一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法
【专利摘要】本发明公开了一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，采用高效液相色谱法对甜菜碱饲料添加剂样品进行色谱分析，通过外标法对样品中的甜菜碱进行定量，并根据色谱出峰结果，判断样品中杂质的种类。本发明方法能全面的、综合性的反映出甜菜碱饲料添加剂的质量情况，避免了甜菜碱常用的几种检测方法的弊端和局限，具有以下优点：1、操作方法较简便易行，分析方法准确可靠，易于在饲料企业普及；2、能检测到甜菜碱饲料添加剂中含有的杂质成分，具有一定的鉴别能力，解决了检测产品中掺假的问题；3、检测过程避免了有毒化学试剂与人体的直接接触，减少了对人体的危害。
【专利说明】一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，属于饲料添加剂检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]甜菜碱为一种白色或微棕色结晶的化合物，是一种季胺型生物碱，广泛存在于动植物中，尤以甜菜糖蜜中含量最高。甜菜碱天然、无毒害、无污染、无残留、无致突变性，其生物效价可相当于蛋氨酸的三倍，50%氯化胆碱的1.8倍，能部分代替蛋氨酸和氯化胆碱，降低饲料成本。此外，其还具有抗病抗应激作用、提高畜禽生产性能、改善畜禽胴体性状、改善畜禽肌肉品质等作用。基于此，甜菜碱在畜牧业上具有广阔的应用前景，是一种十分重要的、安全的饲料添加剂。
[0003]因为甜菜碱的良好性能，其在饲料领域具有很好的应用，目前，有很多不法商贩为了降低成本，在甜菜碱中加入一些含氮化合物，以次充好，此外，甜菜碱含量不达标也对其质量产生较大影响。目前，饲料领域甜菜碱的检测方法有酸碱滴定法、比色法、重量法、薄层扫描定量法、凯氏定氮法、高氯酸非水滴定法、分光光度法、气相色谱法、离子色谱法等。在检测甜菜碱时，可根据实验室条件和测定要求选择适当的方法。目前执行的产品标准是GB/T 21515-2008《饲料添加剂天然甜菜碱》。其含量检测采用的是高氯酸非水滴定法，该法缺点:①该法采用结晶紫指示剂，终点颜色变化不明显，较难判定终点；②采用的高氯酸和冰醋酸有很强的腐蚀性；③高氯酸标准溶液放置过久会变成黄色，对化验室外部环境控制要求较高，受环境温度、湿度影响较大，要经常配制、标定。④利用此法进行检测只要样品中具有碱性基团的化合物如胺类、氨基酸类、含氮杂环化合物、某些有机碱的盐及弱酸盐、钠离子等，都会影响高氯酸非水滴定法检测的准确性。此法在检定纯品甜菜碱时非常有效和准确，但如有掺假时，此法很难辩其真伪。故此类产品含量检测需使用GB/T 21515-2008中仲裁法离子色谱法，但由于离子色谱价格较高，还需要关注色谱仪、色谱柱和抑制器的日常维护，维护成本也较高、因此离子色谱法在饲料企业不易普及。同时用离子色谱进行检测时还需注意标准溶液的保存期，注意峰面积的变化。用离子色谱测定时误差较大，如果谱图无误，还需用凯氏定氮法进行对照。用凯氏定氮法测定样品中的氮，通过甜菜碱和氮含量的换算公式得到甜菜碱的量，此法是饲料企业较常采用的方法，可减少空气污染对操作人员健康的危害，也可排除环境温度、湿度的变化对高氯酸非水滴定法的影响，但在检测纯品时检测误差比高氯酸滴定法高，并且不能排除含氮物质的干扰，也不能解决产品中掺假的问题。
【发明内容】
[0004]本发明针对上述几种检测方法存在的缺陷，提供了一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，该方法依托于高效液相色谱检测法，能很好的检测出添加剂中甜菜碱的含量，也能检测出甜菜碱中的杂质种类，判断是否存在掺假现象，能较好、较全面的判断甜菜碱饲料添加剂的质量优劣。[0005]本发明提供了一种高含量的甜菜碱饲料添加剂的质量综合评估方法，具体是采用以下技术方案实现的:
一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:采用高效液相色谱法对甜菜碱饲料添加剂样品进行色谱分析，通过外标法对样品中的甜菜碱进行定量，同时根据色谱出峰结果，判断样品中杂质的种类。该方法除了测定样品中甜菜碱含量外，还可以从多方面判断样品的质量，更便于对样品的质量、品质进行全面的综合性的评价。
[0006]进一步的，上述方法中，高效液相色谱所用的色谱条件为:
检测器:紫外检测器；
色谱柱:0DS C18反相色谱柱；
流动相:甲醇、水、磷酸的混合物，其中甲醇与水的体积比为10:90，磷酸的用量为甲醇与水总体积的0.2% ；
柱温:30°C ;
波长:210-215nm ；
流速:0.8-1.0ml/min ；
样品进样量:15μ1;
进样的样品浓度:0.5-14mg/ml。
[0007]进一步的，上述方法中，外标法检测样品中甜菜碱含量时，计算公式如下:
【权利要求】
1.一种甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:采用高效液相色谱法对甜菜碱饲料添加剂样品进行色谱分析，通过外标法对样品中的甜菜碱进行定量，同时根据色谱出峰结果，判断样品中杂质的种类。
2.根据权利要求1所述的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:高效液相色谱所用的色谱条件为: 检测器:紫外检测器； 色谱柱:ODS C18反相色谱柱； 流动相:甲醇、水、磷酸的混合物，其中甲醇与水的体积比为10:90，磷酸的用量为甲醇、水总体积的0.2% ； 柱温:30°C ; 波长:210-215nm ；
流速:0.8-1.0ml/min ； 进样的样品浓度:0.5-14mg/mL.
3.根据权利要求2所述的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:进样的样品浓度为10mg/ml。
4.根据权利要求2所述 的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:波长为.214nm。
5.根据权利要求2所述的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:样品进样量为15 μ I。
6.根据权利要求1或2所述的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:外标法检测样品中甜菜碱含量时，计算公式如下:
7.根据权利要求1或2所述的甜菜碱饲料添加剂质量综合评估方法，其特征是:样品用流动相溶解。
【文档编号】G01N30/02GK103940931SQ201410192250
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年5月8日 优先权日:2014年5月8日
【发明者】刘茂玲, 刘丽秀, 冯维春, 魏凤, 唐晓婵, 邢伶, 纪晓红, 孟宪兴 申请人:山东省化工研究院