盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法
【专利摘要】本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，通过采用电导检测，离子色谱法对盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪进行定量分析。本方法进行测定，方法简单，精密度高，稳定性好，重现性好。
【专利说明】盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明涉及一种精细化工产品检测分析方法，特别是盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法。
【背景技术】
[0003]盐酸法舒地尔是一种具有广泛药理作用的新型药物，它的分子结构为5-异喹啉磺酰胺衍生物，为RHO激酶抑制物，通过增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮细胞的张力，改善脑组织微循环，不产生和加重脑的盗血，同时可拮抗炎性因子，保护神经抗凋亡，促进神经再生。本结果表明盐酸法舒地尔对促进神经功能的恢复，减轻临床症状，减少病残率有一定疗效。因此对于在基层由于受经济条件的制约以及对疾病认识程度，超早期溶栓治疗不能实现，但为减少疾病的进一步进展，在治疗时间窗内重建局部血循环显得至关重要，而盐酸法舒地尔具有对缺血性脑血管病的显著神经保护和治疗作用，值得在临床尤其是基层的使用，减少致残率，提高生活质量。法舒地尔是目前唯一临床可用的Rho激酶抑制剂暨新型细胞内Ca2+拮抗剂，能强效扩血管、保护缺血脑组织，临床主要用于蛛网膜下腔出血手术后脑血管痉挛、脑缺血等的防治。
[0004]高哌嗪作为盐酸法舒地尔合成的起始物料，产品质量控制考虑其会有残留，结合生产工艺分析，高哌嗪在反应过程中会生成高哌嗪的盐酸盐，又因高哌嗪没有紫外吸收，且成盐后也不适合用气相检测，不易在生产中控制产品的质量。
[0005]
【发明内容】
[0006]为解决上述问题，本发明公开了盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，操作简单，精密度高，稳定性好，重现性好。
[0007]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，包括如下步骤，将盐酸法舒地尔用溶剂溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔0.1mg~IOmg的溶液以及将高哌嗪用溶剂溶解稀释成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作为供试品溶液，注入离子色谱仪，进样体积为5~100μ 1，利用电导检测器，乙腈-酸溶液作为流动相，流动相流速为0.3^2.0ml/min，采用阳离子交换色谱柱，对盐酸法舒地尔、高哌嗪以及盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪分别进行定量测定，其中所述的流动相中含乙腈的体积比例范围为5%~25%，酸溶液的体积比例范围为75%~95%，所述的酸溶液浓度范围为2~lOmmol/L。
[0008]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的一种改进，所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液、盐酸溶液、硫酸溶液中的一种或其中几种的组合溶液。
[0009]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液。[0010]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述供试品溶液的浓度为3mg/ml。
[0011]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的流动相流速为lml/min。
[0012]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的流动相中含乙腈的体积比例为10%。
[0013]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的酸溶液的体积为90%。
[0014]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的酸溶液浓度为5 mmol/L。[0015]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法的又一种改进，所述的进样体积为20 μ l。
[0016]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，稳定性好、重现性好、操作简单、精密度高，方便可行，准确度高，对人体和环境造成的危害小，对盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪进行检测，填补了高哌嗪成盐后在盐酸法舒地尔中残留无法检测的空白，提高了盐酸法舒地尔产品质量控制的检测手段。
[0017]
【专利附图】
【附图说明】
[0018]图1、本发明各实施例的数据列表。
[0019]【具体实施方式】
[0020]下面结合附图和【具体实施方式】，进一步阐明本发明，应理解下述【具体实施方式】仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
[0021]本发明中以配置得到不同浓度的盐酸法舒地尔溶液和高哌嗪溶液来作为对照样，并以两者的混合溶液来模拟含杂质的盐酸法舒地尔样品溶液来进行测试。
[0022]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法包括如下步骤，将盐酸法舒地尔用溶剂溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔0.1mg~IOmg的溶液以及将高哌嗪用溶剂溶解稀释成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作为供试品溶液，注入离子色谱仪，进样体积为5~100 μ l，利用电导检测器，乙腈-酸溶液作为流动相，流动相流速为
0.3^2.0ml/min，采用阳离子交换色谱柱，对盐酸法舒地尔、高哌嗪以及盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪分别进行定量测定，其中所述的流动相中含乙腈的体积比例范围为5%~25%，酸溶液的体积比例范围为75%~95%，所述的酸溶液浓度范围为2~lOmmol/L。
[0023]作为一种优选，所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液、盐酸溶液、硫酸溶液中的一种或其中几种的组合溶液。
[0024]作为一种优选，所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液。
[0025]作为一种优选，所述供试品溶液的浓度为3mg/ml。
[0026]作为一种优选，所述的流动相流速为lml/min。[0027]作为一种优选，所述的流动相中含乙腈的体积比例为10%。
[0028]作为一种优选，所述的酸溶液的体积为90%。
[0029]作为一种优选，所述的酸溶液浓度为5 mmol/L。
[0030]作为一种优选，所述的进样体积为20 μ I。
实施例
[0031]仪器:离子色谱仪，包括液相泵、电导检测器、进样器 试剂:甲烷磺酸(分析纯)、乙腈(色谱纯)
色谱柱:阳离子交换色谱柱(羧酸基键合硅胶为填充剂)
如图1所示，以下各实施例的基本实验条件相同。
[0032]实施例1:
照离子色谱法(中国药典2010年版二部附录V J)测定。
[0033]色谱条件与系统适用性试验用羧酸基键合硅胶为填充剂；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)为流动相；流速为每分钟1.0ml ;电导检测。称取盐酸法舒地尔和高哌嗪对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔3mg和高哌嗪3ug的混合溶液作为系统适用性试验溶液，精密量取20μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，高哌嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。
