一种大规模细胞培养多联袋的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及生物医学工程和医学检验技术领域，具体是一种大规模细胞培养多联袋。
【背景技术】
[0002]细胞培养泛指将动物活体体内取出的组织或细胞在体外培育并模拟体内的生理条件，以实现细胞的持续生长及扩增。细胞培养是实现细胞生长的基础条件，广泛用于生物学、医学以及药学等领域。当前科研领域进行细胞培养时，多采用PET或PET6材料的培养瓶，经68_8射线灭菌后使用，属于一次性耗材。但是，由于培养瓶属于开放系统，不能实现全封闭状态，达不到GMP标准，不符合临床治疗规范。而应用细胞培养袋可实现密闭的细胞培养系统，可在GMP实验室内为临床提供可靠的细胞来源。
[0003]申请号为“201320010782. 8”、授权公告号为“CN 203112848 U”、名称为“一种细胞培养用的多边形塑料培养袋”的中国实用新型专利公开了一种多边形细胞培养袋，其组成包括：多边形塑料袋底片，所述的多边形塑料袋底片熔接塑料袋上片，所述的塑料袋上片上具有进气口和进料口，所述多边形塑料袋底片为正六边形、正八边形或正十二边形。这个实用新型专利的缺陷在于：没有留样袋，不能监测培养袋中细胞的数量和质量；没有细胞收集袋，只能一次性收集培养的细胞；没有换液系统，培养的细胞不能换液和补充新的培养基。
[0004]申请号为“200980110585. X”、授权公告号为“CN 101978041 B”、名称为“通道受限制的多层细胞培养系统”的中国发明专利公开了一种多层细胞培养装置，其包括：a.至少三个细胞培养室，各细胞培养室具有至少一个端口 ；b.至少两个整体性导管室；和c.滑动端口盖，所述滑动端口盖构造和布置成与所述多层细胞培养装置的至少三个细胞培养室的至少一个端口接合，并提供开放或封闭的端口，其中，开放或封闭的通道是通过以下方式决定的：将该端口盖相对于所述至少一个端口以开放位置或封闭位置滑动接合，其中，开放位置的端口盖包括过滤器，封闭位置的端口盖包括隔片；所述滑动端口盖通过铰接的连接器连接于所述多层细胞培养装置。这个发明专利的缺陷在于：结构复杂，产品成本高，非一次性耗材，适用于贴壁细胞的培养，不适用于临床细胞治疗的需要。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的在于克服现有技术的不足，提供一种全封闭式的科学合理、使用方便、培养效果好的大规模细胞培养及收集用多联袋。
[0006]为了达到上述目的，本实用新型提供了一种大规模细胞培养多联袋，包括培养袋本体、样品袋系统及收集袋系统，所述培养袋本体的一侧依次连通样品袋连接口、收集袋连接口、原料加样口、补料加样口及换液过滤口，其中：
[0007]所述样品袋系统包括样品袋连接管及连接在样品袋连接管上的样品袋，样品袋连接口连通所述样品袋连接管；
[0008]所述收集袋系统包括收集袋连接管及连接在收集袋连接管上的收集袋，收集袋连接口连通所述收集袋连接管。
[0009]优选地，所述的原料加样口通过无菌接管机连接原料细胞袋和培养袋，将待培养的细胞转入细胞培养袋本体中。
[0010]优选地，所述的补料加样口上伸出第一滴斗，第一滴斗上套设第一滴斗塞；
[0011]所述第一滴斗与第一滴斗塞为可拆卸结构。
[0012]优选地，所述补料加样口上的第一滴斗通过连接注射器实现向细胞培养袋本体中添加营养因子或细胞因子。
[0013]优选地，所述的换液过滤口上伸出第二滴斗，第二滴斗上套设第二滴斗塞；
[0014]所述第二滴斗内沿其轴向依次设有两层过滤膜；
[0015]所述第二滴斗与第二滴斗塞为可拆卸结构。
[0016]优选地，所述的第二滴斗内靠近第二滴斗塞的过滤膜为70um细胞过滤膜；第二滴斗内远离第二滴斗塞的过滤膜为3um细胞过滤膜。
[0017]优选地，所述的换液过滤口上的第二滴斗通过连接负压吸引器以实现对细胞培养袋本体中进行长时间培养换液。
[0018]优选地，所述的70um细胞过滤膜为尼龙膜，用以防止大的细胞团块阻塞过滤系统。
