专利名称：一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及氮的分析测定技术领域，尤其涉及一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法。
背景技术：
氮是植物生长发育不可缺少的营养元素，被称为生命元素，氮素代谢在植物的新陈代谢中占主导地位。植物中的氮可分为蛋白质氮和非蛋白质氮，蛋白质氮是植物正在利用的氮含量；非蛋白质氮主要包括氨基酸、生物碱、硝酸盐、亚硝酸盐和氨盐等，是一种储藏形式的氮；总氮则代表植物总的氮元素的吸收情况。植物中氮的含量随着其生理状况及环境条件的不同而发生变化，所以测定其中不同形式氮的含量对研究植物的氮素吸收、运输和代谢规律，了解植物的生长状况，以及确定植物制品的品质、营养价值等都具有重要的意义；对于植物制品，测定其中非蛋白质氮含量还有助于确定其中蛋白质氮的真实含量，有利于对其品质进行评价。对于氮含量的测定，通常采用的方法是将样品中的含氮化合物消解，得到硝酸盐， 然后将得到的硝酸盐还原为亚硝酸盐，利用亚硝酸盐与磺胺和N-萘基乙二胺盐酸盐显色的性质，采用分光光度法对其进行测定。如邹琳等采用流动注射分析仪测定了水中的总氮和总磷的含量(邹琳，周圣东，陈卫.高压消解\流动注射光度法同时测定水中总氮与总磷.中国给水排水，2009，25 (22) 93 97.)，其过程为在110°C下，将水样经过碱性过硫酸钾和硫酸两次消解，得到的消解产物分别进入流动注射分析仪中的总氮、总磷分析系统， 得到水样中总氮、总磷的含量。在总氮分析系统中，消解产物通过一个镀铜的镉圈后，硝酸根被定量还原为亚硝酸根，在酸性条件下，亚硝酸根与磺胺和N-萘基乙二胺盐酸盐在45°C 恒温条件下反应生成紫红色物质，其最佳吸收波长为550nm，采用分光光度法对得到的紫红色物质进行测定，得到水中的总氮含量。高压消解对非蛋白质氮中的无机氮消解效果较好，但是对于植物碱、氨基酸类的非蛋白质氮，如烟碱、茶碱、亮氨酸等来说，由于其结构较为复杂，采用高压消解时存在消解不完全、不彻底的现象，从而造成对非蛋白质氮测定的回收率低，得到的测量结果不准确。 尤其对于植物及植物制品来说，其大部分非蛋白质氮属于植物碱或氨基酸类，而且植物及植物制品中还含有还原性成分，如糖类，这些还原性成分会与氧化剂反应，从而影响对含氮组分的消解，造成其消解不完全和不彻底，采用上述方法对其中的非蛋白质氮含量进行测定时，得到的消解产物不够完全和彻底，导致测定结果不准确。
发明内容
本发明的目的在于提供一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，本发明提供的方法对非蛋白质氮的测定具有较高的回收率，得到的植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定结果准确。本发明提供一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，包括以下步骤
a)分离植物及植物制品中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样；b)在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液；c)将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热，得到消解产物；d)检测所述消解产物，得到紫外光谱数据；e)根据所述紫外光谱数据和预定的标准曲线，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。优选的，所述紫外催化为在非硫酸酸性环境中进行紫外催化。优选的，所述紫外催化的温度为90°C 110°C。优选的，所述高温加热的温度为95°C 150°C。优选的，所述高温加热为加压高温加热。优选的，所述加压高温加热的压力为5Psi 8Psi。优选的，所述步骤b)中的加热温度为90°C 110°C。优选的，所述步骤a)具体为向植物及植物制品中加入蛋白质变性试剂，加热得到的混合物，分离后得到含有非蛋白质氮的待测试样。优选的，所述蛋白质变性试剂为有机酸。优选的，所述步骤b)前还包括向所述待测试样中加入过氧化氢，除去所述待测试样中的还原性组分；和/或向所述待测试样中加入活性炭，除去所述待测试样中的无机色素；和/或向所述待测试样中加入乙二胺四乙酸二钠，除去所述待测试样中的金属离子。