专利名称：增生性疾病的治疗的制作方法
技术领域：
本发明涉及预防或治疗增生性疾病(增殖性疾病，proliferative disease)的方法。具体地，本发明涉及源自或可源自植物的组合物的应用(用途)，如植物防御素，尤其涉及其在预防或治疗增生性疾病如癌症的方法中的应用。本发明还涉及相关的应用、系统和试剂盒。相关申请的引用本申请要求2010年6月24日提交的美国临时专利申请号61/358，126的优先权，其全部内容在此引用作为参考。有关联邦政府资助研究的声明不适用
背景技术：
众所周知，无论是组成型还是诱导型，植物可产生多种化合物，以保护自身免受环境应力、损伤或微生物侵袭的伤害。
迄今已表征的大多数植物抗菌蛋白(抗微生物蛋白)具有相同的特征。它们一般为小的(〈lOkDa)、高碱性蛋白且通常包含偶数个半胱氨酸残基(通常为4、6或8)。这些半胱氨酸全部参与分子内的二硫键，并使蛋白质赋有结构和热力学稳定性(Broekaert etal. (1997))。根据氨基酸序列的同源性，主要参考半胱氨酸残基的数目和间距，对一些不同家族进行定义。它们包括植物防御素(Broekaert等，1995，1997 ；Lay等，2003a)、硫素(thionins) (Bohlmann, 1994)、脂质转移蛋白(Kader, 1996,1997)、橡胶蛋白(hevein)(Broekaert等，1992)和knottin类蛋白(Cammue等，1992),以及源自光壳澳大利亚坚果(Macadamia integrifolia) (Marcus 等，1997 ；McManus 等，1999)和凤仙花(Impatiensbalsamina) (Tailor等，1997 ;Patel等，1998)的抗菌蛋白(表I)。虽然不同的蛋白家族可能利用不同机制发挥作用，但所有的这些抗菌蛋白均在靶微生物质膜水平发挥活性(Broekaert等，1997)。环蛋白为一种小的、常见于菌草科(Rubiaceae)和堇菜科(Violaceae)家族(参考Craik等，1999，2004 ；Craik,2001)成员中的富含半胱氨酸的植物肽的新型家族。这些不寻常的环状肽(表I)具有多种生物活性，包括抗菌性(Tarn等，1999)、抗 HIV 性(Gustafson 等，1994)和杀虫(Jennings 等，2001)特性。表I植物中小的、富含半胱氨酸的抗菌蛋白
权利要求
1.一种用于预防或治疗增生性疾病的方法，其中，所述方法包括为受试者给予治疗有效量的 (a)茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的核酸； (c)包含所述核酸的载体； (d)包含所述载体的宿主细胞； Ce)由所述宿主细胞产生的表达产物；或 Cf)包含所述植物防御素、所述核酸、所述载体、所述宿主细胞或所述表达产物，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物； 由此预防或治疗所述增生性疾病。
2.根据权利要求1中所述的方法，其中，所述植物防御素源自或可源自花烟草(Nicotiana alata)、野生烟草(Nicotiana suaveolens)、矮牵牛(Petunia hybrida)或番爺(Solanum lycopersicum)。
3.根据权利要求1中所述的方法，其中，所述植物防御素选自包含NaDl、NsDUNsD2、PhDlA 和 TPP3 的组。
4.根据权利要求1中所述的方法，其中，所述植物防御素包含选自由SEQID NO: 1、SEQID NO:2, SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQID NO:8、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 12、SEQ IDNO:14、SEQ IDNO:16,SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22、SEQ IDN0:24 或 SEQ IDNO:26构成的组的氨基酸序列或其功能片段。
5.根据权利要求1中所述的方法，其中，所述植物防御素由选自由SEQIDNO:3,SEQ IDN0:5、SEQ ID N0:7、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 15、SEQ IDNO: 17、SEQ ID NO: 19、SEQ ID NO: 21、SEQ ID NO: 23、SEQ ID NO: 25 或 SEQ ID NO: 27 构成的组的核酸序列或其功能片段或补体、或与上述任一核酸序列具有70%同一性的功能核酸序列所编码。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，所述增生性疾病是癌症。
7.根据权利要求6中所述的方法，其中，所述癌症选自包括基底细胞癌、骨癌、肠癌、脑癌、乳腺癌、子宫颈癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或甲状腺癌的组。
8.以下各项在制备用于预防或治疗增生性疾病的药物中的应用 (a)茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的核酸； (c)包含所述核酸的载体； (d)包含所述载体的宿主细胞；或 Ce)由所述宿主细胞产生的表达产物。
9.根据权利要求8中所述的应用，其中，所述植物防御素源自或可源自花烟草、野生烟草、矮牵牛或番茄。
10.根据权利要求8中所述的应用，其中，所述植物防御素选自包含NaDl、NsDl、NsD2、PhDlA 和 TPP3 的组。
11.根据权利要求8中所述的应用，其中，所述植物防御素包含选自由SEQID NO: USEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQID NO:14、SEQ IDNO:16,SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22、SEQ IDN0:24 或 SEQID NO:26构成的组的氨基酸序列或其功能片段。
