本发明涉及一种农药残留的检测方法及试剂盒，特别涉及一种基于显色反应的三氯杀螨醇快速检测方法及试剂盒。
背景技术：
：三氯杀螨醇是一种广谱低毒的有机氯杀螨剂，主要用于防治棉花、果树、花卉等的多种螨害。由于三氯杀螨醇不易分解、残留量高，不宜用于茶叶、蔬菜及食用菌。但目前我国三氯杀螨醇的使用仍较普遍，茶叶、蔬菜及食用菌中的三氯杀螨醇的检出率较高。三氯杀螨醇在碱性条件下会发生碱解反应，产生氯仿等物质。氯仿在吡啶-naoh溶液体系中会反应生成红色化合物，根据红色化合物的吸光度值，可以计算得到三氯杀螨醇的浓度。现有的三氯杀螨醇快速检测方法多是采用吡啶-碱比色法，而吡啶为挥发性有恶臭的毒性溶剂，对人体会造成一定的伤害。同时，该方法的准确性不高，操作时间较长，其应用受到限制。联吡啶的反应活性远弱于吡啶，基本不会与氯仿反应显色，现有技术中未见使用联吡啶来检测三氯杀螨醇。因此，寻找一种更加简便、快速、准确地检测三氯杀螨醇残留量的方法对于环境安全和人们身体的健康都有非常重要的意义。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种三氯杀螨醇残留的快速检测方法及试剂盒。本发明所采取的技术方案是：一种三氯杀螨醇残留的快速检测方法，包括样品提取、固相萃取，样品提取液经固相萃取柱萃取后，用洗脱液洗脱，洗脱后的洗脱液加入2,2-联吡啶、强碱溶液及四甲基氢氧化铵，反应显色，比色确定三氯杀螨醇的量。作为上述快速检测方法的进一步改进，固相萃取柱的填料为聚酰胺粉和石墨化碳。作为上述快速检测方法的进一步改进，洗脱液为乙腈。作为上述快速检测方法的进一步改进，2,2-联吡啶在洗脱液中的浓度为(0.15～0.3)g/ml。作为上述快速检测方法的进一步改进，强碱溶液为naoh溶液、koh溶液。作为上述快速检测方法的进一步改进，四甲基氢氧化铵的用量为5～15mg/ml。作为上述快速检测方法的进一步改进，反应显色的温度不低于60℃。进一步的，反应显色的温度为60～100℃。一种三氯杀螨醇残留的快速检测试剂盒，包括样品提取剂、固相萃取柱、洗脱液和显色剂，显色剂由2,2-联吡啶、强碱溶液及四甲基氢氧化铵组成。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，固相萃取柱的填料为聚酰胺粉和石墨化碳。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，洗脱液为乙腈。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，强碱溶液为naoh溶液、koh溶液。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，显色反应时，2,2-联吡啶在洗脱液中的浓度为(0.15～0.3)g/ml。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，显色反应时，四甲基氢氧化铵的用量为5～15mg/ml。作为上述快速检测试剂盒的进一步改进，快速检测试剂盒反应显色的温度不低于60℃。本发明的有益效果是：本方法经过样品提取、净化洗脱、反应显色的过程，样品检测仅需20分钟即可完成，相对于原有的检测方法，具有简单快捷的特点；显色剂不再使用具有恶臭气味、对人体有害的吡啶试剂，而是选用无气味、更安全的联吡啶作为反应显色剂，实验方法更绿色环保；方法采用相转移催化技术，加入四甲基氢氧化铵作为反应催化剂，使得显色反应两分钟即可完成，提升显色效果；方法通过对比颜色，判断三氯杀螨醇的含量，灵敏度高。本方法可广泛应用于蔬菜、水果、茶叶等样品中三氯杀螨醇的快速检测。前处理采用spe前处理，很好地分离去除植物色素等杂质，使得实验结果更准确。附图说明图1是不同反应条件下的显色结果。具体实施方式一种三氯杀螨醇残留的快速检测方法，包括样品提取、固相萃取，样品提取液经固相萃取柱萃取后，用洗脱液洗脱，洗脱后的洗脱液加入2,2-联吡啶、强碱溶液及四甲基氢氧化铵，反应显色，比色确定三氯杀螨醇的量。作为上述快速检测方法的进一步改进，固相萃取柱的填料为聚酰胺粉和石墨化碳。作为上述快速检测方法的进一步改进，洗脱液为乙腈。作为上述快速检测方法的进一步改进，2,2-联吡啶在洗脱液中的浓度为(0.15～0.3)g/ml。作为上述快速检测方法的进一步改进，强碱溶液为naoh溶液。作为上述快速检测方法的进一步改进，四甲基氢氧化铵的用量为5～15mg/ml。作为上述快速检测方法的进一步改进，反应显色的温度不低于60℃。进一步的，反应显色的温度为60～100℃。下面结合实验，进一步说明本发明的技术方案。试剂正己烷：分析纯乙腈：分析纯氢氧化钠：分析纯氢氧化钠溶液：分析纯25％四甲基氢氧化铵溶液：分析纯2,2-联吡啶：分析纯三氯杀螨醇标准溶液：用正己烷配成浓度为1.00mg/ml的标准储备液，根据需要稀释成适当浓度的工作溶液。实施例：操作步骤1)提取-萃取：称取2.5g试样于离心管中，加入10ml正己烷，上下摇匀30s，吸取提取液经固相萃取柱，吹干，1ml乙腈洗脱固相柱；2)反应显色：加入0.3g2,2-联吡啶，并加入30ul氢氧化钠溶液及50μl四甲基氢氧化铵溶液，置于80-100℃水浴加热2min。若显黄色，则表明含有三氯杀螨醇。检测结果：反应后溶液与标准比色液或比色卡进行比较，判断三氯杀螨醇的含量(半定量)。对添加含有20、10、5、2.5μg三氯杀螨醇的茶叶样品的试验结果表明，在2.5μg的含量下，显色(黄色)结果仍可目视得到。检测灵敏度达到要求。对比显色实验：实验条件：取4个小试管加入三氯杀螨醇标准品20μg并编号①、②、③、④，分别加入0.15g2,2-联吡啶及1ml乙腈溶解，并加入30ul氢氧化钠溶液。其中①、②试管不加入四甲基氢氧化铵溶液，③、④试管加入50μl四甲基氢氧化铵溶液。置于80水浴加热2min，观察对比结果。实验结果如图1所示。将试管中溶液用甲醇稀释至2ml，于410nm波长下检测吸光值，得下表：试管编号①②③④吸光值a0.0260.0260.4250.423结果表明，不添加催化剂的①、②试管几乎不显色，而添加催化剂的③、④试管可以观察到明显的黄色。检测灵敏度实验实验条件：取6个小试管分别加入三氯杀螨醇标准品0、1、2、5、10、20μg，分别加入0.15g2,2-联吡啶及1ml乙腈溶解，并加入30ul氢氧化钠溶液及50μl四甲基氢氧化铵溶液，置于80水浴加热2min。试管中溶液用甲醇稀释至2ml，于410nm波长下检测吸光值，得下表：三氯杀螨醇/μg01251020吸光值a0.0250.0500.0760.1260.2180.422结论：四甲基氢氧化铵可以明显提高反应灵敏度，方法灵敏度可以检测出1μg的三氯杀螨醇。当前第1页12