专利名称：一种sncg基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种SNCG基因的应用，具体地说，是ー种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用。
背景技术：
乳腺癌是最常见和最重要的乳腺疾病，发病率逐年上升，以上海为例，1972年，上海女性的乳腺癌发病率为每10万人中有17人，1992年上升到每10万人中有34人，2000 年，则迅速上升至每10万人中有56. 2人。也就是说，从1992-2000年8年间的上升幅度，超过了 1972-1992年20年间的上升幅度，成为女性发病率最高的恶性肿瘤，严重危害广大妇女的身心健康。作为ー种雌激素依赖的肿瘤，对雌激素及雌激素受体(estrogen receptor, ER)状况在乳腺癌致病、进展以及治疗中的研究日益受到重视，乳腺癌的激素治疗成为与化疗具同等重要地位的综合处理方法，但其同时也遭遇肿瘤細胞耐药而治疗失败的瓶颈。因此，对乳腺癌激素和受体调控的深入探索，并在此基础上建立新的防治策略成为当今世界生物医学界研究的重大课题。肿瘤分期、淋巴结转移以及ER状态等是与乳腺癌进展有关的经典临床病理指标。 随着医学分子生物学的不断发展，越来越多的肿瘤标记物被发现于乳腺癌的发生发展密切相关，有资料显示，SNCG表达与乳腺癌的分期呈明显正相关性，可能是乳腺癌新的预后指标。SNCG是Shi最早克隆出的ー种新的人类基因，经证实，其与乳腺癌特异基因1 (breast cancer specific genel，BCSG1)为同一基因。SNCG是ー种特异的在乳腺癌中有选择性表达的基因，是利用BLAST程序搜寻大约500000条表达序列标签(expressed sequence tag, EST)得到的ー个含8条EST编码SNCG的基因，其中7条来自乳腺cDNA文库，仅1条在脑库，而7条EST中有6条来自乳腺肿瘤文库。近年来，申请人利用逆转录-链式聚合酶反应 (reverse transcription-polymerase chain reaction , RT-PCR)> Western bolt 口原位杂交(in situ hybridization，ISH)等技术检测SNCG在不同乳腺组织的表达，发现大多数进展期乳腺癌的肿瘤上皮細胞出现SNCG表达。研究显示，36%的乳腺癌检测到SNCG表达， 其中SNCG表达率在III / IV期乳腺癌高达81%，而在I / II期乳腺癌仅为15% ；SNCG的表达与乳腺癌的分期呈明显正相关性(/X0. 001)；经过5年密切跟踪随访后发现，28%SNCG表达阳性者出现远处转移(包括胸腔、肺和骨等)，远多于SNCG表达阴性者(仅6%)，/M). 006 ；Cox回归分析显示，SNCG表达阳性者的复发、转移风险高于SNCG表达阴性者(HR 4.515，95% CI 1. 188-17. 154，P=O. 027)。统计生存分析发现SNCG表达阳性者3年无病生存率(Disease Free Survival, DFS)和 5 年 DFS 分别为 78% 和 44%，较 SNCG 表达阴性者 3 年 DFS (94%) 和5年DFS (94%)明显降低Gd=O. 014)，从而首次提出SNCG可能是乳腺癌新的预后指标。中国专利文献CN101497922A，
公开日2009年8月5日，发明名称为PNMA5基因的应用。该发明公开了ー种PNMA5基因的应用，用于制备诊断肝癌的产品和制备治疗肝癌的药物，该发明的PNMA5基因，可作为诊断肝癌的特异标致基因，使肝癌诊断更加准确、快速， 且为防治肝癌提供了新的治疗靶点和有效新药。但是关于SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，目前还未见报道。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供ー种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用。为实现上述目的，本发明采取的技术方案是一种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，所述的SNCG基因通过调节ER活性状态而影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因通过调节抗雌激素治疗敏感性影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因在制备诊断乳腺癌的产品中的应用。所述的诊断乳腺癌的产品包括用RT-PCR、定时定量PCR或免疫检测诊断乳腺癌的产品。本发明优点在于
