气相色谱法检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量的制作方法
【专利摘要】本发明建立一种检测农田地表水中联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于以石油醚—正己烷（V:V=3:1）混合溶剂作为提取剂，提取液经旋转蒸发器浓缩、用弗罗里矽柱净化后，在气相色谱仪上痕量分析。本发明的优点在于：一是7种拟除虫菊酯农药含量与峰面积具有良好的线性关系（0.05-5.0mg/kg范围内），HP-5色谱柱对目标物分离效果好，检测结果准确度高，重现性好，方法灵敏度达到了农药多残留检测的技术要求；二是样品的前处理操作简便、快速，缩短了检测时间，提高了工作效率。
【专利说明】 气相色谱法检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量
【技术领域】
[0001]本发明建立一种检测农田地表水中联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯农药残留量的气相色谱方法，属于农药残留检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]拟除虫菊酯类农药是20世纪70-80年代崛起的一类杀虫剂，具有高效，广谱，低毒，低残留等特点。主要用于防治棉花、果树、蔬菜、茶树、烟草、大豆等农作物上的害虫，目前在农业生产中正被广泛的应用。但在此过程中产生的一个不容忽视的问题是农药对生态环境的影响。
[0003]以往的研究表明，田间喷洒的农药只有10%_20%粘附在作物上，其余80%_90%进入了土壤或经蒸发散逸到空气中，进入土壤的那部分农药又经渗滤、径流及雨水冲刷等途径进入到水体中，造成农田地表水和浅层地下水严重污染。随着高毒农药禁用和无公害蔬菜水果的推广，拟除虫菊酯类农药使用范围扩大，施用量增大，导致该农药在土壤中快速积累，其在农田地表水中的含量不断飚升，结果对水生态系统造成破坏，直接危害鱼、虾等水生浮游动物。在这种情况下，必须对农田地表水中拟除虫菊酯类农药残留进行长期的跟踪监测，及时了解农田地表水污染状况、污染程度，以便采取必要的措施对其进行保护和人工修复。
[0004]本发明旨在建立一种快速、准确、灵敏的多残留检测方法，对农田地表水中联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯农药残留进行曰常的监测。
【发明内容】
[0005]本发明有如下二方面内容:
1、农田地表水水样前处理
2、气相色谱仪检测
本发明所采用的技术，包括以下内容:
(I)仪器与试剂
①仪器 Agilent 6890气相色谱仪、配有电子捕获检测器(ECD)，HP-5(30mX0.32mmX0.25 μ m)作为定量检测色谱柱，DB-608 (30mX0.32mmX0.5ym)作为定性确认色谱柱，弗罗里矽柱(1000mg/6ml安捷伦公司)，电子天平，美国N-EVAP24水浴氮吹仪，带水浴锅旋转蒸发器。
[0006]②试剂石油醚:分析纯；正己烷:分析纯(萃取剂)、色谱纯(净化、定容用);丙酮:色谱纯；氯化钠:分析纯，140°C烘烤4h ;无水硫酸钠:分析纯，650°C马福炉中烘6h。
[0007]③农药标准样品联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯农药标准溶液购自农业部环境保护科研监测所，质量浓度为IOOy g/ml。用正己烷配制成10 μ g/ml浓度的混合储备液，于-25°c保存，使用时用正己烷稀释成所需浓度的标准工作液。
[0008]( 2 )地表水水样前处理
①取50ml水样,用滤纸过滤后转移到500ml分液漏斗中，加入15g氯化钠,振荡溶解；
②加入50ml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂，振荡萃取5min，静置分层后，放出下层水相于另一个分液漏斗中，可稍放出一些有机相(防止水相余留)；
③将上层有机相经装有无水硫酸钠的漏斗过滤，滤液收集到250ml的旋转蒸发瓶中(在旋转蒸发瓶上放一个三角漏斗，漏斗内依次从下往上装少许脱脂棉、2cm无水硫酸钠，在放提取液前，先用石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂将无水硫酸钠润湿)；
④将水相用30ml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂再次提取，共提取2-3次，同样取有机相过滤，最后用IOml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂淋洗漏斗内的无水硫酸钠，合并滤液；
⑤将收集的滤液在旋转蒸发器上浓缩至近干(水浴温度控制在50°C)，接着加入2ml正己烷将残余物完全溶解，待净化；
⑥将弗罗里矽柱用5.0ml丙酮+正己烷(10+90)、5.0ml正己烷预淋洗，当溶剂液面到达柱吸附表面时，立即加入上述待净化液，用15.0ml刻度试管收集洗脱液，再用IOml丙酮+正己烷(10+90)分二次洗蒸发瓶，洗后淋洗弗罗里矽柱，把收集液刻度试管置于氮吹仪(水浴温度控制在60°C),氮吹浓缩至体积小于2.0ml时,用正己烧准确定容至2.0ml,摇勻后，供气相色谱仪检测。
[0009]( 3 )气相色谱仪检测
①色谱参数设定(用DB-608色谱柱与HP-5色谱柱所设定的参数相同)载气:高纯氮气(纯度99.999%);进样模式:恒流，流量为1.8 ml/min ;进样口温度:260°C ;检测器温度:290°C;柱升温程序:初始温度100°C，保持0.5min,以35°C /min上升至265°C，保持14min ；进样方式:不分流；进样量I μ I。
