专利名称：：一种药物组合物的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物的质量控制力'法，特别涉及一种治疗妇科疾病的金鸡制剂的药物组合物的鉴别方法和含量测定方法。
背景技术：
：关于金鸡胶囊的处方，性状和鉴别在中药部颁标准中有记载，拼音名Ji!^iJiaonang,书页弓Z16-95标准编弓WS3-B-3070-98，处方金樱根鸡血藤T斤拔功劳木两面针穿心莲，性状木品为胶囊剂内容物为棕色至棕褐色的粉末和颗粒；味苦。鉴别(1)取本品6粒的内容物，加2X盐酸溶液40ml，充分振摇，静置30分钟，滤过，取滤渣，用水洗至pH值为34，低温千燥，加丙酮l.()ml，浸渍l小时，时时振摇，滤过，滤液点于干燥的滤纸上，滴加1%硫酸铁铵溶液，显灰色至灰绿色斑点，放置后斑点颜色不褪。(2)取本品l()粒的内容物，加甲醇30ml，加热回流15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加2X盐酸溶液20ml使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用浓氨试液调pH值至l()，用氯仿振摇提取2次，每次15ml，合并氯仿提取液，蒸千，残渣加甲醇().3ml使溶解，作为供试品溶液。另取功劳木对照药材0.4g，加甲醇15ml,加热回流15分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加甲醇().5ml便溶解，作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液l()ul、对照药材溶液和对照品溶液各lul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7:1:2)为展开剂，展开，取出,晾干,置紫外光灯(365nm)K检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的-一个黄色荧光斑点。(3)取穿心莲对照药材lg,加甲醇15ml，加热回流15分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄S色谱法(附录VIB)试验，吸取〔鉴别〕(2)项下的供试品溶液及i:述对照药材溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板匕以氯仿-甲醇(9:l)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%二基苯甲酸乙醇溶液与5%氢氧化钠乙醇溶液的等量混合液(临用前混合)。供试品色谱屮，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査水分照水分测定法(附录IXH第二法)测定，不得过12.0%。其他应符合胶囊剂项卜'有关的各项规定(附录IL)。功能与主治清热解fT，ffi脾除湿，通络活血。用于附件炎、子宫内膜炎、盆腔炎属湿热下注证者。用法与用量口服，-一次4粒，-一日3次。注意孕妇慎用。规格每粒装().35g。贮藏密封。广西壮族自治区药品检验所起草。木发明突破原有中药部颁标准公开的金鸡胶囊的质量控制方法，在鉴别方法和含量测定方法上做出新的控制方法，鉴别方法重现性好，阴性无干扰；含量测定方法依据试验结果表明其精密度、至现性、稳定性良好，能够更有效的控制金鸡制剂的产品质量。
发明内容本发明目的是公开金鸡制剂的质量控制方法，该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法。金鸡制剂是由处方为金樱根、鸡血藤、千斤拔、功劳木、两面针和穿心莲六种原料药制成的中成药制剂。金鸡制剂的鉴别方法如下方法A:取金鸡制剂内容物日服川剂缺的1/2，研细，加20-5()ml的60%-95%乙醇溶液，加热回流0.5-4小时，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶0.5-4-g，拌匀，千燥，置硅胶柱上，先用6()9(rC石油醚2()-5()ml洗脱，弃去，再用三氯甲烷40-80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加—氯甲烷l-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每iml含img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l()Pl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄e板上，以7:3:0.15的三氯甲烷-乙醚-甲醇为展开剂，展开，取出，晾千；置254nm紫外光il—F检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置匕显相同颜色的斑点；方法B:取金鸡制剂内容物日服用剂#的1/2,研细,加20-5()ml的60%-95%乙醇溶液，加热冋流0.5-4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-5()ml使溶解，再加20-50ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯i-5ml使溶解，作为供试品溶液。另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄S色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点W'以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板匕以3():6:().3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定方法如下色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用磷酸调pH2.8的27:73的乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相；检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于S()()();对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，加甲醇制成每lml各含对照品5-20Pg的溶液；供试品溶液的制备取金鸡制剂的内容物，研细，取闩服用剂量的1/12-1/6，精密称定，置量瓶屮，加入l:100的盐酸-甲醇混合溶液45-50ml，于50-80"水浴屮加热10-60分钟，取出，放冷，超卢提取40-120分钟，放至室温，加l:IOO的盐酸-甲醇混合溶液定容至5()ml刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加f中性氧化铝柱....匕，用80%乙醇溶液40-80ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至l()ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。5金鸡制剂服用剂量/每日含功劳木以盐酸小檗碱C2。