,1H),7. 42(d,1H, J=8. OHz)，7. 10(d,1H, J= 8. OHz),6. 81 (t, 1H, J=8. OHz),5. 67(s,1H),3. 07 (t, 2H, J=7. 0Hz),1. 68 (m, 2H),1. 45-1 ? 26 (m, 26H)，0? 88 (t, 3H, J = 6. 5Hz) ? 13C NMR (125MHz, CDCl3) : S 197. 9, 146. 7, 145. 3, 120. 0, 119. 7, 119. 5, 119. 3, 31. 9, 29. 7, 29. 6, 29. 5, 29. 3, 29. I, 28. 9, 22. 7, 14. I. HRMS(ESI)m/z calcd for C23H38O3SNa+[M+Na]+417. 2434, Found 417.2457.
[0072] 该化合物的结构式为：
[0073]
[0074] 化合物I -7 :2, 3-二羟基苯甲酸十八硫酯
[0075] 合成方法同化合物I -l，565mg淡黄色固体，收率11%。反应投料为：正十八硫醇 (2. 87g，10.0 mmol)，1_ 乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（3. 83g，20.0 mmol)， 2, 3_ 二羟基苯甲酸（I. 54g, 10.0 mmol)。
[0076]1H NMR (500MHz, CDCl3) : S 11. 27 (s, 1H), 7. 42 (d, 1H, J = 8. OHz)，7. 10 (d, 1H, J = 8. OHz), 6. 81 (t, 1H, J = 8. OHz), 5. 67 (s, 1H), 3. 07 (t, 2H, J = 7. 0Hz), 1. 68 (m, 2H), 1. 45-1. 26 (m, 30H)，0? 88 (t, 3H, J = 6. 5Hz) ? 13C NMR (125MHz, CDCl3) : S 197. 9, 146. 6, 145. 3, 120. 0， 119. 7, 119. 5, 119. 4, 31. 9, 29. 7, 29. 6, 29. 5, 29. 4, 29. 3, 29. 1, 28. 9, 22. 7, 14. I. HRMS(ESI) m/z calcd for C25H42O3SNa+[M+Na]+445. 2747, Found 445.2796.
[0077] 该化合物的结构式为：
[0078]
[0079] 实施例2
[0080] 生物活性鉴定：在老年痴呆动物模型中，研究发现NGF能阻止或减少神经元的退 变，一定程度可阻止AD进展，具有促进神经生长和神经保护作用。由于PC12细胞具有神经 细胞的一般特征，在NGF的作用下PC12细胞会停止分裂，长出突起，转化成神经元样细胞。 因此，能导致PC12细胞转化成神经元样细胞的化合物具有预防及治疗老年性痴呆的应用 价值。
[0081] 实验方法：
[0082] (I)PC 12细胞的培养：接20X IO4个PC 12细胞于IOOmrn的培养皿中，含IOml DMEM培养基（其中含10%马血清、5%胎牛血清），两天后更换一次培养基，再过三天继代。 先用PBS将细胞洗两次，再加入IOmlPBS于培养皿中，在37°C，5% CO2的培养箱内培养10 分钟，吹洗，转移到15ml的一次性离心管，离心后血球计数板上计数。24孔细胞培养板每 孔先加入1ml含血清的DMEM培养基，细胞计数后，每孔接2 X IO4个细胞，CO2培养箱培养24 小时后加样。
[0083](2)活性测试：以0. 5 % DMSO为阴性对照，NGF 40ng为阳性对照，将化合物I -1， I -2, I -3, I -4, I -5, I -6, I -7 配置成不同浓度的 DMSO 溶液。用 Iml 含 0.5% DMSO 和样品的DMEM溶液（不含血清）将24孔细胞板的每孔原培养基取代后，放入37°C，5% CO2 的培养箱中培养。倒置显微镜下每隔24小时、连续6天观察细胞形态变化，记录细胞分化 率NA (神经突起长于胞体直径一倍的细胞数目与视野下总细胞数目的比值），每个视野下 约100个细胞，随机选取3处，并统计作图。
[0084] (3)实验结果：
[0085] 图 1 :加入化合物I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6、I-7 经 48 小时后 PC 12 细胞的神经突起分化率（阴性对照〇. 5% DMS0,阳性对照为40ng/ml NGF，受试化合物的浓 度为 0? I U M)。
[0086] 图 2 :加入化合物I-1、I-2、I-3、I-4、I-5、I-6、I-7 经 48 小时后 PC 12 细胞的神经突起分化率（阴性对照〇. 5% DMS0,阳性对照为40ng/ml NGF，受试化合物的浓 度为 0? 3 u M)。
