一种丹参酮ⅱa的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药化学领域，具体的涉及一种丹参酮II A制备方法。
【背景技术】
[0002]丹参又名赤参，紫丹参，红根等。为唇形科鼠尾草属多年生草本植物丹参的干燥根及根茎。丹参作为一味传统中药在我国应用已久，始载于《神农本草经》，被列为上品，主要有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦、养血安神的功效。
[0003]丹参主要含两类活性成分:一为脂溶性的二萜类化合物，一为水溶性的多聚酚酸类成分。水溶性成分以丹酚酸B为代表，脂溶性成分为丹参酮类，主要有丹参酮1、丹参酮II A、隐丹参酮等。2010版《药典》规定，丹参中丹酚酸B含量不低于3.0%，丹参酮II A含量不低于0.2%。
[0004]目前市面上销售的丹参制剂主要有丹参片、复方丹参滴丸、丹参酮IIA磺酸钠注射液，丹参酮II A磺酸钠注射液疗效明确，质量稳定可控，常用于冠心病、心绞痛、心肌梗死的医治。
[0005]我国丹参资源丰富，价格低廉，产品附加值较低，从丹参药材中分离纯化丹参酮II A对其开发具有重要意义。
[0006]中国专利(CN 103665094A)公开了一种以多级逆流萃取和大孔树脂分离制备丹参酮II A的方法，上述专利存在大量使用有机溶剂，操作程序繁琐等技术问题。
【发明内容】
[0007]由于现有的丹参酮II A分离纯化存在一定的收率及纯度较低的问题。本发明采用乙醇回流提取结合大孔树脂分离及重结晶进一步纯化的制备方法，得到的丹参酮IIA产物不仅收率高，而且纯度也很高，同时工艺简单可行，环境污染小，具有一定的应用价值。
[0008]本发明建立在大量的实验数据基础上，不断对实验条件进行优化，发现丹参通过适宜浓度的乙醇溶液提取后，提取液减压浓缩至近干后乙醇溶解得到丹参醇提物，用DM130大孔树脂分离，其中吸附洗脱条件经过大量优化，收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥得到丹参酮IIA粗品，粗品重结晶后所得丹参酮II A收率大于60%，纯度大于89%。
[0009]本发明涉及的从丹参中提取丹参酮II A的方法较佳的包括以下步骤:所述的乙醇溶液浓度为70%-90%体积分数，较佳的70%以上。所述的每次乙醇溶液用量与丹参药材比为 8-12L/Kg，更佳的为 10L/Kg。
[0010]所述的提取时间1-3小时，更佳的为提取两次，每次I小时。
[0011]所述的大孔树脂型号为DM130，粒径为0.3-1.25mm，孔径为90-100 A，较佳的粒径为90 A，较佳的孔径为0.3mm。
[0012]所述的丹参醇提物由提取液减压浓缩后用乙醇溶解制备。其中减压浓缩真空度为0.07-0.1MPa,较佳的控制在0.09MPa。减压浓缩温度为50_60°C，较佳的温度为60°C。
[0013]所述的柱层析分离的上样液为丹参醇提物，由提取液浓缩至近干后用65%_75%体积分数的乙醇溶液溶解，更佳的乙醇浓度为68%-73%。
[0014]本发明中，所述的大孔树脂分离为本领域常规的制备方法，较佳的步骤如下:将用68%-73%体积分数的乙醇溶液溶解后的丹参醇提物上柱后，先用水、60%-75%体积分数乙醇溶液进行杂质的洗脱，再用88%-98%体积分数的乙醇溶液洗脱，收集丹参酮II A纯度大于65%的洗脱液，即可。
[0015]其中，所述的水和60%_75%体积分数的乙醇溶液的用量为3-5个柱体积，优选4个柱体积。所述的88%-98%体积分数的乙醇溶液用量为2-4个柱体积，优选3个柱体积。
[0016]其中，所述的柱层析树脂的用量根据丹参药材用量比为1:1-1:10，较佳的为1:1-1:5。树脂径高比为1:3-1:6，较佳的为1:5。
[0017]本发明中，在大孔树脂柱层析分离完成后，还包括本领域常用的纯化方法-重结晶，进一步提尚丹参酬II A晶体的纯度。
[0018]其中，所述的重结晶包括以下步骤:将柱层析过程收集到的洗脱液进行减压浓缩，真空干燥得到丹参酮IIA粗品，粗品用氯仿溶解，氯仿加入量以能恰好溶解粗品即可，向所得氯仿溶液中加入蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液于2-4°C条件下避光静置24小时以上，抽滤得到丹参酮II A晶体。
[0019]本发明中，经过重结晶步骤的丹参酮II A晶体纯度大于89%，收率大于60% (HPLC检测)。
[0020]本发明中，在符合本领域基本常识条件下，任意对发明中的参数条件组合，即可得到较佳实例。
[0021]本发明的创新性优点在于:
(I)通过本发明的制备方法，不仅丹参酮II A得率高，而且可以达到很高的纯度。
[0022](2)本发明制备方法，工艺简单可行，污染小，具有一定放大生产价值。
【具体实施方式】
[0023]下面用实例进一步说明本发明，但本发明不受列举实例技术方案限定。
[0024]实施例一:
取10g丹参药材，用70%乙醇热回流两次，每次加1000ml70%乙醇，提取时间分别为I小时、0.5小时。提取液在60°C减压浓缩至近干用乙醇溶解得到丹参醇提物。
