一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺的制作方法_2

文档序号:9701927阅读:来源:国知局
滤后进入一次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰 胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在20°C,纳滤的流速控制在 300L/h;纳滤的浓缩体积倍数为5倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗lOmin。
[0043] 步骤4:经过一次纳滤后进入草酸沉淀罐,再加入一次纳滤得到的浓缩液重量的 0.004%的固体草酸钠,搅拌时间40min后静置。
[0044] 步骤5:进入一次板框过滤除去草酸沉淀罐中的沉淀,板框中过滤介质为滤板,滤 板上预涂有2mm的助滤剂活性炭。
[0045] 步骤6:进入一次过柱纯化,一次过柱纯化采用SP825树脂。
[0046] 步骤7:将一次过柱纯化得到的洗脱液进入二次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm 的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在20°C,纳滤的流 速控制在300L/h;纳滤的浓缩体积倍数为5倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗lOmin。
[0047] 步骤8:进入一次结晶罐中进行一次结晶,加入二次纳滤得到的浓缩液的重量10倍 的丙酮,起始温度控制为35°C,终点温度为7°C,降温速度为l°C/min。
[0048] 步骤9:进入二次板框过滤得到一次结晶体,板框中过滤介质为滤板,滤板上预涂 有2mm的助滤剂活性炭。
[0049] 步骤10:将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐,加入去离子水溶 解,搅拌并加热,待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的3%的活性炭进行脱色 30min〇
[0050] 步骤11:进入脱色板框进行脱色,脱色板框中过滤介质为滤板,滤板上预涂有2mm 的助滤剂活性炭。
[0051] 步骤12:将脱色板框中得到的过滤液进入二次过柱纯化,二次过柱纯化采用 HS20SS树脂。
[0052]步骤13:进入超滤机组,超滤采用中空纤维超滤膜组件,超滤时,控制压力0.2MPa。
[0053] 步骤14:进入三次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳 滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在20°C,纳滤的流速控制在300L/h;纳滤的浓缩 体积倍数为5倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗lOmin。
[0054] 步骤15:进入二次结晶罐中进行二次结晶,加入三次纳滤得到的浓缩液的重量10 倍的丙酮,起始温度控制为35°C,终点温度为7°C,降温速度为l°C/min。
[0055] 步骤16:真空抽滤至干燥。
[0056] 步骤17:将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中,加入二次结晶体重量8倍的 去离子水,搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。
[0057] 步骤18:置于冷冻干燥机内,_45°C冷冻4h,开启真空至15Pa以下进行升华,并升温 至-10°c,在此温度保持真空10h,随后继续升温到0°C并保持真空5h。最后升温至30°C保持 真空3h,打粉包装。 实施例2的HPLC数据表
[0058] 总收率为92.1%,纯度为96.94%。
[0059] 实施例3 步骤1:万古霉素发酵液10m3,效价8.4g/L。将10m3万古霉素发酵液置于预处理罐中,控 制转速为80rad/min,温度为25°C,加入发酵液体积的0.2 %的质量分数为16 %的盐酸进行 成盐,搅拌30min得到预处理液。
[0060] 步骤2:陶瓷膜过滤,选用多通道陶瓷膜,通道数为12,其膜材质为二氧化硅,孔径 为0.2μπι。采用错流模式进行循环过滤,压力控制为0.IMPa。
[0061 ] 步骤3:经过陶瓷膜过滤后进入一次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰 胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在21°C,纳滤的流速控制在 320L/h;纳滤的浓缩体积倍数为4倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗8min。
[0062] 步骤4:经过一次纳滤后进入草酸沉淀罐,再加入一次纳滤得到的浓缩液重量的 0.002 %的固体草酸钠,搅拌时间30min后静置。
[0063] 步骤5:进入一次板框过滤除去草酸沉淀罐中的沉淀,板框中过滤介质为滤板,滤 板上预涂有2mm的助滤剂活性炭。
[0064]步骤6:进入一次过柱纯化,一次过柱纯化采用SP825树脂。