[0019]优选地，所述的3um细胞过滤膜为transwell膜，用以防止在负压吸引时将培养的细胞吸走。
[0020]优选地，所述的收集袋上设有收集袋检测样袋；
[0021]所述收集袋和收集袋检测样袋通过检测样袋连接管进行连通。
[0022]优选地，所述的培养袋本体为一体式结构。
[0023]优选地，所述的培养袋本体采用热合方式形成密封边缘。
[0024]优选地，所述的多联袋采用塑料材料热合成型制成，优选采用乙烯-醋酸乙烯共聚物（EVA)。EVA为透明光泽表面，具有良好的柔软性及弹性，其化学稳定性、耐高温性能良好，没有生物、化学活性，无毒性且成型加工性良好，可在200°C下进行高压灭菌，可以透02、CO2、紫外线、可见光及红外线，但不透水，抗老化和耐臭氧强度好。可在液氮中保持韧性，适用于细胞低温保存。
[0025]优选地，所述的样品袋连接口、收集袋连接口、原料加样口、补料加样口及换液过滤口均为圆形管状结构；
[0026]所述样品袋连接口、收集袋连接口、原料加样口、补料加样口及换液过滤口的轴向相同。
[0027]优选地，所述的多联袋具有I?5个样品袋，所述样品袋的尺寸为5 X 5cm ;
[0028]所述多联袋具有I?5个收集袋，所述收集袋的尺寸为10 X 15cm ；
[0029]优选地，所述的多联袋具有3个样品袋。
[0030]优选地，所述的多联袋具有3个收集袋。
[0031]优选地，所述的样品袋连接口、收集袋连接口、原料加样口、补料加样口及换液过滤口上分别配置有医用片夹；
[0032]所述样品袋连接管与样品袋之间配置有医用片夹；
[0033]所述收集袋连接管与收集袋之间配置有医用片夹。
[0034]优选地，所述的收集袋与检测样袋连接管之间配置有医用片夹。
[0035]本实用新型的有益效果是：
[0036]1、通过培养袋本体可通透氧气和二氧化碳等气体分子，而不能透水、同时隔绝细菌等微生物，防止污染，气体交换面积较大，有利于在有限的空间内进行大量细胞培养，可获得更多高质量的细胞；
[0037]2、本实用新型可以应用于细胞培养、细胞扩增、细胞冷冻、转基因、连续灌注培养和抗体产生等方面，保证全程无菌状态，有效降低细胞污染和操作人员感染的几率；
[0038]3、袋体选取透明柔性材料，便于在显微镜下直接观察细胞状态和监视细胞培养过程;
[0039]4、可在密闭系统中实现不同培养时间下进行动态监测培养袋内细胞的浓度及活力。细胞培养过程中，通过热合机和无菌接管机取样、补液、换液，可保证所有的管道都不开放，形成仅通过氧气和二氧化碳等气体分子的密闭培养系统防止细菌和微生物造成污染。将培养袋本体中的细胞混匀后打开样品袋连接口的医用片夹，挤入适量细胞后关闭医用片夹，再用热合机将培养袋本体的样品袋连接口热合剪断，可对样品袋中细胞进行检测而不破坏原来的密闭系统；
[0040]5、可在密闭系统中实现不同培养时间下分时段收集培养细胞的同时不影响细胞培养袋中剩余细胞的继续培养。将培养袋本体中细胞混匀，打开收集袋连接口的医用片夹，根据样品袋检测出的细胞浓度，换算出需要收集的细胞数量的毫升数，挤出相应份数的细胞后关闭医用片夹，用热合机将收集袋连接口热合剪断后，用于临床治疗。收集袋内的细胞可用于产品质控，而剩余细胞可继续在培养袋本体中培养。根据需要连接不同数量的收集袋，一般优选为3个，较符合临床细胞治疗的周期。如细胞毒性T细胞进行免疫治疗，将采集的细胞转移到细胞培养袋中培养2周后，分3次采集细胞并回输，每次I?3X IO9个CIK细胞；
[0041]6、补料加样管通过连接注射器实现细胞培养过程中添加营养因子或细胞因子；换液过滤管连通可更换培养液以实现培养过程中换液。
[0042]7、本实用新型结构简单、操作使用方便、稳定性好、可靠性高、操作便捷，有利于细胞的培养并获得更多高质量的细胞，且可以直接进行显微观察等多种操作，保证全程无菌，可在封闭系统中实现细胞扩增、取样和收集，大大提高细胞培养效率并降低污染率，适用于悬浮细胞大量扩增和临床细胞治疗。
【附图说明】
[0043]图I为本实用新型的结构示意图；
[0044]其中：
[0045]I-培养袋本体2-样品袋系统21-样品袋连接管