专利名称：一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒及其检测方法
技术领域：
本发明涉及化学成分检测技术领域，尤其是环保水与废水检測、卫生标准中餐具洗涤剂检测技木，具体的说，是ー种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒及其检测方法。
背景技术：
阴离子表面活性剂又称阴离子洗涤剂，主要指直链烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠类物质。洗涤剂的污染会造成水面产生不易消失的泡沫，并消耗水中的溶解氧。目前，阴离子表面活性剂常用亚甲蓝分光光度法(GB/T5750. 4-2006，GB7494-87)进行測定，也有使用盐酸副玫瑰苯胺、碱性品红、孔雀绿等其他染料作为显色剂的文献报道，但是现有方法測定低浓度样品一般都需经过氯仿等有机溶剂萃取，萃取剂对于操作人员及环境有一定危害。
此外，申请公布号CN102353668A的阴离子表面活性剂方法虽然对原方法进行了一定的改进，但是震荡时间对于结果的影响挺大；最終的测试步骤仍需要将氯仿层溶液放入比色皿中进行比色，没有从根本上解决操作人员与有毒萃取剂的接触问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述技术现状，而提供能避免操作人员与萃取齐U的直接接触，同时增加测试速度、环保无污染的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒及其检测方法。本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为
一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其中，包括阴离子专用试剂预制管、洗涤液、破乳棒、试管静置架及移液器，阴离子专用试剂预制管中预设置有相应比例的氯仿及亚甲蓝显色剂，且由氯仿形成的氯仿层高度至少高于光度计检测ロ高度I毫米；所述的亚甲蓝显色剂形成有水封层，所述的水封层位于氯仿层上。为优化上述技术方案，采取的具体措施还包括
上述的阴离子表面活性剂快速检测试剂盒包括有空白对照管、阳性对照管、定位夹与环保密封袋。上述的移液器为巴氏吸管。上述的阴离子专用试剂预制管为ー种具防止漏液的垫片且与分光光度计孔径相适应的带盖圆底螺ロ试管。上述的试管静置架为与阴离子专用试剂预制管相适应孔径的多孔试管架；破乳棒为竹签；环保密封袋为双面八丝自封袋。ー种利用阴离子表面活性剂快速检测试剂盒检测阴离子表面活性剂的方法，包括以下步骤
步骤一、采集样品，将样品进行pH调节；
步骤ニ、将pH调节完成的水样稀释至适当浓度，然后取5毫升水样置于阴离子专用试剂预制管中；步骤三、将加入水样的阴离子专用试剂预制管在漩涡混匀仪上处理，使阴离子专用试剂预制管内产生漩涡，水相与氯仿相充分混匀；
步骤四、将充分混匀的阴离子专用试剂预制管静置I分钟；
步骤五、用移液器缓慢吸出阴离子专用试剂预制管内适当体积的上层水相，井向阴离子专用试剂预制管内补充洗涤液，重复步骤三和步骤四；
步骤六、若阴离子专用试剂预制管内有乳化情况发生，使用破乳棒机械搅拌破乳；破乳后将破乳棒提离氯仿层，且破乳棒与氯仿层接触部分应留在上层水相中，防止氯仿暴露在 空气中挥发，使用定位夹对破乳棒进行固定，继续静置30秒；
步骤七、若阴离子专用试剂预制管内无乳化现象或经步骤四破乳，使用具相应比色槽的分光光度计，以空白对照管为对照，在652nm处测定吸光值；
