奥比特嗪-富马酸盐、水合物、晶型及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学领域，具体涉及奥比特嗪-富马酸盐、水合物、晶型及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是临床上一大类严重危害人类生命健康的疾病。针对肿瘤的治疗人们已 经开发了许多不同类型的药物应用于临床。其中，分子靶向抗肿瘤药因其疗效肯定，不良反 应小而受到广泛关注。但是，现有的分子靶向药物应用于临床后已经出现较多的耐药性问 题，从而影响了这些药物的效果。
[0003] Caspase-3是介导细胞凋亡的一类蛋白水解酶，是细胞凋亡的关键执行分子。作为 效应蛋白，其功能执行需要激活酶原Procaspase-3成为有活性的Caspase-3,才能将细胞 内的重要蛋白降解引起细胞凋亡。因此，特异性激活Procaspase-3诱导细胞凋亡是一种新 型而十分有效的抗肿瘤策略。
[0004] 专利W02006128173公开了一类哌嗪乙酰肼杂环化合物，它能选择性地诱导癌细 胞凋亡，表明这类化合物可以作为潜在的抗肿瘤的分子靶向药物。这类化合物的作用机理 就是通过激活酶原Procaspase-3,使其成为有活性的Caspase-3而发挥作用。
[0005] 本发明人在中国专利CN101503394A中公开了一类高哌嗪乙酰肼杂环化合物，它 们的抗肿瘤活性也是通过激活酶原Procaspase-3,使其成为有活性的Caspase-3而发挥作 用，因此有可能开发成为抗肿瘤药物。其中公开了化合物奥比特嗪一富马酸盐的制备方法 和抗肿瘤活性。奥比特嗪化学名为：
[0006] (E) -N' - (3-烯丙基-2-羟基苯甲烯基）-2- (4-苄基-1，4-二氮杂环庚烷-1-基） 乙酰肼。化学结构为：
[0007]
[0008] 由于不同配比的盐、溶剂合物、多晶型可能引起理化性质的不同，进而影响药物的 疗效和不良反应，因此，制备药物不同配比的盐、溶剂合物、多晶型是药物研发过程中的重 要问题。然而目前尚未有奥比特嗪上述方面的相关报导。
【发明内容】
[0009] 本发明的发明人对奥比特嗪-富马酸盐进行了大量研究，令人欣喜地发现了其水 合物及不同晶型结构，这为获得更高药学效果、易于制备、以及更好存储稳定性的化合物提 供了可能，本发明即基于以上发现完成。
[0010] 本发明第一方面涉及奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其中，奥比特嗪-富马酸盐结构 如式I所示，n值约为1或2。
[0011]
[0012] 根据本发明第一方面所述的奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其包括以下几项：
[0013] 1.奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其在使用Cu-K a辐射、以2 0角度表示的X射线 粉末衍射图中，至少包含以下位置处的峰：5. 9±0. 2,16. 8±0. 2和18. 1±0. 2。
[0014] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 10. 1±0. 2,14. 2±0. 2 和 22. 4±0. 2。
[0015] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 11. 4±0. 2,20. 8±0. 2 和 23. 8±0. 2。
[0016] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型利用差示扫描量热法测定的熔点为 156. 27°C ±3. 0°C。
[0017] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型的n值约为1。
[0018] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型为Form A。
[0019] 在本发明的一个实施方案中，所述Form A的典型的XRPD图如图2所示。
[0020] 在本发明的一个实施方案中，所述Form A的典型的DSC图如图3所示。
[0021] 2.奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其在使用Cu-K a辐射、以2 0角度表示的X射线 粉末衍射图中，至少包含以下位置处的峰：6. 5±0. 2, 20. 0±0. 2和24. 9±0. 2。
[0022] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 5. 3±0. 2,13. 3±0. 2 和 19. 5±0. 2。
[0023] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 12. 0±0. 2,14. 8±0. 2 和 26. 7±0. 2。
[0024] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型利用差示扫描量热法测定的熔点为 171. 45°C ±3. 0°C。
[0025] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型的n值约为2。
[0026] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型为Form C。
[0027] 在本发明的一个实施方案中，所述Form C的典型的XRPD图如图28所示。
[0028] 在本发明的一个实施方案中，所述Form C的典型的DSC图如图29所示。
[0029] 3.奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其在使用Cu-K a辐射、以2 0角度表示的X射线 粉末衍射图中，至少包含以下位置处的峰：5. 7±0. 2,9. 5±0. 2和10. 0±0. 2。
[0030] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 14. 7±0. 2,19. 2±0. 2 和 26. 7±0. 2。
