0] -种针对癌症免疫受试者的方法，其包括：将根据[1]~[5]中任一项的具 有5个连接的表位的肽、或根据[6]的CTL施用于受试者。
[0059] 本说明书包含作为本申请优先权基础的日本国专利申请2013-047271号的说明 书和/或附图中所记载的内容。
[0060] 发明效果
[0061] 根据本发明，可以提供一种癌症抗原肽，其可以作为癌症肽疫苗施用于广泛的癌 症患者，而不需要HLA分型检查、且不限于具有特定的HLA分型的患者。
[0062] 本发明的具有5个连接的CTL表位的肽可以施用于广泛的癌症患者，例如HLA-A2 阳性患者群体、HLA-A24阳性患者群体、HLA-A26阳性患者群体、HLA-A3超型阳性患者群体， 而不需要HLA分型检查，可以治疗和/或预防该患者中的癌症或起因于其的疾病。另外，由 于观察到构成本发明的具有5个连接的CTL表位的肽的肿瘤抗原在多个癌症种类中表达， 因此本发明的具有5个连接的CTL表位的肽可以作为用于治疗或预防各种癌症种类的药物 组合物（更详细而言为免疫治疗剂）使用。进而，与将所构成的CTL表位肽进行混合而等 量施用的情况相比，通过施用本发明的具有5个连接的表位的肽，可以更强地诱导CTL表位 肽特异性CTL及免疫球蛋白，并且可以将抗肿瘤免疫更有效地活化。
【附图说明】
[0063] 图1表示具有5个连接的表位的肽施用的小鼠模型中的表位特异性CTL诱导结果 (* :表示为未研究）。
[0064] 图2表示具有5个连接的表位的肽施用的小鼠模型中的血清中表位特异性IgG抗 体滴度的测定结果。
【具体实施方式】
[0065] 下面，进一步对本发明进行具体说明。
[0066] 1.具有5个连接的表位的肽
[0067] 本发明的"具有5个连接的表位的肽"是指：将选自来自相同和/或不同的肿瘤抗 原分子的CTL表位肽中的5个肽经由接头以线性连接并设为1分子的肽。
[0068] "来自肿瘤抗原分子的CTL表位肽"为肿瘤抗原在肿瘤细胞内分解而产生的肽，其 通过与HLA I类分子结合并呈递在细胞表面上，可以被肿瘤特异性CTL识别、和/或可诱导 和/或活化肿瘤特异性CTL。"诱导肿瘤特异性CTL"是指：在生物体外或体内，使特异性地 识别来自肿瘤抗原分子的CTL表位肽的CTL分化和/或增殖。另外，"活化肿瘤特异性CTL" 是指：通过CTL识别由HLA I类分子所呈递的抗原，产生干扰素 y(IFN-y)。在本说明书 中，有时将"来自肿瘤抗原分子的CTL表位肽"简称为"CTL表位肽"。
[0069] 作为本发明中使用的CTL表位肽，可以使用公知的CTL表位肽，可列举以下的CTL 表位肽：
[0070] PEPl :KLVERLGAA(序列号 I [TO 01/011044]);
[0071] PEP2 :ASLDSDPWV(序列号 2 [TO 02/010369]);
[0072] PEP3 :LLQAEAPRL(序列号 3 [TO 00/12701]);
[0073] PEP4 :DYSARWNEI (序列号 4[日本特开平 11-318455 号公报]);
[0074] PEP5 :VYDYNCHVDL(序列号 5 [TO 00/12701]);
[0075] PEP6 :LYAWEPSFL(序列号 6[日本特开 2003-000270 号公报]);
[0076] PEP7 :QIRPIFSNR (序列号 7 [Cancer Immunol. Immunother. 2007， 56(5)，689-698])。
[0077] 本说明书中，有时分别将序列号1所示的肽称为"PEP1"，序列号2所示的肽称为 "PEP2"，序列号3所示的肽称为"PEP3"，序列号4所示的肽称为"PEP4"，序列号5所示的肽 称为"PEP5"，序列号6所示的肽称为"PEP6"，序列号7所示的肽称为"PEP7"。
[0078] 在本发明中，具有以下氨基酸序列且具有与原来的肽同等或比其更高的CTL诱导 能力以及免疫球蛋白产生诱导能力的肽也可以作为"CTL表位肽"使用，所述氨基酸序列具 有在PEP1、PEP2、PEP3、PEP4、PEP5、PEP6及PEP7的各氨基酸序列中的一个或多个氨基酸的 置换、插入、缺失、和/或添加。在此，"多个"为1~3个、优选1~2个。作为这样的肽，可 列举例如用具有与原来的氨基酸类似的特性的氨基酸置换（即，通过保守的氨基酸置换而 得到的）肽。
[0079] PEP1、PEP2、PEP3、PEP4 及 PEP5 被 HLA-A2 捕获，PEP2、PEP4、PEP5 及 PEP6 被 HLA-A24 捕获，PEP2、PEP4、PEP5 及 PEP7 被 HLA-A3 超型捕获，以及 PEP2 及 PEP5 被 HLA-A26 捕获，可以诱导和/或活化CTL。另外，编码这些CTL表位肽的基因被确认在多个癌症种 类中表达（Yang D et al·，Cancer Res. 1999, 59:4056-63、Harashima N et al·，Eur. J. Tmmunol. 2001，31 (2)，323-32)。
