技术总结
本发明公开了一种尼古丁选择性降解菌的构建方法及其在废烟叶水提液中的应用，以Pseudomonas sp. JY‑Q为原始菌株，通过该菌全基因组信息分析，确定以下五个目的基因，构建目的基因的敲除载体，利用热转法将敲除载体转化到大肠杆菌缺失菌株WM3064中，利用载体上的Kanamycin抗性基因，筛选出第一次交换的重组子；将该菌株过夜扩培后，利用载体上携带的反筛选标记SacB基因，发生第二次交换的重组子——即目的基因随整合入基因组的质粒载体脱落，以实现基因无缝敲除，直至敲除全部目的基因。本发明所得的菌株与野生型JY‑Q的表型差异，主要包括生长差异、尼古丁和葡萄糖降解差异。
技术研发人员：钟卫鸿;张辉;李骏;金维华;黄海婵
受保护的技术使用者：浙江工业大学
技术研发日：2018.04.20
技术公布日：2018.09.14