[0087] 图3 :加入ABG001和化合物I -4经48小时后，PC 12细胞的神经突起分化率的对 比（阴性对照0. 5% DMS0,阳性对照为40ng/ml NGF，对照化合物ABG001的浓度为I ii M，化 合物I -4的浓度为0.1 ii M)。
[0088] 图1~图3中，纵坐标为神经突起分化率（％)。
[0089] 对照化合物ABG001的化学结构式为：
[0090]
[0091] 图4 :加入ABG001和化合物I -4经48小时后，化合物引起PC12细胞神经突起伸 长的显微照片[a)0. 5% DMSO为阴性对照；b)阳性对照NGF的浓度为40ng/mL ;c)阳性对照 ABG001的浓度为I. 0 ii M ;d)化合物1-4的浓度为0.1 ii M]。
[0092] 结果发现，在0.1 UM、0. 3iiM的浓度下，48小时候后所测试的本发明的硫酯类化 合物均显示出良好的NGF-mimics (拟神经生长因子）活性，相同浓度下，本发明实施例化合 物处理后，神经突起分化率比苯甲酸酯类化合物ABG001处理高出3~48个百分点，其中化 合物I -3、I -4、I -5比ABG001处理高出15~48个百分点（图1、图2)。其中化合物 1-4的活性最佳，在0.1 ii M浓度的拟神经生长因子活性与40ng/mL NGF和I. 0 ii M ABG001 的生物活性相同（图3)。
【主权项】
1. 一种苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，结构通式如式（I)所示:1 式（I); 式（I)中， R为碳原子数为1~30的烷基； 札为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基； R2为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基； R3为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基； R4为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基； R5为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基； 札~R5中至少有两个相邻的取代基为羟基。2. 如权利要求1所述的苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，&~R5中相邻两个取代基 为羟基。3. 如权利要求2所述的苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，&为羟基，R2为羟基，R3为 氢，r4为氢，r5为氢。4. 如权利要求1所述的苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，R为碳原子数为6~22的 烷基。5. 如权利要求4所述的苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，R为碳原子数为6、8、10、12、 14、16的烷基。6. 如权利要求4所述的苯甲酸硫酯类化合物，其特征在于，所述的烷基为直链烷基。7. 权利要求1~6任一所述的苯甲酸硫酯类化合物在制备预防、治疗神经退行性疾病 的食品中的应用。8. 权利要求1~6任一所述的苯甲酸硫酯类化合物在制备预防、治疗神经退行性疾病 的药品中的应用。9. 如权利要求1~6任一所述的苯甲酸硫酯类化合物在制备改善认知、学习记忆能力 的食品中的应用。10. 如权利要求1~6任一所述的苯甲酸硫酯类化合物在制备改善认知、学习记忆能力 的药品中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种苯甲酸硫酯类化合物及其应用，所述苯甲酸硫酯类化合物的结构通式如式(Ⅰ)所示，式(Ⅰ)中，R为碳原子数为1～30的烷基；R1～R5均为氢、羟基、酯基、氨基或酰胺基；R1～R5中至少有两个相邻的取代基为羟基。本发明还提供了所述的苯甲酸硫酯类化合物在制备预防、治疗神经退行性疾病以及改善认知、学习记忆能力的药物和食品中的应用。本发明提供了一类新结构类型化合物-苯甲酸硫酯类化合物，该苯甲酸硫酯类化合物具有显著的类似神经生长因子的活性，活性高，可以在制备预防及治疗神经退行性疾病、改善认知、学习记忆能力的食品和药品中获得应用。
【IPC分类】C07C327/26, A23L1/29, A61P25/28
【公开号】CN105085348
【申请号】CN201410447452
【发明人】戚建华, 王广法, 向兰
【申请人】浙江大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年9月4日