专利名称：：一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法
技术领域：
：本发明涉及一种检测方法，特别涉及一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法。属于化学成份检测的
技术领域：
。
背景技术：
：铅是已知毒性最大、累积性极强的重金属之一。当铅长期蓄积于人体时，会严重危害神经、造血系统及消化系统，对婴儿的智力和身体发育影响尤其严重。已被列为食品卫生监督的重要元素。目前微量铅的测定方法很多，氰化物发生-原子荧光光谱法测铅是近年发展较快的一种新的分析技术。氢化物-原子荧光光谱法将样品加酸消解后，在酸性介质中，样品中的铅与硼氢化钾反应生成铅的氢化物。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英原子化器中原子化，在铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量。现有的原子荧光光谱法测定乳中铅的方法中铁氰化钾直接加入样品溶液里，稳定性差，精密度低。
发明内容本发明的目的是提供一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，其稳定性好，精密度较高。本发明提供了一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，包括如下步骤1)绘制标准曲线制备多个不同浓度的铅标准溶液，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制铅含量与检测结果之间的标准曲线；2)制备样品并用配制好的还原剂和载流液上机检测，得到检测结果；3)将步骤2)中的检测结果与所述的标准曲线比对，即得到样品中铅的含量;4)上述步骤中所使用的检测仪器为原子荧光光度计。优选的，上述步骤l)中的铅标准溶液浓度为0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL。上述标准溶液的配制方法为加入铅标准应用液(100ng/mL)0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，用少量纯水稀释后，各加入0.5mL盐酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用纯水准确定容至25mL，摇匀，放置30min。更优选的，步骤2)中样品的制备方法包括以下步骤a)称取样品于微波消解管中，加入硝酸，在微波消解炉消解完全后加水，在电热板上赶酸；赶酸3-4次。b)赶酸完全后用纯水将样品洗入容量瓶中，定容，摇匀；c)根据样品反应后废液酸度，用纯水稀释样液，放置30min;上述步骤c)中可用纯水把试样液稀释成合适浓度使反应后的废液pH值控制在8-9。本发明中，步骤2)中的还原剂优选由以下成分组成氢氧化钠(或氢氧化钾)5g/L、硼氢化钾20-40g/L、铁氰化钾15-25g/L,更优选的，硼氢化钾的浓度为20g/L，铁氰化钾的浓度为15g/L。其制备方法为先溶解氢氧化钠，再溶解硼氢化钾，最后溶解铁氰化钾后，用纯水溶解并定容。本发明中，步骤2)中的载流液优选是2M的盐酸(v/v)。本发明中的原子荧光光度计检测参数优选为炉高为6mm时，负高压220V-230V，灯电流60-65mA，载气和屏蔽气为氩气，流量分别为400mL/min和1000mL/min。本发明的检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法把铁氰化钾加入到还原剂里，控制反应溶液的酸度，检出限为0.1106^g/L、回收率为95%-105%、相对标准偏差为0.6%，针对于现有方法，其精密度明显提高。并且，本发明的检测参数下，灵敏度高、仪器价格低廉，适合用于大量分析乳和乳制品中铅的含量。图1显示的是本发明的一个实施例中炉高与荧光强度的关系；图2显示的是本发明的一个实施例中铁氰化钾浓度与荧光强度的关系；图3显示的是本发明的一个实施例中硼氢化钾浓度与荧光强度的关系；图4显示的是本发明的一个实施例中盐酸加入量与荧光强度的关系；图5显示的是本发明的一个实施例中草酸加入量与荧光强度的关系；图6显示的是本发明的一个实施例中铅标准曲线示意图。具体实施方案下面将结合具体实施方案对本发明的方法做更详细的说明。