1.一种用于判别降高血压药物雷米普利的用药型的引物组合物,其特征在于,该引物组合包括针对能判别用药型的2个snp标记的pcr引物对和延伸引物,其中,pcr引物序列对选自如seqidno:1a-2a所示的序列,延伸引物序列选自如seqidno:1b-2b所示的序列。
2.权利要求1所述的引物组合物,其中所述snp分别选自:
rs4344、rs4359。
3.权利要求1所述的引物组合物,其中上述pcr引物序列为核心序列,其在5'端可包括5-15个保护碱基序列,优选为10bp的tag:acgttggatg。
4.权利要求1-3所述的引物组合物,其中延伸引物5'端可增加作为接头的碱基序列,其中优选为1-15个碱基,更优选1-3个碱基。
5.由权利要求1-4的引物组合物所制备的用于判别雷米普利用药的检测产品,包括:
(1)用于pcr的反应试剂,包括:上述扩增引物对,耐高温的dna聚合酶,dntps,pcr反应缓冲液;
(2)用于pcr产物纯化的试剂;
(3)用于单碱基延伸反应的试剂,包括:上述延伸引物,耐高温的单碱基延伸酶(sap酶),ddntps,延伸反应缓冲液。
6.权利要求5所述的检测产品,其中还包括用于质谱检测且保护上述snp组合的载体,优选质谱芯片和质谱仪。
7.使用权利要求1-4的引物组合物,或权利要求5-6的检测产品,进行质谱法判别雷米普利用药的方法,包括以下步骤:
(1)多重pcr:使用上述pcr引物对,在两个反应体系中,对上述2个snp位点所在dna区域同时进行扩增,得到含2处多态位点所在dna区域的pcr产物;
(2)pcr产物纯化:对步骤(1)得到的pcr产物进行纯化,以减少对后续反应的干扰;
(3)单碱基延伸:使用上述2条特异性的延伸引物,在两个反应体系中,对步骤(2)得到的纯化后pcr产物进行多重单碱基延伸,延伸引物在对应的snp位点处延伸一个核苷酸,该核苷酸与snp位点处的基因型互补配对;
(4)延伸产物纯化:对步骤(3)得到的延伸产物进行纯化,以获得高纯的延伸产物,避免盐离子等杂质对后续检测的影响;
(5)质谱仪检测:将步骤(4)得到的纯化产物点在含有基质的靶片上,放入质谱仪进行检测。
8.权利要求7的方法,其中步骤2的纯化过程可以选自碱性磷酸酶消化、碱性磷酸酶和外切酶exoi消化、切胶纯化、pcr纯化柱过柱。
9.使用权利要求1-4的引物组合物,或权利要求5-6的检测产品,用于进行降高血压药物雷米普利用药的指导。