H17N04■HC1和盐酸巴马汀C21H22N04■HC1合计，不得少于1.2mg。优选鉴别方法如K:方法A、取金鸡制剂内容物日服用剂量的i/2，研细，加95X乙醇20ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸千，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶lg，拌匀，千燥，置硅胶柱上，先用609(TC石油醚30ml洗脱，弃去，W用三氯甲烷40ml洗脱，收集洗脱液，蒸千，残渣加三氯甲烷lml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l()ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄JS板上，以7:3:0.15的—氯甲烷-乙醚-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；方法:B、取金鸡制剂内容物日服用剂量的1/2，研细，加7()X乙醇5()ml，加热回流3()分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，W加30ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，蒸千，残渣加乙酸乙酷2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄S色谱法试验，吸取上述两种溶液各1()U1，分别点于同一以羧甲某纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30:6:0.3的—氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾十；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置....匕，显相同颜色的斑点优选*^测定方法如下色谱条ff与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用磷酸调pH2.8的27:73的乙腈-().05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相;检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000;对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，加甲醇制成每lml各含7.5ug的溶液；供试品溶液的制备取金鸡制剂的内容物，研细，取日服川剂别勺1/12-1/6，精密称定，置量瓶中，加入i:iOO的盐酸-甲醇混合溶液50mh于55t:水浴中加热i5分钟，取出，放冷，超声提取45分钟，放至室温，加i:i()()的盐酸-甲醇混合溶液定容至50ml刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加丁'中阵:氧化铝柱上，用80%乙醇溶液5()ml洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至千，残渣加甲醇适欤使溶解并转移至10ml量瓶巾，加甲醇至刻度，摇匀；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。金鸡制剂服用剂量/每日含功劳木以盐酸小檗碱C2。H17N04HC1和盐酸巴马汀C21H22N04HC1计，不得少于i.2mg。本发明所用的金鸡制剂包括片齐U，胶囊剂，颗粒剂，滴丸剂，口服液，煎膏剂等临床或药学上可接受的常用剂型，其中片剂为每1--i服用剂量18片(糖衣片)或12片(薄膜衣片)金鸡颗粒每日服用剂量2袋，每袋8g，金鸡胶囊每日服用剂量12粒，缓释胶囊一次5粒，每日1-2次，软胶囊每日服ltj剂量12粒，滴丸每日服川剂％]2粒，n服液一日3次，每次10ml，煎膏剂-一日3次，每次10ml。本发明的质量控制方法中鉴别方法重现性好，阴性无T扰；^^:测定方法依据试验结果表明其精密度、重现性、稳定性良好。图1:以三氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:0.15)为展开剂的金鸡胶囊中鸡血藤药材薄层鉴别图2:以三氯甲垸-甲醇(7:3)为展开剂的金鸡胶囊中鸡血藤药材薄层色谱鉴别图3:以28:72的乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相的含量测定分离效果图4:以30:70的乙腈-0.05mol/:L磷酸二氢钠溶液为流动相的含量测定分离效果下面实验例和实施例用T进-^歩说明但不限T本发明。实验例1:鉴别方法中流动相的选择实验金鸡胶囊中鸡血藤药材薄层色谱鉴别实验，分别以三氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:().15)和三氯甲烷-甲醇(7:3)为展开剂，意外发现三氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:0.15)为展开剂重现性好，阴性无干扰，其中图i为重现性好，阴性无干扰；图2为重现性虽好，但阴性有T扰；图1的薄层板为以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板，i、样品(ii06066)2、样品(ii06067)3、样品(ii06068)4、芒柄花素对照品5、阴性对照，展开剂二氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:().15),显色剂置紫外光灯(254nm)下检视，温度31°C，相对湿度79%;图2的薄j^板为以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板，1、样品(1.106066)，2、样品(1.106067)，3、样品(1.106068)4、阴性对照5、芒柄花素对照品，展开剂三氯甲烷-甲醇(7:3);显色剂置紫外光灯(254nm)下检视，温度3Q。C,相对湿度76%。实验例2;含量测定中流动相的选择实验金鸡胶囊的含a测定方法色谱条件与系统适用性试验以----卜八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mol/:L磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3()()()。对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lml含15ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取金鸡制剂的内容物，研细，取约().5g，精密称定，置50ml量瓶中，加入盐酸-甲醇(l:100)混合溶液48ml，于55。C水浴中加热15分钟，取出，放冷，超声提取(功率80W，频率50kHz)45分钟，放至室温，加盐酸-甲醇(l:1.00)混合溶液定容至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于中性氧化铝柱(IOO200g，4g，内径lcm,干法装柱)上，用甲醇5()ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至T-，残渣加甲醇适量使溶解并转移至iOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。