[0034]测定法取本品约0.3g，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取高哌嗪对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每Irnl中约含高哌嗪3μ g的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。
[0035]实施例2:
照离子色谱法(中国药典2010年版二部附录V J)测定。
[0036]色谱条件与系统适用性试验用羧酸基键合硅胶为填充剂；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(75: 25)为流动相；流速为每分钟0.3ml ;电导检测。称取盐酸法舒地尔和高哌嗪对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔3mg和高哌嗪3ug的混合溶液作为系统适用性试验溶液，精密量取20μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，高哌嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。
[0037]测定法取本品约0.3g，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取高哌嗪对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每Irnl中约含高哌嗪3μ g的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。
[0038]实施例3:
照离子色谱法(中国药典2010年版二部附录V J)测定。
[0039]色谱条件与系统适用性试验用羧酸基键合硅胶为填充剂；以5mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(95: 5)为流动相；流速为每分钟2ml ;电导检测。称取盐酸法舒地尔和高哌嗪对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔3mg和高哌嗪3 μ g的混合溶液作为系统适用性试验溶液，精密量取20 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，高哌嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。[0040]测定法取本品约0.3g，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取高哌嗪对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每Irnl中约含高哌嗪3μ g的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。
[0041]实施例4:
照离子色谱法(中国药典2010年版二部附录V J)测定。
[0042]色谱条件与系统适用性试验用羧酸基键合硅胶为填充剂；以2mmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)为流动相；流速为每分钟1.0ml ;电导检测。称取盐酸法舒地尔和高哌嗪对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔IOmg和高哌嗪IOyg的混合溶液作为系统适用性试验溶液，精密量取5 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，高哌嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。
[0043]测定法取本品约3g，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取5μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取高哌嗪对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含高哌嗪10 μ g的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。
[0044]实施例5:
照离子色谱法(中 国药典2010年版二部附录V J)测定。
[0045]色谱条件与系统适用性试验用羧酸基键合硅胶为填充剂；以lOmmol/L甲磺酸水溶液-乙腈(90: 10)为流动相；流速为每分钟1.0ml ;电导检测。称取盐酸法舒地尔和高哌嗪对照品各适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸法舒地尔0.1mg和高哌嗪0.01 μ g的混合溶液作为系统适用性试验溶液，精密量取100 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图，高哌嗪峰与相邻峰的分离度应符合要求。
[0046]测定法取本品约0.01g，精密称定，置100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取100 μ I注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取高哌嗪对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含高哌嗪0.01yg的溶液，作为对照品溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。
[0047]本发明公开的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，稳定性好、重现性好、操作简单、精密度高，方便可行，准确度高，对人体和环境造成的危害小，对盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪进行检测，填补了高哌嗪成盐后在盐酸法舒地尔中残留无法检测的空白，提高了盐酸法舒地尔产品质量控制的检测手段。
[0048]本发明方案所公开的技术手段不仅限于上述技术手段所公开的技术手段，还包括由以上技术特征任意组合所组成的技术方案。以上所述是本发明的【具体实施方式】，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:包括如下步骤，将盐酸法舒地尔用溶剂溶解稀释成每1ml中含盐酸法舒地尔0.1mg~IOmg的溶液以及将高哌嗪用溶剂溶解稀释成每1ml中含高哌嗪0.01 μ g~10 μ g的溶液作为供试品溶液，注入离子色谱仪，进样体积为5~100 μ I，利用电导检测器，乙腈-酸溶液作为流动相，流动相流速为0.3^2.0ml/min，采用阳离子交换色谱柱，对盐酸法舒地尔、高哌嗪以及盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪分别进行定量测定，其中所述的流动相中含乙腈的体积比例范围为5%~25%，酸溶液的体积比例范围为75%~95%，所述的酸溶液浓度范围为2~lOmmol/L。
2.根据权利要求1所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液、盐酸溶液、硫酸溶液中的一种或其中几种的组合溶液。
3.根据权利要求2所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的酸溶液为甲烷磺酸溶液。
4.根据权利要求1所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述供试品溶液的浓度为3mg/ml。
5.根据权利要求1所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的流动相流速为lml/min。
6.根据权利要求1所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的流动相中含乙腈的体积比例为10%。
7.根据权利要求1 所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的酸溶液的体积为90%。
8.根据权利要求1或者7所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的酸溶液浓度为5 mmol/Lo
9.根据权利要求1所述的盐酸法舒地尔中杂质高哌嗪的检测分析方法，其特征在于:所述的进样体积为20 μ I。
【文档编号】G01N30/02GK103901116SQ201210571001
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月26日 优先权日:2012年12月26日
【发明者】王成, 刘跃跃, 张山, 乔德水, 高雪芹 申请人:江苏万邦生化医药股份有限公司, 上海复星医药（集团）股份有限公司