[0065]步骤7:将一次过柱纯化得到的洗脱液进入二次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在21°C,纳滤的流 速控制在320L/h;纳滤的浓缩体积倍数为4倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗8min。
[0066] 步骤8:进入一次结晶罐中进行一次结晶,加入二次纳滤得到的浓缩液的重量10倍 的乙醚,起始温度控制为37°C,终点温度为5°C,降温速度为2°C/min。
[0067] 步骤9:进入二次板框过滤得到一次结晶体,板框中过滤介质为滤板,滤板上预涂 有2mm的助滤剂活性炭。
[0068] 步骤10:将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐,加入去离子水溶 解,搅拌并加热,待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的4%的活性炭进行脱色 30min〇
[0069] 步骤11:进入脱色板框进行脱色,脱色板框中过滤介质为滤板,滤板上预涂有2mm 的助滤剂活性炭。
[0070] 步骤12:将脱色板框中得到的过滤液进入二次过柱纯化,二次过柱纯化采用 HS20SS树脂。
[0071] 步骤13:进入超滤机组,超滤采用中空纤维超滤膜组件,超滤时,控制压力O.IMPa。
[0072] 步骤14:进入三次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳 滤过程中,压力控制在2MPa,滤液温度控制在21°C,纳滤的流速控制在320L/h;纳滤的浓缩 体积倍数为4倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗8min。
[0073]步骤15:进入二次结晶罐中进行二次结晶,加入三次纳滤得到的浓缩液的重量10 倍的乙醚,起始温度控制为37°C,终点温度为5°C,降温速度为2°C/min。
[0074] 步骤16:真空抽滤至干燥。
[0075] 步骤17:将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中,加入二次结晶体重量9倍的 去离子水,搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。
[0076] 步骤18:置于冷冻干燥机内,_45°C冷冻4h,开启真空至15Pa以下进行升华,并升温 至-10°c,在此温度保持真空10h,随后继续升温到0°C并保持真空5h。最后升温至30°C保持 真空3h,打粉包装。 实施例3的HPLC数据表
[0077] 总收率为91.9%,纯度为96.95%。
[0078] 实施例4 步骤1:万古霉素发酵液10m3,效价8.4g/L。将10m3万古霉素发酵液置于预处理罐中,控 制转速为80rad/min,温度为25°C,加入发酵液体积的0.3 %的质量分数为18 %的盐酸进行 成盐,搅拌30min得到预处理液。
[0079] 步骤2:陶瓷膜过滤,选用多通道陶瓷膜,通道数为14,其膜材质为二氧化硅,孔径 为0.2μπι。采用错流模式进行循环过滤,压力控制为0.IMPa。
[0080] 步骤3:经过陶瓷膜过滤后进入一次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰 胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2.IMPa,滤液温度控制在22°C,纳滤的流速控制在 360L/h;纳滤的浓缩体积倍数为5倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗8min。
[0081 ]步骤4:经过一次纳滤后进入草酸沉淀罐,再加入一次纳滤得到的浓缩液重量的 0.001 %的固体草酸钠,搅拌时间35min后静置。
[0082]步骤5:进入一次板框过滤除去草酸沉淀罐中的沉淀,板框中过滤介质为滤板,滤 板上预涂有2mm的助滤剂活性炭。
[0083] 步骤6:进入一次过柱纯化,一次过柱纯化采用SP825树脂。
[0084]步骤7:将一次过柱纯化得到的洗脱液进入二次纳滤机组,纳滤采用孔径为0.5nm 的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳滤过程中,压力控制在2.IMPa,滤液温度控制在22°C,纳滤的 流速控制在360L/h;纳滤的浓缩体积倍数为5倍,纳滤结束,采用纯化水顶洗8min。
[0085] 步骤8:进入一次结晶罐中进行一次结晶,加入二次纳滤得到的浓缩液的重量10倍 的乙醇,起始温度控制为40°C,终点温度为0°C,降温速度为l°C/min。
[0086] 步骤9:进入二次板框过滤得到一次结晶体,板框中过滤介质为滤板,滤板上预涂 有2mm的助滤剂活性炭。
[0087] 步骤10:将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐,加入去离子水溶 解,搅拌并加热,待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的5%的活性炭进行脱色
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