新型的具有5个连接的ctl表位的肽的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种作为癌症抗原肽有用的新型肽。更详细而言，本发明涉及一种新 型癌症抗原肽及利用其的药物组合物，所述新型癌症抗原肽为将具有HLA-A限制性的CTL 诱导能力的5个肽连接而成。
【背景技术】
[0002] 癌症占日本人的死亡原因的第1位，一年约35万人死亡，目前仍然为严重的疾病。 作为所确立的癌症疗法，主要有外科切除术、抗癌药物治疗及放射线疗法。但是，所述疗法 存在复发、生命质量（QOL)降低、以及在为不能接受前面叙述的疗法的中期癌症的情况下 没有其他治疗选项等的问题。
[0003] 长期以来，癌症免疫疗法（癌症疫苗疗法）被期待作为新的疗法，从可以鉴定人类 肿瘤抗原中的表位肽的1990年起，在全世界开始了癌症肽疫苗的临床研究。但是，肽单独 施用或并用疗法中的临床研究成果的分析结果指出，在1，〇〇〇例以上的给药例中，成功率 仅为2. 7% (非专利文献1)，难以实用化。
[0004] 另一方面，在日本还继续进行长期使用特有的癌症肽疫苗的临床研究，其成果逐 渐变得显著。近年来，作为以提高治疗成绩为目标的方法之一，还开始采用施用多种癌症肽 而不是施用1种癌症肽的战略。例如，通过预先检查患者的HLA分型及特异性免疫应答，实 施了选择多种待施用的肽的特制（tailor-made)型的癌症肽疫苗疗法，且安全性及抗肿瘤 效果得到确认。具体而言，通过特制型肽疫苗的单独施用或与抗癌剂的并用，在脑肿瘤、宫 颈癌、前列腺癌、以及胰腺癌方面实现了优异的临床效果以及安全性（非专利文献2、3、4)。
[0005] 在癌症肽疫苗疗法中，被认为是主要的效应细胞的表位特异性细胞毒性T淋巴细 胞（以下，简称为CTL)引起的细胞性免疫是HLA限制性的，实施了以具有特定的HLA分型、 且具体而言仅以具有对象患者数多的HLA-A2或HLA-A24分型的患者为对象的癌症肽疫苗 开发。
[0006] 但是，这2种HLA分型持有比例在日本人中分别为约40%、60% (非专利文献5)， 存在具有这2种以外的HLA分型的患者不能接受癌症肽疫苗的好处的问题。因此，在治疗 开始前需要HLA分型检查成为使治疗的开始时期延迟、使患者负担增大的一个原因。由以 上考虑，期望不需要HLA分型检查、可适用于全部癌症患者的癌症肽疫苗的开发、研究。
[0007] 另外，已知在癌症肽疫苗疗法中，除了作为细胞免疫的CTL的活化之外，通过诱导 作为体液免疫的免疫球蛋白产生，有助于延长寿命的效果（非专利文献6)。
[0008] 现有技术文献
[0009] 非专利文献
[0010] 非专利文献 I :Rosenberg SA et al.，Nature Med. 2〇04, 10 (9) : 9O9-I5
[0011] 非专利文献 2 :Terasaki M et al.，J Clin Oncol. 2011，29(3) :337-44
[0012] 非专利文献 3:Noguchi M et al. , Cancer Immunol, lmmunother. 2010, 59(7):1001-9
[0013] 非专利文献 4 :Yanagimoto H et al.，Cancer Sci. 2007, 98 (4) :605-11
[0014] 非专利文献 5 :Sette A et al.，Immunogenetics. 1999, 50 (3-4) : 201-12
[0015] 非专利文献 6 :Noguchi M et al.，Cancer Biol. Ther. 2011，10(12) :1266-79
【发明内容】
[0016] 本发明的目的在于，提供一种癌症抗原肽，所述癌症抗原肽可作为癌症肽疫苗施 用于广泛的癌症患者，而不需要HLA分型检查、且不限于具有特定HLA分型的患者。
[0017] 本发明人等为了解决上述课题进行了潜心研究，结果发现：通过将选自报道具有 HLA-A2、HLA-A24、HLA-A26或HLA-A3超型的任一种的限制性CTL的诱导能力或具有上述多 种HLA-A限制性的CTL的诱导能力的CTL表位肽中的5个肽经由接头连接而得到的具有5 个连接的CTL表位的肽，可以施用于广泛的癌症患者而不需要HLA分型检查、且不限于具有 特定的HLA分型的患者，从而施用该具有5个连接的CTL表位的肽，由此，较强地诱导对构 成该肽的CTL表位肽特异性的CTL及免疫球蛋白，直至完成了本发明。
[0018] SP，本发明具有以下特征。
[0019] [1] -种具有5个连接的表位的肽，其从由以下的CTL表位肽：序列号1所示的肽 (PEPl)、序列号2所示的肽（PEP2)、序列号3所示的肽（PEP3)、序列号4所示的肽（PEP4)、 序列号5所示的肽（PEP5)、序列号6所示的肽（PEP6)、及序列号7所示的肽（PEP7)构成的 组中可以重复选择的5个肽经由接头分别连接而成，并且