1、SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用，开创了乳腺癌激素治疗的新思
路；
2、SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用，提高了开发治疗乳腺癌的新药的可能性；
3、SNCG基因可作为诊断乳腺癌的特异标志基因，使乳腺癌诊断更加准确、快速。
附图1是实施例2中細胞生长曲线图。附图2是实施例3中細胞周期统计结果图。附图3是实施例5中基因在mRNA水平的表达情况示意图。附图4是实施例6中western blot对蛋白的检测示意图。附图5是实施例7中Transwel 1拍照结果示意图。附图6是实施例7中Transwel 1统计结果示意图。附图7是实施例8中Wfestern blot检测结果示意图。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式
作详细说明。实施例1慢病毒载体的构建与包装一、实验材料
(一)主要设备
YJ-875超净工作台、CO2培养箱3111型、-80°C低温冰箱、LDZX-40BI型压カ蒸汽灭菌器、TGL-16G型台式高速离心机、Nanopure超纯水仪、流式細胞仪、AA-200型电子天平、 carton显微镜CCD摄像系统、CK40-F200型倒置显微镜、XSP-2C生物显微镜、荧光定量PCR 仪、蛋白印迹电泳仪、90-2型磁力搅拌器、孔径101，tm的多聚酯滤膜、微量移液枪等。(ニ)主要药品及试剂
谷氨酰胺(L-Glutamine)、ニ甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶、胎牛血清、DMEM培养粉、鼠抗人单克隆PE-⑶133/1、小鼠抗人ERalpha受体抗体、小鼠抗人BCRP抗体、兔抗人SNCG抗体、alpha-actin抗体-SC-8432、MTT、聚丙烯酰胺、SNCG siRNA lentiviral particle gene silencers、Contro丄 shRNA Lentiviral Particles、ViraPower Bsd Lentiviral Support Kit。(三)主要溶液配制 1.細胞培养用溶液配制
(1)磷酸盐缓冲液(0.lmol/L PBS, pH 7. 4)
NaCl 8. OOg，KCl 0. 20g, Na2HPO4 1. 56g, KH2PO4 0. 20g 加双蒸水定容至100ml，用孔径0. 22um微孔滤膜过滤除菌，4°C保存备用。(2) DMEM完全培养基
采用DMEM培养粉，按说明配制成DMEM基础培养液；加入NaHCO3 (终浓度0. 08%)，小牛血清终浓度为10%，适量的HEPES、抗生素(终浓度为100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素) 和3%谷氨酰胺(终浓度lOumol/ml)。(3)胰蛋白酶消化液
用无钙、镁离子Hank’S液配制终浓度为0. 25%(w/v)的胰蛋白酶溶液，过滤除菌，4°C保存。(4) EDTA 消化液
用0.01 mol/L PBS缓冲液配制终浓度为lmmol/L EDTA (w/v)的消化溶液，过滤除菌，
4°C保存。(5)細胞冻存液
即含10% DMSO和30%小牛血清的完全培养基。(6)胎牛血清
新生胎牛血清购于Gibco公司，临用前56°C热灭活30min，4°C冰箱保存备用。2.其它试剂配制
(2)0.5 mol / L EDTA (PH8. 0) EDTA. 2H20186. Ig 双蒸水 800ml
1 mol/L NaOH 适量调节 PH 至 8. 0， 加双蒸水定容至1000ml。(3) IOmM Tris (PH 7. 5) Tris 1. 2114g
DEPC处理的双蒸水800ml
浓盐酸适量调节PH至7. 5
加DEPC处理的双蒸水溶解定容至1000ml。(4) 5 X TBE 缓冲液 Tris 54g 硼酸 27. 5g
0. 5mol / L EDTA (PH 8.0)20mL 加双蒸水溶解定容至 1000ml。(5) 6 X凝胶载样缓冲液 溴酚蓝0. 25%ニ甲苯青0.25%