步骤八、废物回收；将破乳棒于定位夹以上的部分折断，并移去定位夹，使破乳棒下部没入试管中，保证氯仿在整个操作过程中被完全隔离在水层之下，旋上螺ロ试管盖，将使用过的阴离子专用试剂预制管及移液器放入环保密封袋中封存并处理。上述的步骤ニ中水样稀释至O. 05毫克每升至2. 5毫克每升。上述的步骤三中阴离子专用试剂预制管在漩涡混匀仪上以2500转每分钟的速度处理30秒。上述的步骤四及步骤五中阴离子专用试剂预制管放置在试管静置架上静置。与现有技术相比，本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其中，包括阴离子专用试剂预制管、洗涤液、破乳棒、试管静置架及移液器，阴离子专用试剂预制管中预设置有相应比例的氯仿及亚甲蓝显色剂，且由氯仿形成的氯仿层高度至少高于光度计检测ロ高度I毫米；所述的亚甲蓝显色剂形成有水封层，所述的水封层位于氯仿层上。本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒的基本分析原理与国标方法一致，以保证数据的可比性与更广泛的应用价值。其检测原理为阳离子染料与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的离子对化合物，这类能与亚甲蓝作用的物质统称亚甲蓝活性物质(MBAS)。生成的显色物可被三氯甲烷(氯仿)萃取，其652nm下氯仿相吸光度与阴离子表面活性剂浓度成正比。阴离子专用试剂预制管中的氯仿与亚甲蓝显色剂会形成分层，氯仿层在下，亚甲蓝显色剂层在上，有效防止有毒氯仿的挥发，在整个操作过程中也不会将氯仿带出亚甲蓝显色剂层，保证操作人员与有毒萃取剂接触。在使用本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒检测阴离子表面活性剂时，采用漩涡混匀仪对阴离子专用试剂预制管进行混匀处理，漩涡混匀器萃取原理在高速离心力作用下，在试管中间产生漩涡，使分子间碰撞几率大幅度増加，下层的氯仿相与上层的含亚甲蓝活性物质的水相充分混匀后快速达到平衡。比现有技术中常用的手动混匀效率更高，更加科学。本发明減少了水样和试剂的取用量，同时将氯仿水封在亚甲蓝溶液之下，避免其挥发，同时采用测试管直接比色的方法，避免了操作人员与氯仿的接触。该方法具有准确、快速、方便、环保等特点，可广泛适用于地表水、废水及餐具中阴离子表面活性剂的检測。
图I是本发明的结构示意 图2是环保密封袋结构示意图；图3是破乳棒结构不意 图4是空白对照管结构不意 图5是阳性对照管结构示意 图6是阴离子专用试剂预制管结构示意 图7是移液器结构示意 图8是定位夹结构示意 图9是本发明的漩涡振荡法与现有技术中振荡法混匀效果对比 图10是洗漆液不意图。
具体实施例方式以下结合附图对本发明的实施例作进ー步详细描述。图I至图10所示为本发明的结构示意图。其中的附图标记为阴离子专用试剂预制管I、垫片11、破乳棒2、环保密封袋3、试管静置架4、移液器5、空白对照管6、阳性对照管7、定位夹8，洗涤液9。如图I至图10所示，本发明的
一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其中，包括阴离子专用试剂预制管I、破乳棒
2、试管静置架4、移液器5及洗涤液9，阴离子专用试剂预制管I中预设置有相应比例的氯仿及亚甲蓝显色剂，且由氯仿形成的氯仿层高度至少高于光度计检测ロ高度I毫米；所述的亚甲蓝显色剂形成有水封层，所述的水封层位于氯仿层上。该阴离子表面活性剂快速检测试剂盒包括有空白对照管6、阳性对照管7、定位夹8与环保密封袋3。移液器5为巴氏吸管。阴离子专用试剂预制管I为ー种具防止漏液的垫片11且与分光光度计孔径相适应的带盖圆底螺ロ试管。试管静置架4为与阴离子专用试剂预制管相适应孔径的多孔试管架；破乳棒2为竹签；环保密封袋3为双面八丝以上自封袋。ー种利用阴离子表面活性剂快速检测试剂盒检测阴离子表面活性剂的方法，包括以下步骤
