以生物样品中的氧及氢同位素诊断肾脏失调或肿瘤疾病的制作方法

专利名称：：以生物样品中的氧及氢同位素诊断肾脏失调或肿瘤疾病的制作方法
技术领域：
：本发明是关于肾脏疾病或肿瘤疾病的诊断。具体而言，本发明使用生物样品中的δH-2(δ2H)和/或δ0-18(δ18O)值作为肾脏疾病或肿瘤疾病的诊断基础。
背景技术：
：肾脏为位于脊椎动物腹腔的背侧的单个或成对的器官，其功能为维持适当的水及电解质平衡、调节酸碱浓度及过滤血中代谢废物并以尿液形式排出。因此，肾脏疾病的结果会导致生物整体不平衡。许多器官，如膀胱、肠、心脏、肺及前列腺依靠肾脏的能力滤出身体中的不需要的废物并维持整体平衡。肾脏是清洁血液的器官。肾动脉将血液自心脏带到肾脏，并通过数百万含有肾元的肾小球网络清洁血液。肾元滤出毒素、过量营养物及体液；剩余的经清洁及过滤的血液接着通过肾静脉回到血液循环中。滤出的物质流经肾小管调整盐份、水及废物，并排出至尿液。肾盂收集尿液；尿液从肾盂经输尿管流到膀胱；尿液排出膀胱并经尿道排出身体。肾脏疾病包括高血压、肾小球肾炎与囊肿。糖尿病影响身体调节血糖的能力，过量血糖会伤害肾脏肾元，降低血管过滤毒素的能力。高血压伤害肾元；而肾小球肾炎通常关于一类非肾脏感染的疾病。如两个肾由于疾病丧失功能，病患经验末期肾失调(endstagerenaldisease；ESRD)或肾衰竭。肾衰竭意指身体不再去除特定毒素且无法适当地调节血压及重要营养物。除非这些病患经过治疗，否则他们由于毒素及废液堆积在血液中而可能在数天内死亡。糖尿病性肾病，已知为糖尿病肾病变，是第I型糖尿病(TIDM)患加速发病并提早死亡。约25%至40%的TIDM病患会发展成糖尿病肾病变。糖尿病肾病变的最长期严重影响是肾衰竭导致末期肾脏病，一种永久及几乎完全失去肾功能的病况，仅有少于10%的肾基础功能。已知诊断肾脏疾病的传统方法牵涉特定蛋白质的检测。US7，141，382关于检测样品中介白素18(interleukin18)的方法，较佳为倾向如肾衰竭的个体的血清肌酸酐增加前。US7，935，495提供一种检测动物早期肾病的方法，包括下列步骤(a)得到欲检测样品及(b)测定样品中白蛋白的量。US7，833，872关于新颖且有用的生物标记，GR0-alpha(SP，CXCL1、趋化素(Chemokine)C-X-C配体1、GROUGROa,MGSA,MGSAalpha、MGSA-a、NAP-3、SCYB1)，针对急性肾伤害(即AKI)、肾缺血再灌注伤害(即IRI)、缺血性急性肾伤害和/或缺血性急性肾小管性肾炎。虽然已知许多测定尿液或血液样品中成份的诊断肾失调的方法，但此等方法的缺点是牵涉复杂的步骤以得到测定结果。此外，肿瘤或癌症病况持续为最普遍弓I起死亡的疾病的一种疾病。肿瘤发生随老化增加。肿瘤或癌症由持续多种基因突变引起，导致致癌基因活化和/或肿瘤抑制基因不活化。肿瘤或癌症成为全球致死率的主要原因。虽然诊断及治疗的进步，总存活率并未显著提升。仍有需要较准确和灵敏的诊断肿瘤或癌症的检测方法，特别是早期阶段的肿瘤或癌症。水是生命的基础，也是身体最重要且最丰富的物质，约占身体质量的70%。虽然注意到水的重要性，但水同位素的独特性通常被忽略。天然水含有微量的重同位素氢和氧原子，其中2H与18O是主要种类。1H对2H的比例约为6240比1，或在V_SM0W(ViennaStandardMeanOceanWater)水标准中为约155ppm,和16O对18O的比例约为499比I或约2005ppm。水同位素的独特特性与质谱技术的快速进展，各种生物样品中氢(sH)与氧(sO)的安定比例已在古食物、气象学、人类学、生态学和现代食物链网中作为”原子化石或追踪者”。安定的非放射活性的同位素水，2H2O,在人类生理和病理生理上扮演重要角色。数种使用动物和细胞培养研究已显示饮食水中2H2O的增加或缺乏在病理生理和生理上具有重要影响。例如，现有技术显示2H2O通过刺激微管蛋白次单元(tubulinsubunit)的聚合可促进微小管(microtubule)的形成，并导致细胞死亡。此外,2H2O含量增加在自发性高血压鼠可预防高血压。换言之，培养基中水的重氢(deuterium)缺乏降低动物细胞株的生长率。未治疗的链佐霉素诱导的糖尿病(streptozotocin-1nduceddiabetesmellitus)鼠的身体水中的氢(S2H)与氧(δ180)同位素比例与正常鼠显著不同。然而，没有任何现有技术揭示、教示或建议水同位素与肾脏疾病与肿瘤间的关系。