本发明提供的植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，包括以下步骤分离植物及植物制品中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样；在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液；将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热， 得到消解产物；检测所述消解产物，得到紫外光谱数据；根据所述紫外光谱数据和预定的标准曲线，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。在本发明中，过硫酸钾在加热条件下产生活性氧原子
，对植物及植物制品进行初步消解；然后在紫外催化条件下，部分活性氧原子
与水反应生成自由基，该自由基使样品中的非蛋白质氮组分进一步消解；接着， 高温条件下，活性氧原子
对植物及植物制品中的非蛋白质氮的组分进行更进一步的消解，最终使各类非蛋白质氮组分消解完全。本发明提供的方法具有良好的消解效果，在将待测试样中的非蛋白质氮组分完全和彻底消解的同时，将其中的还原性组分消解，使其失去还原作用，减少对非蛋白质氮组分消解的干扰，从而提高得到的消解结果的均一性，提高对非蛋白质氮测定的回收率，提高测定结果的准确性。另外，本发明提供的测定方法具有良好的稳定性和重复性。实验结果表明，本发明提供的方法对植物及植物制品中非蛋白质氮组分之一的烟碱检测的回收率为98. 76 % 100. 9 %，茶碱的回收率达到100. 8 %，亮氨酸的回收率为 99.0% ；采用本发明提供的方法测定了烟草中的非蛋白质氮含量，得到了准确的结果。另外，本发明提供的方法采用连续消解的方式，操作简单、省时，步骤简便，且消解条件温和， 本发明提供的方法批量处理样品能力较强，处理周期较短，大大提高了检测效率。
图1为本发明实施例1得到的紫外光谱图；图2为本发明实施例1得到的非线性二级标准曲线；图3为本发明实施例1得到的线性标准曲线。
具体实施例方式本发明提供了一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，包括以下步骤a)分离植物及植物制品中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样；b)在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液；c)将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热，得到消解产物；d)检测所述消解产物，得到紫外光谱数据；e)根据所述紫外光谱数据和预定的标准曲线，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。为了便于对植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定，本发明优选对得到的植物及植物制品进行前处理，具体包括以下步骤将植物及植物制品烘干、粉碎，得到植物及植物制品粉末。所述烘干温度优选为 250C 40°C，更优选为280C 38°C，最优选为30°C 35°C，所述植物及植物制品粉末的粒度优选为60目 120目，更优选为65目 110目，最优选为80目 100目。得到植物及植物制品粉末后，获得所述植物及植物制品粉末的干重。所述植物及植物制品粉末的干重优选按照以下方法获得测定所述植物及植物制品粉末中的水分含量，用称量得到的植物及植物制品粉末的质量扣除得到的植物及植物制品粉末中的水分含量，得到所述植物及植物制品粉末的干重。本发明优选采用烘箱法测定所述植物及植物制品粉末中的水分含量，对所述烘箱法没有特殊限制。植物及植物制品粉末的质量根据测定结果的精确度而定，本发明中，测定结果的准确度优选为0. OOOlg 0. Olg,更优选为0. OOlg 0. Olgo得到植物及植物制品粉末的干重后，本发明分离所述植物及植物制品粉末中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样。本发明可以采用向植物及植物制品粉末中加入蛋白质变性试剂，加热得到的混合物，或紫外烘烤所述植物及植物制品粉末的方法，固化其中的蛋白质，分离固化后的蛋白质，得到含有非蛋白质氮的待测试样；本发明优选向植物及植物制品粉末中加入蛋白质变性试剂，将得到的混合物加热，分离固化后的蛋白质，得到含有非蛋白质氮的待测试样，所述蛋白质变性试剂优选为有机酸，更优选为醋酸水溶液；所述醋酸水溶液的体积分数优选为0. 