[0025]取60g活化的DM130大孔树脂装填于内径为2.5cm的层析柱内，树脂层高度为14cm。取丹参醇提物上样，然后分别用4BV水、70%体积分数乙醇依次洗脱杂质，再用2BV95%体积分数乙醇洗脱丹参酮II A，收集洗脱液。通过HPLC检测，得到洗脱液中丹参酮II A纯度为 79.5%，收率 75.4%ο
[0026]将洗脱液减压浓缩至干，以I倍样品体积的氯仿溶解，向氯仿溶液中缓慢加入蒸馏水，至溶液出现浑浊为止。浑浊液在2°C冰箱中避光静置24小时结晶，抽滤得到丹参酮II A晶体。HPLC检测丹参酮II A纯度89.2%，收率为60.4%。
[0027]实施例二:
取10g丹参药材，用80%体积分数乙醇回流提取两次，第一次加1200ml75%体积分数乙醇提取I小时，第二次加1000ml75%体积分数乙醇提取I小时，提取液在60°C下减压浓缩至干，加入乙醇溶解得丹参醇提物。
[0028]取78g经活化的DM130树脂，装填于内径为3cm的层析柱内，填料高度为13cm。取丹参醇提物上样，然后分别用5BV蒸馏水、75%体积分数乙醇依次洗脱杂质。再用3BV98%体积分数乙醇洗脱丹参酮II A，收集洗脱液。经HPLC检测，洗脱液中丹参酮II A纯度为73.9%，收率为78.8%。
[0029]将洗脱液减压浓缩至干，以2倍样品体积的氯仿溶解，向氯仿溶液中缓慢加入蒸馏水，至溶液出现浑浊为止。浑浊液在2°C冰箱中避光静置过夜结晶，抽滤得到丹参酮II A晶体。HPLC检测丹参酮II A纯度91.8%，收率为64.4%。
[0030]以上所述是本发明优选的实施实例，需要指出的是，对于了解本领域常识的普通技术人员来说，在本发明技术启发下，适当的参数修改也被视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种丹参酮II A的制备方法，其包含以下步骤:将丹参用70%-90%的乙醇热回流提取1-3小时，滤液减压浓缩至近干后乙醇溶解得到丹参醇提物，用大孔树脂进行柱层析分离，收集洗脱液，减压浓缩、真空干燥得到丹参酮IIA粗品，粗品重结晶即可。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述的大孔树脂型号为DM130，其粒径为0.3-1.25mm，孔径为90-100 A，树脂骨架为交联聚苯乙烯。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述的减压浓缩真空度为0.07-0.1MPa，减压浓缩温度为50_60°C。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述的丹参醇提物由下列方法制得:将丹参提取液减压浓缩至近干后溶解即可。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于:所述的丹参提取液由下列方法制得:将丹参药材用乙醇热回流提取，其中，所述的乙醇溶液浓度为70%-90% ;所述的乙醇溶液与丹参药材的体积质量比为8-12L/Kg ;所述的提取时间为l_3h ;所述的提取次数为1-2次。
6.如权利要求1和2任一项所述的制备方法，其特征在于:所述的大孔树脂柱层析分离的步骤如下:将丹参醇提物上样后，先用蒸馏水和60%-75%体积分数的乙醇溶液洗脱杂质，再用88%-98%体积分数的乙醇溶液进行洗脱，收集丹参酮II A纯度大于65%的洗脱液，即可。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于:所述的蒸馏水和60%-75%体积分数的乙醇溶液的用量为3-5个柱体积，88%-98%体积分数的乙醇溶液的用量为2-4个柱体积。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于:在丹参醇提物用大孔树脂柱层析分离之前，将丹参提取液浓缩至近干用65%-75%体积分数的乙醇溶液溶解，再上大孔树脂柱分离。
9.如权利要求1项所述的制备方法，其特征在于:在大孔树脂柱层析分离之后，还包括以下步骤:将柱层析得到的丹参酮IIA粗品进行常见的固体物质纯化步骤-重结晶，得到纯度在89%以上的丹参酮II A结晶，即可，其中，重结晶过程包含以下步骤: a.将柱层析过程收集到的洗脱液进行减压浓缩，浓缩物用氯仿溶解； b.向所得氯仿溶液中加入蒸馏水至溶液出现浑浊，将浑浊液于2-4°C条件下避光静置24小时以上，得到丹参酮II A晶体。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于:b步骤所述的浑浊液静置条件为避光2。。。
【专利摘要】本发明公开了一种丹参酮ⅡA的制备方法，其主要步骤包括：丹参用乙醇热回流提取，通过大孔吸附树脂进行柱层析分离，收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，重结晶得到丹参酮ⅡA。本发明的制备方法不仅丹参酮ⅡA得率及纯度很高，而且操作简单，成本较低，具有一定的应用价值。
【IPC分类】C07J73-00
【公开号】CN104530181
【申请号】CN201410808695
【发明人】刘武, 周永康, 孙娜
【申请人】北京康仁堂药业有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月24日