一种乳品中尿素的快速检测试剂盒及检测方法
【专利摘要】本发明涉及一种乳品中尿素快速检测试剂盒，所述的试剂盒包括以下组分：蒸馏水、尿素标准品、A试剂、B试剂、C试剂、沉淀液。.采用所述的检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的方法包括以下步骤：先对样品进行预处理，制得待测样品溶液；再配制不同浓度的尿素标准品溶液，分别取一定量的待测样品溶液及不同浓度的尿素标准品溶液置入大试管中，先后加入A试剂，B试剂，反应，观察有无气泡产生；在反应后的试管中再加入C试剂，后观察溶液颜色变化，若有气体逸出，且加入C试剂后样品溶液未出现紫红色，判断为样品中含有尿素。本发明仅需20-30min即可完成检测，检测结果准确，尤其适用于相关部门对乳品中尿素的定性检测。
【专利说明】一种乳品中尿素的快速检测试剂盒及检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品检测领域，具体涉及一种乳品中尿素的快速检测试剂盒及检测方法。
【背景技术】
[0002]尿素是生物体中的重要降解产物.是碳酰胺最简单的有机化合物之一。乳品中加入尿素可明显提高非蛋白氮(NPN)的含量。因此，一些不法厂商会在鲜奶中添加尿素来提高蛋白质质量分数，这样不仅影响乳品的口感及风味，还直接损害了食用者的健康甚至造成中毒。因此，为了加强牛乳的质量监督，对乳品中的尿素进行检测并严格控制至关重要。
[0003]目前，尿素检测的实验室方法有许多，最常用的为显色法，显色剂主要为二甲氨基苯甲醛等，这些方法均需要借助实验室仪器才能完成，难以满足相关部门对乳品的现场快速检测。另外，还有酶法、色谱法等，色谱法灵敏度高，受杂质干扰小，但尿素属于强极性化合物，在常用C18液相色谱柱上保留非常弱，明显影响了分析结果的准确性。而酶法在检测变质的酸性乳或掺碱的碱性乳时，会导致假性结果。因此，寻找一种乳品中尿素的快速、简便的检测方法至关重要。
【发明内容】
[0004]本发明的目的就是针对上述现有技术中存在的缺陷提供一种味精中谷氨酸钠的快速检测试剂盒及检测方法。
[0005]本发明的技术方案如下:
一种乳品中尿素快速检测试剂盒，所述的试剂盒包括以下组分:蒸馏水、尿素标准品、A试剂、B试剂、C试剂、沉淀液。
[0006]所述的A试剂为亚硝酸盐。
[0007]优选的，所述的亚硝酸盐选自亚硝酸钠或亚硝酸钾中的一种。
[0008]所述的B试剂为强酸溶液。
[0009]优选的，所述的强酸溶液选自浓盐酸或浓硫酸中的一种。
[0010]优选的，所述的C试剂为格里斯试剂。
[0011]优选的，所述的沉淀液为质量分数为15%_25%的偏磷酸溶液。
[0012]采用如上所述的检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的检测方法，包括以下步骤:
(1)对样品进行预处理，制得待测样品溶液；
(2)尿素标准品溶液配制:准确称取尿素标准品10-20mg，加蒸馏水配制成浓度为
0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L 的尿素标准品溶液；
(3)取步骤(I)中制得的待测样品溶液5-10ml及步骤(2)中制得的尿素标准品溶液5-10ml分别置入五个大试管中，并分别编号，在五支大试管中继续加入A试剂6-9滴，再加入B试剂0.5-lml,轻轻晃动试管，反应2-5min，观察有无气泡产生；
(4)在步骤(3)中反应后的大试管中加入C试剂l_3ml，混匀，2-5min后观察溶液颜色变化。
[0013]步骤(I)中对样品进行预处理的具体方法为:称取固体样品5-10g或量取液体样品5-10ml加入大试管中，加蒸馏水10-20ml溶解，超声混匀2_5min，加入沉淀液2_5ml，沉淀，离心5-10min，脱脂棉过滤，取滤液作为待测样品溶液。
[0014]步骤(3)中有气体逸出，而步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色时，判断样品中含有尿素，步骤(3)中无气体逸出，步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色，判断样品中不含有尿素。
[0015]本发明与现有技术相比，具有以下有益效果:
1.本发明根据尿素与亚硝酸盐在酸性溶液中发生反应生成二氧化碳气体逸出，而亚硝酸盐可与格里斯试剂发生偶氮反应生成紫红色染料，掺尿素就会影响该反应的发生的这一原理来检测样品中是否含有尿素，若反应过程中有气泡逸出且在加入格里斯试剂反应后，样品溶液未出现紫红色，而尿素标准溶液出现紫红色，则可判断样品中含有尿素，整个检测过程仅需20-30min，检测过程只涉及几种常用试剂，尤其适用于相关部门对乳品中尿素的定性检测。
[0016]2.本发明先对样品进行预处理，具体包括超声混匀，加入沉淀液，沉淀，离心，脱脂棉过滤，可有效提取样品中尿素，消除有关杂质对检测的干扰，保证了检测结果的准确性。
[0017]3.本发明配制了 0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L的尿素标准品溶液,将其与样品溶液一样进行格里斯试剂反应，可排除主客观因素的干扰。
【具体实施方式】
[0018]本发明通过以下具体实施例更详细的说明本发明，可以使本专业技术人员更全面的了解本发明，但不以任何方式限制本发明。
[0019]实施例1
一种乳品中尿素快速检测试剂盒，所述的试剂盒包括以下组分:蒸馏水、尿素标准品、亚硝酸钠、浓盐酸、格里斯试剂、15%的偏磷酸溶液。
[0020]采用如上所述的检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的检测方法，包括以下步骤:
(1)对样品进行预处理:称取固体样品5g加入大试管中，加蒸馏水1ml溶解，超声混匀2min，加入15%的偏磷酸溶液2ml，沉淀，离心5min，脱脂棉过滤，取滤液作为待测样品溶液制得待测样品溶液；
(2)尿素标准品溶液配制:准确称取尿素标准品10mg，加蒸馏水配制成浓度为0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L 的尿素标准品溶液；
(3)取步骤(I)中制得的待测样品溶液5ml及步骤(2)中制得的尿素标准品溶液5ml分别置入五个大试管中，并分别编号，在五支大试管中继续加入亚硝酸钠6滴，再加入浓盐酸0.5ml,轻轻晃动试管，反应2min，观察有无气泡产生；
(4)在步骤(3)中反应后的大试管中加入格里斯试剂1ml，混匀，2min后观察溶液颜色变化。
[0021]步骤(3)中有气体逸出，而步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色，判断样品中含有尿素。
[0022]实施例2
一种乳品中尿素快速检测试剂盒，所述的试剂盒包括以下组分:蒸馏水、尿素标准品、亚硝酸钾、浓硫酸、格里斯试剂、25%的偏磷酸溶液。
[0023]采用如上所述的检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的检测方法，包括以下步骤: (O对样品进行预处理，称取固体样品5g加入大试管中，加蒸馏水20ml溶解，超声混匀5min，加入25%的偏磷酸溶液5ml，沉淀，离心lOmin，脱脂棉过滤，取滤液作为待测样品溶液；
(2)尿素标准品溶液配制:准确称取尿素标准品10-20mg，加蒸馏水配制成浓度为0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L的尿素标准品溶液,并分别编号；
(3)取步骤(I)中制得的待测样品溶液5-10ml及步骤(2)中制得的尿素标准品溶液5-10ml分别置入五个大试管中，并分别编号，在五支大试管中继续加入亚硝酸钾9滴，再加入浓硫酸1ml，轻轻晃动试管，反应5min，观察有无气泡产生；
(4)在步骤(3)中反应后的大试管中加入格里斯试剂3ml，混匀，5min后观察溶液颜色变化。
[0024]步骤(3)中无气体逸出，步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色，判断样品中不含有尿素。
[0025]实施例3
一种乳品中尿素快速检测试剂盒，所述的试剂盒包括以下组分:蒸馏水、尿素标准品、亚硝酸钾、浓盐酸、格里斯试剂、20%的偏磷酸溶液。
[0026]采用如上所述的检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的检测方法，包括以下步骤:
(1)对样品进行预处理，量取液体样品5ml加入大试管中，加蒸馏水15ml溶解，超声混匀3min，加入20%的偏磷酸溶液3ml，沉淀，离心8min，脱脂棉过滤，取滤液作为待测样品溶液，置入另一支大试管中；