步骤一、采集样品，将样品进行PH调节；
步骤ニ、将PH调节完成的水样稀释至适当浓度，然后取5毫升水样置于阴离子专用试剂预制管I中；
步骤三、将加入水样的阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上处理，使阴离子专用试剂预制管I内产生漩涡，水相与氯仿相充分混匀；
步骤四、将充分混匀的阴离子专用试剂预制管I静置I分钟；
步骤五、用移液器5缓慢吸出阴离子专用试剂预制管I内适当体积的上层水相，并向阴离子专用试剂预制管I内补充洗涤液9，重复步骤三和步骤四；
步骤六、若阴离子专用试剂预制管I内有乳化情况发生，使用破乳棒2机械搅拌破乳；破乳后将破乳棒2提离氯仿层，且破乳棒2与氯仿层接触部分应留在上层水相中，防止氯仿暴露在空气中挥发，使用定位夹8对破乳棒2进行固定，继续静置30秒；步骤七、若阴离子专用试剂预制管I内无乳化现象或经步骤四破乳，使用具相应比色槽的分光光度计，以空白对照管6为对照,在652nm处测定吸光值；
步骤八、废物回收；将破乳棒2于定位夹8以上的部分折断，并移去定位夹8，使破乳棒2下部没入试管中，保证氯仿在整个操作过程中被完全隔离在水层之下，旋上螺ロ试管盖，将使用过的阴离子专用试剂预制管I及移液器5放入环保密封袋3中封存并处理。步骤ニ中水样稀释至O. 05毫克每升至2. 5毫克每升。步骤三中阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上以2500转每分钟的速度处理30秒；步骤四及步骤六中阴离子专用试剂预制管I放置在试管静置架4上静置。步骤五明离子专用试剂预制管I中剰余水相至少保留I毫升。
本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒的基本分析原理与国标方法一致，以保证数据的可比性与更广泛的应用价值。其检测原理为阳离子染料与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的离子对化合物，这类能与亚甲蓝作用的物质统称亚甲蓝活性物质(MBAS)。生成的显色物可被三氯甲烷(氯仿)萃取，其652nm下氯仿相吸光度与阴离子表面活性剂浓度成正比。阴离子专用试剂预制管I中的氯仿与亚甲蓝显色剂会形成分层，氯仿层在下，亚甲蓝显色剂层在上，有效防止有毒氯仿的挥发，在整个操作过程中也不会将氯仿带出亚甲蓝显色剂层，保证操作人员与有毒萃取剂接触。在使用本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒检测阴离子表面活性剂时，采用漩涡混匀仪对阴离子专用试剂预制管进行混匀处理，漩涡混匀器萃取原理在高速离心力作用下，在试管中间产生漩涡，使分子间碰撞几率大幅度増加，下层的氯仿相与上层的含亚甲蓝活性物质的水相充分混匀后快速达到平衡。漩涡混匀萃取方法与申请公布号CN102353668A震荡方法相比，由于漩涡作用，极大地増加了氯仿相与上层水相接触面积，从而达到更快速充分萃取的目的，对比效果见图9。阴离子专用试剂预制管I :15ml外径16mm的圆底螺ロ试管(具垫片11，防止漏液)。试管内装有2ml氯仿、1.5ml亚甲蓝显色剂(两者比例可以根据需要进行调整，但氯仿层高度不应低于光度计检测ロ高度，一般设置检测ロ光斑上沿2mm以上；亚甲蓝按照国标方法进行配置)；本试剂盒采用螺ロ试管而不用平ロ试管是防止在运输过程中因试管颠倒而产生试剂泄漏问题。破乳棒2 :发生乳化现象时搅动，以破除乳化；一般使用在一定时间(以破乳时间20s计)内不与待测物质反应，且不吸附亚甲蓝活性物质(MBAS)的材料；其长度应高于试管长度20mm以上；为减少环境污染，材料应易折断；出于成本考虑，本试剂盒使用符合实验要求的竹签；
