豆渣水解液高密度酵母工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及酶化学处理技术，具体地说是豆渣水解液高密度酵母工艺。
【背景技术】
[0002]大豆又名黄豆、青仁乌豆、泥豆，其品种多样，有冬豆、秋豆和四季豆，大豆的形状有球形、椭圆形等，具有多种颜色，例如:淡绿色、黑色、黄色等。大豆的用途有很多多，可加工成多种豆制品或加工成大豆油等。是一种种子含有丰富植物蛋白和糖类的作物，大豆的营养价值很高，我国主要生产于东北地区。
[0003]豆渣是豆制品如豆腐、豆奶等生产加工过程中的副产物，虽是副产物，但仍具有丰富的营养元素。目前豆渣主要是用做饲料、肥料，利用效率较低，有些甚至被作为垃圾被抛弃，直接污染环境。豆渣产量大、有利用价值，目前利用率较低。因此，如何对豆渣进行综合利用，提高产品的附加值，
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种新型工艺白酒工段生产工艺。
[0005]为了解决【背景技术】问题，本发明采用以下技术方案:豆渣水解液高密度酵母工艺，其特征在于，包括以下操作步骤:
[0006]I)培养基配制:酵母筛选用固体培养基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0007]酵母驯化用固体培养基;水解液200?700ml/L、硫酸铵5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L、琼脂20g/L;
[0008]种子用培养基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0009]酵母发酵用培养基;水解液200?700ml/L、硫酸铵10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L;
[0010]2)种子培养:筛选培养前经两次传代培养后用微量移液枪移取3ml的菌液接种于装有300ml种子培养基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒温振荡培养。
[0011]3)生长曲线的测定:取种子培养液于新的发酵液中每隔2小时测吸光度，绘制酵母生长曲线，确定酵母生长的稳定期；
[0012]4)目标菌株的筛选:选取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6个水解液浓度梯度，配制成浓度不同的液体培养基，用微量移液枪逐个接种3ml的处于生长期的种子培养菌液于一系列浓度梯度的培养基中，28°C振荡培养18-24小时后取菌液稀释平板涂布培养，进一步纯化，重复操作直至筛选出单个菌落，最后即可制备斜面固体培养基保藏菌种，以备后续实验使用；
[0013]5)选取处于培养至生长期左右的种子培养液，于超净工作台中用微量移液枪分别向配置好的浓度梯度为 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液体培养基中移取3ml的种子培养液，从而将酵母菌转入液体培养基中，28°C恒温振荡培养18-24小时。
[0014]综上所述，此发明有益效果如下:本发明中依据现代酶工程技术原理和辅助物理与化学处理技术，采用有针对性的高效酶制剂生物活性物质材料，高效地降解豆渣营养成分为五碳糖、氨基酸，主要作为白酒发酵主要原料。研究降解的最适酶解工艺，为豆渣的高值化利用及后期微生物发酵研究作前提优。
【具体实施方式】
[0015]实施例一
[0016]豆渣水解液高密度酵母工艺，其特征在于，包括以下操作步骤:
[0017]I)培养基配制:酵母筛选用固体培养基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0018]酵母驯化用固体培养基;水解液200?700ml/L、硫酸铵5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L、琼脂20g/L;
[0019]种子用培养基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0020]酵母发酵用培养基;水解液200ml/L、硫酸铵10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L;
[0021]2)种子培养:筛选培养前经两次传代培养后用微量移液枪移取3ml的菌液接种于装有300ml种子培养基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒温振荡培养。
[0022]3)生长曲线的测定:取种子培养液于新的发酵液中每隔2小时测吸光度，绘制酵母生长曲线，确定酵母生长的稳定期；
[0023]4)目标菌株的筛选:选取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6个水解液浓度梯度，配制成浓度不同的液体培养基，用微量移液枪逐个接种3ml的处于生长期的种子培养菌液于一系列浓度梯度的培养基中，28°C振荡培养18小时后取菌液稀释平板涂布培养，进一步纯化，重复操作直至筛选出单个菌落，最后即可制备斜面固体培养基保藏菌种，以备后续实验使用；
