一种提高红霉素发酵效价的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及微生物发酵领域，特别是设及一种提高红霉素发酵效价的方法。
【背景技术】
[0002] 红霉素是大环内醋类抗生素，抗菌谱与青霉素相似，临床上常用于对青霉素过敏 者的治疗。近年来由于红霉素衍生物的广泛开发使用，使红霉素的需求量不断增加。
[0003] 现有技术中，W红色糖多胞菌做出发菌株发酵生产红霉素的过程中，全程补入含 大量迟效氮源、憐元素的混合氮源和糖水，运种方法具有W下技术缺点：1)随着菌丝体大 量繁殖，中后期体积增加，造成溶氧的缺乏；2)由于迟效氮源消耗慢，发酵结束残留较大， 影响提取的效果及成品质量；3)有些菌种全程只需补入糖水，只在基础料中加入足够量的 氮源，运样会造成前期营养丰富，菌丝大量繁殖，氮源消耗量大，发酵液粘度、发酵液表面张 力加大，氧的传递效率降低，溶解氧浓度降低，造成菌体溶氧缺乏，中后期氮源缺乏，菌丝提 前衰老，发酵周期缩短，产率减低。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种有效提高红霉素效价的方 法。 阳〇化]为实现上述发明目的所采取的技术方案为：
[0006] 一种提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在W红色糖多胞菌做出发菌株发酵 生产红霉素的过程中，缓慢流加补入硫酸锭溶液。
[0007] 所述硫酸锭溶液的补入量合计为发酵液体积的5-10%。
[0008] 所述硫酸锭溶液质量体积浓度为2-5 %。
[0009] 所述硫酸锭溶液质量体积浓度为2-3 %。
[0010] 在发酵到60小时时，开始缓慢流加硫酸锭溶液。
[0011] 在发酵80-140小时缓慢流加硫酸锭溶液。
[0012] 本发明通过在发酵60小时时开始流加硫酸锭溶液，由于此时期菌丝大量繁殖， 基础料氮源利用较多，发酵液需氧量大，发酵液粘度大，体积增加，可通过缓慢流加硫酸锭 溶液，改变发酵液粘度，改善溶氧，调节红霉素各组分的合成，同时可补充氮源，增加菌体活 力，延长红霉素分泌期，从而提高红霉素发酵水平。
【具体实施方式】
[0013] 本发明通过W下实施例进一步详述，但本实施例所叙述的技术内容是说明性的， 而不是限定性的，不应依此来局限本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所作 的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
[0014] 下述实施例中
[0015] 试验罐全程可检测到溶氧、PH、溫度、揽拌转速等参数。
[0016] 硫酸锭的流加量根据检测粘度及溶氧状况确定。
[0017] 其它补料按正常工艺控制进行。
[0018] 制备方法：采用=级发酵生产红霉素，具体步骤如下：
[0019] 1、斜面抱子制备：将红色糖多胞菌在无菌条件下接种于固体培养基上，35°C恒溫 培养6-8天，接种于一级种子培养基中。
[0020] 2、上述斜面抱子培养基按照常规方法配制，配方为：淀粉8g/l，硫酸锭2. 5g/l，氯 化钢2. 3g/l，碳酸巧2. 4g/l，玉米浆1.Og/L。
[0021] 3、一级种子培养：将步骤1生长好的斜面抱子无菌方式接种于一级种子培养基 中，35°C恒溫培养，通气比为1. 5-2.Ov/v/min，揽拌转速为400-600r/min，培养40-60小 时。
[0022] 4、上述一级种子培养基用常规方法制备，其配方为淀粉lOOg/l，糊精50g/l，豆粉 75g/l，玉米浆40g/l，硫酸锭18g/l，氯化钢15g/l，碳酸巧35g/l，豆油20g/L。
[0023] 5、二级种子培养：将步骤3生长好的一级种子培养液无菌方式接种于二级种子培 养基中，35°C恒溫培养，通气比为1. 5-2.Ov/v/min，揽拌转速为400-600r/min，培养22-35 小时。
[0024] 6、上述二级种子培养基用常规方法制备，其配方为淀粉300g/l，糊精200g/l，豆 粉350g/l，玉米浆120g/l，硫酸锭20g/l，氯化钢25g/l，碳酸巧50g/l，豆油30g/L。
[0025] 7、发酵培养：将步骤5培养好的二级种子无菌条件分别接种于实施例与对照例发 酵培养基中，接种量为10-20%，控制培养溫度32-35°C，过程通气比：0. 8-1. 5v/min，保证 过程溶氧不低于20%，培养6-8天。
[00%] 8、发酵培养基用常规方法制备。
[0027] 对照例培养基配方为：淀粉580g/l，糊精150g/l，豆粉525g/l，玉米浆300g/l，硫 酸锭40g/l，氯化钢37. 5g/l，碳酸巧105g/l，豆油50g/L。
[0028] 实施例发酵培养基配方：淀粉580g/l，糊精150g/l，豆粉375g/l，玉米浆125g/L， 硫酸锭40g/L氯化钢37. 5g/L碳酸巧105g/L，豆油45g/L。 阳〇29] 实施例1
[0030] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到60小时开始缓慢流加硫酸锭 溶液，所述硫酸锭溶液浓度为3-5%，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在120-25化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-8%。
[0031] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，175小时停止发酵。
[0032]
阳〇3引 实施例2