[0020] 所述具有5个连接的表位的肽具有选自以下的（1)~（12)的一个或多个特征：
[0021] (1)含有PEP5和PEP2经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0022] (2)含有PEP2和PEP4经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0023] (3)含有PEP4和PEP6经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0024] (4)含有PEP6和PEP3经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0025] (5)含有PEP4和PEPl经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0026] (6)含有PEPl和PEP3经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0027] (7)含有PEP4和PEP2经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0028] (8)含有PEPl和PEP4经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0029] (9)含有PEP5和PEPl经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0030] (10)含有PEP6和PEP5经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0031] (11)在C末端含有PEP2 ;以及
[0032] (12)在 C 末端含有 PEP3。
[0033] [2]根据[1]的具有5个连接的表位的肽，其包含在N末端含有PEP5和PEP2、PEP6 和PEP5、或PEP4和PEP6经由接头从N末端侧依次相邻的序列和/或在C末端含有PEP7 和 PEP3、PEP4 和 PEP3、PEP6 和 PEP3、PEPl 和 PEP3、PEP5 和 PEP2、PEP4 和 PEP2、或 PEP5 和 PEP3经由接头从N末端侧依次相邻的序列。
[0034] [3]根据[2]的具有5个连接的表位的肽，其含有选自以下的（a)~（p)中的序 列：
[0035] (a) PEP5-PEP2-PEP4-PEP7-PEP3 ；
[0036] (b)PEP5-PEP2-PEP7-PEP3-PEP4 ；
[0037] (c) PEP4-PEP6-PEP5-PEP7-PEP3 ；
[0038] (d)PEP5-PEP2-PEP4-PEP6-PEP3 ；
[0039] (e)PEP5-PEP2-PEP4-PEPl-PEP3 ；
[0040] (f)PEP4-PEP5-PEP2-PEP7-PEP3 ；
[0041] (g)PEP7-PEP3-PEP4-PEP5-PEP2 ；
[0042] (h)PEP5-PEP7-PEP3-PEP4-PEP2 ；
[0043] (i)PEP6-PEPI-PEP4-PEP5-PEP2 ;
[0044] (j)PEP6-PEP5-PEPl-PEP4-PEP2 ；
[0045] (k)PEP4-PEP5-PEPI-PEP6-PEP3 ;
[0046] (1)PEP7-PEP2-PEP4-PEP5-PEP3 ；
[0047] (m)PEP4-PEP2-PEP7-PEP5-PEP3 ；
[0048] (η)PEP7-PEP2-PEP5-PEP4-PEP3 ；
[0049] (o)PEP5-PEP2-PEP7-PEP4-PEP3 ;或
[0050] (p)PEP5-PEP2-PEP4-PEP3-PEP7 ；
[0051] 其中，式中表示接头。
[0052] [4]根据[1]~[3]中任一项的具有5个连接的表位的肽，其中，所述接头为氨基 Ife接头。
[0053] [5]根据[4]的具有5个连接的表位的肽，其中，所述氨基酸接头为连接2个精氨 酸的精氨酸二聚体。
[0054] [6] -种CTL，其通过使用根据[1]~[5]中任一项的具有5个连接的表位的肽刺 激外周血淋巴细胞而得到。
[0055] [7] -种用于治疗或预防癌症的药物组合物，其含有根据[1]~[5]中任一项的具 有5个连接的表位的肽、或根据[6]的CTL作为有效成分。
[0056] [8]根据[7]的药物组合物，其为免疫治疗剂。
[0057] [9] 一种癌症的治疗方法，其包括：将根据[1]~[5]中任一项的具有5个连接的 表位的肽、或根据[6]的CTL施用于癌症患者。
[0058] [1