一种类器官球体的高通量培养方法与流程

文档序号:18233971发布日期:2019-07-24 08:33阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种类器官球体的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养方法包括以下步骤:

(1)将含细胞的基质胶和氟油分别通入到三通装置中得到类器官球体;

(2)将步骤(1)中得到的类器官球体加热后与3D打印平台联动并将类器官球体进行分配,而后进行培养类器官球体。

2.根据权利要求1所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(1)所述含细胞的基质胶由细胞与基质胶混合后制备得到。

3.根据权利要求2所述的高通量培养方法,其特征在于,所述细胞的个数为1.0×105~1.0×107个;优选为2.0×106个;

优选地,所述细胞为原代细胞;

优选地,所述基质胶的体积为20~200μL;优选为100μL;

优选地,所述混合的温度为2~8℃;优选为4℃。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(1)所述通入的方法为注射。

5.根据权利要求4所述的高通量培养方法,其特征在于,所述注射的方法为:将含细胞的基质胶和氟油分别置于两个注射装置中,然后分别通过管道注射进三通装置中。

6.根据权利要求5所述的高通量培养方法,其特征在于,所述含细胞的基质胶的流速为1~100μL/min;优选为20μL/min;

优选地,所述氟油的流速为1~500μL/min;优选为50μL/min;

优选地,所述注射装置的温度为2~8℃;优选为4℃;

优选地,所述管道的直径为200~1000μm,优选为800μm。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述加热的温度为35~40℃;优选为37℃。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述分配为:将类器官球体分配至高通量培养载体中;

优选地,所述高通量培养载体包括96孔板或384孔板。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述3D打印平台的打印速度为0.5~0.9s/孔;优选为0.7s/孔;

优选地,步骤(2)中所述培养的培养基为改良的DMEM/F12培养基;

优选地,所述改良的DMEM/F12培养基含有生长因子。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的高通量培养方法,其特征在于,所述高通量培养方法包括以下步骤:

(1)将1.0×105~1.0×107个细胞与20~200μL基质胶在2~8℃下混合得到含细胞的基质胶,然后将含细胞的基质胶和分别置于两个温度为2~8℃的注射装置中,分别通过直径为200~1000μm的管道注射进三通装置中得到类器官球体;其中含细胞的基质胶的流速为1~100μL/min,氟油的流速为1~500μL/min;

(2)将步骤(1)中得到的类器官球体在35~40℃下加热后,与3D打印平台联动,并按照0.5~0.9s/孔的打印速度分配至高通量培养载体中,氟油挥发,而后加入改良的DMEM/F12培养基进行培养类器官球体。

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