发明内容本发明惊讶地发现生物样品中deltaH-2(δ2H)和/或delta0-18(δ18O)的值与肾脏疾病或肿瘤疾病有关。因此，本发明发展比较得自假定具有肾脏疾病可能的个体与没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中deltaΗ-2(δ2H)和/或delta0-18(518O)的诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的方法。除非另有定义，本文中所有技术或科学用语具有本领域技术人员一般了解的意义。所有本文中提到的公开刊物、专利申请案、专利及其它参考数据均以其全文并入参考。此外，材料、方法及实施例仅做为说明，并非限制本发明。用语”检测(detecting)”或”诊断(diagnosing)”是鉴定具肾脏疾病或肿瘤疾病的病患或罹患肾脏疾病或肿瘤疾病风险的病患。用语”分析(assay)”指分析样品以测定样品中物质的存在和/或该物质的量。用语”降低量(decreasedamount)”指较预定量为低的量。用语”肾脏疾病(renaldisease)”指一个体的肾脏功能失调、受损、异常或功能障碍。用语”样品”指得自哺乳动物个体的体液或组织液样品。作为非限制性实例，用于本发明的体液或组织液样品可为尿液、血液、血清、血浆、唾液、淋巴液、脑脊髓液、囊性液(cysticfluid)、腹水、粪便、胆汁、组织液及任何其它的分离体液。用语”肿瘤”或”癌症”包括，但不限于，源自乳房、前列腺、大肠、肺、胰脏、肝、胃、膀胱或生殖器官(子宫颈、卵巢、子宫内膜等)、脑和骨髓的肿瘤或癌症、黑色素瘤或淋巴癌。本案引用的所有刊物与专利文件以其全部并入参考，其目的是如个别公开或专利文件指出的相同范围。文件中的各种参考数据的引用，申请人不承认任何特定文献为其发明的现有技术。在一方面，本发明提供一种在疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体诊断肾脏疾病或肿瘤疾病可能性的方法，包括测定疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的值，比较该测定的delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的参考值，基于该测定的delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的参考值的比较诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性；其中当疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的值低于没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18(δ18O)和/或deltaΗ-2(δ2H)的参考值时，则诊断为有肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性。所有哺乳动物个体可使用本发明方法测试。典型地，受测个体(或病患)罹患肾功能障碍(例如末期肾失调、肾病变、肾衰竭、高尿酸血症、糖尿病性肾病变、缺血性或毒物诱导的肾伤害、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球性肾炎、多囊性肾病或慢性肾盂肾炎)、或肿瘤(例如，赘瘤(neoplasm)、肿瘤(tumor)、癌瘤(carcinoma)、肉瘤(sarcoma)、腺瘤(adenoma)、骨髓白血病、肝细胞癌、肝母细胞瘤、横纹肌肉瘤、食管癌、甲状腺癌、神经节母细胞瘤、纤维肉瘤、黏液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨肉瘤、脊索癌、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤文氏瘤(ewing’ssarcoma)、平滑肌肉瘤、rhabdotheliosarcoma、大肠癌、胰脏癌、肝癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状·细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管肺癌、肾细胞癌、血肿、胆管癌、黑色素瘤、绒毛膜癌、精母细胞瘤、胚胎性癌、威尔姆氏肿瘤(Wilms’tumor)、子宫颈癌、睪丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神经胶质瘤、星状细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果腺瘤、血管母细胞瘤、视网膜母细胞肿瘤、白血病、急性成髓细胞性白血病、慢性白血病、真性红细胞增多症、淋巴瘤(何杰金氏症及非何杰金氏症)、多发性骨髓瘤、Waldenstrom氏巨蛋白血症(Waldenstrommacroglobulinemia)、直肠癌、头颈癌、脑癌、原发部位未明癌、周围神经系统癌、中枢神经系统癌、听神经瘤、少突胶质细胞瘤、脑膜瘤、神经母细胞瘤、重链病、癌转移、及以未控制或不正常细胞生长表征的任何疾病或病症组成的群组)。较佳地，哺乳动物个体为人类、猪、马、狗、绵羊、牛、山羊或猫。本发明惊讶地发现健康个体的水同位素存在生物平衡(biologicalhomeostasis)。