一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒及其使用方法
【专利摘要】本发明涉及一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒及其使用方法，适用于尿液中葡萄糖含量的快速检测。尿液中葡萄糖含量检测试剂盒包括如下成分：缓冲剂、葡萄糖氧化酶、脱氢酶、邻联甲苯胺、抗干扰剂和稀释溶剂。本发明通过硫酸亚铁来抑制尿液中VC等物质对实验结果的影响，通过显色更加明显的蓝色来显示尿液中葡萄糖是否超标。本发明提供的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，简单易操作，速度快，检测效果更加准确、检出率高，为家庭式检测提供了一种更好的选择。
【专利说明】一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒及其使用方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测试剂，更具体是涉及一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒及其 使用方法。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或 其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、 肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。糖尿病是由遗传因素和环境因素造成的。遗传 因素：1型或2型糖尿病均存在明显的遗传异质性。糖尿病存在家族发病倾向，1/4?1/2 患者有糖尿病家族史。临床上至少有60种以上的遗传综合征可伴有糖尿病。1型糖尿病有 多个DNA位点参与发病，其中以HLA抗原基因中DQ位点多态性关系最为密切。在2型糖尿 病已发现多种明确的基因突变，如胰岛素基因、胰岛素受体基因、葡萄糖激酶基因、线粒体 基因等。环境因素：进食过多，体力活动减少导致的肥胖是2型糖尿病最主要的环境因素， 使具有2型糖尿病遗传易感性的个体容易发病。1型糖尿病患者存在免疫系统异常，在某些 病毒如柯萨奇病毒，风疹病毒，腮腺病毒等感染后导致自身免疫反应，破坏胰岛素3细胞。
[0003]糖尿病的检测通常包括九种方法。1.血糖：是诊断糖尿病的惟一标准。有明显 "三多一少"症状者，只要一次异常血糖值即可诊断。无症状者诊断糖尿病需要两次异常血 糖值。可疑者需做75g葡萄糖耐量试验。2.尿糖：常为阳性。血糖浓度超过肾糖阈（160? 180毫克/分升）时尿糖阳性。肾糖阈增高时即使血糖达到糖尿病诊断可呈阴性。因此，尿 糖测定不作为诊断标准。3.尿酮：体酮症或酮症酸中毒时尿酮体阳性。4.糖基化血红蛋 白（HbAlc):是葡萄糖与血红蛋白非酶促反应结合的产物，反应不可逆，HbAlc水平稳定，可 反映取血前2个月的平均血糖水平。是判断血糖控制状态最有价值的指标。5.糖化血清 蛋白：是血糖与血清白蛋白非酶促反应结合的产物，反映取血前1?3周的平均血糖水平。 6.血清胰岛素和C肽水平：反映胰岛0细胞的储备功能。2型糖尿病早期或肥胖型血清 胰岛素正常或增高，随着病情的发展，胰岛功能逐渐减退，胰岛素分泌能力下降。7.血脂： 糖尿病患者常见血脂异常，在血糖控制不良时尤为明显。表现为甘油三酯、总胆固醇、低密 度脂蛋白胆固醇水平升高。高密度脂蛋白胆固醇水平降低。8.免疫指标：胰岛细胞抗体 (ICA)，胰岛素自身抗体（IAA)和谷氨酸脱羧酶（GAD)抗体是1型糖尿病体液免疫异常的三 项重要指标，其中以GAD抗体阳性率高，持续时间长，对1型糖尿病的诊断价值大。在1型 糖尿病的一级亲属中也有一定的阳性率，有预测1型糖尿病的意义。9.尿白蛋白排泄量， 放免或酶联方法：可灵敏地检出尿白蛋白排出量，早期糖尿病肾病尿白蛋白轻度升高。其中 尿糖检测法是最为方便的体质，成本低廉的。但由于各人体质的不同和尿液中一些物质的 影响，导致了尿糖检测法的不准确性而不得大范围推广。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于为了克服以上现有技术的不足而提供一种减少干扰因素，检测 效果准确的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒及其使用方法。
[0005] 技术方案：本发明公开了一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：缓 冲剂、葡萄糖氧化酶、脱氢酶、邻联甲苯胺、抗干扰剂和稀释溶剂。
[0006] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，缓冲剂为ll(Tl80mm〇l/L的柠檬酸钠 溶液。
[0007] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，葡萄糖氧化酶的浓度为600(T7500U/ L〇
[0008] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，脱氢酶的浓度为15(T200U/L。
[0009] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，邻联甲苯胺的浓度为4. 5飞.Ommol/L。