环保密封袋3 :用于回收测试完的试剂预制管以及其他实验过程中产生废物；使用八丝以上PE材料，保证一定的承重强度，本试剂盒使用双面八丝的14cmX20cm自封袋。空白对照管6 :试剂预制管中加入5ml去离子水配置而成。用作实验测试的空白对照，比色前按说明进行漩涡混匀与静止，稳定时间I个月以上；
阳性对照管7 :试剂预制管中加入5ml的lmg/L左右阴离子标准溶液配置而成，比色前按说明进行漩涡混匀与静止，稳定时间I个月以上。用于实验的质量控制或校正实验数据。试管静置架4 :用于预制管的陈列以及漩涡混匀后的静置分层步骤，孔径与试管外径相适应，本试剂盒使用16mm孔径的50孔试管架。
移液器5 :米用5ml巴氏吸管,精度O. Olml,用于样品移取,特别适用于现场操作(由于成本较低，可一次性使用，避免交叉污染)；实验室为提高精度，可以使用A级移液管。定位夹8 :用于在静置和比色时固定破乳棒2 ;可以用小的夹子，也可用回形针代替，其大小应与静置架相适应。洗涤液9 :用于去除实验液体中直链烷基苯磺酸钠以外的阴离子表面活性物质；使实验数据真实可靠。实验一标准曲线及标准样品测定 实验仪器与材料
DR2800便携式分光光度计 Wiggens旋涡混匀仪(TM-1F) 阴离子表面活性剂快速检测试剂盒
LAS 标准溶液(GBW(E)081639 1104，1000mg/L±2%)
LAS 标准样品(GSB07-1197-2000 204420，I. 35mg/L±0. 11)
实验步骤
(1)将LAS 标准溶液稀释成 Omg/L, O. 2mg/L, O. 4mg/L, O. 6mg/L, 0. 8mg/L, I. Omg/L,I. 5mg/L, 2. Omg/L, 2. 5mg/L, 3. Omg/L的标准系列溶液；并把LAS标准样品按要求配置成I. 35mg/L±0. 11 ；
(2)分别取5ml稀释完的LAS标准系列溶液置于阴离子专用试剂预制管I;同时取5ml配置完的LAS标准样品(GSB07-1197-2000 204420)置于阴离子专用试剂预制管1，并对标准样品做6次平行测试；
(3)将加入水样的阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上以2500r/min的速度处理30秒；
(4)静置一分钟，用巴氏吸管缓慢吸出阴离子专用试剂预制管I内5ml至5.5ml的上层水相，并至少留Iml作为水封层，同时向阴离子专用试剂预制管I内补充5ml洗涤液9，再将阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上以2500r/min的速度处理30秒；
(5)静置I分钟，使用具有16mm比色孔的DR2800便携式分光光度计，以空白(O浓度管)为对照，在652nm处测定吸光值。(6)废物回收；将破乳棒2于定位夹8以上的部分折断，并移去定位夹8，使破乳棒2下部没入试管中，保证氯仿在整个操作过程中被完全隔离在水层之下，旋上螺口试管盖，将使用过的阴离子专用试剂预制管I及巴氏吸管放入环保密封袋3中封存，交专门公司处理。标准曲线
表I阴离子表面活性剂标准曲线
序号|l |2 |3 |4 |5|6|7 |8 |9 IlO
LAS (mg/L)~0Γ00Γ2~ O. 4 O. 6 O. 8I. OI. 5 2. O ~5 3. O A-An |θ |θ. 162 |θ. 326 |θ. 507 |θ. 657 |θ. 777 |l. 137 |l. 549 |l. 881 |l. 946