蔗糖40% (W / V)，4°C保存
(6)5mg/ml MTT的配制称取MTT 0. 5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)，用0. 22um 滤膜过滤以除去溶液里的細菌，放4°C避光保存备用。(7) western blot 溶液的配制
1) 2mol/L Tris-HCL(PH8. 8) 100ml 称取 24. 2g Tris 碱，加入 50ml ddH20，缓慢加入浓盐酸至PH8. 8，冷却至室温，加入ddH20至100ml。2) lmol/L Tris-HCL(PH6. 8) 100ml 称取 12. Ig Tris碱，加入50ml ddH20，缓慢加入浓盐酸至PH6. 8，冷却至室温，加入ddH20至100ml。3) 10%SDS 100ml 称取 IOgSDS,加入 ddH20 至 100ml，室温保存。4) 10%过硫酸铵0. 5g过硫酸铵加入5ml ddH20,密封后存放于4°C。5)电泳缓冲液:3gTris碱14. 4g甘氨酸，IgSDS加入IL水溶解 6)转移缓冲液:1. 93gTris碱9g甘氨酸加入ddH20至1し7)TBS :5mlTris-HCL (2mol/L，PH7. 5),37. 5mlNaCl (4mol/L)加 ddH20 至 1L，调 PH 值至7.5，临用前加入Tween20 (1:1000)。8)封闭液5%脱脂奶粉溶于TBST溶液。ニ、实验步骤
1. 1将已有的克隆质粒(RG204173) P-CMV-SNCG内的基因经过酶切(SgfI-MluI)Jfg 的片段转入慢病毒载体(pLenti6. 3)，并测序验证后进行转染。1.2转染前一天将四31~細胞铺于IOcm板，当細胞密度达到80%左右即可进行 PEI转染。将下列DNA加入一个已装有480ul 1* HBS( PH 7.4)灭菌管混勻。1. 3将10* PEI剧烈振荡后加入到360ul 1* HBS ( PH 7. 4)灭菌管混勻。 1. 4将混勻的PEI加入到装有DNA的灭菌管中，用枪头吹吸15次混勻，室温培养 30分钟。1. 5吸去待转染細胞的培养液换成5ml无血清DMEM培养，待DNA静置时间到达， 将DNA混合液逐滴均勻加入到細胞培养皿中，用手轻摇混勻平皿。1.6 6-8小时后，将无血清DMEM移去，换成13ml 10%血清的正常DMEM于37°C培养包装病毒。1. 7在随后的三天，每天收集細胞上清于ー个灭菌的50ml管中保存于4°C，随后更换新鲜培养液。1. 8收集的細胞上清液经过0. 45um 一次性滤器过滤，除去細胞碎片。1. 9将35ml过滤的上清加入到ー个高速离心管中，离心管用培养液平衡并用封 ロ膜封ロ，4°C，70000g离心2小时后，用移液管小心移去上清，加入Iml培养液并用移液管小心吹吸大概20下至沉淀溶解。1.10收集到的病毒根据所需量，在终浓度6-lOng/ul polybrene存在下加入到 70%左右目的細胞的6孔板中，6孔板于37°C 2500rpm离心30分钟后，置于37°C培养验证效率即可。实施例2 MTT法测细胞的増殖活性一、实验材料(參见实施例1)ニ、实验步骤
MTT溶液配置称取MTT 0. 5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)中，用0. 22 μ m滤膜过滤以除去溶液里的細菌，放4°C避光保存即可。1)細胞依据不同试验分組，转染不同的载体后，每孔加入細胞培养液培养池， 24h, 48h，72h，每组选择三个复孔。2)拿出培养箱后，每孔加入500μ 1細胞培养液和50μ 1 MTT溶液(5mg/ml)。37°C 培养箱内孵育4小吋。3)小心吸出細胞培养液，加入500μ 1 DMS0，震荡lOmin，使结晶物充分溶解。4)每孔分別取出100 μ 1，加入96孔板中进行检測。选择490nm波长，以对照孔调零，在酶标仪上測定各孔的吸光值。以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制細胞生长曲线图。三、实验结果