金鸡制剂服用剂量/每日含功劳木以盐酸小檗碱(C20H17NO4'HC1)的量计，不得少于540ug。因金鸡胶囊除有功劳木外还含有两面针等5味原料药，经反复试验和调整用不同比例关系为流动相，结果发现27:73的乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH2.8)分离效果较好，而选择乙腈-().()5mol/L磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH2.8)(3():70)为流动相分离效果并不拜想，参见图3，图4。实验例3:含^测u:中供试品溶液提取及洗脱实验关于含量测定中供试品溶液提取实验，使用的盐酸-甲醇(i:i00)为溶剂进行提取，在提取方法上采用于55。C水浴中加热后再超声处理，具体操作及结果见表1。表l、提取条件的选择结果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>从表1可知，以丁'55"C水浴中加热15分钟后再超声处理45分钟提取效率最佳，故提取条件确定为取制剂内容物，研细，取约().5g，精密称定，置具塞锥形瓶巾，精密加入盐酸-甲醇(l:100)混合溶液50ml，称定重量，于55"C水浴中加热15分钟，放冷，再超声处理(功率80W，频率50kHz)45分钟，放冷，再称定歪量，用盐酸-甲醇(1:IOO)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过。关f含^测定中增加滤液的洗脱步骤，直接取滤液注入液相色谱仪测定，因金鸡胶囊除有功劳木外还含有两面针等5味，杂质峰太多，影响主峰的判断，故增加洗脱除去杂质，再行测定。洗脱方法为"精密量取续滤液15ml，加于中性氧化铝柱(1()()200目，4g，内径lcm，干法装柱)上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。"实验例4:含量测定方法中线性关系考察实验精密称取盐酸小檗碱对照品10.21.mg，置5()ml量瓶屮，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液(浓度为0.2042mg/ml)，精密量取上述对照品储备溶液0.5、1、2、5、l()ml，分别置25ml^瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按色谱条件分别进样i0u1测定。以盐酸小檗碱对照品进样量(Ug)为横坐标PO，峰面积积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，则回归方程为Y=3888622X-23528.5(i-=0.9999)结果表明当进样量在0.04080.8168Pg范闱内时，盐酸小檗碱进样^^岭面积积分值呈良好的线性关系。上述试验结果详见表2。表2盐酸小檗碱对照品线性关系<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>回归方程Y=3888622X-23528.5(r=0.9999)实验例5:含量测定方法中精密度试验对同一供试品溶液，连续测定5次，计算含量。结果盐酸小檗碱含量的平均值为0.364mg/g，RSD》j0.91%(n=5)。详见表3。试验表明，含量测定方法的精密度较好。表3精密度试验结果序号<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实验例7:含量测定方法中重复性试验对同一批样品，平行测定6份，结果见——F表。结果盐酸小檗碱含量的平均值为0.386mg/g，RS:D为1.99%(n=6)。结果表明，本法的重复性较好。表5至复性试验结果(测定结果为两次进样平均值)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>本发明具体实施例如下实施例1金鸡胶囊的质量控制/f法取金鸡胶^l内容物2g，研细，加乙醇20ml，加热冋流1小时，滤过，滤液蒸:「，残渣用甲醇适一:使溶解，加入硅胶lg,拌匀，T燥，置硅胶柱(100-200目，2g，内径丄cm，干法装柱)上，先用石油醚(609(TC)30ml洗脱，弃去，再用三氯甲烷40ml洗脱，收集洗脱液，蒸千，残渣加二氯甲垸lml使溶解，作为供试品溶液。另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取l:述两种溶液各l()Pl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:0.15)为展开剂，展开，取出，晾千。置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱屮，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例2金鸡胶囊的质^控制方法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mol/'L磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低丁'3000。对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lml含15pg的溶液，即得。供试品溶液的制备取金鸡胶囊装量差异项F的内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加入盐酸-甲醇(l:IOO)混合溶液4-8ml，于55。C水浴屮加热15分钟，取出，放冷，超声提取(功率80W，频率50kHz)45分钟，放至室温，加盐酸-甲醇(l:IOO)混合溶液定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l()Pl，注入液相色谱仪，测定，即得。金鸡胶囊每粒0.35g含功劳木以盐酸小檗碱(C2。H17N04HC1)的量讣，不得少于45pg。实施例3:金鸡片的质量控制方法色谱条件与系统适用性试验以--卜八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mo1/:L磷酸二氢钠溶液(磷酸调pH2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lml含15ug的溶液，即得。供试品溶液的制各取本品薄膜衣片8片或糖衣片i2片，除去包衣，研细，取约().5g，精密称定，置5()ml量瓶中，加入盐酸-甲醇(l:1()())混合溶液48ml，于55。C水浴中加热15分钟，取出，放冷，超声提取(功率80W，频率50kHz)45分钟，放至室温，加盐酸-甲醇(l:l()())混合溶液定容至刻度，摇匀，滤过，精密^取续滤液15ml，加于屮性氧化铝柱(2003()()目，4g，内径l.cm,千法装柱)上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，冋收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各iOul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含功劳木以盐酸小檗碱(C2QH17N04■HC1)计，薄膜衣片不得少丁-45pg，糖衣片不得少于30ug。