一种血红蛋白的检测方法及血红蛋白检测试剂盒与流程

文档序号:12713860阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种血红蛋白的检测方法,其特征在于:采用免疫夹心法进行检测,具体步骤如下:标记有胶体金颗粒的第一抗体结合血液中释放的血红蛋白后,借助毛细作用力向前层析,层析至硝酸纤维素膜包被的第二抗体时,形成“胶体金颗粒-抗体-抗原-抗体”的复合体系,并且聚集于硝酸纤维素膜上,胶体金颗粒大量聚集时可形成紫红色的信号,通过仪器能够准确定量判读检测信号的强度,从而实现定量检测,所述第一抗体为抗人血红蛋白抗体,第二抗体为配对的血红蛋白抗体,所述第一抗体和第二抗体可同时结合于目标抗原的不同表位,从而形成复合体系。

2.一种实现权利要求1所述检测方法的血红蛋白检测试剂盒,其特征在于:包括由血红蛋白检测试纸、外置卡壳、样本裂解液以及内设了相应标准曲线和判定方法的IC卡,其中,

所述血红蛋白检测试纸,宽度为3-5mm,长度为7-8cm,所述检测试纸由含有胶体金标记的抗人血红蛋白抗体的胶体金垫、包被有T线和C线的硝酸纤维素膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成,所述T线为配对的血红蛋白抗体,C线为抗鼠IgG,所述抗人血红蛋白抗体作为第一抗体标记有胶体金颗粒,样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端;

所述外置卡壳,包含上盖和下盖,两条所述血红蛋白检测试纸平行放置于所述下盖内部,所述上盖对应样品垫部分设置有样品孔,用于加入样本和稀释液,上盖对应硝酸纤维素膜中部位置设置有视窗口,用于观察硝酸纤维素膜上的C线、T线,判定结果;

所述样本裂解液,主要配方为:0.02M Tris-HCL,0.15molNaCL,1%Triton100调节PH至7.4;

所述IC卡,为内置了标准曲线和判定方法的IC卡,该IC卡配套使用NS3001B型免疫层析结果判读记录仪使用,用于对检测结果的定量判定,对血红蛋白检测范围为50-250g/L。

3.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒,其特征在于:所述吸样垫为吸水滤纸。

4.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒,其特征在于:所述包被有配对抗体的硝酸纤维素膜的制备方法为:以0.01M pH 7.4磷酸盐缓冲液将配对的血红蛋白抗体配制成终浓度1-2mg/mL,将喷膜仪在硝酸纤维素膜上以1.2-1.4ul/cm的参数进行划线,包被T线,同时在硝酸纤维素膜上部包被1-2mg/ml的抗鼠IgG,作为C线,干燥,备用。

5.根据权利要求2所述的血红蛋白检测试剂盒,其特征在于:所述胶体金垫的制备方法为:取100ml胶体金液放在烧杯内,用0.2M K2CO3调至pH7.0-8.0,再加入1-2mg标记用血红蛋白抗体,室温搅拌1小时,封闭,12000rpm离心30分钟,弃上清,用工作液复溶至60ml,然后用喷金机分别均匀地喷涂在无纺布或玻纤上,干燥备用。

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