(2)尿素标准品溶液配制:准确称取尿素标准品10-20mg，加蒸馏水配制成浓度为0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L的尿素标准品溶液,分别置入四个大试管中，并分别编号;
(3)取步骤(I)中制得的待测样品溶液8ml及步骤(2)中制得的尿素标准品溶液8ml分别置入五个大试管中，并分别编号，在五支大试管中继续加入亚硝酸钾8滴，再加入浓盐酸0.8ml,轻轻晃动试管，反应3min，观察有无气泡产生；
(4 )在步骤(3 )中反应后的大试管中加入格里斯试剂2ml，混匀，3min后观察溶液颜色变化。
[0027]步骤(3)中无气体逸出，步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色，判断样品中不含有尿素。
[0028]以上所述实施例只是本发明的较佳实例，并非来限制本发明实施范围，故凡依本发明申请专利范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均应包括本发明专利申请范围内。
【权利要求】
1.一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括以下组分:蒸馏水、尿素标准品、A试剂、B试剂、C试剂、沉淀液。
2.根据权利要求1所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的A试剂为亚硝酸盐。
3.根据权利要求2所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的亚硝酸盐选自亚硝酸钠或亚硝酸钾中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的B试剂为强酸溶液。
5.根据权利要求4所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的强酸溶液选自浓盐酸或浓硫酸中的一种。
6.根据权利要求1所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的C试剂为格里斯试剂。
7.根据权利要求1所述的一种乳品中尿素快速检测试剂盒，其特征在于，所述的沉淀液为质量分数为15%-25%的偏磷酸溶液。
8.采用如权利要求1-7任一所述的乳品中尿素快速检测试剂盒对乳品中尿素进行检测的检测方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)对样品进行预处理，制得待测样品溶液； (2)尿素标准品溶液配制:准确称取尿素标准品10-20mg，加蒸馏水配制成浓度为0.001mg/L、0.01mg/L、0.lmg/L、lmg/L 的尿素标准品溶液； (3)取步骤(I)中制得的待测样品溶液5-10ml及步骤(2)中制得的尿素标准品溶液5-10ml分别置入五个大试管中，并分别编号，在五支大试管中继续加入A试剂6-9滴，再加入B试剂0.5-lml,轻轻晃动试管，反应2-5min，观察有无气泡产生； (4)在步骤(3)中反应后的大试管中加入C试剂l_3ml，混匀，2-5min后观察溶液颜色变化。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，步骤(I)中对样品进行预处理的具体方法为:称取固体样品5-10g或量取液体样品5-10ml加入大试管中，加蒸馏水10_20ml溶解，超声混勻2-5min,加入沉淀液2_5ml,沉淀,离心5_10min,脱脂棉过滤,取滤液作为待测样品溶液。
10.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，判断样品中是否含有尿素的具体方法为:步骤(3)中有气体逸出，而步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色时，判断样品中含有尿素，步骤(3)中无气体逸出，步骤(4)中样品溶液未出现紫红色，尿素标准溶液出现紫红色，判断样品中不含有尿素。
【文档编号】G01N21/78GK104280387SQ201410482357
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2014年9月20日 优先权日:2014年9月20日
【发明者】郭狄 申请人:中山鼎晟生物科技有限公司