一实施方式中，ELAVL2 siRNA也可以包含与序列编号1、2、3、或4的碱基序列互补的碱基序列(例如，序列编号5的碱基序列的1-21位的碱基序列、序列编号6的碱基序列的1-21位的碱基序列、序列编号7的碱基序列的1-19位的碱基序列、或序列编号8的碱基序列的1-21位的碱基序列)。在本发明的一实施方式中，TEAD1 siRNA也可以包含与序列编号9、10、11、或12的碱基序列互补的碱基序列(例如，序列编号13的碱基序列的1-19位的碱基序列、序列编号14的碱基序列的1-18位的碱基序列、序列编号15的碱基序列的1-19位的碱基序列、或序列编号16的碱基序列的1-19位的碱基序列)。在本发明的一实施方式中，GATAD2B siRNA也可以含有与序列编号17、18、19、或20的碱基序列互补的碱基序列(例如，序列编号21、22、23、或24的碱基序列的1-19位的碱基序列)。
[0079]在本发明的一实施方式中，序列编号1?40所示的碱基序列只要具有所希望的效果，也可以是从由以下碱基序列构成的组中选择的一个以上碱基序列，即，(c)在任意的碱基序列中，1个或多个碱基序列缺失、置换、插入、或附加的碱基序列，(d)相对于任意的碱基序列，具有90%以上的同源性的碱基序列，(e)与由与任意的碱基序列互补的碱基序列构成的多核苷酸在严格的条件下(Under stringent condit1ns)特异性地杂交的多核苷酸所编码得到的碱基序列。在本发明的一实施方式中，“互补的碱基序列”是指相对于一个多核苷酸，可以杂交的互补性高的其他的多核苷酸所具有的碱基序列。所谓杂交表示在多个多核苷酸间，通过碱基间的氢键等可以形成碱基对的性质。碱基对以沃森-克里克碱基对、Hoogsteen碱基对、或任意的其他的序列特异性的形式产生。两个单链杂交的状态被称为双链。
[0080]所述“多个”例如可以是10、8、6、5、4、3、或2个，也可以是这些任意的值以下。从稳定地诱导类Muse细胞的观点、或更稳定地延长细胞或细胞群的寿命的观点出发，该数越小越好。另外，如本领域的技术人员所知，接受1个或多个碱基的缺失、附加、插入、或置换的RNA链维持其生物学活性。
[0081 ] 所述“90%以上”例如可以是90、95、96、97、98、99、或100%以上，也可以这些任意两个值的范围内。从稳定地诱导类Muse细胞的观点、或更稳定地延长细胞或细胞群的寿命的观点出发，该数越大越好。所述“同源性”也可以按照该技术领域中公知的方法计算两个或多个碱基序列中相同的碱基的比例。在计算比例之前，对所比较的碱基序列组的碱基进行排列，当需要使同一碱基的比例最大时，对碱基序列的一部分导入间隙。用于排列的方法、比例的算定方法、比较方法、以及与这些相关联的计算机程序在该技术领域中一直为人所知(例如，BLAST、GENETYX等)。在本说明书中，“同源性”只要没有特别地断定，就可以由通过NCBI的BLAST而测定到的值来表示。在由BLAST来比较碱基序列时的算法中，可以在默认设定中使用Blastn。
[0082]所述“严格的条件”例如可以采用以下的条件。(1)为了清洗，使用低离子强度以及高温度(例如，50°C、0.015M的氯化钠/0.0015M的柠檬酸钠/0.1%的十二烷基硫酸钠)，(2)在杂化中使用甲酰胺等变性剂(例如，42°C下、50% (v/v)甲酰胺和0.1%牛血清白蛋白/
0.1%聚蔗糖/0.1 %的聚乙烯吡咯烷酮/50mM的pH6.5的磷酸钠缓冲剂、以及750mM的氯化钠、75mM梓檬酸钠)、或(3)在含有20 %甲酰胺、5 X SSC、50mM磷酸钠(pH7.6)、5 X DENHARDT溶液、10%硫酸葡聚糖、以及20mg/ml的变性剪断鲑鱼精DNA的溶液中，以37°C孵化一晚，接着，在大约37-50°C以1 X SSC清洗过滤器。另外，甲酰胺浓度也可以是50 %或其以上。清洗时间也可以是5、15、30、60、或120分钟、或这些以上。作为影响杂化反应的严格性的要素，考虑温度、盐浓度等多个要素，细节可以参照Ausubel et al., Current Protocols inMolecular B1logy, Wiley Interscience Publishers, (1995)。
[0083]所述抑制剂向细胞的导入、以及该细胞的培养方法可以按照在该技术领域中公知的方法来进行。向细胞导入例如可以使用利用病毒载体的感染导入、磷酸钙法、脂质转染法、电穿孔法、或微喷射等。另外，可以利用药剂耐性或细胞分选仪等，只选择被导入的细胞。培养基例如可以使用未分化维持用培养基(例如，多能干细胞用培养基、ReproStem、灵长类ES细胞用培养基(Cosmo B1公司))、或通常的人类细胞用的培养基(例如，基于DMEM或RPMI的培养基)等。例如，也可以由ReproStem以37°C、5 % C02、10 % FBS的条件来培养。该数值例如也可以在负10、20、或30%的范围内增减。也可以在不存在饲养细胞的情况下建立(establish)、或培养。建立类Muse细胞时培养的天数没有特别地限定，例如可以为1、2、3、