由上表数据可知，当 LAS 浓度 Omg/L 至 2. 5mg/L 时 LAS= (A-A0-O. 0265)/0. 7508*n，
r=0. 9994对样品阴离子表面活性剂浓度进行计算(A为以空白为参照的氯仿相吸光度值；
LAS-阴离子洗漆剂浓度，mg/L ；n-稀释倍数)。当浓度超过2. 5mg/L,达到3. 0mg/L时,吸
光度明显回落，按上述曲线计算得LAS值为2. 56mg/L。所以，为增加结果的准确性，测试值最好落在0-2. 5mg/L范围内。标准样品测试
使用本试剂盒对LAS标准样品(GSB07-1197-2000 204420)进行6次测试，测试结果分别为 I. 24，I. 27，I. 25，I. 31，I. 28，I. 27mg/L。测试均值 I. 27mg/L,相对偏差 I. 9%。6 次测试值均在标准限值范围内，测试均值的相对误差为5. 9%。实验说明该方法的精密度和准确度均较高，能满足实验要求。 实验二 地表水和废水中阴离子洗涤剂的测定 实验仪器与材料
DR2800便携式分光光度计 Wiggens旋涡混匀仪(TM-1F)
阴离子表面活性剂快速检测试剂盒 某水库样品 某河道样品
某焊接设备厂样品(进水、出水)
某污水厂样品(进水、出水)
实验步骤
(1)样品采集后，按照GB7494-87要求进行pH调节(未经pH调节的水样，如果其组分中含有直链烷基苯磺酸钠以外的阴离子表面活性物质，可能造成结果偏差)；
(2)取5ml预处理完的水样(高浓度样品需预先稀释)置于阴离子专用试剂预制管I
中；
(3)将加入水样的阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上以2500r/min的速度处理30秒；
(4)静置一分钟，用巴氏吸管缓慢吸出阴离子专用试剂预制管I内5ml至5.5ml的上层水相，并至少留Iml作为水封层，同时向阴离子专用试剂预制管I内补充5ml洗涤液9，再将阴离子专用试剂预制管I在漩涡混匀仪上以2500r/min的速度处理30秒，静置I分钟，由于某焊接设备厂水样在漩涡混匀后有乳化情况发生，使用破乳棒2机械搅动破乳；破乳后将破乳棒2提离氯仿层(与氯仿层接触部分应留在上层水相中)，使用定位夹8对破乳棒进行固定，继续静置30秒左右。(5)对于无乳化现象或破乳后的阴离子专用试剂预制管1，使用具有16_比色孔的DR2800便携式分光光度计，以空白为对照，在652nm处测定吸光值。(6)使用实例一中得到的标准曲线LAS (mg/L) = (A-A0-O. 0265) /0. 7508*n对样品阴离子表面活性剂浓度进行计算(A为以空白为参照的氯仿相吸光度值；LAS(mg/L)-阴离子洗漆剂浓度，mg/L ；n-稀释倍数)
(7)废物回收；将破乳棒2于定位夹8以上的部分折断，并移去定位夹8，使破乳棒2下部没入试管中，保证氯仿在整个操作过程中被完全隔离在水层之下，旋上螺口试管盖，将使用过的阴离子专用试剂预制管I及移液器5放入环保密封袋3中封存，交专门公司处理。实验结果
使用本试剂盒对不同水样进行分析，其结果与国标方法测试结果比较如下
表2地表水和废水中阴离子表面活性剂测试比较
权利要求
1.一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其特征是包括阴离子专用试剂预制管(I)、破乳棒(2)、试管静置架(4)、移液器(5)及洗涤液(9)，所述的阴离子专用试剂预制管(1)中预设置有相应比例的氯仿及亚甲蓝显色剂，且由所述的氯仿形成的氯仿层高度至少高于光度计检测ロ高度I毫米；所述的亚甲蓝显色剂形成有水封层，所述的水封层位于氯仿层上。