1 % 5 %，更优选为0. 3 % 4 %，最优选为0. 5 % 3 % ；所述蛋白质变性试剂的体积与植物及植物制品粉末的质量比优选为25mL (0. 1 3)g，更优选为25mL (0. 3 1) g ；优选将得到的混合物加热至沸腾；所述加热时间优选为5分钟 50分钟，更优选为8分钟 40分钟，最优选为20分钟 30分钟。停止加热后，优选将得到的溶液趁热过滤，用所述蛋白质变性试剂优选淋洗1 次 10次，更优选为2次 8次，最优选为3 5次，合并每次得到的滤液，冷却后定容，得到含有非蛋白质氮的待测试样。为了减小植物及植物制品中还原性组分对其中非蛋白质氮含量测定的干扰，本发明在对所述待测试样进行消解前优选除去所述待测试样中的还原性组分。本发明中所述植物及植物制品中主要的还原组分为糖类化合物，优选当所述待测样品中总糖含量> 15% 时，更优选>20%时，优选向所述待测样品中加入过氧化氢，除去所述待测试样中的还原性组分。所述过氧化氢与待测样品中的糖进行氧化还原反应，糖中的醛基被过氧化氢氧化为羧基，失去还原作用，所述过氧化氢的质量浓度优选为3 % 50 %，更优选为10 % 30 %， 本发明对所述氧化还原反应中原料的配比，反应条件等没有特殊限制，为本领域技术人员熟知的糖与过氧化氢之间的氧化还原反应。为了减小杂质对非蛋白质氮测定的干扰，本发明在对所述待测试样进行消解前优选除去所述待测试样中的杂质，将得到的滤液定容，得到含有非蛋白质氮的待测试样，如所述待测样品中含有无机色素时，可以采用以下方法处理优选向所述滤液中加入活性炭，过滤得到的混合溶液，除去其中的无机色素；所述待测样品含有金属离子时，可以采用以下方法处理优选向所述滤液中加入乙二胺四乙酸二钠溶液，过滤得到的混合溶液，除去其中的金属离子，所述乙二胺四乙酸二钠溶液的浓度优选为0. lg/L 5g/L，更优选为0. 2g/L 3g/L，最优选为0. 8g/L 2g/L ；所述待测样品含有无机色素和金属离子时，可以先用上述方法除去无机色素再除去金属离子，也可以先用上述方法除去金属离子再除去无机色素。得到含有非蛋白质氮的待测试样后，本发明在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液。所述过硫酸钾在加热条件下释放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
会对待测试样中的非蛋白质氮化合物进行消解，得到消解产物。所述过硫酸钾与所述植物及植物制品干重的质量比优选为1 (1 20)，更优选为1 O 15)，最优选为1 (3 10)；所述过硫酸钾优选为过硫酸钾溶液，所述过硫酸钾溶液的摩尔浓度优选为 0. lmol/L lmol/L，更优选为 0. 15mol/L 0. 8mol/L,最优选为 0. 25mol/L 0. 5mol/ L ；所述加热温度优选为90°C 110°C，更优选为95°C 105°C。得到混合溶液后，本发明将所述混合溶液进行紫外催化，得到紫外催化的消解产物。在紫外催化过程中，上述得到的部分活性氧原子
在紫外催化的条件下与水反应， 优选在紫外灯照射条件下，生成自由基，所述自由基可对待测试样中的各类有机氮等还原性组分进行消解，得到紫外催化的消解产物。所述紫外催化优选在非硫酸酸性环境中进行紫外催化，更优选为在盐酸酸性环境中进行紫外催化；所述紫外催化的温度优选为90°C 110°c，更优选为 95°C 105 °C。得到紫外催化的消解产物后，本发明将所述紫外催化的消解产物继续进行高温加热，得到所述待测试样的消解产物。在高温加热过程中，上述得到的活性氧原子
在高温条件下对所述紫外催化的消解产物进行进一步地消解，得到所述待测样品的消解产物。所述高温加热的温度优选为95°C 150°C，更优选为100°C 140°C，最优选为110°C 130°C; 所述高温加热优选为加压高温加热，所述加压高温加热的压力优选为5Psi 8Psi，更优选为 5. 5Psi 7. 5Psi。得到所述待测试样的消解产物后，检测所述消解产物，本发明优选采用紫外分光光度法检测所述消解产物，得到所述消解产物的紫外光谱数据。首先将得到的消解产物还原，得到亚硝酸盐，然后将所述亚硝酸盐优选与磺胺和Ν-α-萘基)乙二胺二盐酸盐反应，得到紫红色产物，采用紫外分光光度法测定得到的紫红色产物，得到所述消解产物的紫外光谱数据。