，30μ1)、 5-(4-氨基苄基）噻唑-2,4-二酮(6mmol，1.332g)、磷酸钾（10mmol，2.12g)及无水 1,4-二氧 六环(40mL)依次加入到100mL双颈圆底烧瓶中，搅拌并升温至110°C反应6小时。反应完成 后，冷至室温，加入150mL水，用乙酸乙酯（100mL X 3)萃取，合并乙酸乙酯，真空旋除溶剂，残 留物以石油醚：乙酸乙酯（1:1-1: 2)梯度洗脱，可制得compound 1(2.575克），yield 87%。 4 Mffi(400MHz，CDCl3，ppm) :S = 7.56(2H，d，J = 7.6Hz) ,7.41-7.31(8H，m)，7.22(lH，s)， 7·02(2H，d，J = 8.8Hz)，6.63(2H，d，J = 8.0Hz) ,6.47(lH，s) ,6.43(lH，d，J = 2.0Hz) ,5.20 (2H，s)，5.07(2H，s)，4.60(2H，dd，Ji = 15.6Hz，J2 = 17.2Hz)，4.48(lH，dd，Ji = 4.0Hz，j2 = 8.4Hz)，3.37(2H，dd，Jl = 7.6Hz，J2 = 14.4H)，3.15(2H，dd，Ji = 8.4Hz，J2 = 14.0Hz) .13C NMR(100MHz，CDC13)S=174.84，173.30，170.79，162.92，159.89，159.83，151.62，136.19， 135.60,130.60,128.78,128.65,128.48,127.75,127.59,126.72,118.60,115.65,109.72， 98.41,94.18,70.81,70.53,51.72,37.51,37.30.ESI-MS m/z(relative intensity) 591.28(M-，100).
[0075] 实施例3: compound 2的制备
[0076] 在氩气保护下，将上步制得的5,7_二苄氧基-3-溴甲基-4H-香豆素-4-酮(5mmol， 2.258)、碘化亚铜（0.25_〇1，2511^)、（11?，21〇-环己基-1，2-二胺（（0.2858,3(^1)、5-(4-羟 基苄基）噻唑_2,4-二酮（6mmol，1 · 338g)、磷酸钾（lOmmol，2 · 12g)及无水1,4-二氧六环 (40mL)依次加入到100mL双颈圆底烧瓶中，搅拌并升温至110°C反应6小时。反应完成后，冷 至室温，加入150mL水，用乙酸乙酯（100mLX3)萃取，合并乙酸乙酯，真空旋除溶剂，残留物 以石油醚：乙酸乙酯（1 :卜1:2)梯度洗脱，可制得compound 2(2.91克），yield 98% </H NMR (400MHz，CDCl3，ppm):S = 7.50(2H，d，J = 7.2Hz) ,7.39-7.25(8H，m)，7.22(lH，s)，7.02(2H， d,J = 8.8Hz) ,6.78(2H,J = 8.8Hz), 6.46( lH,d,J = 2.4Hz), 6.43( lH,d,J = 2.0Hz) ,5.18 (2H,s) ,5.00(2H,s) ,4.62(2H,dd ,Ji = 15.6Hz ,J2 = 22.4Hz) ,4.38(2H, dd ,Ji = 7.6Hz ,J2 = 8.4Hz),4.14(2H,dd ,Ji = 7.2Hz J2=14.4H) ,3.35(lH,dd ,Jl = 3.6Hz ,J2=14.0Hz) ,3.10 (lH，dd，Ji = 8.4Hz，j2=14.0Hz)，13C 匪R(100MHz，CDC13)S = 175.30，173.25，170.93， 163.10,159.89,159.78,156.01,152.10,136.09,135.51,130.74,128.75,128.63,128.47， 127.80,127.66,126.83,126.66,118.42,115.74,109.49,98.47,94.11,70.70,70.50， 60.51,51.68,37.46,37.42.ESI-MS m/z(relative intensity)594.17(M+,100),592.00 (M-,100).