健康个体中的水状态(δ18O与δ2H)与肾脏疾病或肿瘤疾病的体中的水状态显著不同。肾脏疾病或肿瘤疾病的体中的delta0-18和/或deltaH_2是降低的。样品中的delta0_18和/或deltaH_2的值作为比较用的参考值者是得自没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体(健康病患)。肾脏疾病或肿瘤疾病可藉由得自个体(如疑似罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体)的体液样品中delta0-18和/或deltaH-2的值降低而诊断。根据本发明的方法也适合于健康个体的例行分析，即实施年度分析以诊断非常早期阶段的肾脏疾病或肿瘤疾病。”控制组”参考值为得自健康状态的相同或其它个体的参考值。具体而言，同位素表不为关于国际V-SN0W(ViennaStandardMeanoceanWater)标准的δ-符号(％。)。根据本发明，没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18为-3°Λ至约-4.5°/,没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的deltaH-2为-30%至约-35°/。。。根据本发明，水同位素降低诊断为肾脏疾病或肿瘤疾病。也就是说，罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体中的delta0-18和/或deltaH-2的值低于没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体中的值。根据本发明，罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18值低于约-4.5%。、约-5.5%。、约-6.0%。、约-7.0%。、约-8.0%。、约-9.0%。、约-10.0%。、约-11.0%0、约-12.O%。、约-13.O%。、约-14.O%。、约-15.O%。、约-16.O%。、约-17.O%。、约_18.0%0、约-19.O%。、约-20.O%。、约-21.O%。、约-22.O%。、约-23.O%。、约-24.O%。、约-25.O%。、约-26.0%。、约-27.0%。、约-28.0%。、约-29.0%。或约-30.0%。。较佳地，delta0-18值约-4.5%。至约-30.O%。；较佳为-4.5%。至约-25.O%。、-4.5%。至约-22.O%。、-4.5%。至约-20.O%。、-4.5%。至约-18.O%。、-4.5%。至约-16.O%。、-4.5%。至约-14.O%。、-4.5%0至约-12.0%0、-4.5%。至约-10.0%;更佳为肾脏疾病为-5.0%。至约-16.0%。、-5.0%。至约-14.0%。、-5.0%。至约-12.0%。或更佳为肿瘤疾病为-5.0%。至约-25.0%。、-5.0%。至约-22.0%。、-5.0%。至约-20.0%。、-5.0%。至约-18.0%。、-5.0%。至约-16.0%。、-5.0%0至约-14.0%。、-5·0%。至约-12.0%。、-5·0%。至约-10.O0Z00o更佳地，delta0-18值为约-5.0%至约-28.0%。、-5.0%。至约-26.0%。、-5.0%。至约-25.0%。、-5.0%。至约-20.0%。、-5.0%0至约-18.0%。、-5.0%。至约-16.0%。、-5.0%。至约-14.0%。、-5.0%。至约-12.0%。或-5.0%0至约-10.0%0。根据本发明，罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的deltaH_2值低于约-35%。、约_36%。、约_37%。、约_38%。、约_39%。、约_40%。、约_42%。、约_44%。、约_48%。、约_50%。、约-55%。、约-60%。、约-65%。、约-70%。、约-75%。、约-80%。、约-85%。、约-90%。、约_95%0或约-100%。。较佳地，deltaH-2值为约-35%。至约-100%。、约_35%。至约-95%。、约_35%0至约-90%。、约-35%。至约-85%。、约-35%。至约-80%。、约-35%。至约-75%。、约-35%0至约-70%。、约-35%。至约-65%。、约-35%。至约-60%。、约-35%。至约-55%。、约-35%。至约-50%。、约-35%。至约-45%。、约-35%。至约-40%。、约-40%。至约-100%。、约-40%。至约-90%。、约_40%。至约-85%。、约_40%。至约-80%。、约_40至约-75%。、约_40%。至约_70%0或约-40%。至约-65%。。较佳地，肾脏疾病的deltaH-2值为约_40%。至约-80%。、约_40%0至约-75%。、约-40%。至约-80%。