如图1所示，图1是细胞生长曲线图，横坐标为细胞培养的不同时间点，纵坐标为MTT 试验中读取OD值，OD值越高，代表細胞細胞活力越強。不同的组别如图1所示，我们可以看出，与其它各组相比，转染SNCG-shRNA组，也就是抑制SNCG表达的实验组，在72h时间点， 細胞活力最低，和对照组相比，具有统计学差异，P<0. 05，表明该细胞在低表达SNCG的情况下，細胞整体活力较低。相反，过表达SNCG組，細胞在48Κ7 !时间点OD值都最高，细胞活力最強，且差异具有统计学意义，表明SNCG高表达情况下，細胞活力较高。实施例3流式检测細胞周期一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤
1)取各实验组細胞，胰酶消化后，离心，PBS洗一遍；
2)上述細胞分別制成单细胞悬液，调整细胞数为1X IO6个/し3 )加入冰预冷的70%的乙醇固定，4°C，1 _2小时。4)离心弃去固定液，3mlPBS重悬5min。5)加入 150 ul RNaseA (250-500 ug/ml PBS 稀释)重悬細胞，37°C消化 30 分钟。6) 400 目的筛网过滤 1 次，500-1000r/min 离心 5min,弃去 PBS。7)用 Iml PI (50ug/ml)染液染色，4°C避光 30min。8)流式细胞仪检测，PI用488nm氩离子激光器激发，由630带通滤光片接收，通过FSC/SSC散点图。細胞周期统计结果如下
如图2所示，图2是细胞周期统计结果图，Cell cycle实验统计結果，横坐标为不同细胞周期状态，纵坐标为处在该细胞周期的細胞占总细胞数的比例。图2中可见，过表达SNCG 后，G2/M期細胞减少；下调SNCG后，G2/M期细胞增多，说明SNCG的表达高低对于細胞周期产生了影响。但是，和对照组相比，过表达或是抑制SNCG組，P值均无显著性差异，说明 SNCG的表达高低对于細胞周期的影响并不大。实施例4細胞培养及转染试验一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤人T47D細胞株培养于含5%胎牛血清的1640培养基中，于37°C、5% CO2培养箱内培养。转染前一天将贴壁生长的细胞进行胰酶消化、铺板，使转染当天細胞密度达到90%。按照以下分组进行转染
阴性对照组-1 (阴性对照，加入空shRNA)；
阴性对照组-2 (阴性对照，加入对照lentivirus vector)；
实验组-1 (加入shRNA-SNCG)，实验组-2 (加入lenti-SNCG)，每组设3个复孔。转染步骤按LipofectamineTiCOOO说明书进行。M h后消化稀释细胞(1 10)至新鲜培养基中， 48 h后加G418 (800mg/L)筛选，约2周左右获得阳性单克隆，用含800mg/L G418的培养基扩大培养，约8周获得稳定表达SNCGshRNA、阴性对照质粒的T47D細胞。实施例5 RT-PCR方法检测SNCG以及ER、BCRP的mRNA的表达一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤
1)细胞总RNA的抽提纯化
(1) 1 X IO7細胞倒入1. 5mlEP离心管中加入ImlRNArose试剂。(2)勻浆室温放置5min，然后在4°C以离心カ为12000g离心5min。(3)上清液倒入另ー EP离心管中，按照Iml的RNArose使用200 μ 1的比例在上清液中加入氯仿，用力颠倒离心管以混勻，室温静置IOmin使之分层后，4°C，以离心カ为 12000g 离心 15min。(4)小心将上层水相移至另外ー个离心管中，再加入等体积异丙醇，混勻，室温放 i IOmin0(5)4°C，以12000 g离心lOmin，小心弃上清，管底见少许白色沉淀，为分离出的总
RNA。(6)在离心管中按照Iml的RNArose使用至少Iml 75%乙醇的比例加入75%乙醇来回颠倒离心管混勻片刻后，4°C，7500g离心5min，小心弃上清。(7)室温静置IOmin使RNA沉淀恰好干燥，加入201，tl DEPC处理的双蒸水溶解 RNA，取1 μ 1用于样品纯度和浓度測定。2) RNA样品浓度及纯度測定
取上述溶解的样品加入IOmM的Tris (ΡΗ7. 5)，用紫外分光光度仪测定浓度及纯度。RNA 浓度(UgAil)=OD26tlX 100X40 / 1000。RNA 纯度根据 OD26tl / OD28tl 进行判定。本实验 RNA 样品OD260 / OD280均在1. 80以上，符合实验要求。3)逆转录(RT)合成 cDNA
(1)在经DEPC水处理的微量离心管中建立如下逆转录反应体系
MgCl22ul
10XRT BufferIul