实施例4:金鸡颗粒的质量控制方法色谱条件与系统适用性试验用|-八烷某硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0,05mol/L磷酸二氢钠(磷酸调pH至3,0)(25:75)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低f3000。对照品溶液的制各精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每iml含i5ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，研细，取约2g,精密称定，置50ml量瓶中，加入盐酸-甲醇(1:100)混合溶液48ml，于55"水浴中加热15分钟，取出，放冷，超声提取(功率80W，频率50kHz)45分钟，放至室温，加盐酸-甲醇(1:l()())混合溶液定容至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于屮性氧化铝柱(200300目，4g，内径lcm，干法装柱)上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，冋收甲醇至T、残渣加甲醇适g:使溶解并转移至l()ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各20ul，汴入液相色谱仪，测定，即得。本金鸡颗粒每袋含功劳木以盐酸小檗碱(C2QH17N04'HC1)计，不得少丁'0.28mg。实施例5:金鸡缓释胶囊的质還:控制方法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用磷酸调pH2.8的27:73的乙腈-().05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相；检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lml含15pg的溶液；供试品溶液的制备取金鸡缓释胶囊i粒的内容物，研细，取内容物i/2，精密称定，置5()mlg:瓶中，加入l:l()()的盐酸-甲醇混合溶液48ml，于6()。C水浴中加热3()分钟，取出，放冷，超声提取60分钟，放至室温，加l:100的盐酸-甲醇混合溶液定容至50ml刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于巾性氧化铝柱l:，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；金鸡缓释胶囊每日服用剂量含功劳木以盐酸小檗碱(；HnNOfHa的量计，不得少f5'1()pg。实施例6:金鸡滴丸的质量控制方法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用磷酸调pH2.8的27:73的乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相；检测波长为265nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000;对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每l.ml含15Pg的溶液；供试品溶液的制备取金鸡滴丸l粒的内容物，研细，精密称定，置50ml量瓶中，加入i:i()()的盐酸-甲醇混合溶液48mi，f5(rc水浴中加热l()分钟，取出，放冷，超声提取45分钟，放至室温，加i:iOO的盐酸-甲醇混合溶液定容至50ml刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于中性氧化铝柱上，用甲醇4()ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；金鸡滴丸服用剂量/每闩含功劳木以盐酸小檗碱C2。H17N04fl:Cl的量计，不得少于54-0ug。实施例7:金鸡U服液的质量控制方法色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-().()5mo1/L磷酸—氢钠溶液(磷酸调pH2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3()()()。对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每lml含15ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取金鸡口服液5ml，精密称定，置5()ml量瓶巾，加入盐酸-甲醇(l:100)混合溶液48ml，于55"C水浴中加热15分钟，取出，放冷，超声提取(功率8()W，频率50kHz)45分钟，放至室温，加盐酸-甲醇(l:l.O())混合溶液定容至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于中性氧化铝柱(IOO200目，4g，内径lcm，干法装柱)上，用甲醇5()ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至T-，残渣加甲醇适量使溶解并转移至iOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。金鸡口服液每日服用剂^含功劳木以盐酸小檗碱(C加H:,7N(VHC1)的量计，不得少丁'540iig。实施例8:金鸡滴丸的质量控制方法取金鸡滴丸内容物6粒，研细，加60X的30ml的乙醇溶液，加热回流2小时，滤过，滤液蒸千，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶2g，拌匀，千燥，置硅胶柱上，先用6090t:石油醚30ml洗脱，弃去，再用—氯甲烷50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加三氯甲烷3ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每iml含img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取--匕述两种溶液各l()lil，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄e板上，以7:3:0.15的三氯甲烷-乙醚-甲醇为展开剂，展开，取出，晾千；置254nm紫外光幻—F检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置匕显相同颜色的斑点。实施例9:金鸡制煎膏剂的质量控制^/法取金鸡制煎膏剂15ml，加95X乙醇20ml，加热冋流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶lg,拌匀，十燥，置硅胶柱(10()-200目，2g,内径丄cm，干法装柱)上，先用石油醚(6090°C)30ml洗脱，弃去，再用三氯甲烷40ml洗脱，收集洗脱液，蒸千，残渣加二氯甲垸lml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄^色谱法试验，吸取i:述两种溶液各10P1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板....