，所述的步骤三中所用的恒温油浴锅的温度控制在180_230°C。
[0026]以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
[0027]实施例1:制备产油培养基:将碳源物质纤维二糖、木糖和其他微生物培养常见的碳源物质，葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、果糖或甘油制成水溶液，添加其他微生物培养常用营养物质，包括氮源、磷源、硫源、无机盐、维生素或它们的组合，调整PH5.0，(氮源质量为碳源总质量的10%、磷源质量为碳源总质量的15%、硫源质量为碳源总质量的5%)灭菌后备用;在培养基中接种小球藻、葡萄球藻、栅藻、杜氏藻、拟微绿球藻、粘红酵母、海洋红酵母，进行产油微生物种子培养;培养过程中温度为25°C，转速为300r/min下培养45h后，发酵结束后测定菌体的生物量;将微生物发酵得到大量菌体进行离心干燥收集菌体，将干燥的菌体与正己烷和乙醇组成的混合溶剂、催化剂浓硫酸进行混合，在高温条件下的恒温油浴锅中冷凝回流搅拌反应，恒温油浴锅的温度控制在180°C，反应完成后，将反应完的溶液取出，于室温条件下静置冷却I小时，过滤除去滤渣，滤液用正己烷萃取，加入饱和的NaCl溶液，静置分层后，收集上层正己烷相，反复萃取3次，合并有机相，减压蒸馏，即得到生物柴油粗产品。
[0028]实施例2:制备产油培养基:将碳源物质纤维二糖、木糖和其他微生物培养常见的碳源物质，葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、果糖或甘油制成水溶液，添加其他微生物培养常用营养物质，包括氮源、磷源、硫源、无机盐、维生素或它们的组合，调整PH8.0，(氮源质量为碳源总质量的25%、磷源质量为碳源总质量的20%、硫源质量为碳源总质量的10%)灭菌后备用;在培养基中接种小球藻、葡萄球藻、栅藻、杜氏藻、拟微绿球藻、粘红酵母、海洋红酵母，进行产油微生物种子培养;培养过程中温度为30°C，转速为400r/min下培养55h后，发酵结束后测定菌体的生物量;将微生物发酵得到大量菌体进行离心干燥收集菌体，将干燥的菌体与正己烷和乙醇组成的混合溶剂、催化剂浓硫酸进行混合，在高温条件下的恒温油浴锅中冷凝回流搅拌反应，恒温油浴锅的温度控制在200°C，反应完成后，将反应完的溶液取出，于室温条件下静置冷却I小时，过滤除去滤渣，滤液用正己烷萃取，加入饱和的NaCl溶液，静置分层后，收集上层正己烷相，反复萃取4次，合并有机相，减压蒸馏，即得到生物柴油粗产品。
【主权项】
1.利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:步骤一:制备产油培养基:将碳源物质纤维二糖、木糖和其他微生物培养常见的碳源物质，葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、甘露糖、果糖或甘油制成水溶液，添加其他微生物培养常用营养物质，包括氮源、磷源、硫源、无机盐、维生素或它们的组合，调整PH 4.0-8.0，灭菌后备用； 步骤二:向步骤一制成的培养基中接种产油微生物种子液，然后在种子培养基中进行产油微生物种子培养； 步骤三:将微生物发酵得到大量菌体进行离心干燥收集菌体，将干燥的菌体与正己烷和乙醇组成的混合溶剂、催化剂浓硫酸进行混合，在恒温油浴锅中冷凝回流搅拌反应。 步骤四:反应完成后，将反应完的溶液取出，于室温条件下静置冷却1-1.5小时，过滤除去滤渣，滤液用正己烷萃取，加入饱和的NaCl溶液，静置分层后，收集上层正己烷相，反复萃取3-4次，合并有机相，减压蒸馏，即得到生物柴油粗产品。2.按照权利要求1所述的利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:所述的步骤一中氮源质量为碳源总质量的1 % -25 %、磷源质量为碳源总质量的15 % -20 %、硫源质量为碳源总质量的5%-10%。3.按照权利要求1所述的利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:所述步骤二中接种的产油微生物为小球藻、葡萄球藻、栅藻、杜氏藻、拟微绿球藻、粘红酵母、海洋红酵母的混合物。4.按照权利要求1所述的利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:所述的步骤二中产油微生物种子培养的条件为:温度为25-35°C，转速为300-500r/min下培养36-72h后，发酵结束后测定菌体的生物量。5.按照权利要求1所述的利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:所述的步骤三中正己烷和乙醇组成的混合溶剂中，正己烷和乙醇的质量为:1:2。6.按照权利要求1所述的利用微生物油脂制备生物柴油的方法，其特征在于:所述的步骤三中所用的恒温油浴锅的温度控制在180-230°C。
【专利摘要】本发明公开了利用微生物油脂制备生物柴油的方法，属于生物能源技术领域。具体方法为：在产油培养基中接种产油微生物种子液，将微生物发酵得到大量菌体，离心干燥收集菌体，将干燥的菌体与正己烷和乙醇组成的混合溶剂、催化剂浓硫酸进行混合，在高温条件下的恒温油浴锅中冷凝回流搅拌反应。将反应完的溶液取出，过滤除去滤渣，滤液用正己烷萃取，加入饱和的NaCl溶液，静置分层后，收集上层正己烷相，反复萃取3-4次，合并有机相，减压蒸馏，即得到生物柴油粗产品。产油微生物的发酵时间短，原料利用效率高、采用提取、酯交换一步法制备生物柴油，反应过程无需微波、超声等辅助，节约能耗，它的工艺简单、过程易控制。
【IPC分类】C12P7/64, C12R1/89
【公开号】CN105506011
【申请号】CN201610019484
【发明人】车春玲
【申请人】山东联星能源集团有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月13日