一种提取佛手多糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天然产物提取技术领域，具体而言，涉及一种提取佛手多糖的方法。
【背景技术】
[0002]佛手，又称佛手柑，为芸香科柑橘属植物佛手的干燥果实，主要产于我国的广东、广西、四川、浙江等地，是我国传统的名贵中药。其药性温，味辛、苦、酸、温，具有疏肝理气、和胃止痛之功效，用于治疗肝郁气滞、胸胁胀痛、胃脘痞满、食少呕吐。佛手不仅可供药用，还可做佛手盆景，因而具有很大的开发利用价值。
[0003]佛手喜温暖、湿润的气候环境，因此宜选择气候温暖、余量充沛、阳光充足和冬季无冰冻的地方种植。佛手的繁殖方式只要采用嫁接、扦插和空中压条三种方法，其中以嫁接法最好。此外，佛手需肥量大，施肥过少或不及时，易引起落花落果。经研究发现，佛手早期落果与幼果的可溶性蛋白质和植物激素有关，喷沙GA3可提高佛手的座果率。
[0004]中医认为，本品性味辛、苦、温，入肝、脾、胃、肺经，有舒肝理气，燥湿化痰之功。适用于肝郁气滞所致的胁痛，胸闷，脾胃气滞所致的院腹胀满，纳呆胃痛，暖气呕恶，咳嗽痰多，胸闷胸痛等。《本草便读》言其“理气快隔，惟肝脾气滞者宜之”。《本草纲目》言“佛手柑。气味辛，温无毒;主治下气，除心头痰水;煮酒饮，治痰多咳嗽;煮汤，治心下气痛”。现代医学分析，佛手干果中含柠檬油素、微量的香叶木甙和橙皮甙以及多种维生素，能扩张冠状动脉，并能抑制离体肠管运动。
[0005]许多文献报道佛手的主要成分有黄酮类、挥发油类，多糖类、香豆素类、氨基酸、果胶等化合物。大量药理和临床研究均表明，多糖类化合物首先是一种免疫调节剂，它能激活免疫细胞，提高机体的免疫功能。其次，它还有抗肿瘤的作用，一是对已经产生的肿瘤细胞的杀伤作用，二是表现为对肿瘤发生的预防，多糖在这两方面的作用很明显。再次，它还有抗氧化、清除体内超氧阴阳离子、经自由基、过氧化氢及其他活性氧的作用，从而达到抗衰老的目的。而且，多糖还有降血脂、抗血栓、降血糖、抗辐射和增强骨髓造血功能；抗感染和抗各种化学因素对脏器损伤的作用等等。
[0006]目前，佛手中多糖提取的文献报道较少，主要的研究集中对其黄酮和香豆素的提取。浸提法、加热法是佛手香豆素或者黄酮物等物质的传统提取方法，具有操作不太复杂，但存在提取时间长、试剂消耗大、温度高、得率低等问题。
【发明内容】
[0007]有鉴于此，本发明一方面提供一种较为提取佛手多糖的方法，该方法操作简单，得率高。
[0008]—种提取佛手多糖的方法，包括以下步骤:
[0009]将佛手进行脱脂；
[0010]将经脱脂后的佛手以水为溶剂在超声波的条件下进行超声波提取，得到提取液；以及[0011 ]将所述提取液进行透析。
[0012]进一步地，所述脱脂包括:先以石油醚为溶剂提取，而后以乙醇为溶剂提取。
[0013]进一步地，所述以石油醚为溶剂提取中:
[0014]所述石油醚的用量为8?12ml，以佛手的质量为lg计；
[0015]优选地，所述提取的时间为0.5?1.5h。
[0016]进一步地，所述以乙醇为溶剂提取中:
[0017]所述乙醇的用量为6?10ml，以佛手的质量为lg计；
[0018]优选地，所述乙醇的质量分数为70?90%;
[0019]优选地，所述提取的时间为0.5?lh。
[0020]进一步地，所述超声波提取中:
[0021]所述超声波的频率为25?60kHz;
[0022]优选地，提取的时间为0.5?2.5h;
[0023]优选地，所述水的用量为5?25ml，以脱脂后的佛手质量为lg计；
[0024]优选地，温度为50?90°C;
[0025]优选地，提取的次数为1?5次。
[0026]进一步地，所述透析中:
[0027]以蒸馏水为透析液；
[0028]优选地，透析采用透析袋；
[0029]优选地，所述透析的时间为3?7天；
[0030]优选地，所述透析袋为截留重均分子量为5000?7000透析袋。
[0031 ]进一步地，所述脱脂之前还包括对佛手进行粉粹至200目。
[0032]进一步地，所述透析后还包括浓缩冻干。
[0033]进一步地，所述脱脂之后超声波提取前还包括将脱脂后的佛手进行烘干。
[0034]进一步地，所述烘干的温度为60?80°C。
[0035]本发明提取佛手多糖的方法以水为溶剂在超声波条件下提取，由此显著提高了得率，操作也较为简单。另外，该方法减少试剂用量、节约能耗、减少污染。
【附图说明】
[0036]图1示出了实施例1至5超声波提取中料液比对佛手多糖提取率的影响。
[0037]图2示出了实施例6至9超声波提取中提取时间对佛手多糖提取率的影响。
[0038]图3示出了实施例10至12超声波提取中超声波频率对佛手多糖提取率的影响。
[0039]图4示出了实施例13至16超声波提取中提取温度对佛手多糖提取率的影响。
[0040]图5示出了实施例17至20超声波提取中提取次数对佛手多糖提取率的影响。
【具体实施方式】
[0041]为了便于理解本发明，下面合实施例来进一步说明本发明的技术方案。