匕，以三氯甲烷-乙醚-甲醇(7:3:().1.5)为展开剂，展开，取出，晾千；置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例10金鸡胶囊的鉴别方法取金鸡胶囊内容物2g，研细，加70X乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加水30ml使溶解，再加30ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄S色谱法试验，吸取上述两种溶液各1()U1，分别点于同一以羧甲某纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30:6:0.3的一:氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，時,l;置25'lnm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。上述所用金鸡胶囊用法与用量口服，一次4粒，一日3次。规格每粒装0.35g。实施例11:金鸡胶囊的含量测定方法含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版--------部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以卜八烷某硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mo1/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸巴马汀峰和盐酸小檗碱峰计算应不低f5000。对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含7.5ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶巾，精密加入盐酸-甲醇(l:1.00)混合溶液5()ml，密塞，称定重量，于55。C水浴中加热15分钟，超声处理(功率400W，频率40kHz)45分钟，放冷，再称定歪量，用盐酸-甲醇(i:10())混合溶液补足减失的歪*，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，通过中性氧化铝柱(IOO200g,5g，内径l.Ocm，干法装柱)上，用80%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至十，残渣用甲醇溶解，并转移至l()mla瓶屮，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2()ul，注入液相色谱仪，测定，即得。木品每粒含功劳木以盐酸小檗碱(C2(1Hl7N04'HC1)和盐酸巴马汀(C2iH22N04'HC1)计，不得少于0.10mg。....匕述所用金鸡胶囊用法与用量n服，一次4粒，一日3次。规格每粒装Q.35g。实施例12:金鸡颗粒质量控制方法鉴别方法取金鸡颗粒i6g，研细，加70X乙醇50mh加热回流30分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加水3()ml使溶解，加乙酸乙酯3()ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每lml含l—mg的溶液，作为XM品溶液。照薄层色離(巾国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取卜.述两种溶液各l()ul，分别点于同一以羧甲某纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄JS板上，以一:a甲烷-乙酸乙酯-甲醇(30:6:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含tt测定照卨效液相色谱法(中闺药典2()()5年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.()5mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸巴马汀和盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含7.5ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品装量差异项K的内容物，研细，取约2g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸—甲醇(i:i00)混合溶液50mh密塞，称定重量，于55。C水浴中加热15分钟，超声处理(功率4()()W，频率4()kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇(l:IOO)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于巾性氧化铝柱(1.0020()目，5g，内径l.()cm，千法装柱)匕用80X乙醇5()ml洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至干，残渣用甲醇溶解，并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。金鸡颗粒每袋含功劳木以盐酸小檗碱(C20H丄7N04.HC1)和盐酸巴马汀(C21H22N04HC1)计，不得少于().7()mg。上述所用金鸡颗粒每袋装8g，用开水冲服，-'次1袋，-4--12次。实施例13金鸡片剂质量控制方法取本品糖衣片9片或薄膜衣片6片，除去包衣，研细，加70X乙醇50ml，加热M流30分钟，滤过，滤液蒸千，残渣加水30ml使溶解，用乙酸乙酯30ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2()()5年版-一部附录VI:B)试验，吸取上述两种溶液各iOuh分别点于同--以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(3():6:().3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置匕显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版--部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验以卜八烷某硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05mo1/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值2.8)(27:73)为流动相；检测波长为265nm。