),37.38(ch2),38.45(ch2),40.49(ch2),42.77(c),42.95(c),44.74(c),47.94(ch),54.18(ch),60.70(ch2),60.88(ch2),60.97(ch),69.70(ch),69.86(ch),75.18(ch),75.96(ch),76.25(ch),76.39(ch),76.74(ch),81.20(ch),87.86(ch),103.51(ch),103.77(ch),112.42(c),127.13(ch),169.56(c),177.54(c),198.89(c).
hr-esi-ms:m/z817.4343[m+na]+(计算值c42h66o14na；817.4345).
ir(kbr)cm-1:3408,2931,1704,1653.
[α]d15+101.1(c0.1,ch3oh).
(vii)化合物(7b)的选择性氧化
将化合物(7b)(1.01g、1.27毫摩尔)和2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧化物(40.3mg、0.258毫摩尔)、溴化钾(461mg、3.88毫摩尔)溶解于饱和碳酸氢钠水溶液(23ml)。将4％次氯酸钠水溶液(11ml)滴加到反应液，室温下搅拌15分钟。向反应液加入硫代硫酸钠停止反应，附加于用水调整的diaionhp-20。依次用水、2摩尔/l稀盐酸、水洗涤，用乙腈洗脱。将乙腈层减压浓缩，以白色粉末形式得到目标的化合物(8b)(mw822.93、0.98g、1.19毫摩尔)。化合物(8b)的物理化学的性质如以下所示。
1h-nmr(dmso-d6,600mhz)δ:0.67-0.79(1h,m),0.71(3h,s),0.75(3h,s),0.88-1.00(2h,m),0.94(3h,s),1.02(3h,s),1.03(3h,s),1.08-1.18(1h,m),1.10(3h,s),1.22-1.29(2h,m),1.31-1.41(7h,m),1.46-1.83(8h,m),2.02-2.12(2h,m),2.33(1h,m),2.52-2.62(1h,m),2.98-3.12(2h,m),3.19(1h,t,j＝9.1hz),3.26-3.48(6h,m),3.56(1h,d,j＝9.6hz),3.64(1h,d,j＝9.6hz),4.41(1h,d,j＝7.7hz),4.49(1h,d,j＝7.7hz),5.13(1h,s),5.39(1h,s),5.65(1h,s),5.78(1h,s)
13c-nmr(dmso-d6,150mhz)δ:15.78(ch3),16.08(ch3),16.78(ch2),18.22(ch3),22.82(ch3),25.54(ch2),25.66(ch2),25.93(ch2),26.98(ch3),27.68(ch3),28.25(ch3),30.21(ch2),31.41(c),31.97(ch2),36.18(c),37.39(ch2),38.31(ch2),38.86(c),40.48(ch2),42.77(c),42.94(c),44.72(c),47.92(ch),54.14(ch),60.91(ch),71.04(ch),71.38(ch),74.72(ch),75.04(ch),75.47(ch),75.72(ch),76.09(ch),82.51(ch),88.06(ch),103.31(ch),104.59(ch),127.13(ch),169.55(c),169.85(c),170.06(c),177.54(c),198.85(c).
hr-esi-ms:m/z845.3930[m+na]+(计算值c42h62o16na；845.3930).
ir(kbr)cm-1:3417,2949,1732,1647.
[α]d15+69.7(c0.4,ch3oh).
如以上所述，可以将甘草次酸作为起始原料，以7个工序、收率51％合成甘草酸。
产业上的可利用性
根据本发明，能够简便且高收率地得到半乳糖醛酸甘草酸和甘草酸，因此作为它们的工业上的合成方法是有用的。