、约-40%。至约-75%。、约-40%。至约-70%。、约-40%。至约-65%。、约_40%。至约-60%。、约_40%。至约_55%。或约_40%。至约-50%。。较佳地，肿瘤疾病的deltaH-2值为约_45%。至约-100%。、约_45%。至约-95%。、约_45%。至约-90%。、约_45%0至约-85%。、约_45%。至约-80%。、约_45%。至约_70%。或约_45%。至约_60%0。根据本发明，生物样品为体液。较佳地，体液为尿液、血液、血清、血浆、唾液、淋巴液、脑脊髓液、囊性液(cysticfluid)、腹水、粪便、胆汁、组织液及任何其它的分离体液。任何已知得到作为同位素测定的水的方法均可用于本发明。根据本发明之一具体实施例，测定同位素的水是得自将体液样品置于含干燥剂的密闭容器使得样品中的水被干燥剂吸收以得到不含其它成份的纯水，并接着从含水(或水合)的干燥剂去除水分。较佳地，以蒸馏自含水(或水合)干燥剂去除水；较佳为真空蒸馏。根据本发明，干燥剂是选自硅胶(silicagel)、活性碳、硫酸|丐、氯化|丐、蒙脱黏土(montmoriIIoniteclay)和分子筛(molecularsieve)的群组。根据本发明的另一具体实施例，用于测定同位素的水是经逆渗透(reverseosmosis)得到。在另一方面，本发明是关于实施本发明的套组，该套组包括一包含生物样品的容器或预定充填该样品的容器，该生物样品得自可能罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体或罹患肾脏疾病或肿瘤疾病风险的个体，一测定生物样品中delta0-18和/或deltaH-2的装置，和一参考值装置，用于诊断肾脏疾病或肿瘤疾病。较佳地，该套组另包含含有干燥剂的容器。较佳地，该套组另包含自样品得到其中的水的装置；例如，含干燥剂的密闭容器及蒸馏装置或逆渗透装置。测定delta0-18和/或deltaH-2的装置可选自提供/定量delta0-18和/或deltaH-2的任何适合装置；例如，同位素质谱仪(Isotope-ratiomassspectrometry；IRMS)。用于诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的参考值的装置较佳选自得自含健康个体生·物样品的容器。本发明套组可进一步包含校正曲线、套组使用说明书或其组合。较佳包含适当的说明书(如书面形式)，提供关于诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的使用信息。本发明研究生物样品中氢(δ2H)和氧(δ18O)的安定同位素比例，观察到生物样品中(如血液、血浆)的S2H及δ18O与肾脏功能和肿瘤疾病有关。特别是，控制组个体及糖尿病组个体(没有肾功能障碍)血浆(bloodplasma)中的δ18O较晚期肾失调个体分别高87%及160%。健康肾组个体(即控制组个体及糖尿病组个体)血衆(bloodplasma)中的S2H较肾失调组个体分别高72%及92%。然而，在控制组个体和糖尿病组个体血浆中的水含量(S2H)及氧(δ18O)则没有差异。具体实施方式实魁虽然已参考特定实施例描述本发明，但熟习此项技术者应了解，在不悖离本发明的范畴的情况下可作出各种变化且可用等效物替代其组件以适于特定情况。提供以下实验性实例以展示及进一步说明本发明的某些实施例的各种形式且不应理解为限制其范畴。在以下实验性揭示内容中，使用下列材料及方法参与者.根据针对参与者的记录的生物化学参数及医生描述,将参与者分成三类对照个体(CS)、诊断为末期肾脏失调(ESRD)的患者及患有糖尿病但无可侦测的肾脏功能障碍(DB)的个体。所有DB个体皆处于糖尿病控制下。所有48名个体(5个CS、32个ESRD及5个DB)皆为居住在台北市的本地台湾人。其在取样日期之前至少三个月未远足。因此,可消除由食物及水的地理同位素组成而造成的同位素比变化(BowenGJ,WilkinsonB(2002)Spatialdistributionofdelta0-18inmeteoricprecipitation.Geology30:315-318;HobsonKA,AtwellL,WassenaarLI(1999)Influenceofdrinkingwateranddietonthestable-hydrogenisotoperatiosofanimaltissue,.ProcNatlAcadSciUSA96:8003-8006；BowenGJ,EhleringerJR,ChessonLA,ThompsonAH,PodlesakDW等人(2009)Dietaryandphysiologicalcontrolsonthehydrogenandoxygenisotoperatiosofhairfrommid_20thcenturyindigenouspopulations.AmJPhysAnthropol139:494-504;ChessonLA,PodlesakDff,ErkkilaBR,CerlingTE,EhleringerJR(2010)Isotopicconsequencesofconsumerfoodchoice:Hydrogenandoxygenstableisotoperatiosinfoodsfromfostfoodrestaurantsversussupermarkets.FoodChemistry119:1250-1256)。