2.根据权利要求I所述的ー种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其特征是该阴离子表面活性剂快速检测试剂盒包括有空白对照管出)、阳性对照管(7)、定位夹(8)与环保密封袋⑶。
3.根据权利要求2所述的ー种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其特征是所述的移液器(5)为巴氏吸管。
4.根据权利要求3所述的ー种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其特征是所述的阴离子专用试剂预制管(I)为ー种具防止漏液的垫片(11)且与分光光度计孔径相适应的带盖圆底螺ロ试管。
5.根据权利要求4所述的ー种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，其特征是所述的试管静置架(4)为与阴离子专用试剂预制管(I)相适应孔径的多孔试管架；所述的破乳棒(2)为竹签；所述的环保密封袋(3)为双面八丝以上自封袋。
6.ー种利用如权利要求I所述的阴离子表面活性剂快速检测试剂盒检测阴离子表面活性剂的方法，其特征是包括以下步骤 步骤一、采集样品，将样品进行PH调节； 步骤ニ、将PH调节完成的水样稀释至适当浓度，然后取5毫升水样置于阴离子专用试剂预制管⑴中； 步骤三、将加入水样的阴离子专用试剂预制管(I)在漩涡混匀仪上处理，使阴离子专用试剂预制管(I)内产生漩涡，水相与氯仿相充分混匀； 步骤四、将充分混匀的阴离子专用试剂预制管(I)静置I分钟； 步骤五、用移液器(5)缓慢吸出阴离子专用试剂预制管(I)内适当体积的上层水相，并向阴离子专用试剂预制管(I)内补充洗涤液(9)，重复步骤三和步骤四； 步骤六、若阴离子专用试剂预制管⑴内有乳化情况发生，使用破乳棒⑵机械搅拌破乳；破乳后将破乳棒(2)提离氯仿层，且破乳棒(2)与氯仿层接触部分应留在上层水相中，防止氯仿暴露在空气中挥发，使用定位夹(8)对破乳棒(2)进行固定，继续静置30秒； 步骤七、若阴离子专用试剂预制管(I)内无乳化现象或经步骤四破乳，使用具相应比色槽的分光光度计，以空白对照管(6)为对照，在652nm处测定吸光值； 步骤八、废物回收；将破乳棒(2)于定位夹(8)以上的部分折断，并移去定位夹(8)，使破乳棒(2)下部没入试管中，保证氯仿在整个操作过程中被完全隔离在水层之下，旋上螺ロ试管盖，将使用过的阴离子专用试剂预制管(I)及移液器(5)放入环保密封袋(3)中封存并处理。
7.根据权利要求6所述的ー种检测阴离子表面活性剂的方法，其特征是所述的步骤ニ中水样稀释至O. 05晕克姆升至2. 5晕克姆升。
8.根据权利要求6所述的ー种检测阴离子表面活性剂的方法，其特征是所述的步骤三中阴离子专用试剂预制管(I)在漩涡混匀仪上以2500转每分钟的速度处理30秒；所述的步骤四及步骤六中阴离子专用试剂预制管(I)放置在试管静置架(4)上静置。
9.根据权利要求6所述的ー种检测阴离子表面活性剂的方法，其特征是所述的步骤五明离子专用试剂预制管(I)中剰余水相至少保留I毫升。
全文摘要
本发明的一种阴离子表面活性剂快速检测试剂盒，包括阴离子专用试剂预制管、破乳棒、洗涤液、试管静置架及移液器，阴离子专用试剂预制管中预设置有相应比例的氯仿及亚甲蓝显色剂，且由氯仿形成的氯仿层高度至少高于光度计检测口高度1毫米。通过本发明的快速检测试剂盒及其检测方法能避免操作人员与萃取剂的直接接触，同时增加测试速度、环保无污染，可广泛适用于地表水、废水及餐具中阴离子表面活性剂的检测。
文档编号G01N21/31GK102692412SQ20121018924
公开日2012年9月26日 申请日期2012年6月11日 优先权日2012年6月11日
发明者卢珊青, 赵建平, 赵洋甬 申请人:宁波市环境监测中心