4、蠕动栗;5、搅拌设备五.
【具体实施方式】
[0032]下面结合说明书附图对本实用新型作进一步描述。
[0033]如图1所述，一种用于实现快速批量细胞转染的装置，包括转染试剂存储瓶1、缓冲液存储瓶2、转染瓶3、蠕动栗4、搅拌设备5，所述存放转染试剂的存储瓶1是用于存储转染液与转染细胞所用的质粒载体系统，所述存放缓冲液的存储瓶2是用于存储转染细胞所用的2X BBS缓冲液，所述转染瓶3是用于实现细胞转染，所述蠕动栗4是用于实现将两个存储瓶内的样液等速混合并输送至转染瓶3，所述搅拌设备5是用于实现转染过程中的液体混匀，存储瓶1中的转染试剂和转染细胞所用的质粒载体系统由搅拌设备5混匀，存储瓶2中的转染细胞缓冲液由搅拌设备5混匀，然后通过蠕动栗4将存储瓶1内的转染试剂和转染细胞所用的质粒载体系统与存储瓶2内的2 XBBS缓冲液等速混合输送至含有一定浓度细胞的转染瓶3内，在搅拌设备5搅拌下进行细胞转染，获得稳定高效转染效率。
[0034]婦动栗4等速混合，转速控制在50?150rpm。
[0035]转染瓶3内被转染的细胞终浓度为4X 106个/ml。
[0036]搅拌设备5的搅拌转速为20?lOOrpm。
[0037]采用本实用新型装置来实现实验室快速批量细胞转染的步骤如下:在体积为1L的储存瓶1内配制摩尔浓度为0.25mol/L的CaCl2溶液，装液量为50?70% (v/v)，121°C高压灭菌30min，冷却后加入经过滤除菌的质粒载体系统中，其中CaCl2溶液与质粒载体系统的比例为20:1?30:1(V/V)。储存瓶2内配制2XBES缓冲液(硼酸缓冲液)，装液量为50?70% (v/v)，121°C高压灭菌30min，冷却备用。使用三通连接装置将储存瓶1、储存瓶2和蠕动栗4用输送管连接，调整栗转速为50?150rpm，将转染试剂、质粒载体系统和缓冲液栗入内细胞终浓度为4X106个/ml细胞的转染瓶3内，启动搅拌设备5，搅拌转速为20?lOOrpm，转染时间为6?8h0
[0038]采用本实用新型装置来实现实验室快速批量细胞转染生产慢病毒的步骤如下:在体积为1L的储存瓶1内配制摩尔浓度为0.25mol/L的CaCl2溶液，装液量为500ml，121°C高压灭菌30min，冷却后加入经过滤除菌的慢病毒包装质粒载体系统20ml。在体积为1L的储存瓶2内配制2 XBBS缓冲液(硼酸缓冲液)500ml，121°C高压灭菌30min，冷却备用。使用三通连接装置将储存瓶1、储存瓶2和蠕动栗4用输送管连接，调整栗转速为50rpm，将转染试剂、质粒载体系统和缓冲液栗入内细胞终浓度为4 X 106个/ml 293FT细胞的转染瓶3内，启动搅拌设备5，搅拌转速为25rpm，转染时间为6?8h。
[0039]采用本实用新型装置来实现实验室快速批量细胞转染生产腺相关病毒的步骤如下:在体积为11的储存瓶1内配制摩尔浓度为0.2511101/1的0&(:12溶液，装液量为6001111，121°〇高压灭菌30min，冷却后加入经过滤除菌的腺相关病毒包装质粒载体系统30ml。在体积为1L的储存瓶2内配制2 XBBS缓冲液(硼酸缓冲液)600ml，121°C高压灭菌30min，冷却备用。使用三通连接装置将储存瓶1、储存瓶2和蠕动栗4用输送管连接，调整栗转速为50rpm，将转染试剂、质粒载体系统和缓冲液栗入内细胞终浓度为4X 106个/ml293FT细胞的转染瓶3内，启动搅拌设备5，搅拌转速为20rpm，转染时间为6?8h。
[0040]上述实施例以慢病毒和腺相关病毒包装为例，介绍本实用新型在实现磷酸钙法快速批量转染细胞中的优势。
[0041]以上对本实用新型做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本实用新型的内容并加以实施，并不能以此限制本实用新型的保护范围，凡根据本实用新型的实质内容所做的特效变化或修饰，都应包含在本实用新型的保护范围内。
【主权项】
1.一种用于实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，其特征在于:所述装置包括存放转染试剂的存储瓶、存放缓冲液的存储瓶、蠕动栗、转染瓶和搅拌设备，其中，所述存放转染试剂的存储瓶是用于存储转染液与转染细胞所用的质粒载体系统，所述存放缓冲液的存储瓶是用于存储转染细胞所用的2XBBS缓冲液，所述蠕动栗是用于将两个存储瓶内的样液等速混合并输送至转染瓶，所述转染瓶是用于实现细胞转染，所述搅拌设备是用于实现转染过程中的液体混匀。2.根据权利要求1所述的实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，其特征在于:所述的存储瓶为实验室小批量快速细胞转染用，可进行高压灭菌操作;规模放大时可设计为储液罐。3.根据权利要求1所述的实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，其特征在于:所述的转染瓶为实验室小批量快速细胞转染用，可进行高压灭菌操作;规模放大时可设计为转染罐。4.根据权利要求2所述的规模放大实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，其特征在于所述的储液罐为可高压灭菌并含冷却装置和搅拌装置的发酵罐。5.根据权利要求3所述的规模放大实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，其特征在于所述的转染罐为可高压灭菌并含冷却装置和搅拌装置的发酵罐。
【专利摘要】本实用新型涉及一种用于实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，所述装置包括依次设置和通过连接管道连通的，用于存放转染试剂的存储瓶、用于存放转染所用缓冲液的存储瓶、用于输送液体的蠕动泵和用于实现细胞转染的转染瓶。本实用新型细胞转染装置结构简单、能耗低、有助于实现半自动、自动、连续批量细胞转染操作，可节省人力消耗，避免手动转染产生的误差；可获得比手动转染更高更稳定的细胞转染效率，转染效果重复再现性好，适合进行规模放大和应用。
【IPC分类】C12M1/02, C12M1/36
【公开号】CN205115481
【申请号】CN201520715680
【发明人】胡惠忠, 蔡永超, 潘讴东
【申请人】和元生物技术（上海）股份有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年9月16日