一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法
【专利摘要】一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法。发明了一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法：在反应釜中，打入纯水，加入一定量的分散剂，引发剂，甲基丙烯酸甲酯／N，N-亚甲基双丙烯酰胺／1，1-二氟-2，2-二氯乙烯／马来酸，致孔剂等，升温至反应温度，待反应结束.烘干，抽提致孔剂，烘干收袋.本发明在聚合中引入少量1，1-二氟-2，2-二氯乙烯，马来酸作为共聚单体，以提高树脂与雷帕霉素的相容性，以及树脂骨架地耐高温，酸碱腐蚀的能力，从而提高了聚合物颗粒的强度.对红霉素分离效果好，选择性强。含氟基团的引入，使树脂骨架耐腐蚀性增强，球体表面受到保护，从而延长了使用寿命。
【专利说明】一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种树脂吸附剂的制备方法，特别是一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法。
【背景技术】
[0002]雷帕霉素(Rapamycin, RAPA),又名西罗莫司(Sirolimus),是一种新型大环内酯类免疫抑制剂。RAPA的分子式为C51H79N013，分子量991，为白色固体结晶，熔点为183-185°C，亲脂性，溶解于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂，极微溶于水，几乎不溶于乙醚。RAPA通过不同的细胞因子受体阻断信号传导，阻断T淋巴细胞及其他细胞由Gl期至S期的进程，从而发挥免疫抑制效应。随着器官移植数量的增加，用于器官移植后减少排异反应的免疫抑制剂类药物也呈现快速增长趋势，特别是雷帕霉素等新的产品正在逐渐成为器官移植用免疫抑制剂主流产品，而作为一种新型的抗排斥反应药物，以雷帕霉素为原料的制剂在国内刚刚上市。国内由于用药水平起步较晚，此类产品技术开发周期较长，特别是现有生产工艺的不尽完善等因素，严重影响了雷帕霉素的技术和生产水平提高，由于生产能力较小，现有产量尚不能满足国内需求。目前我国雷帕霉素制剂依靠进口为主，进口量呈现逐年增加的趋势。以该产品为原料制成的制剂在中国市场上市后，产品市场容量巨大，市场前景引人注目。
[0003]CN 102433364提供了一种微生物发酵法制取雷帕霉素的工艺，其中，包括以下步骤:先在斜面培养基中培养吸水链霉，然后转接于新鲜种子培养基中进行培养；将经所述种子培养基培养的菌株按照2%的接种量接种至新鲜的发酵培养基中进行发酵培养，得到含雷帕霉素的发酵液，利用雷帕霉素在水和有机溶剂中的溶解度差异，对含雷帕霉素的发酵液进行分离和纯化。雷帕霉素粗品溶解后上硅胶柱进行层析纯化，用丙酮的己烷溶液(丙酮30% )进行洗脱，收集含有雷帕霉素的洗脱液，浓缩洗脱液后加入雷帕霉素晶体作为种子，将浓缩液冷却至0-5°C，搅拌I小时后静置结晶，重结晶获得的雷帕霉素产品过滤后干燥获得雷帕霉素终产品。
[0004]CN 101133065描述了纯化的雷帕霉素和用于获得纯化雷帕霉素的方法，其包括:
(a)在有适宜碱存在的条件下，于惰性溶剂中用三甲基氯硅烷处理雷帕霉素，从而提供雷帕霉素31,42-双-O- 二甲基甲娃烧基酿；(b)过滤雷帕霉素31,42-双-O- 二甲基甲娃烧基醚；(c)在庚烷中萃取雷帕霉素31，42-双-O-三甲基甲硅烷基醚；(d)洗涤萃取过的雷帕霉素31，42_双-O-三甲基甲硅烷基醚；并(e)用酸使萃取过的雷帕霉31，42_双-O-三甲基甲硅烷基醚脱保护，从而产生雷帕霉素。
[0005]雷帕霉素的发酵产量低，从发酵液中分离提取雷帕霉素的难度较大。现有工艺的最大缺陷就是分离效率较低、能耗较高、废水污染严重等。采用树脂吸附工艺则可望克服这些缺陷，不过要求树脂的吸附容量及其对色素的选择去除能力相对较高，普通吸附树脂难于达到这一要求。通常，树脂的比表面积、树脂孔结构及树脂的极性等对有机物的吸附影响较大。雷帕霉素为弱极性物质，根据“类似物吸附类似物”的原则，应以非极性或弱极性的大孔树脂吸附效果更佳。同时，当吸附树脂具有适宜孔径能确保溶质分子良好扩散的条件下，树脂比表面积越大，吸附量也就越大。具有较大比表面积的弱极性大孔吸附树脂对雷帕霉素的吸附量较高.