理论板数按盐酸巴马汀峰和盐酸小檗碱峰计算应不低f5000。对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含7.5ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品IO片，除去包衣，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(l-:l()O)混合溶液50ml，密塞，称定重量，于55'C水浴屮加热15分钟，取出，超声处理(功率4.00W,频率40kHz)4.5分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇(l:100)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加f中性氧化铝柱(1()()200目，5g，内径1.0cm，T法装柱)上，用8()%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，回收乙醇至干，残淹用乙醇溶解，并转移至iOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含功劳木以盐酸小檗碱(C2。H17N04.:H:C1)和盐酸巴马汀(C21H22N04.HCl)的总量计，糖衣片不得少于70ug，薄膜衣片不得少于105ug。上述金鸡薄膜衣片每片重0.47g;糖衣片基片重0.27g。薄膜衣片一次4片，糖衣片一次6片；一日3次。权利要求一种金鸡制剂的质量控制方法，该金鸡制剂由金樱根、鸡血藤、千斤拔、功劳木、两面针和穿心莲六种原料药制成，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法方法A取金鸡制剂内容物日服用剂量的1/2，研细，加20-50ml的60％-95％乙醇溶液，加热回流0.5-4小时，滤过，滤液蒸干，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶0.5-4g，拌匀，干燥，置硅胶柱上，先用60～90℃石油醚20-50ml洗脱，弃去，再用三氯甲烷40-80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加三氯甲烷1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适量加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7∶3∶0.15的三氯甲烷-乙醚-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；方法B取金鸡制剂内容物日服用剂量的1/2，研细，加20-50ml的60％-95％乙醇溶液，加热回流0.5-4小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-50ml使溶解，再加20-50ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30∶6∶0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；方法C色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用磷酸调pH2.8的27∶73的乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相；检测波长为265nm；理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000；对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，加甲醇制成每1ml各含对照品5-20μg的溶液；供试品溶液的制备取金鸡制剂的内容物，研细，取日服用剂量的1/12-1/6，精密称定，置量瓶中，加入1∶100的盐酸-甲醇混合溶液45-50ml，于50-80℃水浴中加热10-60分钟，取出，放冷，超声提取40-120分钟，放至室温，加1∶100的盐酸-甲醇混合溶液定容至50ml刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，加于中性氧化铝柱上，用80％乙醇溶液40-80ml洗脱，收集洗脱液，回收甲醇至干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；金鸡制剂服用剂量/每日含功劳木以盐酸小檗碱C20H17NO4·HCl和盐酸巴马汀C21H22NO4·HCl计，不得少于1.2mg。2.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法方法A、取金鸡制剂内容物日服用剂量的1/2，研细，加95X乙醇20ml，加热冋流l小时，滤过，滤液蒸千，残渣用甲醇适量使溶解，加入硅胶lg，拌匀，千燥，置硅胶柱上，先用609(TC石油醚30ml洗脱，弃去，再用一:氯甲烷40ml洗脱，收集洗脱液，蒸T，残渣加三氯甲烷lml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品适^加甲醇制成每iml含img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各l()Pl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板....匕，以7:3:().15的三氯甲烷-乙醚-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干；置254nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置匕显相同颜色的斑点；方法B、取金鸡制剂内容物日服用剂量的1/2，研细，加70X乙醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，再加30ml乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯液，蒸T，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芒柄花素对照品，加甲醇制成每iml含img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取....匕述两种溶液各l()ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄^板上，以30:6:0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾千；置254nm紫外光幻——F检视；供试品色谱中，在与。全文摘要本发明公开一种药物组合物的质量控制方法，特别是关于金鸡制剂的质量控制方法，该方法包括鉴别方法和/或含量测定方法，鉴别方法重现性好，阴性无干扰；含量测定方法依据试验结果表明其精密度、重现性、稳定性良好，能够更有效的控制金鸡制剂的产品质量。文档编号G01N30/90GK101690752SQ20091014393公开日2010年4月7日申请日期2009年6月3日优先权日2008年6月6日发明者刘树军申请人:广西灵峰药业有限公司