12.根据权利要求8中所述的应用，其中，所述植物防御素由选自由SEQIDNO:3, SEQID NO:5,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:15、或 SEQID NO:17,SEQ ID NO:19,SEQ ID N0:21、SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:25 或 SEQ ID NO:27 构成的组的核酸序列或其功能片段或补体、或与上述任一核酸序列具有70%同一性的功能核酸序列所编码。
13.根据权利要求8至12中任一项所述的应用，其中，所述增生性疾病是癌症。
14.根据权利要求13中所述的应用，其中，所述癌症选自包括基底细胞癌、骨癌、肠癌、脑癌、乳腺癌、子宫颈癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或甲状腺癌的组。
15.一种在用于预防或治疗增生性疾病时的试剂盒，其中，所述试剂盒包含治疗有效量的 (a)茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的核酸； (c)包含所述核酸的载体； (d)包含所述载体的宿主细胞； Ce)由所述宿主细胞产生的表达产物；或 Cf)包含所述植物防御素、所述核酸、所述载体、所述宿主细胞或所述表达产物，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
16.根据权利要求15中所述的试剂盒，其中，所述植物防御素源自或可源自花烟草、野生烟草、矮牵牛或番茄。
17.根据权利要求15中所述的试剂盒，其中，所述植物防御素选自包含NaDl、NsDUNsD2、PhDlA 和 TPP3 的组。
18.根据权利要求15中所述的试剂盒，其中，所述植物防御素包含选自由SEQIDNO:1、SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:6,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:26构成的组的氨基酸序列或其功能片段。
19.根据权利要求15中所述的试剂盒，其中，所述植物防御素由选自由SEQID N0:3、SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:9, SEQID NO: 11、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 15、或SEQ ID NO: 17,SEQ ID NO: 19,SEQ ID N0:21、SEQ ID NO:23,SEQ ID N0:25或SEQ ID NO:27构成的组的核酸序列或其功能片段或补体、或与上述任一核酸序列具有70%同一性的功能核酸序列所编码。
20.根据权利要求15至19中任一项所述的试剂盒，其中，所述增生性疾病是癌症。
21.根据权利要求20中所述的试剂盒，其中，所述癌症选自包括基底细胞癌、骨癌、肠癌、脑癌、乳腺癌、子宫颈癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或甲状腺癌的组。
22.权利要求15至21中任一项所述的试剂盒在预防或治疗增生性疾病中的应用，其中，将治疗有效量的 Ca)所述茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的所述核酸； (c)包含所述核酸的所述载体； Cd)包含所述载体的所述宿主细胞； Ce)由所述宿主细胞产生的所述表达产物；或 Cf)包含所述植物防御素、所述核酸、所述载体、所述宿主细胞或所述表达产物，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的所述药物组合物； 给予受试者，由此预防或治疗所述增生性疾病。
23.一种在用于预防或治疗增生性疾病时的药物组合物，其中，所述药物组合物包含 (a)茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的核酸； (c)包含所述核酸的载体； (d)包含所述载体的宿主细胞； Ce)由所述宿主细胞产生的表达产物； 以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
24.一种在用于预防或治疗增生性疾病时的茄科II类植物防御素。
25.一种用于筛选茄科II类植物防御素对哺乳动物肿瘤细胞的细胞毒性的方法，其中，所述方法包括使 (a)茄科II类植物防御素； (b)编码所述茄科II类植物防御素的核酸； (c)包含所述核酸的载体； (d)包含所述载体的宿主细胞；或 Ce)由所述宿主细胞产生的表达产物 与哺乳动物细胞系接触，并测定因与所述植物防御素接触而对所述哺乳动物细胞系的细胞毒性，由此筛选所述茄科II类植物防御素对哺乳动物肿瘤细胞的细胞毒性。
26.通过根据权利要求25中所述的方法筛选出的茄科II类植物防御素。
27.一种用于产生具有降低的溶血活性的茄科II类植物防御素的方法，其中，所述方法包括在所述防御素的N-末端处或N-末端附近向所述植物防御素引入至少一个丙氨酸残基。
28.通过根据权利要求27中所述的方法产生的具有降低的溶血活性的茄科II类植物防御素。
29.—种具有降低的溶血活性的茄科II类植物防御素，其基本上如本文中参照一个或多个实施例描述的。
全文摘要
本发明涉及用于预防或治疗增生性疾病的方法。具体地，本发明涉及源自或可源自植物的组合物的应用，如植物防御素，尤其涉及其在预防或治疗增生性疾病如癌症的方法中的应用。本发明还涉及相关的应用、系统和试剂盒。
文档编号G01N33/50GK103037888SQ201180031237
公开日2013年4月10日 申请日期2011年6月23日 优先权日2010年6月24日
发明者马克·达雷恩·休利特, 伊万·卡·霍·鹏, 玛里琳·安妮·安德森 申请人:巴尔莫勒尔澳大利亚私人有限公司, 赫希玛有限公司