优选用镉将得到的消解产物还原，得到亚硝酸盐；所述磺胺的浓度优选为Ig/ L 50g/L，更优选为10g/L 40g/L，最优选为20g/L 30g/L ；所述N-萘基乙二胺盐酸盐的浓度优选为0. lg/L 10g/L,更优选为0. 5g/L 8g/L，最优选为lg/L 5g/L ；所述测定波长优选为520nm 560nm，更优选为530nm 550nm，最优选为5;35nm M5nm。根据上述技术方案得到的紫外光谱数据和预定的标准曲线，即可得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。在本发明中，所述标准曲线优选按照以下方法获得配制系列浓度的标准溶液；在加热条件下，向所述标准溶液中加入过硫酸钾，得到混合溶液；将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热，得到消解产物；检测所述消解产物，得到系列浓度标准溶液的紫外光谱数据；根据所述紫外光谱数据及系列浓度绘制得到标准曲线。本发明中所述标准溶液优选为硝酸钠水溶液，采用国家标准物质研究中心的硝酸盐氮标准，配制系列浓度的标准溶液。首先，配制标准物质的储备液，将得到的储备液稀释至标准溶液的浓度。所述标准溶液的质量浓度优选为0.001% 10%，更优选为0. 01% 5%，最优选为0. ；优选用醋酸溶液将标准物质储备液稀释到标准溶液的浓度，所述醋酸溶液的体积分数优选为0. 1 % 10 %，更优选为0. 25 % 8 %，最优选为0. 5 % 5%。得到系列浓度的标准溶液后，本发明在加热条件下，向所述标准溶液中加入过硫酸钾，得到混合溶液。所述过硫酸钾在加热条件下释放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
会对所述标准溶液进行消解，得到消解产物。所述过硫酸钾与所述标准溶液中标准物质的质量比优选为1 (1 20)，更优选为1 O 15)，最优选为1 (3 10);所述过硫酸钾优选为过硫酸钾溶液，所述过硫酸钾溶液的摩尔浓度优选为0. lmol/L lmol/ L，更优选为0. 15mol/L 0. 8mol/L，最优选为0. 25mol/L 0. 5mol/L ；所述加热温度优选为90°C 110°C，更优选为95°C 105°C。得到混合溶液后，将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热，得到消解产物。 所述紫外催化和高温加热过程与上述技术方案中的紫外催化和高温加热过程相同。按照上述技术方案中的紫外催化和高温加热过程，得到消解产物后，检测所述消解产物，得到系列浓度标准溶液的紫外光谱数据。所述检测过程与上述技术方案中的检测过程相同。根据上述技术方案中的检测过程，得到系列浓度标准溶液的紫外光谱数据后，根据所述紫外光谱数据及其对应的浓度绘制标准曲线。所述标准曲线优选为非线性二级标准曲线或线性标准曲线。根据上述技术方案得到的植物及植物制品消解产物的紫外光谱数据和标准曲线， 经过计算即可得到植物及植物制品中非蛋白质氮的质量，再将所述非蛋白质氮的质量除以上述植物及植物制品的干重，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。本发明中，对植物及植物制品含有的非蛋白质氮化合物中的烟碱、茶碱和亮氨酸进行了测定，测定了烟草中非蛋白质氮含量，均得到了准确的结果。
烟碱，俗称尼古丁，是一种存在于茄科植物中的生物碱，具有式(I)结构 茶碱是氮杂环类化合物，为植物及植物制品中植物碱的一种，具有式(II)结构亮氨酸可用来配制植物生长促进剂，是植物及植物制品中重要的非蛋白质氮化合物之一，具有式(III)结构本发明提供的植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，过硫酸钾释放出的活性氧原子
首先对植物及植物制品进行初步消解，然后依次在紫外催化和高温加热条件下对植物及植物制品进行进一步的消解，最终使植物及植物制品中的非蛋白质氮化合物得到相对完全、彻底的消解，而且消除了其中还原性组分对消解产物的影响，具有良好的消解效果，得到的消解产物具有良好的均一性，本发明提供的方法对植物及植物制品中非蛋白质氮测定的回收率高，结果准确。实验结果表明，本发明提供的方法对植物及植物制品中非蛋白质氮化合物烟碱测定的回收率为98. 76% 100. 9%，茶碱的回收率达到100. 8%， 亮氨酸的回收率达到99.0%。采用本发明提供的方法测定了烟草中的非蛋白质氮的含量， 结果准确。