一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法
【专利摘要】本发明公开了一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法，包括培养肿瘤细胞制成细胞悬液，并将细胞悬液注射至实验动物背部皮下，待肿瘤细胞生长至100mm3~300mm3时将实验动物随机分组；其中一组注入羟氯喹亚麻酸酯，一组为阴性对照组注入盐水或者溶剂，并计算羟氯喹亚麻酸酯药物组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。本方法能够对羟氯喹亚麻酸酯的有效性进行评价，判断羟氯喹亚麻酸酯对肿瘤细胞的抑制效果，便于确认药物剂量，快速筛选肿瘤治疗方案。
【专利说明】一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物有效性的评价方法，具体涉及到一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法。
【背景技术】
[0002]药物的安全性和有效性是药品的基本特征。药品有效性是药物的重要特性，药物对治疗某种疾病的有效，是药品存在的重要依据，药品的有效性是药物存在和应用的重要保证。
[0003]肿瘤是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。羟氯喹亚麻酸酯是综合应用肿瘤靶向前体药物设计原理和结构拼接原理的基础，设计合成前体药物连接α亚麻酸和羟氯喹的新化合物，具有非常广阔的抗肿瘤前景，对于新药的应用，需要对其有效性进行评价。
[0004]为了解决现有技术中的上述不足，本发明提出了一种新的解决方案。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法。
[0006]为达上述目的，本发明所采用的技术方案是:提供一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法，包括:
[0007]培养肿瘤细胞，待其生长至70%?90%时，收集肿瘤细胞，并使用培养基离心洗漆，再重悬成细胞悬液待用；
[0008]取实验动物，将细胞悬液注射至实验动物背部皮下，每只实验动物注射SOul?120ul的细胞悬液，然后正常饲养，待肿瘤细胞生长至100mm3?300mm3时将实验动物随机分组；其中一组注入羟氯喹亚麻酸酯，一组为阴性对照组注入盐水或者溶剂；
[0009]每组实验动物分别每天给药一次，连续给药21?24天，且在给药过程中，每个测算周期测量一次肿瘤体积和实验动物瘤重；计算羟氯喹亚麻酸酯药物组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。
[0010]本发明中，肿瘤生长抑制率GI = ( Λ vt— AVc)/AVcX100%；AVt为羟氯喹亚麻酸酯药物组在测算周期前后肿瘤体积差，AVc为阴性对照组测算周期前后肿瘤体积差。
[0011]瘤重抑制率G = (Wc-Wt) /ffc X 100% ；ffc为阴性对照组瘤重，Wt为羟氯喹亚麻酸酯药物组的瘤重。
[0012]本发明中，实验动物为BALB/c裸小鼠；肿瘤细胞为HCT116结肠癌细胞。
[0013]本发明中，肿瘤体积的计算公式为TV = l/2XaXb2，其中a为肿瘤的长，b为肿瘤的宽。
[0014]本发明中，需要每隔一段时间来检测肿瘤的体积和瘤重，可以设置测算周期为3天。
[0015]本发明中，细胞悬液的细胞浓度为I X 18个/ml。
[0016]综上所述，本发明具有以下优点:
[0017]本发明采用在实验动物体内评价羟氯喹亚麻酸酯的抗肿瘤活性；可以对其有效性进行评价，判断不同剂量的羟氯喹亚麻酸酯对肿瘤细胞的抑制效果。
【具体实施方式】
[0018]肿瘤动物造模
[0019]取HCT116结肠癌细胞在培养基中培养，待其生长至70%?90%时，收集肿瘤细胞，并使用培养基离心洗涤三次，再重悬成细胞浓度为I X 18个/ml的细胞悬液待用；
[0020]选取BALB/c裸小鼠，雌性，5-6周龄，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。按照每只小鼠80ul?120ul的量将细胞悬液注射至BALB/c裸小鼠右侧后背部皮下，并在常规条件下饲养小鼠，让其肿瘤细胞生长至10mm3?300mm3，即得到肿瘤动物模型。
[0021]实施例1
[0022]取12只造模成功的小鼠，随机分成两组，每组6只小鼠。其中一组每天腹腔注射羟氯喹亚麻酸酯，剂量为30mg/kg ;对照组每天腹腔注射等剂量的生理盐水；持续21?24天，每隔3天测量每只小鼠的体重、肿瘤尺寸和瘤重；并计算羟氯喹亚麻酸酯组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。
