荸荠皮提取6-异戊烯基柚皮素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然有机化学领域，涉及一种6-异戊烯基柚皮素的提取分离方法，特 别是涉及一种从荸荠皮中提取分离6-异戊烯基柚皮素的方法。
【背景技术】
[0002] 荸养（Eleocharis tuberosa)，又称马蹄，属莎草科多年生浅水草本植物荸养的地 下球茎，我国大部分地区都有栽培。其中，广西荸荠产量占全国70%，贺州荸荠产量占广西 70%。据文献报道，荸荠有抗菌、抗肿瘤、防治呼吸道疾病、利肠通便和利尿排淋等作用；临 床上可用于治疗咽喉疼痛、痰热咳嗽、热病烦渴、小便不利、痢疾等症。研宄表明，荸荠的活 性物质主要富集在果皮和果肉之间。在荸荠加工过程中，被丢弃的荸荠皮质量约占新鲜荸 荠质量的25%，资源非常丰富。我们在荸荠皮活性成分提取分离研宄中发现了 6-异戊烯基 柚皮素，属于二氢黄酮化合物。6-异戊烯基柚皮素均为C-异戊烯基化的二氢黄酮，该类化 合物除了具有二氢黄酮的的抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种药理活性外，还具有良好的 雌激素活性，例如6-异戊烯基柚皮素就具有良好的抗肿瘤、雌激素和抗真菌活性。6-异戊 烯基柚皮素存在于大麻科津草属植物啤酒花中，可从植物啤酒花中分离，也可从脱甲基黄 腐酚异构化获得。公开号为CN 1893963A公开的具有雌性激素和抗增殖活性的啤酒花提取 物的生产方法。6-异戊烯基柚皮素为首次从荸荠皮中分离得到。
[0003] 目前，未见从荸荠皮中提取分离6-异戊烯基柚皮素的文献报道。经中国公开专利 检索，没有发现与本专利申请相同的技术方案。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于：提出一种荸荠皮提取6-异戊烯基柚皮素的方法。
[0005] 6-异戊烯基柚皮素化学结构式如下：
[0006]
【主权项】
1. 一种荸荠皮提取6-异戊烯基柚皮素的方法，包括提取、萃取；其特征在于：其具体步 骤如下： (1) 将新鲜的荸荠皮风干，粉碎，备用；以重量计，称取荸荠皮粉末1份加入提取罐中， 每次加入4-10份70%体积百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次；过滤，合并 滤液，减压浓缩至膏状，获得提取物； (2) 以重量计，取步骤（1)的提取物1份，分散在5份水中，制成悬浊液，每次加入5-10 份乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至干，得萃取物； (3) 以重量计，取步骤（2)的萃取物1份，加入甲醇至完全溶解，用2-4份聚酰胺拌样， 将甲醇挥发至干，装柱，连接MCI柱进行中压分离，以甲醇水溶液为流动相梯度洗脱，薄层 色谱法检测，收集合并流动相浓度为70-90%体积百分比的洗脱液，减压浓缩至干，得粗品 A； (4) 以重量计，取步骤（3)的粗品A 1份，加入甲醇至完全溶解，加入2-4份聚酰胺拌 样，将甲醇挥发干，转入聚酰胺色谱柱进行分离，用体积比为5:1-2:1的氯仿-甲醇溶液洗 脱，以石油醚：乙酸乙酯：甲酸=50:49:1的混合液作展开剂，用薄层色谱法检测，收集合 并心为〇. 7的洗脱液，减压浓缩至干，得粗品B ; (5) 以重量计，取步骤（4)的粗品B 1份，溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇体积的水制 成悬浊液，用S印hadex LH-20凝胶色谱柱纯化，用甲醇洗脱，以石油醚：乙酸乙酯：甲酸= 50:49:1的混合液作展开剂，用薄层色谱法检测，收集合并&为0. 7的洗脱液，减压浓缩，得 粗品C ; (6) 以重量计，取步骤（5)的粗品C 1份，溶于2-5份甲醇中，以280nm为紫外检测波长， 以62-68 %体积百分比的甲醇水溶液为流动相，用4. 6mmX 25cm的ZorbaxSB-C18柱进行高 效液相色谱分析，用9. 4mmX 25cm的ZorbaxSB-C18柱进行半制备纯化，按9. 82-15. 69min 的出峰时间，收集色谱峰中阀值不小于20mAU的洗脱液，减压浓缩，即得产品。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3)中的所述的MCI柱规格 为70X460mm，填充材料为MCI-gel CHP-20P，柱色谱条件为：柱压为80Psi，流动相流速为 50mL/min，检测波长为245nm ;所述的流动相为40-100%体积百分比的甲醇水溶液。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4)中所述的聚酰胺规格为 200-300目；所用洗脱液为体积比为5:1-3:1的氯仿-甲醇溶液。
【专利摘要】本发明的荸荠皮提取6-异戊烯基柚皮素的方法，属于天然有机化学领域。其特征在于，以丙酮水溶液为溶剂，粗提物用乙酸乙酯萃取后，经中压MCI柱色谱和聚酰胺柱色谱分离，然后用Sephadex LH-20凝胶和半制备型高效液相色谱制备，重结晶辅助纯化，所得产品含量在95％以上。本发明利用废弃的荸荠皮为原料提取分离得到6-异戊烯基柚皮素，分离效果好，产品纯度高，使荸荠皮变废为宝，所选用的层析材料MCI、聚酰胺、凝胶均可反复使用，原料易得，资源丰富，生产成本低，具有较好的应用前景。
【IPC分类】C07D311-40, C07D311-32
【公开号】CN104529982
【申请号】CN201410833072
【发明人】罗杨合, 李行任, 伍淑婕, 马璐, 凌玲
【申请人】贺州学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月29日