dNTP MixtureIul
RNase Inhibitor0. 25ul
AMV Reverse Transcriptase0. 5ul
Random 9 mers0. 5ul 实验样品总RNARNase Free dH90
补足总体积IOul
(2)在混勻器上充分混勻
(3)按照以下条件在PCR仪上进行逆转录反应
30 0C 42 0C 99 0C 5 0C
IOmin 30min 5min
5min 一个循环后，20°C保存。 4)聚合酶链反应(PCR)
按下列參数加样10 μ ι体系，每个PCR扩增体系如下
cDNA模板
上游引物(lumol/μ 1) 下游引物(lumol/μ 1) Sub green mix
2μ 1 0. 1 μ 1 0. 1 μ 1
加灭菌双蒸馏水至体积10 μ 1，将加好样的PCR管置Applied Biosystems9700反应，程序如下50°C 2mins,95°C 2mins,60°C 30s (40 个循环)。以 GAPDH 作为校正。三、实验结果
请參照图3，图3是基因在mRNA水平的表达情况示意图，Lenti-vector为转染慢病毒空载组，Ienti-SNCG为过表达SNCG组，sh-RNA为转染空载干扰RNA组，shRNA-SNCG为干扰 SNCG基因组。该图横坐标为基因名称，纵坐标为该基因与GAPDH表达量的比值，反应基因在 mRNA水平的表达高低情況，不同颜色的柱状图代表不同的处理組。图3反应如下信息
1.与对照组相比，Ienti-SNCG组的SNCG基因表达量显著升高，shRNA-SNCG组表达量发生显著降低，表明SNCG过表达或者被抑制的两个模型在mRNA水平验证成功。2.与对照组相比，在SNCG过表达的情况下，ER基因的mRNA表达量增高；在SNCG 被抑制情况下，ER基因的mRNA表达量降低；即在mRNA水平，SNCG基因表达量的高低直接影响ER基因的表达量，并且是正相关，即SNCG的高表达会诱发ER的高表达，SNCG的低表达同样会导致ER的低表达；而SNCG对BCRP基因的表达量几乎没有影响。实施例6 western blot方法检测SNCG以及ER、BCRP的表达的影响一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤
1)装配好灌胶用的模具，配置10%分离胶10ml，小心将凝胶溶液用吸管缓慢加入模具内。在分离胶溶液上覆盖ー层ddH20，可消除气泡并使凝胶表面变得平整。2)等待30-60min，使凝胶聚合，吸尽分离胶上的溶液，配置5%的积层胶細1，将积层胶用吸管加至分离胶上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端，将梳子插入凝胶内，确保梳齿的末端没有气泡。3)等待30min待凝胶聚合后，小心拔出梳子。将凝胶放入电泳槽内，将电泳缓冲液加入内外电泳槽中，使凝胶上下端均浸泡在缓冲液中。4)取蛋白样品加至样品孔中，接好电极，以100V电压进行电泳2小吋，电泳结束后取出凝胶
5)打开转移盒，用转移缓冲液将海绵垫完全浸透，海绵上放置一张浸湿的滤纸，小心将凝胶放置于滤纸上，再将硝酸纤维素膜放在胶面上，膜上再放一张浸湿的滤纸，用一干净小试管滚过以消除所有气泡，将另ー块海绵浸湿后放在凝胶膜上，关上转移盒插入转移池。在转移池中注满转移缓冲液。连接好电极，恒压100V转移1.5小吋。6)免疫检测将膜放入8ml封闭液中，室温轻摇1小时，弃去封闭液；加入1:200 稀释的抗体，温和摇动，4°C孵育过夜；弃去ー杭，用TBS洗膜10minX4次；弃去TBS，加入 1:1000稀释的HRP标记的ニ抗，室温温和摇动1小时；弃去ニ抗，用TBS洗膜IOminX4次； 弃去TBS，用吸水纸将膜吸干，加入荧光底物，吸干膜上的水分，曝光，显影定影。三、实验结果
请參照图4，图4是western blot对蛋白的检测示意图，本试验通过western blot技术针对蛋白水平的检测，条带亮度越高，表明该蛋白表达量越高。图4中结果表明