本领域技术人员应当理解，下述实施例均用于对本发明所要求保护的范围进行实例性的描述，以此概括本发明的各参数的相对范围，因而不能将之理解为对本发明的一种具体限制。实施例1检测参数的选择及绘制标准曲线l.实验步骤U仪器与试剂AFS-2202E型双道原子荧光光度计(北京海光仪器公司)微波消解炉(美国CEM，MARSXPRESS)电热板铅标准储备液1000|ig/mL，国家标准物质中心铅标准应用液100ng/mL，精确吸取铅标准储备液，逐级稀释至100ng/mL。草酸溶液(10g/L):称取1.0g草酸，加入纯水溶解定容至100mL，混匀。还原剂由氢氧化钠1克，硼氢化钾4克和铁氰化钾3克组成。先溶解氢氧化钠，再溶解硼氢化钾，最后溶解铁氰化钾，用纯水溶解并定容至200mL，现用现配。上述氢氧化钠可由氢氧化钾代替。盐酸(2%):吸取10mL盐酸，用纯水定容至500mL。硝酸、盐酸优级纯。1.2仪器条件灯电流60mA;光电倍增管负高压220V;原子化器高度6mm;载气(氩气)流量400mL/min;屏蔽气(氩气)流量1000mL/min;读数时间IOS;延迟时间l.Os;测量方法标准曲线法；读取方式峰面积；还原剂氢氧化钠1克，硼氢化钾4克，铁氰化钾3克，先溶解氢氧化钠，再溶解硼氢化钾，最后溶解铁氰化钾后,用纯水溶解并定容至200mL，现用现配；掩蔽剂10^L草酸；载流液2%盐酸。1.3标准工作曲线的绘制取25ml容量瓶6个，依次加入铅标准应用液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL(各相当于铅浓度O.O、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL)，用少量纯水稀释后，各加入0.5mL盐酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用纯水准确定容至25mL，摇匀。放置30min后检测。1.4样品处理称取0.5-1.0克乳或乳粉样品，置于微波消解管中，加入10毫升硝酸，在微波消解炉消解完全后加20mL纯水，在电热板上赶酸3次。用纯水洗入25mL容量瓶中，并准确定容至25mL，摇匀。根据反应后废液酸度用纯水稀释，将PH值控制在8-9，大约稀释5倍，放置30min后按上述工作条件进行检测。微波消解条件见表1。表l微波消解条件<table>complextableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>2.检测条件的选择2.1仪器工作参数的选择实验2丄1炉高分别将炉高调至4、5、6、7、8mm测荧光强度，原子化器增高，即炉高小，荧光强度增大，过高时会出现严重干扰，背景噪音过大，原子化器过低，荧光强度低。图1显示的是炉高与荧光强度的实验结果曲线，炉高为6mm时，仪器灵敏度和稳定性较好。2丄2负高压随着负高压的增大，荧光强度也相应增大，但噪音也相应增大。图2显示的是铁氰化钾浓度与荧光强度的实验结果曲线；实验证明，选择负高压为220V-230V，荧光强度较为稳定。2丄3灯电流随着灯电流的增强，荧光强度增大，灯电流过低时不稳定，过高时影响灯的使用寿命。实验证明，选择灯电流60-65mA荧光强度较好。2丄4载气(氩气)、屏蔽气(氩气)流量载气过大，相当于稀释样品的浓度，使荧光强度减小。载气过小时，火焰不稳定。本实施例选择载气、屏蔽气流量分别为400mL/min和1000mL/min。2.2铁氢化钾浓度的选择铁氰化钾作为基体改进剂，可以减少其它金属所造成的干扰，通过比较浓度为0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的铁氰化钾溶液，实验结果如图2所示，发现1.5%-2.5%范围内时荧光强度稳定。本实施例选择加入铁氰化钾浓度为1.5%。2.3硼氢化钾浓度的选择通过实验发现荧光强度随还原剂硼氢化钾浓度增大而增大，如图3所示，硼氢化钾浓度2.0%-4.0%范围内荧光强度趋于稳定。本实施例优选加入硼氢化钾浓度为2%。2.4酸度的选择铅的氢化物生成反应条件对酸度要求非常苛刻，要求反应后废液的PH值范围控制在8-9左右。如图4所示，50mL体系中加入浓盐酸量为0.5-1.0mL时荧光强度稳定。优选加入盐酸量为l.OmL。2.5掩蔽剂草酸加入量的影响如图5所示，实验表明，在50mL体系中10g/L草酸加入量0.5-1.5mL时荧光强度稳定。