水样.将3ml人类血衆样品储存于15ml法尔康管(falcontube)中。随后将管置放于具有15gCaCl2颗粒(Sigma-Aldrich)的预干燥且抽真空的圆瓶烧瓶中。随后将圆瓶烧瓶封盖且小心地密封以确保空气中的水不会进入烧瓶中。在室温下保温烧瓶以使CaCl2自人类血浆样品中吸收水，持续七天。藉由真空蒸馏自水合0&(12获得水样(约2ml)(BuchiGlassOvenB-585,Kugelrohr)。测定人类血浆中的氢(δ2Η)及氧(δ180).如下进行水样中的氢(δ2Η)及氧(δ18O)之评估。通过熟知CO2-H2O平衡方法来分析稳定氧同位素组成(EpsteinS，MayedaT(1953)Variationof018contentofwatersfromnaturalsources.GeochimicaetCosmochimicaActa4:213-224;BrenninkmeijerCAM,MorrisonPD(1987)AnautomatedsystemforisotopicequilibrationofC02andH20for180analysisofwater.ChemicalGeology:1sotopeGeosciencesection66:21-26)。由VGSIRA10同位素比质谱仪量测平衡之CO2气体。在使用由印地安那大学(IndianaUniversity)生物地球化学实验室制造的锌珠将水还原成H2之后于VGMM602D同位素比质谱仪上测定氢同位素组成(ColemanML,ShepherdTJ,DurhamJJ,RouseJE,MooreGR(1982)Reductionofwaterwithzincforhydrogenisotopeanalysis.AnalyticalChemistry54:993-995)。所有同位素比结果以相对于国际V_SM0W(维也纳标准平均海洋水(ViennaStandardMeanOceanWater))标准之δ表示法(％。)报导且按SLAP(标准轻南极降水(StandardLightAntarcticPrecipitation))的δ18O及δ2H分别为-55.5%。及_428%ο的标度进行校正(GonfiantiniR(1978)Standardsforstableisotopemeasurementsinnaturalcompounds.Nature271:534-536)。针对实验室标准表示为Iσ的分析精确度分别优于1.3%ο(对于δ2H)及O.08%。(对于δ18O)。水样的双重复分析的平均差异分别为±1.5%ο(对于δ2H)及+0.11%。(对于δ18O)。数据分析·通过使用STASTISTICA8.O(StartSoft.1nc.，Tulsa,OK)进行ANOVA及史都登氏t检验(Student’st-test)。在MATLABR2011a(MathWorks.1nc.，Natick,MA)中进行k平均值丛聚，其将数据分配成四个丛集的预设集(preset)。量测欧几里德距离(Euclideandistance)以计算丛集的矩心,亦即彼丛集内数据点的平均值。进行总共10，000次重复丛聚过程，在各轮中给出初始丛集矩心位置的新集合。此程序传回四个丛集的最佳解答方案，其中各丛集的点-矩心距离的总和具有最低值。实例I使用本发明方法诊断肾脏失调量测来自42个人类血浆的水样的氢(δ2H)及氧(δ18O)的稳定同位素比。自以下四组参与者随机获得样品空腹对照个体(CS，η=5)、未经血液透析处理的空腹末期肾脏失调个体(ESRD_，n=5)、经血液透析处理的空腹末期肾脏失调个体(ESRDm，n=5)及空腹糖尿病个体(DB，n=5)。对照个体组(CS).如表I中所示，CS的δ2H及δ180的平均值为-4.76%。及-35.2%0。表1.对照个体的血浆的同位素值。权利要求1.