[0010] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，抗干扰剂为〇. 05~0. 2mol/L的硫酸亚 铁溶液。
[0011] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，稀释溶剂为0.159TO. 5%的氢氧化钠 溶液。
[0012] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入3-7mL稀释溶剂，搅拌2-3分钟后加入2-3滴抗干扰剂搅拌 至抗干扰剂的绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入1-2滴缓冲剂后加入3-5滴葡萄糖氧化酶，搅拌 2-3分钟后加入2-3滴脱氢酶，搅拌1-2分钟后加入3-5滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，若步骤三中所述的反应液显蓝色则尿液中葡萄糖含量超标；若步骤三中所述 的反应液仍显黄色则尿液中葡萄糖含量未超标。
[0013] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，步骤三中所述的观察颜色 为反应5分钟内的颜色。
[0014] 有益效果：本发明通过硫酸亚铁来抑制尿液中VC等物质对实验结果的影响，通过 显色更加明显的蓝色来显示尿液中葡萄糖是否超标。本发明提供的尿液中葡萄糖含量检测 试剂盒，简单易操作，速度快，检测效果更加准确、检出率高，为家庭式检测提供了一种更好 的选择。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：110mm〇l/L的柠檬酸钠溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脱氢酶、6.Ommol/L的邻联甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 15%的氢氧化钠溶液。
[0016] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入3mL氢氧化钠溶液，搅拌2分钟后加入3滴硫酸亚铁溶液搅 拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入1滴柠檬酸钠溶液后加入5滴葡萄糖氧化酶，搅 拌3分钟后加入3滴脱氢酶，搅拌1分钟后加入3滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液显浅蓝色则尿液中葡萄糖含量微量超标。
[0017] 实施例2 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：180mmol/L的柠檬酸钠溶液、 6000U/L的葡萄糖氧化酶、200U/L的脱氢酶、4. 5mmol/L的邻联甲苯胺、0. 2mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 5%的氢氧化钠溶液。
[0018] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入7mL氢氧化钠溶液，搅拌3分钟后加入2滴硫酸亚铁溶液搅 拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入2滴柠檬酸钠溶液后加入3滴葡萄糖氧化酶，搅 拌2分钟后加入2滴脱氢酶，搅拌2分钟后加入5滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液显深蓝色则尿液中葡萄糖含量严重超标。
[0019] 实施例3 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：110mm〇l/L的柠檬酸钠溶液、 6500U/L的葡萄糖氧化酶、180U/L的脱氢酶、6.Ommol/L的邻联甲苯胺、0. 15mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 2%的氢氧化钠溶液。
[0020] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入4mL稀氢氧化钠溶液，搅拌2分钟后加入3滴硫酸亚铁溶液 搅拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入1滴柠檬酸钠溶液后加入5滴葡萄糖氧化酶，搅 拌3分钟后加入3滴脱氢酶，搅拌1分钟后加入3滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液显蓝色则尿液中葡萄糖含量超标。
[0021] 实施例4 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：150mmol/L的柠檬酸钠溶液、 6800U/L的葡萄糖氧化酶、190U/L的脱氢酶、5.Ommol/L的邻联甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 35%的氢氧化钠溶液。
