壮培养基；
[0045]C、按常规条件培养得复壮菌种。
[0046] 其中，在步骤B将灵芝菌种培养成菌丝时，既可W采用现有的传统培养基，即原料 配比为±豆150-400g，葡萄糖10-30g，琼脂粉10-25g，憐酸二氨钟l-5g，硫酸儀0. 5-3g的 传统培养基。又可W采用本发明提供的灵芝菌丝提纯培养基，即原料配比为上豆150-400g， 葡萄糖10-30g，琼脂粉10-25g，憐酸二氨钟l-5g，硫酸儀0. 5-3g，玉米粉5-25g，教皮 25-75g，栋树树皮、青冈树树皮中至少一种50-200g的本发明灵芝菌丝提纯培养基。
[0047] 本发明的有益效果为：
[0048]本发明提供的一种灵芝菌种复壮培养基及其制备方法比传统培养基制作方法较 特别，该配方由±豆、葡萄糖、琼脂粉、憐酸二氨钟、硫酸儀、玉米粉、教皮、栋树树皮或青冈 树树皮、灵芝子实体配制而成，该培养基经过长期试验，摸索而得到，通过该提纯复壮培养 基而得到的菌种与传统培养基比较，其菌丝生长快、整齐浓密、菌丝洁白浓密、生长出的灵 芝子实体农艺性状佳。
【附图说明】
[0049] 图1 SLZ30采用传统培养基培养。
[0050] 图2 SLZ30采用本发明培养基培养。
[0051] 图3 SLZ46采用传统培养基培养。
[0052] 图4 SLZ46采用本发明培养基培养。
[0053] 图5SLZ44采用传统培养基培养。
[0054] 图6SLZ44采用本发明培养基培养。
【具体实施方式】 阳化5] 下面结合具体的实施案例对本发明进行进一步的说明，3个灵芝菌种化Z30、 SLZ46、SLZ44的提纯复壮试验。
[0056] 灵芝菌种复壮培养基的制备包括W下步骤：
[0057] (1)提纯复壮培养基配方
[0058] 灵芝菌丝提纯培养基，即1号培养基准备：
[0059] 选取20mmX200mm圆底试管20支，培养料全部在当地选择，±豆200g，葡萄糖 20邑，琼脂粉15g，憐酸二氨钟3g，硫酸儀1. 5g，玉米粉lOg，教皮50g，栋树树皮和/或青冈树 树皮任意比例lOOg。
[0060] 灵芝菌种复壮培养基，即2号培养基准备：<br>[0061] 选取20mmX200mm圆底试管20支，培养料全部在当地选择，±豆200g，葡萄糖 20邑，琼脂粉15g，憐酸二氨钟3g，硫酸儀1. 5g，玉米粉lOg，教皮50g，栋树树皮和/或青冈树 树皮任意比例皮lOOg，灵芝子实体50邑。
[0062] (2)选料及配制：分别按照上述两种培养基配方进行操作配置，按常规方法将± 豆去皮，切成薄化将±豆化玉米粉，教皮，栋树树皮和/或青冈树树皮任意比例、灵芝子 实体、水1000ml放在锅里一同煮制作1号培养基，另外将±豆片，玉米粉，教皮，栋树树皮和 /或青冈树树皮任意比例，灵芝子实体，水1000ml放在锅里一同煮制作2号培养基。当水沸 腾后用文火加热，煮沸过程中不断揽拌，保持20分钟。
[0063] (3)过滤：用Ξ层纱布过滤，取上述培养液，用蒸馈水补足至lOOOM^。
[0064] (4)溶解：将琼脂粉放入上培养液中加热溶解，溶解过程中不断揽拌，当琼脂粉溶 解后，加入葡萄糖、憐酸二氨钟、硫酸儀，完全溶解后备用。 阳0化](5)分装：将溶解后的培养液分装到预先准备好的试管中，每个试管装入量为试 管长度的1/5,然后用硅胶塞封口。
[0066] (6)灭菌：将分装好的试管进行捆扎，每10只试管捆扎一起，在高压锅内灭菌， 12rC维持35分钟。
[0067] (7)摆斜面：当锅内溫度下降到60°C左右，取出试管并摆斜面，斜面长度为总长度 的1/2,冷却后备用。
[0068](二）提纯与复壮
[0069](1)接种至1号培养基中：在无菌操作台上进行操作，选取直径5mm左右的菌种块 接种到配制好的试管1号培养基中。