[0034] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制 备的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到60小时开始缓慢流加硫酸 锭溶液，所述硫酸锭溶液浓度为6%，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在120-20化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-8%。
[0035] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，175小时停止发酵。
[0037] 实施例3
[0038] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到80小时开始缓慢流加硫酸锭 溶液，所述硫酸锭溶液浓度为3. 0%，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在120-20化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-6%。176小时停止发酵。
[0039] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，176小时停止发酵。
W41] 实施例4
[0042] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制 备的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到80小时开始缓慢流加硫酸 锭溶液，所述硫酸锭溶液浓度为6%，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在120-20化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-6%。172小时停止发酵。
[0043] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，172小时停止发酵。
W45] 实施例5
[0046] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制 备的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到80小时开始缓慢流加硫酸 锭溶液，所述硫酸锭溶液浓度为1 %，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在200-30化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-8%。172小时停止发酵。
[0047] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，172小时停止发酵。
W49] 实施例6
[0050] 1、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制 备的实施例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，发酵到90小时开始缓慢流加硫酸 锭溶液，所述硫酸锭溶液浓度为4%，根据粘度及溶氧状况控制每小时流加量在150-25化/ 虹，流加至140小时停止，累计流加量为发酵液体积的5-6%。170小时停止发酵。
[0051] 2、取上述制备方法中步骤5培养好的二级种子培养基无菌条件接种于步骤7制备 的正常对照例发酵培养基中，按照正常培养条件进行培养，170小时停止发酵。
[0052]
【主权项】
1. 一种提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在以红色糖多胞菌做出发菌株发酵生 产红霉素的过程中，缓慢流加补入硫酸铵溶液。2. 按照权利要求1所述的提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：所述硫酸铵溶液的 补入量合计为发酵液体积的5-10%。3. 按照权利要求1或2所述的提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：所述硫酸铵溶 液质量体积浓度为2-5%。4. 按照权利要求3所述的提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：所述硫酸铵溶液质 量体积浓度为2-3%。5. 按照权利要求1所述的提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在发酵到60小时 时，开始缓慢流加硫酸铵溶液。6. 按照权利要求1或5所述的提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在发酵80-140 小时缓慢流加硫酸铵溶液。
【专利摘要】本发明涉及一种提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在以红色糖多胞菌做出发菌株发酵生产红霉素的过程中，缓慢流加补入硫酸铵溶液。本发明通过在发酵60小时时开始流加硫酸铵溶液，由于此时期菌丝大量繁殖，基础料氮源利用较多，发酵液需氧量大，发酵液粘度大，体积增加，可通过缓慢流加硫酸铵溶液，改变发酵液粘度，改善溶氧，调节红霉素各组分的合成，同时可补充氮源，增加菌体活力，延长红霉素分泌期，从而提高红霉素发酵水平。
【IPC分类】C12R1/645, C12P19/62
【公开号】CN105296571
【申请号】CN201510797249
【发明人】章惠霞, 孙瑞君, 张志
【申请人】宁夏启元药业有限公司
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月19日