[0077] 三、药理实验
[0078] 实施例4:(3〇1^〇1111(11、2、3对??41?丫激动活性-瞬时转染实验
[0079] 采用HEK-293细胞瞬时转染PPARy质粒，荧光素酶（luciferase)检测方法筛选 PPAR激动剂，其中PPARγ阳性对照药为罗格列酮，构建表达PPARγ、RXR的真核表达质粒载 体以及PPAR γ，RXR的应答元件PPRE调控的荧光素酶报告基因质粒载体（PPRE-luciferase)。用脂质体转染的方法共转染PPAR γ、RXR、PPRE-luciferase表达质粒进哺乳 动物细胞系HEK-293细胞。转染的3种质粒摩尔量比为1:1: 2AEK-293细胞转染24h后，用胰 酶消化、计数细胞后均分成若干份，分别与加入样品的培养基混合，在合适的培养板中继续 培养24h，并设立阴性对照（溶剂二甲亚砜组0.1%)及阳性对照（罗格列酮）。每个样品设立 平行组。根据需要样品浓度设置梯度。加药24~48h后，用细胞裂解液充分裂解细胞，收集培 养板中各孔细胞裂解液，加入荧光素酶反应底物，用化学发光检测仪测量荧光读数。阳性药 物在转染后的293ET细胞中激活报告基因表达的活性设为100 %，测试样品的报告基因激活 活性与阳性药物罗格列酮100%相比所得的相对百分比，为测试样品的相对活性。Efficacy 为相对于罗格列酮活性比值。
[0080] 下表及图11-1所示，本发明所选化合物与阳性对照组相比，在处理浓度为lOwnol/ L时，compoundl、compound 2、compound 3均表现出对PPARy具有部分激动效应，compound〗 最好，但弱于罗格列酮，浓度依赖关系如图ll-ι所示。罗格列酮单独存在活性如附图11-2所 示，当加入compound 2后，其活性明显被部分抑制，可以证实compound 2为PPARy部分激动 剂。
[0081] 表3
[0083] 实施例5:PPARy蛋白表达实验
[0084]方法：取标准品，分别稀释为 12ng/ml、6ng/ml、3ng/ml、1 · 5ng/ml、0 · 75ng/ml。待测 样品孔每孔加入40μ1样本，然后加入抗-PPAR γ -抗体10μ1、链霉亲和素-HRP50yl;标准品孔 加入标准品50μ1和链霉素-HRP50yl;空白孔不加入样品、生物素标记的抗PPAR γ抗体和链 霉亲和素-HRP。加样后，盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37°C温育60分钟。经过洗涤、显色、终止 后，以空白调零，450nm波长依序测量各孔的0D值。根据标准品的浓度及对应的0D值计算出 标准曲线的回归方程，在根据样品的0D值计算出对应的样品浓度。
[0085] 结果:模型对照组PPAR γ蛋白表达与空白组对照明显下降，阳性对照组PPAR γ蛋 白表达明显升高，compound 2低剂量组则较差，compound 2中剂量组较模型组升高，高剂量 组稍弱于空白对照组及阳性对照组，进一步说明compound 2为PPARy的部分激动剂 (3卩3313.0软件统计分析，？〈0.05)。
[0089] 实施例6:Compound 2对Wistar大鼠的作用
[0090] 1动物模型的建立
[0091] 取wistar大鼠112只（雌雄各半），体重200~250g。随机选取12只作为对照组;其余 100只以高糖高脂饲料喂养4周。4周后，各实验组大鼠腹腔注射35mg/kg链脲佐菌素（1 % STZ 溶液，溶于0.1m〇l/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液)诱导糖尿病;72h后鼠尾取血测定各组大鼠空 腹血糖，血糖2 11. lmmol/L认为造模成功。对糖尿病Wistar大鼠按随机分成5组，分别为模 型对照组、阳性对照组、Compound 2低、中、高剂量组。正常对照组则按每笼3只，以普通饲料 喂养。
[0092] 根据预试验结果，compound 2对大鼠起始有效剂量为5mg · kg< · 0-1。以上各组动 物分别灌胃给药，正常对照组和模型对照组大鼠给予蒸馏水10mL · kg< · cf1，阳性对照组 给予5mg/kg/d罗格列酮，药物低、中、高剂量组分别给予药物溶液，根据预试验结果，给药剂 量分别为2.5mg · kg_l · d_l、5mg · kg_l · d_l、10mg · kg_l · d_l，给药体积 10ml · kg_l，l 次