[0031] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 13. 3±0. 2,22. 2±0. 2 和 23. 6±0. 2。
[0032] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型利用差示扫描量热法测定的熔点为 156. 93°C ±3. 0°C。
[0033] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型的n值约为2。
[0034] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型为Form D。
[0035] 在本发明的一个实施方案中，所述Form D的典型的XRPD图如图34所示。
[0036] 在本发明的一个实施方案中，所述Form D的典型的DSC图如图35所示。
[0037] 本发明的第二方面涉及奥比特嗪-富马酸盐水合物的晶型，其中，奥比特嗪-富马 酸盐水合物的结构如式II所示，n值约为1，m值约为1。
[0038]
[0039] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，至少包含以下位置处的峰：7. 0±0. 2,17. 3±0. 2和21. 3±0. 2。
[0040] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 12. 9±0. 2,17. 9±0. 2 和 19. 7±0. 2。
[0041] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X 射线粉末衍射图中，还包含至少一个（例如一个、两个或者三个）选自以下位置处的峰： 13. 4±0. 2,14. 7±0. 2 和 23. 5±0. 2。
[0042] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型具有双熔点特性。
[0043] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型利用差示扫描量热法测定的两个熔点分别 为 102. 18°C ±3. 0°C和 153. 72°C ±3. 0°C。
[0044] 在本发明的一个实施方案中，所述晶型为Form B。
[0045] 在本发明的一个实施方案中，所述Form B的典型的XRPD图如图16所示。
[0046] 在本发明的一个实施方案中，所述Form B的典型的DSC图如图17所示。
[0047] 本发明第三方面涉及奥比特嗪-富马酸盐的无定型，其中，奥比特嗪-富马酸盐结 构如式I所示，其中n值约为1。
[0048]
[0049] 在本发明的一个实施方案中，所述无定型利用差示扫描量热法测定的玻璃化转变 温度为 51. 12°C ±3.0°C。
[0050] 本发明第四方面涉及奥比特嗪-富马酸盐水合物，其中，奥比特嗪-富马酸盐结构 如式II所示，其中n值约为1，m值约为1。
[0051]
[0052] 本发明第五方面涉及本发明第一方面第1项所述的晶型的制备方法，其包含以下 步骤：
[0053] 奥比特嗪一富马酸盐、本发明第一方面第2~3项或本发明第二方面任一项所述 的晶型在溶剂中结晶，得到本发明第一方面第1项所述的晶型。
[0054] 在本发明的一个实施方案中，所述奥比特嗪一富马酸盐为奥比特嗪一富马酸盐晶 型 Form A0
[0055] 在本发明的一个实施方案中，所述溶剂选自水，醇类（例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙 醇、丁醇、异丁醇、叔丁醇、戊醇、异戊醇等）、酮类（例如丙酮、丁酮等）、烷烃或卤代烷烃 (例如正己烷、环己烷、正庚烷、二氯甲烷（DCM)、氯仿（CHCl 3)等）、酯类（例如乙酸乙酯、乙 酸异丙酯、乙酸叔丁酯等）、醚类（例如异丙醚、甲基叔丁基醚、石油醚等）、四氢呋喃（THF)、 1，4-二氧六环、甲苯、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺（DMF)、N，N-二甲基乙酰胺（DMA)、N-甲基 吡咯烷酮（NMP)、二甲亚砜（DMSO)等、或上述溶剂的组合。
[0056] 在本发明的一个实施方案中，奥比特嗪一富马酸盐可通过挥发结晶得到本发明第 一方面第1项所述晶型。优选地，用于挥发结晶的溶剂选自醇类（例如甲醇、乙醇、正丙醇、 异丙醇、丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、异戊醇等）、酮类（例如丙酮、丁酮等）、卤代 烷烃（如DCM、01(：1 3等）、酯类（例如乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸叔丁酯等，其中不包含甲 酸叔丁酯）、1，4_二氧六环、甲苯、乙腈、DMF等，或上述溶剂的组合（例如甘油/乙醇（1 :1， V/V)，例如甲醇或乙醇/庚烷（1 :1，V/V)，例如THF/庚烷（2 :1，V/V)，THF/乙腈（1 :1，V/ V)，THF/ 乙酸异丙酯（1 :1，V/V)，THF/DCM(1 :1，V/V)，THF/ 丙酮（1 :1，V/V)，THF/ 乙酸乙 酯（1 :1，V/V)，THF/甲酸丁酯（1 :1，V/V)等）；优选地，所述挥发结晶在室温下进行。
[0057]在本发明的一个实施方案中，奥比特嗪一富马酸盐可通过重结晶得到本发明第一 方面第1项所述的晶型。优选地，用于重结晶的溶剂选自醇类（如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙 醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正戊醇、异戊醇等）、酮类（如丙酮、丁酮等）、酯类（如 乙酸乙酯、乙酸异丙酯等，其中不包含甲酸丁酯）、乙腈、THF等，或上述溶剂的组合（例如甲 醇/水（1 :4, V/V)，甲醇/甲基叔丁基醚（1 :4, V/V)，甲醇/乙酸异丙酯（1 :4, V/V)，乙醇 /正己烷（3 :2，V/V));优选地，奥比特嗪一富马酸盐溶解温度为25°C~90°C，例如为30°C、 40°C、50°C、60°C、70°C