[0042]作为本发明中的脱脂，指将佛手原料所含的脂类化合物这一非目标物质通过溶剂溶解而去除。脱脂所采用的溶剂较好地使用石油醚，以及乙醇。即，先以石油醚提取，而后以乙醇提取。应当理解的是，在不较大地损害脱脂效果的前提下，也可采用与石油醚具有类似溶解性质的溶剂，例如环己烷等。可采用与乙醇具有类似溶解性质的溶剂，例如正丙醇、异丁醇等。至于二者溶剂的用量不做特别严苛的要求，但是石油醚的较佳用量为8?12ml，以佛手的质量为lg计，例如可以为8ml、8.5ml、9ml、10ml、1 lml、11.5ml、12ml等，特别优选为10ml。采用石油醚提取的时间以0.5?1.5h为宜，例如30min、45min、50min、60min、80min、85min或90min等。石油醚的较佳用量为6?10ml，以佛手的质量为lg计，例如可为6ml、
6.5ml、7ml、7.5ml、8ml、9ml、9.5ml或10ml等，特别优选为8ml。采用乙醇提取的时间较好地为0.5?lh，例如30111；[11、35111；[11、40111；[11、45111；[11、50111；[11、55111；[11或60111；[11等。对于乙醇的形式，即其纯度不做特别的限$1」，例如质量分数可为70?90%，例如70%、75%、80%、85%、90%等，应当知晓的是，此处百分质量是基于该乙醇溶液为乙醇和水形成的混合液。
[0043]应当明了的是，脱脂中采用上述溶剂提取的设备的形式很多，例如可采用索氏提取器。为了增加上述两种溶剂对佛手原料的溶解效果，可将佛手作粉粹处理，例如可粉粹至不超过200目大小。当然为了降低佛手中所含水分的影响，可将佛手于脱脂前进行除水，例如可晾晒、或风干等。采用上述两种溶剂提取的操作完毕后，可通过过滤(例如减压过滤)得到滤饼(去除含有脱脂产物的滤液)以实施后续的步骤。于脱脂之后，还可以经待后续处理的滤饼进行干燥，例如可于60?80°C烘干，例如60°C、65°C、70°C、75°C、80°C等。
[0044]作为本发明中的超声波提取，指在借助产生波使用溶剂进行提取。超声波的频率以25?60kHz为佳，例如25kHz、40kHz、50kHz、60kHz等，特别优选为50kHz。于此频率的产生波下，提取的时间以0.5?2.5h为佳，例如0.5h、lh、1.5h、2.0h、2.5h等，特别优选为1.5h。提取的温度以50?90°C为佳，例如50°C、60°C、70°C、80°C、90°C等，特别优选为80°C。至于提取的次数，可采用1?5次，例如1次、2次、3次、4次、5次等，特别优选为3次。
[0045]本发明中产生波提取以水为溶剂。水的形式，采用纯度较高的水，例如蒸馏水，当然其它形式的水例如反渗透水等也可。以水为蒸馏水为例，水的使用量5?25ml，以脱脂后的佛手质量为lg计，例如5ml、10ml、15ml、20ml、25ml。注意，此处水的使用量同脱脂后的佛手质量之比也称为料液比。
[0046]作为本发明中的透析，其透析所采用的半透膜形式不做限定。例如可采用透析袋，透析袋优选为截留重均分子量(Wm)为5000?7000透析袋。此处，该规格的透析袋可采用市售的。透析的时间以达到预定的透析效果为准，透析时间可以为3?7天，例如3天、4天、5天、6天、7天等。应当明白的是，此处“天”指24h。在透析后，最佳地可以将透析得到的液体进行浓缩冻干。在此，浓缩冻干可根据实际情况做调整，这里就不限制。
[0047]下面通过具体的实施例来说明本发明的方案。
[0048]实施例1
[0049]采摘新鲜佛手晒干，粉碎后过200目筛。然后称取200目筛的干佛手粉50.0g，加入1000mL索氏提取器，再加入石油醚500mL，回流提取lh。减压过滤得到滤渣，滤渣70°C挥干溶剂后再加入上述索氏提取器，再加入质量分数为80%的乙醇400mL加热回流45min，最后减压过滤并在70°C下烘干得到脱脂的佛手渣。
[0050]称取上述脱脂后的佛手渣5.0g，加入25ml蒸馏水，在超声温度80°C，超生波频率50kHz条件下回流提取1.5h。重复提取3次，得到提取液。
[0051]将上述提取液加入透析袋(Mw:6000)蒸馏水透析5天，将透析袋中的溶液浓缩后冻干得到佛手多糖提取物。
[0052]实施例2
[0053]本例中，超声波提取中加入蒸馏水的体积为50ml，其它同实施例1。
[0054]实施例3
[0055]本例中，超声波提取中加入蒸馏水的体积为75ml，其它同实施例1。
[0056]实施例4
[0057]本例中，超声波提取中加入蒸馏水的体积为100ml，其它同实施例1。
[0058]实施例5
[0059]本例中，超声波提取中加入蒸馏水的体积为125ml，其它同实施例1。
[0060]实施例6
[0061 ]本例中，超声波提取中提取时间为0.5h，其它同实施例3。
[0062]实施例7
[0063]本例中，超声波提取中提取时间为lh，其它同实施例3。
[0064