优选草酸加入量为1.0mL。2.6标准曲线及线形范围工作参数仪器参数炉高为6mm，负高压220V-230V，灯电流60-65mA，载气和屏蔽气为氩气，流量分别为400mL/min和1000mL/min。对标准溶液进行检测，绘制标准工作曲线，如图6所示，相关系数为0.9996，回归方程为1&79.27*0+18.912。经试验测得铅在0-100ng/mL范围内呈线性关系。2.7最低检出限根据仪器给定的检出限测定程序，连续测定标准空白溶液和标准系列的荧光信号，计算出此方法的检出限为0.1106pg/L。2.8精密度考察按实验方法11次重复测量浓度为10.00pg/L铅标准溶液，计算出相对标准偏差为0.6%。2.9加标回收率实验采用加标回收方法，称取已知含量的样品，分别加入三种不同浓度的铅标准溶液做回收率实验，检测结果见表2。表2回收率实验结果<table>complextableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>在选定的最佳测定条件下，此方法检出限为0.1106pg/L、回收率为95%-105%、相对标准偏差为0.6%。表明本发明的方法是一种检出限低、灵敏度高、仪器价格低廉，适用于分析乳和乳制品中铅含量的方法。实施例2本发明与现有方法精密度对比实验按本发明与现有实验方法重复测量11次浓度为10.00pg/L铅标准溶液，计算其精密度，实验结果见表3。同时，以现有方法重复测量11次浓度为10.00pg/L铅标准溶液，计算其精密度，实验结果见表4。现有方法的步骤如下准确吸取5.00毫升100ng/mL铅标准应用液于50毫升容量瓶中，加入1.0mL盐酸(1+1)、1.0mL10g/L草酸溶液、2.0mL100g/L铁氰化钾溶液，用纯水准确定容至50mL，混匀，配制成10.00pg/L铅标准溶液。用配制好的还原剂和载流液11次重复测量其荧光强度，仪器自动计算出精密度。现有方法的检测参数炉高8mm、负高压323V、灯电流75mA、载气(氩气)流量800mL/min、屏蔽气(氩气)流量1000mL/min，还原剂称取5.0g硼氢化钠溶于500毫升2g/L氢氧化钠溶液中，混匀，现用现配。表3本发明的方法精密度实验结果测定次数荧光强度相对标准偏差1439.9212439.2993433.5094439.2765436.3440.6%6434.456436.7398434,9269437.17110439.87111441.504表4现有方法精密度实验结果测定次数荧光强度相对标准偏差1414,6212417.516438.0624426.216429.5172.02%6428.2217424.2768420.3819438.06210420.21611439.162从以上检测结果可以看出本发明方法比现有方法稳定性好、精密度高。本本发明方法通过把铁氰化钾加入到还原剂里，控制反应溶液的酸度，效果明显。实施例3检测条件采用实施例1所优选的参数。实验步骤1)称取0.5-1.0克样品，酸酸乳、纯牛奶于微波消解管中，加入10毫升硝酸，在微波消解炉消解完全后加20mL水在电热板上赶酸3次。2)赶酸完全后用纯水洗入25mL容量瓶中并准确定容至25mL，摇匀。3)准确吸取5.00毫升上述定容好的样液于25mL容量瓶中，加入0.5mL10g/L草酸溶液，用纯水定容至25毫升，放置30min。此时，试样液反应后废液PH值在8-9范围内。4)还原剂的配制氢氧化钠1克，硼氢化钾4克，铁氰化钾3克，先溶解氢氧化钠，再溶解硼氢化钾，最后溶解铁氰化钾，用纯水溶解并定容至200mL，现用现配。5)载流液的配制吸取10mL浓盐酸，用纯水定容至500mL，混匀。6)标准系列溶液的配制取25ml容量瓶6个，依次加入铅标准应用液0.0、0.5、1,0、1.5、2.0、2.5ml(各相当于铅浓度0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、ng/mL)，用少量纯水稀释后，各加入0.5mL盐酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用纯水准确定容至25mL、摇匀。放置30min。7)用配制好的还原剂和载流液上机检测。将检测结果与标准曲线对比，得到各个样品中铅的含量。检测结果如表5所示。