30min〇
[0088] 步骤11:进入脱色板框进行脱色，脱色板框中过滤介质为滤板，滤板上预涂有2mm 的助滤剂活性炭。
[0089] 步骤12:将脱色板框中得到的过滤液进入二次过柱纯化，二次过柱纯化采用 HS20SS树脂。
[0090] 步骤13:进入超滤机组，超滤采用中空纤维超滤膜组件，超滤时，控制压力0.2MPa。
[0091] 步骤14:进入三次纳滤机组，纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳 滤过程中，压力控制在2.IMPa，滤液温度控制在22°C，纳滤的流速控制在360L/h;纳滤的浓 缩体积倍数为5倍，纳滤结束，采用纯化水顶洗8min。
[0092]步骤15:进入二次结晶罐中进行二次结晶，加入三次纳滤得到的浓缩液的重量10 倍的乙醇，起始温度控制为40°C，终点温度为0°C，降温速度为l°C/min。
[0093] 步骤16:真空抽滤至干燥。
[0094] 步骤17:将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中，加入二次结晶体重量10倍 的去离子水，搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。
[0095] 步骤18:置于冷冻干燥机内，_45°C冷冻4h，开启真空至15Pa以下进行升华，并升温 至-10°c，在此温度保持真空10h，随后继续升温到0°C并保持真空5h。最后升温至30°C保持 真空3h，打粉包装。 实施例4的HPLC数据表
[0096] 总收率为92.0%，纯度为96.95%。
[0097] 实施例5 步骤1:万古霉素发酵液l〇m3,效价8.4g/L。将10m3万古霉素发酵液置于预处理罐中，控 制转速为80rad/min，温度为25°C，加入发酵液体积的0.4 %的质量分数为20 %的盐酸进行 成盐，搅拌30min得到预处理液。
[0098] 步骤2:陶瓷膜过滤，选用多通道陶瓷膜，通道数为16,其膜材质为二氧化硅，孔径 为0.2μπι。采用错流模式进行循环过滤，压力控制为0.IMPa。
[0099] 步骤3:经过陶瓷膜过滤后进入一次纳滤机组，纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰 胺复合纳滤膜;纳滤过程中，压力控制在2.2MPa，滤液温度控制在23°C，纳滤的流速控制在 340L/h;纳滤的浓缩体积倍数为4倍，纳滤结束，采用纯化水顶洗9min。
[0100] 步骤4:经过一次纳滤后进入草酸沉淀罐，再加入一次纳滤得到的浓缩液重量的 0.003 %的固体草酸钠，搅拌时间45min后静置。
[0101 ]步骤5:进入一次板框过滤除去草酸沉淀罐中的沉淀，板框中过滤介质为滤板，滤 板上预涂有2mm的助滤剂活性炭。
[0102] 步骤6:进入一次过柱纯化，一次过柱纯化采用SP825树脂。
[0103] 步骤7:将一次过柱纯化得到的洗脱液进入二次纳滤机组，纳滤采用孔径为0.5nm 的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳滤过程中，压力控制在2.2MPa，滤液温度控制在23°C，纳滤的 流速控制在340L/h;纳滤的浓缩体积倍数为4倍，纳滤结束，采用纯化水顶洗9min。
[0104] 步骤8:进入一次结晶罐中进行一次结晶，加入二次纳滤得到的浓缩液的重量10倍 的乙醚，起始温度控制为43°C，终点温度为12°C，降温速度为2°C/min。
[0105] 步骤9:进入二次板框过滤得到一次结晶体，板框中过滤介质为滤板，滤板上预涂 有2mm的助滤剂活性炭。
[0106] 步骤10:将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐，加入去离子水溶 解，搅拌并加热，待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的4%的活性炭进行脱色 30min〇
[0107] 步骤11:进入脱色板框进行脱色，脱色板框中过滤介质为滤板，滤板上预涂有2mm 的助滤剂活性炭。
[0108] 步骤12:将脱色板框中得到的过滤液进入二次过柱纯化，二次过柱纯化采用HS20SS树脂。
[0109] 步骤13:进入超滤机组，超滤采用中空纤维超滤膜组件，超滤时，控制压力O.IMPa。
[0110] 步骤14:进入三次纳滤机组，纳滤采用孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳 滤过程中，压力控制在2.2MPa，滤液温度控制在23°C，纳滤的流速控制在340L/h;纳滤的浓 缩体积倍数为4倍，纳滤结束，采用纯化水顶洗9min。
[0111] 步骤15:进入二次结晶罐中进行二次结晶，加入三次纳滤得到的浓缩液的重量10 倍的乙醚，起始温度控制为43°C，终点温度为12°C，降温速度为2°C/min。
[0112] 步骤16:真空抽滤至干燥。