另外，本发明提供的方法具有良好的稳定性和重复性。为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的植物及植物制品中非蛋白质氮含量测定方法进行详细描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。实施例1将Ilg硝酸钠溶解于IOOmL蒸馏水中，得到质量浓度为10. 0 %的硝酸钠储备液。 准确移取1. OmL,2. OmL,4. OmL,6. OmL,8. OmLUO. OmL所述标准储备液，用体积分数为0. 5% 的醋酸溶液分别定容到lOOmL，得到系列浓度的硝酸钠标准待测溶液。分别取所述标准待测溶液2mL，倾入连续流动分析仪样品管中分别平行测定三次。在连续流动分析仪中，样品进样量为0. lmL/min，进样时间为100s，冲洗时间为120s。首先在90°C下，向所述标准待测溶液中加入2mL摩尔浓度为0. 3mol/L的过硫酸钾溶液，过硫酸钾溶液的进样量为0. 8mL/min, 然后得到的混合溶液在90°C、盐酸提供的酸性条件下进行紫外灯照射:3min，接着在6Psi压力下高温加热得到的紫外催化的消解产物2. 5min，加热温度为110°C，得到样品的消解产物。得到的消解产物经过镉柱被还原为亚硝酸盐，进入检测器进行紫外分光光度法测定，检
(III )。测波长为MOnm，得到标准物质的紫外光谱图。标准物质的紫外光谱图如图1所示，图1为本发明实施例1得到的紫外光谱图，图中曲线上的信号叉从第五个开始紧接着的6个信号叉依次为系列浓度的标准溶液的电信号强度。根据得到的系列浓度的标准物质的紫外光谱图及其对应的浓度绘制得到标准曲线，如图2和图3所示，图2为本发明实施例1得到的非线性二级标准曲线，图3为本发明实施例1得到的线性标准曲线，图3所示的线性标准曲线的硝酸根浓度线性范围为0. 1%，线性方程为:A(吸光度)=-1076. 98+47750. 43C(% )，相关系数r为0.9981。由图中可以看出，本发明提供的方法对非蛋白质氮氮含量测定的电信号强度得到明显的提高，而且电信号强度与其浓度之间存在良好的线性关系，本发明提供的方法具有良好的效果。比较例1将Ilg硝酸钠溶解于IOOmL蒸馏水中，得到质量浓度为10. O %的硝酸钠储备液。 准确移取1. OmL,2. OmL,4. OmL,6. OmL,8. OmLUO. OmL所述标准储备液，用体积分数为0. 5% 的醋酸溶液分别定容到lOOmL，得到系列浓度的硝酸钠标准溶液。分别取得到的标准溶液 2mL，倾入连续流动分析仪样品管中分别平行测定三次。在连续流动分析仪中，样品进样量为0. lmL/min，进样时间为100s，冲洗时间为120s。首先在90°C下，向所述标准溶液中加入 2mL摩尔浓度为0. 3mol/L的过硫酸钾溶液，过硫酸钾溶液的进样量为0. SmL/min，然后在 6Psi压力高温加热得到的混合溶液2. 5min，加热温度为110°C，得到样品的消解产物。得到的消解产物经过镉柱被还原为亚硝酸盐，进入检测器进行紫外分光光度法检测，检测波长为MOnm，得到标准物质的紫外光谱图。根据得到的系列浓度的标准物质的紫外光谱图绘制得到标准曲线。实施例2 3将3. 2446g烟碱用蒸馏水溶解并定容至200mL，得到质量浓度为1. 60%的烟碱储备液。移取16. OmL,32. OmL所述烟碱储备液，用体积分数为0. 5 %的醋酸溶液定容到 lOOmL，得到烟碱待测溶液。移取2. OmL所述两种不同浓度的烟碱待测溶液，倾入流动分析仪样品管中分别平行测定三次。在连续流动分析仪中，样品进样量为0. lmL/min，进样时间为100s，冲洗时间为120s。首先在90°C下，向所述烟碱待测溶液中加入2mL摩尔浓度为 0. 3mol/L的过硫酸钾溶液，过硫酸钾溶液的进样量为0. SmL/min，然后得到的混合溶液在 90°C、盐酸提供的酸性条件下进行紫外灯照射3min，接着在6Psi压力下高温加热得到的紫外催化的消解产物2. 5min，加热温度为110°C，得到烟碱样品的消解产物。得到的消解产物经过镉柱被还原为亚硝酸盐，进入检测器进行紫外分光光度法检测，检测波长为540nm，得到烟碱的紫外光谱图。根据得到的烟碱的紫外光谱图和实施例1得到的标准曲线，得到烟碱的氮含量， 计算得到烟碱的平均质量分别为5. 113mg, 10. 448mg,对烟碱测定的回收率为98. 76 %、 100. 90%，结果如表1所示，表1为本发明实施例2 3与比较例2 3得到的测定结果。比较例2 3将3. 