[0022] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入5mL稀氢氧化钠溶液，搅拌3分钟后加入3滴硫酸亚铁溶液 搅拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入2滴柠檬酸钠溶液后加入4滴葡萄糖氧化酶，搅 拌3分钟后加入2滴脱氢酶，搅拌1分钟后加入3滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液仍显黄色则尿液中葡萄糖含量未超标。
[0023] 实施例5 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：110mm〇l/L的柠檬酸钠溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脱氢酶、6.Ommol/L的邻联甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 15%的氢氧化钠溶液。
[0024] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入6mL稀氢氧化钠溶液，搅拌2分钟后加入2滴硫酸亚铁溶液 搅拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入1滴柠檬酸钠溶液后加入4滴葡萄糖氧化酶，搅 拌2分钟后加入3滴脱氢酶，搅拌1分钟后加入4滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液仍显黄色则尿液中葡萄糖含量未超标。
[0025] 实施例6 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，包括如下成分：110mm〇l/L的柠檬酸钠溶液、 7500U/L的葡萄糖氧化酶、150U/L的脱氢酶、6.Ommol/L的邻联甲苯胺、0. 05mol/L的硫酸亚 铁溶液和〇. 15%的氢氧化钠溶液。
[0026] 以上所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入4mL稀氢氧化钠溶液，搅拌3分钟后加入3滴硫酸亚铁溶液 搅拌至绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入2滴柠檬酸钠溶液后加入3滴葡萄糖氧化酶，搅 拌3分钟后加入3滴脱氢酶，搅拌2分钟后加入3滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，步骤三中所述的反应液仍显黄色则尿液中葡萄糖含量未超标。
[0027] 以上实施例1-6所检测的为来自不同检测者的检测样品，其中实施例1-3中所 使用的样品来自患有糖尿病的患者，实施例4-6中所使用的样品来自未患有糖尿病的患 者。将实施例1-6的样品的检测结果与正规医院尿检检测结果对比见表1 : 表1实施例1-6的检测结果与现有检测试剂盒比较
【权利要求】
1. 一种尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，包括如下成分：缓冲剂、葡萄糖氧 化酶、脱氢酶、邻联甲苯胺、抗干扰剂和稀释溶剂。
2. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，缓冲剂为 ll(Tl80mm〇l/L的柠檬酸钠溶液。
3. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，葡萄糖氧化酶 的浓度为 600(T7500U/L。
4. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，脱氢酶的浓度 为 150?200U/L。
5. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，邻联甲苯胺的 浓度为 4. 5?6. Ommol/L〇
6. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，抗干扰剂为 0. 05?0. 2mol/L的硫酸亚铁溶液。
7. 根据权利要求1所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒，其特征在于，稀释溶剂为 0. 15%~0. 5%的氢氧化钠溶液。
8. 根据权利要求1-7任一项所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，包括 如下步骤： 步骤一，取lmL尿液，加入3-7mL稀释溶剂，搅拌2-3分钟后加入2-3滴抗干扰剂搅拌 至抗干扰剂的绿色消失； 步骤二，向步骤一中所述的样品中加入1-2滴缓冲剂后加入3-5滴葡萄糖氧化酶，搅拌 2-3分钟后加入2-3滴脱氢酶，搅拌1-2分钟后加入3-5滴邻联苯甲胺； 步骤三，快速搅拌上述所述的反应液观察颜色变化； 步骤四，若步骤三中所述的反应液显蓝色则尿液中葡萄糖含量超标；若步骤三中所述 的反应液仍显黄色则尿液中葡萄糖含量未超标。
9. 根据权利要求8所述的尿液中葡萄糖含量检测试剂盒的使用方法，其特征在于，步 骤三中所述的观察颜色为反应5分钟内的颜色。
【文档编号】G01N21/78GK104458727SQ201410742682
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年12月9日 优先权日:2014年12月9日
【发明者】熊开胜, 张海防, 谢建庭 申请人:苏州东辰林达检测技术有限公司