[0010]②定性和定量方法以联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯标准溶液色谱峰的保留时间来定性；以ΗΡ-5色谱柱样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量，对于阳性样品采用DB-608色谱柱确认。
[0011](4)方法验证(见表I)
①线性和范围分别配制浓度为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg/kg联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯系列的混合标准溶液，按上述色谱条件下依次进样，以目标农药的色谱峰面积Y对相应的标准溶液浓度X (mg/kg)绘制标准曲线，相关系数均在0.9990以上。
[0012]②准确度、精密度以添加回收率来衡量方法的准确度，以变异系数(CV)来表示方法的精密度。在本底不含拟除虫菊酯类农药的土样中，添加联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的混合标准溶液，添加浓度为0.05、
0.1U.0,5.0 mg/kg,同时设置6个重复，再按前述的样品处理方法及色谱条件进行添加回收率试验，在4个添加水平上，7种拟除虫菊酯农药的平均回收率为75.8%-106.5%，变异系数在8%以下。
[0013]③检出限体现了方法的灵敏度。用联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的混合标准溶液逐级稀释添加，按上述方法检测，以3倍噪声强度的信号计算，测得最低检出浓度为0.001mg/kg-0.003mg/kg。
[0014]表1检测方法的检出限、准确度和精密度
【权利要求】
1.一种检测农田地表水中联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于包括下述步骤: ①取50ml水样,用滤纸过滤后转移到500ml分液漏斗中，加入15g氯化钠,振荡溶解； ②加入50ml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂，振荡萃取5min，静置分层后，放出下层水相于另一个分液漏斗中，可稍放出一些有机相(防止水相余留)； ③将上层有机相经装有无水硫酸钠的漏斗过滤，滤液收集到250ml的旋转蒸发瓶中(在旋转蒸发瓶上放一个三角漏斗，漏斗内依次从下往上装少许脱脂棉、2cm无水硫酸钠，在放提取液前，先用石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂将无水硫酸钠润湿)； ④将水相用30ml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂再次提取，共提取2-3次，同样取有机相过滤，最后用IOml石油醚一正己烷(V:V=3:1)混合溶剂淋洗漏斗内的无水硫酸钠，合并滤液； ⑤将收集的滤液在旋转蒸发器上浓缩至近干(水浴温度控制在50°C)，接着加入2ml正己烷将残余物完全溶解，待净化； ⑥将弗罗里矽柱用5.0ml丙酮+正己烷(10+90)、5.0ml正己烷预淋洗，当溶剂液面到达柱吸附表面时，立即加入上述待净化液，用15.0ml刻度试管收集洗脱液，再用IOml丙酮+正己烷(10+90)分二次洗蒸发瓶，洗后淋洗弗罗里矽柱，把收集液刻度试管置于氮吹仪(水浴温度控制在60°C ),氮吹浓缩至体积小于2.0ml时,用正己烧准确定容至2.0ml,摇勻后，供气相色谱仪检测； ⑦色谱参数设定(用DB-608色谱柱与HP-5色谱柱所设定的参数相同)载气:高纯氮气(纯度99.999%);进样模式:恒流，流量为1.8 ml/min ;进样口温度:260°C ;检测器温度:290°C;柱升温程序:初始温度100°C，保持0.5min,以35°C /min上升至265°C，保持14min ；进样方式:不分流；进样量Ιμ I; ⑧定性和定量方法以联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯标准溶液色谱峰的保留时间来定性；以ΗΡ-5色谱柱样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量，对于阳性样品采用DB-608色谱柱确认。
2.根据权利要求1所述的一种检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于以石油醚一正己烷(V: V=3:1)混合溶剂作为提取剂，提取液经旋转蒸发器浓缩、用弗罗里矽柱净化后，用正己烷定容。
3.根据权利要求1所述的一种检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用Agilent 6890 (配有电子捕获检测器)气相色谱仪痕量分析。
4.根据权利要求1所述的一种检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于HP-5色谱柱规格为30mX0.32mmX0.25 μ m, DB-608色谱柱规格为30mX 0.32mmX 0.5 μ m。
5.根据权利要求1所述的一种检测农田地表水中7种拟除虫菊酯农药残留量的气相色谱方法，其特征在于用标准溶液色谱峰的保留时间来定性，以HP-5色谱柱样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量，对于阳性样品采用DB-608色谱柱确认。
【文档编号】G01N30/02GK103499660SQ201310434696
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年9月23日 优先权日:2013年9月23日
【发明者】邬金飞 申请人:邬金飞