2446g烟碱用蒸馏水溶解并定容至200mL，得到质量浓度为1. 60%的烟碱储备液。准确移取16. OmL,32. OmL所述烟碱储备液，用体积分数为0. 5%的醋酸溶液定容到 IOOmL,得到烟碱待测溶液。移取2. OmL所述两种不同浓度的烟碱待测溶液，倾入连续流动分析仪样品管中分别平行测定三次。在连续流动分析仪中，样品进样量为0. lmL/min，进样时间为100s，冲洗时间为120s。首先在90°C下，向所述烟碱待测溶液中加入2mL摩尔浓度为0. 3mol/L的过硫酸钾溶液，过硫酸钾溶液的进样量为0. SmL/min，然后在6Psi压力下高温加热得到的混合溶液2. 5min，加热温度为110°C，得到样品的消解产物。得到的消解产物经过镉柱被还原为亚硝酸盐，进入检测器进行紫外分光光度法检测，检测波长为540nm，得到烟碱的紫外光谱图。根据得到的烟碱的紫外光谱图和比较例1得到的标准曲线，得到烟碱的氮含量， 计算得到烟碱的平均质量为3. 943mg,7. 18%ig，对烟碱测定的回收率为75. 95%,69. 19%, 结果如表1所示，表1为本发明实施例2 3与比较例2 3得到的测定结果。表1本发明实施例2 3与比较例2 3得到的测定结果
权利要求
1.一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，包括以下步骤a)分离植物及植物制品中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样；b)在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液；c)将所述混合溶液依次经过紫外催化和高温加热，得到消解产物；d)检测所述消解产物，得到紫外光谱数据；e)根据所述紫外光谱数据和预定的标准曲线，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述紫外催化为在非硫酸酸性环境中进行紫外催化。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述紫外催化的温度为90°C 110°C。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高温加热的温度为95°C 150°C。
5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述高温加热为加压高温加热。
6.根据权利要求5所述的测定方法，其特征在于，所述加压高温加热的压力为5Psi SI3Si。
7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤b)中的加热温度为90°C 110°C。
8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤a)具体为向植物及植物制品中加入蛋白质变性试剂，加热得到的混合物，分离后得到含有非蛋白质氮的待测试样。
9.根据权利要求8所述的测定方法，其特征在于，所述蛋白质变性试剂为有机酸。
10.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤b)前还包括 向所述待测试样中加入过氧化氢，除去所述待测试样中的还原性组分；和/或向所述待测试样中加入活性炭，除去所述待测试样中的无机色素； 和/或向所述待测试样中加入乙二胺四乙酸二钠，除去所述待测试样中的金属离子。
全文摘要
本发明提供一种植物及植物制品中非蛋白质氮含量的测定方法，包括以下步骤分离植物及植物制品中的蛋白质氮，得到含有非蛋白质氮的待测试样；在加热条件下，向所述待测试样中加入过硫酸钾，得到混合溶液；依次对所述混合溶液进行紫外催化和高温加热，得到消解产物；检测所述消解产物，得到紫外光谱数据；根据所述紫外光谱数据和预定的标准曲线，得到植物及植物制品中非蛋白质氮含量。本发明提供的方法具有良好的消解效果，在将待测试样中的非蛋白质氮组分完全消解的同时，将其中的还原性组分消解，使其失去还原作用，减少对非蛋白质氮组分消解的干扰，从而提高得到的消解结果的均一性，提高对非蛋白质氮测定的回收率，提高测定结果的准确性。
文档编号G01N21/33GK102519900SQ201110460000
公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者孔浩辉, 张心颖, 程志颖 申请人:广东中烟工业有限责任公司