4、5、6、8、10、15、30、60、或100天以上，也可以是这些任意两个值的范围内。另外，从可以更稳定地建立类Muse细胞的观点、或可以稳定地延长细胞或细胞群的寿命的观点出发，优选导入抑制剂的细胞是成纤维细胞。另外，当将所述RNA链导入细胞时，也可以并用导入RNA链至细胞。另外，当将所述DNA链导入细胞时，也可以将多个DNA链导入细胞。在此，“多个RNA链”或“多个DNA链”也可以是2、3、4、5、10、或20个以上的RNA链或DNA链。
[0084]在本发明的一实施方式中，“载体”可以使用病毒(例如，慢病毒、腺病毒、逆转录病毒、或HIV等)载体、来自大肠杆菌的质粒(例如，PBR322)、来自枯草芽孢杆菌的质粒(例如，pUBllO)，来自酵母的质粒(例如，pSH19)、A噬菌体等噬菌体、psiCHECK-2、pAl-ll、pXTl、pRc/CMV、pRc/RSV、pcDNAI/Neo、pSUPER(01igoEngine公司)、BL0CK-1t Inducible HI RNAiEntry Vector(英杰公司)、pRNATin_Hl.4/Lenti (GenScript, corp., NJ, USA)等。所述载体也可以包含启动子、复制起始点、或抗生物质耐性基因等、DNA链的表达所需的构成要素。所述载体也可以是所谓的表达载体。
[0085]在本发明的一实施方式中，“细胞群“是含有多个细胞的集团。该细胞群例如也可以是包括实质上同质细胞的集团。另外，细胞群也可以是细胞制品。细胞制品例如也可以含有细胞和缓冲液或培养基成分。类Muse细胞群例如可以含有类Muse细胞80、90、95、96、97、98、99、或100 %以上，也可以包含于这些任意的两个值的范围内。
[0086]在本发明的一实施方式中，“治疗”包含发挥被测者的疾病、或伴随疾病的1个以上的症状的、症状改善效果或预防效果。在本发明的一实施方式中，“治疗药”也可以是含有药理学上允许的一个或一个以上的载体的医药组合物。医药组合物例如混合有效成分和所述载体，通过制剂学的技术领域中熟知的任意的方法来制造。另外，治疗药如果可以用于治疗，则使用方式没有限定，可以单独使用有效成分，也可以混合有效成分与任意的成分。另夕卜，所述载体的形状没有特别地限定，例如也可以是固体或液体(例如，缓冲液)。另外，恶性肿瘤的治疗药包含用于预防恶性肿瘤的药物(预防药)、或恶性肿瘤的良性化诱导剂或正常干细胞化诱导剂。
[0087]治疗药的投入路径优选在治疗时使用有效的路径，例如可以是静脉内、皮下、肌肉内、腹腔内、或经口投入等。作为投入方式，例如也可以是注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂等。当投入多核苷酸时，使用注射剂比较有效。注射用的水溶液例如也可以由小瓶、或不锈钢容器来保存。另外，注射用的水溶液例如也可以配合生理盐水、糖(例如，海藻糖)、NaCl、或NaOH等。另外，治疗药例如也可以配合缓冲剂(例如，磷酸盐缓冲液)、稳定剂等。
[0088]投入量并没有特别地限定，例如可以为每次0.0OOlmg?1000mg/kg体重。投入间隔也没有特别地限定，例如可以1?10日投入一次。投入量、投入间隔、投入方法可以根据被测者的年龄、体重、症状、对象脏器等适当地选择。另外，也可以与其他的合适的化学疗法药并用地投入。另外，治疗药优选包含治疗有效量、或发挥所希望的作用的有效量的有效成分。当恶性肿瘤的标记在投入后减少时，也可以判断为存在治疗效果。
[0089]在本发明的一实施方式中，“被测者”包含人、或除人以外的哺乳动物(例如，大鼠、豚鼠、仓鼠、小鼠、老鼠、兔子、猪、羊、山羊、牛、马、猫、狗、狨、猴、或黑猩猩等一种以上)。
[0090 ] 另外，抑制以上的ELAVL2、TEAD 1、或GATAD2B时的各种实施方式还可以适用于来自ELAVL2等一种以上的RNA链或蛋白质的活性的情况(其中，除去基因的功能所特异性的实施方式)。那样的情况下的实施方式也包含于本发明的一实施方式中。例如，本发明的一实施方式是一种类Muse细胞的生产方法、或延长细胞或细胞群的寿命的方法，该方法包含抑制来自ELAVL2、TEAD 1、或GATAD2B的RNA链或蛋白质的活性的工艺。
[0091]在本说明书中，“或”可以在采样文章中所列举的事项的“至少1个以上”时使用。“或者”也相同。在本说明书中，当记作“两个值的范围内”时，在该范围中还包含两个值本身。
[0092]以上，针对本发明的实施方式进行了叙述，但这些是本发明的示例，还可以采用所述以外的各种结构。另外，还可以组合采用所述实施方式所记载的结构。
[0093]【实施例】
以下，通过实施例进一步说明本发明，但本发明并不限定于此。
[0094]<实验例1>成纤维细胞的培养
购买了人类成人成纤维细胞(NHDF-Ad，TakaraB1公司)之后，在FBM+FGM-2培养基(Ronza公司)中以37°C培养4周。其结果，观察细胞老化(图1)。
[0095]图1(a)是购买NHDF-Ad后，第0天的图像。图1(b)是培养四周图1(a)的细胞时的图像。图1(c)是培养NHDF-Ad开始大约一个月后暂时保存，为了再次培养目的而产生的细胞。图1(d)是培养四周图1(c)的细胞时的图像。
[0096]<实施例1>
分别从GeneCopoeia公司购买生成ELAVL2 siRNA、TEADl siRNA、或GATAD2B siRNA的质粒DNA(validated shRNA clone set)。将这些质粒DNA与Virapower(用于提高导入效率、Invitrogen