表5检测乳和乳制品铅含量的结果<table>complextableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本发明的检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法把铁氰化钾加入到还原剂里，控制反应溶液的酸度，检出限为0.1106ng/L、回收率为95%-105%、相对标准偏差为0.6%，相比于现有方法，其精密度明显提高。并且，本发明的检测参数下，灵敏度高、仪器价格低廉，适合用于大量分析乳和乳制品中铅的含量。权利要求1.一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，包括如下步骤1)绘制标准曲线制备多个不同浓度的铅标准溶液，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制铅含量与检测结果之间的标准曲线；2)制备样品并用配制好的还原剂和载流液上机检测，得到检测结果；3)将步骤2)中的检测结果与所述的标准曲线比对，即得到样品中铅的含量；4)上述步骤中所使用的检测仪器为原子荧光光度计。2.如权利要求l所述的方法，其特征在于，所述步骤l)中的铅标准溶液浓度为0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述用铅标准溶液的配制方法为加入铅标准应用液(100ng/mL)0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，用少量纯水稀释后，各加入0.5mL盐酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用纯水准确定容至25mL，摇匀，放置30min。4.如权利要求l所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中所述样品的制备方法包括以下步骤a)称取样品于微波消解管中，加入硝酸，在微波消解炉消解完全后加水，在电热板上赶酸；b)赶酸完全后用纯水将样品洗入容量瓶中，定容，摇匀；c)根据样品反应后废液酸度，用纯水稀释样品溶液，放置30min;5.如权利要求4所述的的方法，其特征在于，所述赶酸要进行3-4次。6.如权利要求5所述的检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，其特征在于，所述步骤c)中试样液反应后的废液pH值控制在8-9。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤c)中用纯水把试样液稀释五倍。8.如权利要求l所述的检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，其特征在于所述步骤2)中的还原剂由以下成分组成氢氧化钠(或氢氧化钾)5g/L、硼氢化钾20-40g/L、铁氰化钾15-25g/L，其制备方法为先溶解氢氧化钠，再溶解硼氢化钾，最后溶解铁氰化钾后，用纯水溶解并定容。9.如权利要求l所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中的载流液是2%的盐酸(v/v)。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述原子荧光光度计检测参数为炉高为6mm时，负高压220V-230V，灯电流60-65mA,载气和屏蔽气为氩气，流量分别为400mL/min和1000mL/min。全文摘要本发明涉及一种检测乳和乳制品中重金属铅含量的方法，包括如下步骤1)绘制标准曲线；2)制备样品并用配制好的还原剂和载流液上机检测，得到检测结果；3)将步骤2)中的检测结果与所述的标准曲线比对，即得到样品中铅的含量；4)上述步骤中所使用的检测仪器为原子荧光光度计。本发明的方法对原子荧光光度计的工作条件及实验条件进行优化，在选定的最佳测定条件下，把铁氰化钾加入到还原剂里，控制反应溶液的酸度。本方法检出限低，灵敏度高，仪器价格低廉，适合用于分析乳和乳制品中铅的含量。文档编号G01N1/34GK101344483SQ200810132249公开日2009年1月14日申请日期2008年7月22日优先权日2008年7月22日发明者娃高申请人:内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司