1.与对照组相比，Ienti-SNCG组的SNCG蛋白表达量显著升高，shRNA-SNCG组的SNCG 蛋白表达量发生显著降低，各组蛋白上样以actin蛋白校正，表明在蛋白水平SNCG过表达或者被抑制试验成功。2. SNCG过表达的情况下，与对照组相比，ER蛋白的表达量增高；SNCG被抑制情况下，与对照组相比，ER蛋白的表达量降低；即在蛋白水平，SNCG蛋白表达量的高低直接影响 ER蛋白的表达量，并且是正相关，即SNCG蛋白表达升高的情况下，ER蛋白表达也会升高，反之亦然。而对BCRP基因的表达量几乎没有影响。这些结果与实施例5中mRNA水平结果ー致。实施例7 Transwell迁移侵袭实验检测SNCG对细胞的侵袭增殖促进作用一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤
DTranswell小室制备=Chemicon公司的ECM550系列说明书要求，将小室放入培养板中，在上室加入300μ1预温的无血清培养基，室温下静置15-30min，使基质胶再水化，再吸去剰余培养液。2)消化細胞，终止消化后离心弃去培养液，用PBS洗1-2遍，用含BSA的无血清培养基重悬。调整細胞密度至5X105。3)取细胞悬液100_200μ1加入Transwell小室，常规培养48h。4)用棉签擦去基质胶和上室内的細胞，0. 1%结晶紫染色，染色后可以用33%醋酸脱色，使用的是Leica DC 300F正置显微镜进行观察和拍照，把Transwel 1小室反过来底朝上就可清楚看到小室底膜上下室侧附着的細胞。随机选取16个视野，使用的显微镜所看到的视野的直径刚好是Chemicon公司的ECM550系列小室底面膜的直径的1/4。三、实验结果
Transwell拍照结果如图5所示，Transwell统计结果如图6所示。Transwell拍照结果中，见到的紫色細胞越多，表明細胞的侵袭カ越強，其具体的細胞数见统计结果柱状图。综合二者，可以看出
和对照组(lenti-vector)相比，SNCG过表达组侵袭細胞数明显增多；和对照组 (shRNA)相比，SNCG被抑制组侵袭細胞数明显减少；表明SNCG基因高表达的細胞具有更强的細胞侵袭能力，SNCG低表达的细胞则细胞侵袭能力降低。
实施例8建立荷瘤鼠模型和分组一、实验材料(參见实施例1)
ニ、实验步骤
在接种细胞前2周，肌注2 mg雌ニ醇，将12只裸鼠随机分为3组(1) T47D組，收集对数生长期的T47D細胞5 X IO7个，接种于裸鼠皮下，之后每周肌注2 mg雌二醇；(2) 对照組，注射等体积注射用水；(3) lv-SNCG-T47D組，注射转染Iv-SNCG的T47D細胞；(4) shRNA-SNCG-T47D 组，注射转染 shRNA_SNCG 的 T47D 細胞。30 d后处死裸鼠，分离瘤体后測量直径，计算肿瘤体积，VW-I / 2ab (a为最大长径，b为横径)。Western blot检测ER、BCRP、P53、C_ERB2的表达情况(方法同上)。结果见表1。表 权利要求
1.ー种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，其特征在干，所述的SNCG基因通过调节雌激素受体活性状态而影响乳腺癌的激素治疗。
2.根据权利要求1所述的SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，其特征在干，所述的SNCG基因通过调节抗雌激素治疗敏感性影响乳腺癌的激素治疗。
3.根据权利要求1所述的SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，其特征在干，所述的SNCG基因在制备诊断乳腺癌的产品中的应用。
4.根据权利要求1所述的SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，其特征在干，所述的诊断乳腺癌的产品包括用RT-PCR、定时定量PCR或免疫检测诊断乳腺癌的产
全文摘要
本发明涉及一种SNCG基因在乳腺癌的诊断和激素治疗中的应用，所述的SNCG基因通过调节ER活性状态而影响乳腺癌的激素治疗。所述的SNCG基因在制备诊断乳腺癌的产品中的应用。本发明优点在于SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用，开创了乳腺癌激素治疗的新思路；SNCG基因表达调节对ER和激素治疗敏感性的作用，提高了开发治疗乳腺癌的新药的可能性；SNCG基因可作为诊断乳腺癌的特异标志基因，使乳腺癌诊断更加准确、快速。
文档编号G01N33/574GK102586407SQ20111000512
公开日2012年7月18日 申请日期2011年1月12日 优先权日2011年1月12日
发明者吴克瑾, 林清, 王永坤, 翁子毅, 陆云姝 申请人:上海交通大学医学院附属新华医院