[0113] 步骤17:将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中，加入二次结晶体重量11倍 的去离子水，搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。
[0114] 步骤18:置于冷冻干燥机内，_45°C冷冻4h，开启真空至15Pa以下进行升华，并升温 至-10°c，在此温度保持真空10h，随后继续升温到0°C并保持真空5h。最后升温至30°C保持 真空3h，打粉包装。 实施例5的HPLC数据表
[0115]总收率为92.5%，纯度为96.95%。
【主权项】
1. 一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:包括如下步骤:发酵液的预处理、陶 瓷膜过滤、一次纳滤、草酸沉淀、一次板框过滤、一次过柱纯化、二次纳滤、一次结晶、二次板 框过滤、活性炭脱色、脱色板框过滤、二次过柱纯化、超滤、三次纳滤、二次结晶、真空抽滤、 晶体溶解、冷冻干燥、打粉包装，其中 ① 发酵液的预处理:按照发酵液体积的0.1-0.5%往万古霉素发酵液加入药学可接受的 酸进行成盐，搅拌30min得到预处理液； ② 草酸沉淀:将一次纳滤得到的浓缩液加入草酸沉淀罐，再加入一次纳滤得到的浓缩 液重量的0.001-0.004%的固体草酸钠，搅拌30-50min后静置； ③ 活性炭脱色:将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐，加入去离子水 溶解，搅拌并加热，待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的3-6%的活性炭进行 脱色30min。2. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述板框过滤 中，过滤介质为滤板，所述滤板上预涂有2mm的助滤剂，所述助滤剂为活性炭。3. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述一次结晶 和二次结晶过程中均加入晶体重量10倍的有机溶剂进行结晶，所述有机溶剂选用乙醇、丙 酮和乙醚中的其中一种。4. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述一次结晶 和二次结晶的起始温度为35-45°C，终点温度为0_15°C，降温速度为l_3°C/min。5. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述晶体溶解 步骤为:将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中，加入二次结晶体重量8-12倍的去离 子水，搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。6. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述药学可接 受的酸为盐酸，所述盐酸的质量分数为10-20%。7. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述一次过柱 纯化采用SP825树脂，所述二次过柱纯化采用HP20SS树脂。8. 根据权利要求1所述的一种万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述陶瓷膜为多通 道陶瓷膜，通道数控制在8~16，其膜材质为二氧化硅，孔径为0.2μπι。9. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述纳滤采用 孔径为0.5nm的芳香聚酰胺复合纳滤膜;纳滤过程中，压力控制在2~2.2MPa，滤液温度控制 在20~25°C，纳滤的流速控制在300~400L/h;纳滤的浓缩体积倍数为4~5倍，纳滤结束，采 用纯化水顶洗8~1Omin。10. 根据权利要求1所述的一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是:所述超滤采 用中空纤维超滤膜组件，超滤时，控制压力0.1~0.2MPa。
【专利摘要】本发明公开了一种盐酸万古霉素的分离纯化工艺，其特征是：包括如下步骤：发酵液的预处理、陶瓷膜过滤、一次纳滤、草酸沉淀、一次板框过滤、一次过柱纯化、二次纳滤、一次结晶、二次板框过滤、活性炭脱色、脱色板框过滤、二次过柱纯化、超滤、三次纳滤、二次结晶、真空抽滤、晶体溶解、冷冻干燥、打粉包装。本发明的有益效果：该工艺在保证高收率的基础上提高产品的纯度，简化生产。
【IPC分类】C07K1/30, C07K9/00, C07K1/36, C07K1/34
【公开号】CN105461786
【申请号】CN201610046437
【发明人】芦琦, 陈晓静
【申请人】雅赛利(台州)制药有限公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2016年1月23日