[0070] (2)接种至2号培养基中：将接种好的1号培养基试管放入25Γ培养箱中培养，每 天观测，当斜面菌丝生长到一半后，挑选生长快而健壮的试管，取菌丝的尖端部位菌丝体移 接到2号培养基中，同样放在25Γ培养箱中培养，菌丝长满后即得到复壮菌种，可W进行大 规模生长或工厂化栽培。
[0071]1试验材料与方法 阳072] 1. 1试验材料
[0073] 将枝条粉碎晒干、发酵备用。棉巧壳、玉米忍、教皮、石膏、石灰均来自当地农贸市 场和工厂。 阳074] 1. 2试验方法 阳〇7引1. 2. 1培养基制作
[0076] 表1本发明培养基和传统培养基配方
[0077]
阳07引1.2. 2原种、栽培种制作
[0079] 原料选择要选完整无损、无霉变、无虫蛙，未发芽的玉米粒，将玉米用清水浸泡24 小时使其充分吸水膨胀后拱出，稍惊片刻，拌入1%的石膏。分装入菌种瓶中，12rC灭菌3 小时。
[0080] 1. 2. 3栽培袋制作
[0081] 1.2. 3.1 拌料
[0082] 按照如下配方称取栽培材料，将浸泡好的棉巧壳、玉米忍一起拌料，拌料均匀后将 教皮、石膏、石灰混合均匀，再同主料一起拌匀。最后调节水分使其达到65%左右，再堆积1 小时。
[0083] 栽培配方为：棉巧壳60%、杂木屑15%、玉米忍15%、教皮8%、石膏1 %、熟石灰 1%。
[0084] 1. 2. 3. 2 装袋 阳0化]采用17cmX33cmX0. 005cm聚乙締袋，每袋装干料0.化g，装好后盖上菌盖，准备 灭困。
[0086] 1. 2. 3. 3灭菌、冷却、接种
[0087] 将袋料灵芝进行常压灭菌，灭菌时间15小时。当溫度下降到30°C时，无菌操作接 种。
[0088] 1.2. 3. 4发菌和出芝管理
[0089] 将接种好的栽培袋放在黑暗中培养，培养条件为：溫度22-28°C，湿度65%左右。 经过30天左右的培养，菌丝发满菌袋。将发菌满的菌袋搬入出芝棚内，进行出芝管理，大约 经过1个月的出芝管理，即可采收灵芝子实体。
[0090] 2.结果与分析
[0091] 2. 1不同配方对灵芝菌丝生长的影响
[0092] 接种后，每天观察菌丝的生长情况，从菌丝的长势、浓密、整齐和洁白度等外观性 状W及菌丝生长速度等方面考察菌丝生长状况。从表2、表3、表4可W看出，采用本发明1 号培养基和2号培养基所得菌丝生长速度、长势、菌丝外观、发菌时间都比传染培养基配方 佳。
[0093] 表2 SLZ30灵芝菌丝生长情况
[0094]
[0099] 2. 2不同配方对灵芝子实体性状及产量的影响
[0100] 从表5、表6、表7中可W看出，3个菌株经过本发明1号培养基和2号培养基提纯 复壮后其菌盖直径、菌盖厚度、单片鲜重、产量、生物转化率相比传统培养基存在的明显的 优势，从图1-6中更能直观的看出其差别。 阳101]表5 SLZ30灵芝子实体性状及产量的比较阳102]
阳1化]表7 SLZ44灵芝子实体性状及产量的比较阳106]
阳107] 3、结论
[0108] 上述3个品种的灵芝菌种通过本发明提纯培养基和复壮培养基，从菌丝生长速 度、外观W及菌丝长势明显看出其抗逆性、活性得到了显著提高。从子实体的农艺性状中其 菌盖直径、厚度、产量和生物转化率可W看出，3个品种菌种通过本发明方法提纯复壮培养 后各项数据得到了明显的提高，其产量最高提高了 44. 32%，最低提高了 40. 48%，单袋出 产密集，产量明显提高。
【主权项】
1. 灵芝菌种提纯复壮培养方法，其特征在于：包括如下步骤： A、 制备灵芝菌种复壮培养基：所述灵芝菌种复壮培养基含有下述配比的原料： 土豆150-400g，葡萄糖10-30g，琼脂粉10-25g，磷酸二氢钾l-5g，硫酸镁0. 5-3g，灵芝 子实体30-70g，蒸馏水适量； B、 将灵芝菌种培养成菌丝后接种至步骤A所得灵芝菌种复壮培养基； C、 按常规条件培养得复壮菌种； 其中，优...