[0080] 选自PEP1、PEP2、PEP3、PEP4、PEP5、PEP6及PEP7中（可以重复选择）的5个肽经 由接头分别以线性连接。
[0081] 接头只要可以在向生物体施用具有5个连接的表位的肽时被裂解、且被连接的 CTL表位肽彼此被分离即可，可列举例如：酯键、醚键、酰胺键、糖链接头、聚乙二醇接头、氨 基酸接头等。作为用作氨基酸接头的氨基酸序列的实例可包括精氨酸二聚体、赖氨酸二聚 体、甘氨酸二聚体、甘氨酸五聚体、甘氨酸六聚体、丙氨酸-丙氨酸-酪氨酸（AAY)、异亮氨 酸-亮氨酸-丙氨酸（ILA)、精氨酸-缬氨酸-赖氨酸-精氨酸（RVKR)等，优选为精氨酸二 聚体。
[0082] 所选择的CTL表位肽及其连接顺序，可以通过以下来确定：将以给定的组合及给 定的连接顺序合成的具有5个连接的表位的肽施用于人类HLA-A转基因小鼠并评价各CTL 表位肽特异性CTL诱导在生物体内的有无。
[0083] 优选地，本发明的具有5个连接的表位的肽具有选自以下的（1)~（12)的一个或 多个特征：
[0084] (1)含有PEP5和PEP2经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0085] (2)含有PEP2和PEP4经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0086] (3)含有PEP4和PEP6经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0087] (4)含有PEP6和PEP3经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0088] (5)含有PEP4和PEPl经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0089] (6)含有PEPl和PEP3经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0090] (7)含有PEP4和PEP2经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0091] (8)含有PEPl和PEP4经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0092] (9)含有PEP5和PEPl经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0093] (10)含有PEP6和PEP5经由接头从N末端侧依次相邻的序列；
[0094] (11)在C末端含有PEP2 ;以及
[0095] (12)在 C 末端含有 PEP3。
[0096] 优选地，本发明的具有5个连接的表位的肽包含
[0097] (I)在N末端含有
[0098] PEP5 和 PEP2、
[0099] PEP6 和 PEP5、或
[0100] PEP4 和 PEP6
[0101] 经由接头从N末端侧依次相邻的序列，和/或
[0102] (II)在C末端含有
[0103] PEP7 和 PEP3、
[0104] PEP4 和 PEP3、
[0105] PEP6 和 PEP3、
[0106] PEPl 和 PEP3、
[0107] PEP5 和 PEP2、
[0108] PEP4 和 PEP2、或
[0109] PEP5 和 PEP3
[0110] 经由接头从N末端侧依次相邻的序列。
[0111] 进一步优选地，本发明的具有5个连接的表位的肽含有选自以下的（a)~（P)中 的序列、或由该序列构成（式中表示接头）：
[0112] (a) PEP5-PEP2-PEP4-PEP7-PEP3 ；
[0113] (b)PEP5-PEP2-PEP7-PEP3-PEP4 ；
[0114] (c)PEP4-PEP6-PEP5-PEP7-PEP3 ;
[0115] (d)PEP5-PEP2-PEP4-PEP6-PEP3 ；
[0116] (e)PEP5-PEP2-PEP4-PEPl-PEP3 ；
[0117] (f)PEP4-PEP5-PEP2-PEP7-PEP3 ；
[0118] (g)PEP7-PEP3-PEP4-PEP5-PEP2 ；
[0119] (h)PEP5-PEP7-PEP3-PEP4-PEP2 ；
[0120] (i)PEP6-PEPI-PEP4-PEP5-PEP2 ;
[0121] (