一种在疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体诊断肾脏疾病或肿瘤疾病可能性的方法，包括测定疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中delta0-18(518O)和/或deltaΗ-2(δ2H)的值，比较该测定的delta0_18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18(518O)和/或deltaΗ_2(δ2H)的参考值，基于该测定的delta0-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与delta0-18(δ18O)和/或deltaΗ-2(δ2H)的参考值的比较诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性；其中当疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中delta0-18(518O)和/或deltaΗ_2(δ2H)的值低于没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18(δ18O)和/或deltaΗ-2(δ2H)的参考值时，则诊断为有肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性。2.如权利要求1所述的方法，其中得自没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的delta0-18(δ18O)参考值范围为-3.0%。至-4.5%0。3.如权利要求1所述的方法，其中得自没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的deltaΗ-2(δ2H)参考值范围为-30%。至-35%。。4.如权利要求1所述的方法，其中所述肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中delta0-18(δ18O)低于约_5%0。5.如权利要求1所述的方法，其中所述肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中deltaΗ-2(δ2H)低于约_40%0。6.如权利要求1所述的方法，其中所述生物样品为体液。7.如权利要求6所述的方法，其中所述体液为尿液、血液、血清、血浆、唾液、淋巴液、脑脊髓液、囊性液(cysticfluid)、腹水、粪便、胆汁或组织液。8.如权利要求6所述的方法，其中所述体液为血浆。9.如权利要求1所述的方法，其中所述生物样品的处理是将所述样品置于含干燥剂的密闭容器，并接着从含水(或水合)的干燥剂去除水分以得到用于测定delta0-18(518O)和/或deltaΗ-2(δ2H)的值的水，或所述生物样品经逆渗透处理得到所述水。10.如权利要求9所述的方法，其中自含水(或水合)干燥剂去除水是经蒸馏或真空蒸懼。11.如权利要求1所述的方法，其中所述肾脏疾病为末期肾失调、肾病变、肾衰竭、高尿酸血症、糖尿病性肾病变、缺血性或毒物诱导的肾伤害、慢性肾衰竭、急性肾衰竭、肾小球性肾炎、多囊性肾病或慢性肾盂肾炎。12.—种套组，其包括一包含生物样品的容器或预定充填所述样品的容器，所述生物样品得自可能罹患肾脏疾病或肿瘤疾病的个体或罹患肾脏疾病或肿瘤疾病风险的个体，一测定生物样品中delta0-18和/或deltaH-2的装置，和一参考值装置，用于诊断肾脏疾病或肿瘤疾病。13.如权利要求12所述的套组，其另包含含有干燥剂的容器。14.如权利要求12所述的套组，其中所述干燥剂是选自硅胶(silicagel)、活性碳、硫酸隹丐、氯化1丐、蒙脱黏土(montmoriIIoniteclay)和分子筛(molecularsieve)的群组。全文摘要本发明提供一种在疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体诊断肾脏疾病或肿瘤疾病可能性的方法，包括测定疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的值，比较该测定的deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的参考值，基于该测定的deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)值与deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的参考值的比较诊断肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性；其中当疑似肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的生物样品中deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的值低于没有肾脏疾病或肿瘤疾病的个体的deltaO-18(δ18O)和/或deltaH-2(δ2H)的参考值时，则诊断为有肾脏疾病或肿瘤疾病的可能性。本发明亦提供一种实施本发明方法的套组。文档编号G01N33/48GK102998436SQ20121033354公开日2013年3月27日申请日期2012年9月10日优先权日2011年9月9日发明者郭宪寿,林元灏申请人:郭宪寿,林元灏