【发明内容】
[0006]目的在于针对从雷帕霉素发酵液分离雷帕霉素对吸附分离材料的基本要求，提供一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法，同时公开其制备方法。
[0007]在反应釜中，打入纯水，加入一定量的分散剂，引发剂，甲基丙烯酸甲酯/ N, N-亚甲基双丙烯酰胺/ 1，1-二氟-2，2-二氯乙烯/马来酸等单体，致孔剂等，升温至反应温度，待反应结束.烘干，抽提致孔剂，烘干收袋.本发明在聚合中引入少量1，1_ 二氟-2，2-二氯乙烯，马来酸作为共聚单体，以提高树脂与雷帕霉素的相容性，以及树脂骨架地耐高温，酸碱腐蚀的能力。
[0008]本发明提供一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法，通过以下步骤实现:步骤1.水相的配制
[0009]按重量份计，在压力反应釜中内加入100份纯水0.5-2份有机化学分散剂(优选
0.5份)，搅拌均勻；
[0010]所述化学分散剂选自聚乙烯醇、明胶或羟甲基纤维素等。
[0011]步骤2.油相的配制
[0012]按重量份计，将100份甲基丙烯酸甲酯、30-100份(优选70份)N，N-亚甲基双丙烯酰胺、3-10份(优选6份)1，1- 二氟-2，2- 二氯乙烯，3-10份(优选5份)马来酸混合，再加入0.5-3份过氧化物引发剂(优选2份)、10-40份致孔剂，搅拌均匀；
[0013]步骤3.悬浮聚合反应
[0014]将步骤2烧杯中配好的油相溶液加到步骤I中装有已配制水相的压力反应釜中，在60-95°C反应7-20h，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提干净，得到产品.[0015]步骤2所述的1，1-二氟-2，2-二氯乙烯结构式见式(I)，为市售产品，如杭州宝凯生物化学品有限公司生产的1，1- 二氟-2，2- 二氯乙烯产品。
[0016]CF2=CCl2 (I)
[0017]步骤2所述的马来酸结构式见式(2)，为市售产品，如郑州天耀科技有限公司生产的马来酸产品。
[0018]Ho2CCH=CHCo2H (2)
[0019]步骤2所述的过氧化物引发剂优选过氧化苯甲酰。
[0020]步骤2所述的致孔剂是良溶剂或非良溶剂或混合溶剂，如白油，溶剂油，甲苯等，优选甲苯。
[0021]本发明的有益效果:
[0022]I):通过本发明方法制得的一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂对雷帕霉素相容性好，对雷帕霉素分离效果好，选择性强。
[0023]2)含氟基团的引入，使树脂骨架耐腐蚀性增强，球体表面受到保护，从而延长了使用寿命。【具体实施方式】
[0024]以下实施例仅仅是进一步说明本发明，并不是限制本发明保护的范围。
[0025]实施例1
[0026]步骤1.水相的配制
[0027]按重量份计，在压力反应釜内加入100份纯水，0.5份明胶，搅拌均匀。
[0028]步骤2.油相的配制
[0029]将以下比例的油相组分在烧杯中混合，搅拌均匀；
[0030
【权利要求】
1.一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 步骤1.水相的配制 按重量份计，在压力反应釜中内加入100份纯水0.5-2份有机化学分散剂(优选0.5份)，搅拌均匀； 所述化学分散剂选自聚乙烯醇、明胶或羟甲基纤维素等。 步骤2.油相的配制 按重量份计，将100份甲基丙烯酸甲酯、30-100份(优选70份)N，N-亚甲基双丙烯酰胺、3-10份(优选6份)1，1- 二氟-2，2- 二氯乙烯，3-10份(优选5份)马来酸混合，再加入0.5-3份过氧化物引发剂(优选2份)、10-40份致孔剂，搅拌均匀； 步骤3.悬浮聚合反应 将步骤2烧杯中配好的油相溶液加到步骤I中装有已配制水相的压力反应釜中，在.70-10(TC反应10_20h，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提干净，得到产品.
2.一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法，其特征在于共聚单体包括1，1_ 二氣_2，2_ 二氣乙稀，I, 1-二氣-2, 2_ 二氣乙稀结构式见式(I): CF2=CCl2 (I)
3.一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法，其特征在于共聚单体包括马来酸，马来酸结构式见式(2): Ho2CCH=CHCo2H (2)
4.根据权利要求1-3之一所述制备方法获得的一种应用于雷帕霉素分离的吸附剂的制备方法。
【文档编号】B01J20/26GK103752288SQ201410035278
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年1月22日 优先权日:2014年1月22日
【发明者】王琪宇, 张玲 申请人:王金明