[0023]肿瘤生长抑制率GI = ( Λ Vt- AVc)/AVcX100% ；Δ Vt为羟氯喹亚麻酸酯药物组在测算周期前后肿瘤体积差，AVc为阴性对照组，生理盐水组测算周期前后肿瘤体积差。
[0024]瘤重抑制率G = (Wc-Wt) /ffc X 100% ；ffc为阴性对照组瘤重，Wt为羟氯喹亚麻酸酯药物组的瘤重。
[0025]实施例2
[0026]取12只造模成功的小鼠，随机分成两组，每组6只小鼠。其中一组每天腹腔注射羟氯喹亚麻酸酯，剂量为50mg/kg ;对照组每天腹腔注射等剂量的生理盐水；持续21天，每隔3天测量每只小鼠的体重、肿瘤尺寸和瘤重；并计算羟氯喹亚麻酸酯组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。
[0027]肿瘤生长抑制率GI = ( Λ Vt- AVc)/AVcX100% ；Δ Vt为羟氯喹亚麻酸酯药物组在测算周期前后肿瘤体积差，AVc为阴性对照组测算周期前后肿瘤体积差。
[0028]瘤重抑制率G = (Wc-Wt) /ffc X 100% ；ffc为阴性对照组瘤重，Wt为羟氯喹亚麻酸酯药物组的瘤重。
[0029]实施例3
[0030]取12只造模成功的小鼠，随机分成两组，每组6只小鼠。其中一组每天腹腔注射羟氯喹亚麻酸酯，剂量为80mg/kg ;对照组每天腹腔注射溶剂，剂量为0.2ml/只，溶剂的组分为乙醇:蓖麻油:水=1:1:6;持续24天，每隔3天测量每只小鼠的体重、肿瘤尺寸和瘤重；并计算羟氯喹亚麻酸酯组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。
[0031 ] 肿瘤生长抑制率GI = ( Λ Vt- AVc)/AVcX100% ；Δ Vt为羟氯喹亚麻酸酯药物组在测算周期前后肿瘤体积差，AVc为阴性对照组测算周期前后肿瘤体积差。
[0032]瘤重抑制率G = (Wc-Wt) /ffc X 100% ；ffc为阴性对照组瘤重，Wt为羟氯喹亚麻酸酯药物组的瘤重。
[0033]表1:实施例1~实施例3中的小鼠肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率
[0034]
【权利要求】
1.一种羟氯喹亚麻酸酯治疗肿瘤的有效性体内评价方法，包括: 培养肿瘤细胞，待其生长至70°/Γ90%时，收集肿瘤细胞，并使用培养基离心洗涤，再重悬成细胞悬液待用； 取实验动物，将细胞悬液注射至实验动物背部皮下，每只实验动物注射80uf 120ul的细胞悬液，然后正常饲养，待肿瘤细胞生长至100 mnT300 mm3时将实验动物随机分组；其中一组注入羟氯喹亚麻酸酯，一组为阴性对照组注入盐水或者溶剂； 每组实验动物分别每天给药一次，连续给药2广24天，且在给药过程中，每个测算周期测量一次肿瘤体积和实验动物瘤重；计算羟氯喹亚麻酸酯药物组的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率。
2.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述肿瘤生长抑制率GI=(AVt-AVc)/AVcX 100% ; AVt为羟氯喹亚麻酸酯药物组在测算周期前后肿瘤体积差，AVc为阴性对照组测算周期前后肿瘤体积差； 瘤重抑制率G= (Wc-Wt) /ffc X 100% ；ffc为阴性对照组瘤重，Wt为羟氯喹亚麻酸酯药物组瘤重。
3.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述实验动物为BALB/c裸小鼠。
4.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述肿瘤细胞为HCT116结肠癌细胞。
5.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述细胞悬液的细胞浓度为IX 18个/ml。
6.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述肿瘤体积TV=l/2XaXb2，其中a为肿瘤的长，b为肿瘤的宽。
7.如权利要求1所述的评价方法，其特征在于:所述测算周期为3天。
【文档编号】G01N33/15GK104165976SQ201410396155
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年8月13日 优先权日:2014年8月13日
【发明者】肖洪涛, 田鲲, 廖治, 童荣生, 喻冬柯, 串俊兰, 张丽娟, 张远, 边原 申请人:四川省人民医院