[0024]5)选取处于培养至生长期左右的种子培养液，于超净工作台中用微量移液枪分别向配置好的浓度梯度为 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液体培养基中移取3ml的种子培养液，从而将酵母菌转入液体培养基中，28°C恒温振荡培养18小时。
[0025]实施例二
[0026]豆渣水解液高密度酵母工艺，其特征在于，包括以下操作步骤:
[0027]I)培养基配制:酵母筛选用固体培养基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0028]酵母驯化用固体培养基;水解液700ml/L、硫酸铵5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L、琼脂20g/L;
[0029]种子用培养基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0030]酵母发酵用培养基;水解液700ml/L、硫酸铵10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L;
[0031]2)种子培养:筛选培养前经两次传代培养后用微量移液枪移取3ml的菌液接种于装有300ml种子培养基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒温振荡培养。
[0032]3)生长曲线的测定:取种子培养液于新的发酵液中每隔2小时测吸光度，绘制酵母生长曲线，确定酵母生长的稳定期；
[0033]4)目标菌株的筛选:选取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L
6个水解液浓度梯度，配制成浓度不同的液体培养基，用微量移液枪逐个接种3ml的处于生长期的种子培养菌液于一系列浓度梯度的培养基中，28°C振荡培养24小时后取菌液稀释平板涂布培养，进一步纯化，重复操作直至筛选出单个菌落，最后即可制备斜面固体培养基保藏菌种，以备后续实验使用；
[0034]5)选取处于培养至生长期左右的种子培养液，于超净工作台中用微量移液枪分别向配置好的浓度梯度为 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液体培养基中移取3ml的种子培养液，从而将酵母菌转入液体培养基中，28°C恒温振荡培养24小时。
【主权项】
1.豆渣水解液高密度酵母工艺，其特征在于，包括以下操作步骤: 1)培养基配制:酵母筛选用固体培养基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母驯化用固体培养基;水解液200?700ml/L、硫酸铵5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L、琼脂20g/L; 种子用培养基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母发酵用培养基；水解液200?700ml/L、硫酸铵10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁lg/L; 2)种子培养:筛选培养前经两次传代培养后用微量移液枪移取3ml的菌液接种于装有300ml种子培养基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒温振荡培养。 3)生长曲线的测定:取种子培养液于新的发酵液中每隔2小时测吸光度，绘制酵母生长曲线，确定酵母生长的稳定期； 4)目标菌株的筛选:选取2001111/1、3001111/1、40011111/1、5001111/1、6001111/1、7001111/16 个水解液浓度梯度，配制成浓度不同的液体培养基，用微量移液枪逐个接种3ml的处于生长期的种子培养菌液于一系列浓度梯度的培养基中，28°C振荡培养18-24小时后取菌液稀释平板涂布培养，进一步纯化，重复操作直至筛选出单个菌落，最后即可制备斜面固体培养基保藏菌种，以备后续实验使用； 5)选取处于培养至生长期左右的种子培养液，于超净工作台中用微量移液枪分别向配置好的浓度梯度为 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液体培养基中移取3ml的种子培养液，从而将酵母菌转入液体培养基中，28°C恒温振荡培养18-24小时。
【专利摘要】本发明公开了豆渣水解液高密度酵母工艺，依据现代酶工程技术原理和辅助物理与化学处理技术，采用有针对性的高效酶制剂生物活性物质材料，高效地降解豆渣营养成分为五碳糖、氨基酸，主要作为白酒发酵主要原料。研究降解的最适酶解工艺，为豆渣的高值化利用及后期微生物发酵研究作前提优。
【IPC分类】C12N1/16
【公开号】CN105543117
【申请号】CN201610076990
【发明人】孙传伯, 韩邦兴, 陈存武, 陈乃富
【申请人】安徽楚井坊酒业有限公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2016年1月31日