本发明属于分析检测技术领域，涉及一种酒类含氮化合物的分析方法，特别是一种国窖1573酒中含氮化合物的检测方法。
背景技术：
国窖1573是我国高品质浓香型白酒之一，它开放式操作的工艺特点和独特的酿造环境铸就了其制曲和酿酒微生物的纷繁复杂以及发酵的多途径香味物质代谢，孕育了国窖1573酒特有的丰富呈香呈味物质。其酒质无色透明、窖香幽雅、绵甜爽净、柔和协调、尾净香长、风格典型，深受消费者的喜爱。
国窖1573酒中的含氮化合物与其他物质一样是国窖1573酒中重要的组成成分，其对国窖1573酒的风味和典型性都有一定的影响。国内外研究者采用定性定量的办法已经鉴定出许多种影响成品国窖1573酒风味的物质。主要是酯类、酸类、醇类、多酚类化合物、羟基类化合物和氨基酸这6大类物质。其中白酒中的游离的氨基酸往往会和还原糖发生美拉德反应生成吡嗪、吡咯、噻唑等含氮化合物。这些含氮化合物虽然在国窖1573酒中含量甚微，但该类化合物风味阈值低，具有坚果香、焙烤香、焦香等怡人风味，是国窖酒中重要的香味组分。并且它对其他香味物质有一定的协同作用。目前国内外对国窖1573酒中的含氮化合物的研究尚无太多。有研究报道白酒中的含氮量物质往往小于1mg/L，所以应用常规的气相色谱法(FID检测器)直接进样分析存在一定困难。本发明旨在采用顶空固相微萃取结合气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术，对市面上国窖1573酒酒样中的含氮化合物进行分析研究，建立一种国窖1573酒中含氮化合物的定性定量分析方法，操作简单、易行，适用性广泛。
技术实现要素：
针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种国窖1573酒中含氮化合物的检测方法，所述的这种方法要解决现有技术中测定国窖1573酒中的含氮化合物不准确的技术问题。
本发明一种国窖1573酒中含氮化合物的鉴定方法，包括下列步骤：
1)一个提取国窖1573酒中含氮化合物的步骤：首先准备国窖1573酒酒样，先用去离子水稀释至酒精度为10％的溶液体系，然后取5mL该酒样，添加1g氯化钠、20μL2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于15ml或20mL顶空瓶中，顶空瓶用硅胶垫皮密封，SPME条件为：将萃取头插入到顶空瓶中，并使萃取头处于样品之上2cm，恒温水浴温度45～55℃下，萃取40～50min；萃取完成后，迅速将萃取头插入气相色谱-氮磷检测器-质谱联用仪进样口，于250℃下解吸4～6min；
2)一个利用气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术检测分析步骤1)所得到的国窖1573酒中的含氮化合物的步骤：
气相色谱条件：HP-5MS毛细管色谱柱，其参数为60m×0.25mm、0.25μm；手动不分流进样，进样口温度250℃；程序升温：初始温度40℃，保留6min，以3℃/min的速率升至100℃，以5℃/min的速率升至230℃，保留20min；
NPD温度：250℃；氢气流速：2.0mL/min；空气流速：60mL/min；载气He，流速30mL/min；
MS条件：EI电离源，电子能量70eV，扫描范围30～550amu，离子源温度230℃；传输线温度280℃；四极杆温度150℃；
3)一个对检出的含氮化合物进行定性分析的步骤，未知化合物的质谱通过与wiley7nDatabase，NIST11及标准品对比进行定性；
4)一个对检出的含氮化合物进行定量分析的步骤，称取一定量标准品，配制于无水乙醇中作为单标贮备液，准确吸取一定量的标准贮备液用模拟酒，所述的模拟酒为体积百分比为10％的乙醇溶液，配制成一系列浓度的混合标样；其中内标物质为2-甲氧基-3-甲基吡嗪。
进一步的，所述的分析检测仪器为气相色谱-氮磷检测器-质谱联用仪。
进一步的，所述的定量方法为内标标准曲线法定量。
本发明采用了顶空固相微萃取结合气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术，对国窖1573酒中的含氮化合物进行分析研究，建立一种适用于国窖1573酒中含氮化合物的有效定性定量分析方法。本发明操作简单、易行，达到了满足生产快速检测需求的目的，适用性广泛。
附图说明
图1为市售国窖1573酒中的含氮化合物色谱图。
具体实施方式
为进一步阐释采用顶空固相微萃取结合气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术快速检测并定性定量国窖1573酒中含氮化合物的方法，下面结合实例作更详尽的说明。
实施例1
本方法主要采用顶空固相微萃取结合气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术对国窖1573酒中含氮化合物进行快速检测及定性定量，具体步骤如下：
1)提取国窖1573酒中含氮化合物：首先准备国窖1573酒酒样，先用去离子水稀释至酒精度为10％的溶液体系，然后取5mL该酒样，添加1g氯化钠、20μL2-甲氧基-3-甲基吡嗪置于20mL顶空瓶中，顶空瓶用硅胶垫皮密封，SPME条件为：将萃取头插入到顶空瓶中，并使萃取头处于样品之上2cm，恒温水浴温度50℃下，萃取45min；萃取完成后，迅速将萃取头插入气相色谱-氮磷检测器-质谱联用仪进样口，于250℃下解吸5min；
2)用气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术检测分析步骤1)所得到的国窖1573酒中的含氮化合物、并对其含氮化合物进行定性定量分析：
气相色谱条件：HP-5MS毛细管色谱柱，其参数为60m×0.25mm、0.25μm；手动不分流进样，进样口温度250℃；程序升温：初始温度40℃，保留6min，以3℃/min的速率升至100℃，以5℃/min的速率升至230℃，保留20min；
NPD温度：250℃；氢气流速：2.0mL/min；空气流速：60mL/min；载气He，流速30mL/min；
MS条件：EI电离源，电子能量70eV，扫描范围30～550amu，离子源温度230℃；传输线温度280℃；四极杆温度150℃；
3)检出物质的定性：未知化合物的质谱通过与wiley7nDatabase，NIST11及标准品对比进行定性；
4)定量分析：称取一定量标准品，配制于无水乙醇中作为单标贮备液，准确吸取一定量的标准贮备液用模拟酒，所述的模拟酒为体积百分比为10％的乙醇溶液，配制成一系列浓度的混合标样；其中内标物质为2-甲氧基-3-甲基吡嗪。
表1本发明方法国窖1573酒中的含氮化合物检测结果
由表1可知，利用气相色谱-氮磷检测器-质谱联用技术共检测出国窖1573酒中9种含氮化合物，其中噻唑类3种、吡嗪类5种、吡咯类1种。该方法能快速定性出多种含氮化合物，准确测定出国窖1573酒中含氮化合物的含量。